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PUBLICACIONFINANCIADAPORINSTITUTOTECNOLGICODECD.ALTAMIRANO.
2011ITCA.
CopyrightInstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano,Cd.Altamirano,Gro.,Mxico.

AUTORESDELVOLUMEN:
GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez,
HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez.

DIRECCINDELAOBRA:
GustavoAdolfoBallesterosPatrnyLuisAlfonsoRodrguezPez

REDACTORES:
GustavoAdolfoBallesterosPatrn,AmbarCasimiroArce,FranciscoZavalaHernndez,
HctorManuelTovarSotoyLuisAlfonsoRodrguezPez.

DISEOINTERIOR,CUBIERTASYCARTOGRAFA:
LuisAlfonsoRodrguezPez

IMPRESIN:
InstitutoTecnolgicodeCd.Altamirano.

PRIMERAEDICIN:ABRILDE2011
MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL

GARABATOEDITORIAL,CD.ALTAMIRANO,GRO.,MXICO,108P.
ISBN:9786077814085

Esta publicacin puede se reproducida, archivada en un sistema de recuperacin o trasmitida en cualquier


formato o por medio corpreo o incorpreo, electrnico, mecnico, por fotocopia o grabacin o de
cualquierotramanerasiempreycuandosecitealosautoresydueosdelCopyright.

MANUALDEPRCTICASDEFISIOLOGAVEGETAL

1. INTRODUCCIN

Granpartedelaslimitantesparaelavancedelaaplicacindeconocimientoseslafaltade
experiencias prcticas, que le permitan al estudiante fortalecer los postulados tericos
mediante la evidencia experimental. En el Sistema Nacional de Educacin Superior
Tecnolgicaseinsisteenelparadigmadeaprenderhaciendoatalpuntoqueiniciamosen
el ao 2010 el sistema educativo por competencias, lamentablemente esto no se hace y
loscursossedesarrollantericaymemorsticamente.

En el Instituto Tecnolgico de Cd. Altamirano. Se ha tomado la decisin de fortalecer las


reasbsicas,entrelascualessedestacalaFisiologaVegetal.Estoimplicalaadecuacin
y dotacin de un laboratorio, su equipamiento y la preparacin de recursos humanos en
estarea.

El presente proyecto hace parte de los propsitos de organizacin del rea de Fisiologa
Vegetal, mediante la elaboracin de un manual de prcticas para los estudiantes de
Biologa y Agronoma del Instituto Tecnolgico de Cd. Altamirano. Cuya implementacin
serbenficapuesmejoraremoslaaprehensindeconocimientosyhabilidadesporparte
delosalumnos,loscualessernbeneficiados,puesrealizarntalleressobrelosdiferentes
aspectosdelafisiologavegetal.

Para realizacin de presente libro se revisaron manuales de Fisiologa Vegetal de otras


institucionesyseseleccionaron50prcticasdelascualesfueronejecutadasenelInstituto
TecnolgicodeCd.Altamirano.Adems,setuvounaestanciadedosmesesenelreade
Fisiologa Vegetal del Colegio de Postgraduados de Texcoco. Con base en estas
experienciasrealizadasseelaborelpresenteManualdeFisiologaVegetal.

INDICE

Pagina
INTRODUCCIN 3
PRACTICANo.1 LATENCIADESEMILLAS 6
PRACTICANo.2 ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL 8
PRACTICANo.3 GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS 9
PRACTICANo.4 INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN 10
PRACTICANo.5 IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN. 12
PRACTICANo.6 CRECIMIENTOYDESARROLLOPRUEBADELTETRAZOLIOPARA
DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS.
14
PRACTICANo.7 CLULASYTEJIDOSVEGETALES 16
PRACTICANo.8 ESTRUCTURASANATMICASQUEINTERVIENENENELTRANSPORTEDE
AGUA
17
PRACTICANo.9 MADURACINDEFRUTOS 19
PRACTICANo.10 REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS 20
PRACTICANo.11 REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS 22
PRACTICANo.12 REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO 26
PRACTICANo.13 OTROSREGULADORESDELCRECIMIENTOEFECTODEEXTRACTOSDE
VARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO
30
PRACTICANo.14 DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA 32
PRACTICANo.15 REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS 34
PRACTICANo.16 INDUCCINDEENRAIZAMIENTODEESQUEJESPORMEDIODE
HORMONAS
35
PRACTICANo.17 REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS 38
PRACTICANo.18 METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR 41
PRACTICANo.19 DETERMINACINDELREAFOLIAR 46
PRACTICANo.20 ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES 47
PRACTICANo.21 VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR 48
PRACTICANo.22 INFLUENCIADELAHUMEDADATMOSFRICASOBRELAABSORCINDE
AGUAPORSEMILLASALMACENADAS.
50
PRACTICANo.23 MECANISMOSDEABSORCIONYTRANSPORTEDEAGUAENLASPLANTAS 52
PRACTICANo.24 ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN 55
PRACTICANo.25 REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA 56
PRACTICANo.26 ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS 57
PRACTICANo.27 MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN 59
PRACTICANo.28 TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD 63
PRACTICANo.29 FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION 65
PRACTICANo.30 RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS 67
PRACTICANo.31 RESPIRACIONLAPRUEBADELTETRAZOLIOPARADETECTARLA
ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS.
69
PRACTICANo.32 RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDEAERENQUIMAEN
ARROZ
71
PRACTICANo.33 TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS 73
PRACTICANo.34 DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL 74
PRACTICANo.35 FERTILIZACINFOLIAR 75
PRACTICANo.36 MADURACINDEFRUTOS 76
PRACTICANo.37 POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES 77
PRACTICANo.38 CMOCONSTRUIRUNPORMETRO 78
PRACTICANo.39 DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPORELMETODO
DEMORGAN.
80
PRACTICANo.40 SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL 86
5

PRACTICANo.41 EFECTODESOLUCIONESNOBALANCEADASSOBREELCRECIMIENTODE
PLNTULAS
87
PRACTICANo.42 CULTIVOSHIDROPNICOS 88
PRACTICANo.43 NUTRICIONMINERAL 90
PRACTICANo.44 FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELASPLNTULASY
LALIGNIFICACIONDELOSTALLOS
92
PRACTICANo.45 EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA 94
PRACTICANo.46 ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS 96
PRACTICANo.47 PIGMENTOSNOFOTOSINTETICOS:CAMBIOSDECOLORDELOS
PIGMENTOSFLAVONOIDES
97
PRACTICANo.48 EFECTODELAINTENSIDADDELALUZYDELACONCENTRACINDELCO
2

ENLAFOTOSNTESIS
99
PRACTICANo.49 PIGMENTOSFOTOSINTETICOSSEPARACIN,ESPECTRODEABSORCIONY
FLUORESCENCIA
100
PRACTICANo.50 IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4 104
BIBLIOGRAFIA 105

PRACTICANo.1
TITULO:LATENCIADESEMILLAS

INTRODUCCIN
Auncuandolascondicionesambientalesseanadecuadasparalagerminacindesemillas,
muchas de ellas no lo hacen aunque estn viables. La no germinacin de las semillas, se
conocecomolatenciaoletargo,yestligadaacausasintrnsecasdelassemillasofrutos,
pero tambin a efectos ambientales. La ilama (Annona diversifolia) es un frutal regional
proceso de domesticacin que tiene caractersticas silvestres tales como dehiscencia de
frutos y latencia de semillas, las cuales solo germinan despus de cuatro meses de
almacenamientodebidoalaexistenciadeembrionesinmaduros

OBJETIVO
Demostrarlaexistenciadeletargoolatenciaensemillasdeilamaderecoleccinreciente.

MATERIAL
200 semillas de ilama, (100 de este ao y 100 del ao pasado), bolsas de polietileno,
tierra,lijas,agua,solucindegiberelinas.

PROCEDIMIENTO
Consigadoslotesde100semillasdeilama,cadauno.Elprimeroconsemillasdefrutosde
este ao (octnov) y el segundo de frutos de la cosecha del ao pasado. Para tratar de
romperelletargoseminaldellotedesemillasdeilamareciente,divdaloencincogrupos
de20semillascadauno.

Elprimergrupode20semillassereltestigo(noseharningntratamiento).

El segundo grupo de semillas ser escarificado raspando la cubierta seminal con lija o
rozndolassobreunpisodecementonopulido.Elobjetivoesromperlacubiertaseminal
paraquepenetreelagua.

Eltercergrupodesemillasserncolocadasenunasolucindegiberelinasa100ppm.De
concentracindurante3horas.

Elcuartogrupodesemillasserncolocadasenaguahirviendodurante2minutos.

Yelquintogrupodesemillassecolocarandurante3horasenaguaconhielolassemillas
sernsembradasenbolsasdepolietilenocontierra,aracindeunasemillaporbolsa.
Cada uno de los tratamientos ser marcado en la respectiva bolsa. Cada tres das se
inspeccionaran las bolsas para anotar la fecha de emergencia de las plntulas. A los 2
mesessesuspenderelexperimentoysediscutirnlosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London.
7

Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New
York.

PRACTICANo.2
TITULO:ETAPASVEGETATIVASDEMAZYFRJOL

INTRODUCCIN
La germinacin abre camino a la emergencia y desarrollo de la plntula hasta un estado,
dondeelaspectodesusestructurasesencialesmanifiestasiesonocapazdedesarrollarse
hastaunaplantanormalbajocondicionesfavorablesdesuelo.

OBJETIVO
Observarlamorfologadeplntulas.

MATERIAL
Bolsasplsticas,tierraysemillas(maz,frjol)

PROCEDIMIENTO
Coloque dos bloques de 20 bolsas con tierra, en un bloque siembre semillas de frjol y el
otro semillas de maz. A continuacin observe las diferencias morfolgicas entre las
plntulasdemazylasdefrjol.
La radculadel embrin se convierte enraz primaria de laplanta, searraiga la extensin
delaclulaepidrmicasuperficialdelarazimplicadaenlaabsorcindeaguayalimento.
Sepresentalarazsecundariaatravsdelaprimaria.
Maz; las races adventicias que se originan en los vstagos se van de otras races. La
envolturafotosensibledelcoleoptilosobrelaplmula.Larazembrionariaseconvierteen
elsistemainicialdelarazdelasemilla

Dibuje una plntula de maz y escribe en ella las siguientes estructuras: coleoptilo,
mesfilo,racesfibrosas.

Dibuje una plntula de frjol y seale las siguientes partes: cotiledones, cuello de la raz,
hipotilo,epictilo,hojasembrionales,plmula.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin, R.E. 1973. An unbreekeable potometer. En C. J. Clegg (Ed.) Plant Physlology. ASE
Lab.Books.London.

PRACTICANo.3
TITULO:GERMINACINDESEMILLASENDIFERENTESSUELOS

INTRODUCCIN
Demanerageneral,lagerminacinsepuededividirentresfases.Enlaprimera,lasemilla
tomaaguamedianteelprocesodeimbibicinyosmosis;enlasegundafase,laabsorcin
deaguacontinua,peroseinicianeincrementanprocesosmetablicoscomolarespiracin
ylatransformacinenzimticadelasreservas,enlatercerafase,aparecelaradculayse
incrementaelcrecimiento.

OBJETIVO
Pruebasdegerminacinendiferentessuelos

MATERIAL
Bolsasplsticas,tierra,agua,50semillas(frjol)

PROCEDIMIENTO
Instale5lotesde10bolsasconsuelo,elprimerloteriguelodiariamenteconunasolucin
salina preparada con agua y sal de cocina, el segundo lote se mantendr el suelo seco,
tercerlote,suelosubregado;conunriegosemanal,cuartolotesueloencharcado;quese
mantendrsaturadodeagua,yelquintoloteeseltestigoqueseregaratodoslosdas.
Discutalosresultados.

BIBLIOGRAFIA

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth.

SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de
Divulgacin.No.21,Mxico.

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PRACTICANo.4
TITULO:INFLUENCIADELOXGENOENLAGERMINACIN

INTRODUCCION
Despusdelhumedecimientoinicialdelmediodondesevanasembrarlassemillas,nose
requierederiegoadicionalhastaquelagerminacinhayaocurrido.Estoaseguraqueuna
adecuada cantidad de oxgeno sea retenida por el medio de germinacin. Es sabido que
un excesivo riego a las semillas retarda la germinacin. Un riego abundante
frecuentemente previene la germinacin, debido a que el oxgeno es relativamente
insolubleenelagua.Muchaaguatambincausadaoensemilladepobrecalidad,debido
aquelasclulasdeshidratadasnopuedencompetirconelrpidoflujodehumedad.

OBJETIVO
Comprobarlaimportanciadeloxgenoenlagerminacin

MATERIAL
Semillasderbano
Frascosdebocaancha:3
Crisolesdeporcelanaobeakersde50ml:3
Papeldefiltro
SolucindeKOHal15%
Solucindecidopiroglicoal7%
Aguadestilada
Bandasdecaucho
Papeldealuminio
Pinzasdelaboratorio
Algodn

PROCEDIMIENTO
Utilizandoloscrisolesyelpapeldefiltrohagatresgerminadoresycoloqueencadauno10
semillasderbano.
Tome tres frascos de boca ancha (tipo envase de mermelada) y proceda en la forma
siguiente:
Frasco 1. Vierta 15 ml de KOH al 25% y 8 ml de cido piroglico al 7%, luego coloque
dentro un crisol (germinador) teniendo el cuidado que no le entre solucin y tpelo
hermticamenteconpapeldealuminiodoble,ajustandoconunasbandasdecaucho.
Frasco2.Vierta15mldeaguadestilada,coloquedentrootrocrisol(Germinador)ytpelo
hermticamenteconpapeldealuminio.
Frasco 3. Vierta 15 ml de agua, coloque dentro un germinador y tape el frasco con
algodn.
Dejelosfrascosenelambientedellaboratorio.
Luegode3dasobservelagerminacindelassemillasencadafrasco.
Expliquelarazndelosresultados.
11

BIBLIOGRAFIA
Salisbury, F.B. Y W.C. Ross. 1978. Plant Physiology. 2a. Ed. Wadsworth. California
Iberoamrica,Mxico,D.F.

Salisbury.F.B.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.D.F.
.
SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de
Divulgacin.No.21,Mxico.

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PRACTICANo.5
TITULO:IMPORTANCIADELACALIDADDELALUZPARALAGERMINACIN.

INTRODUCCION
Adems de la humedad y temperatura favorables, algunas semillas requieren luz para su
germinacin.Ellepidio(Lepidiumvirginicum)nogerminaenlaoscuridad.Lavariedadde
lechuga"GrandRapidez",germinacercadel25%encompletaoscuridad;sinembargo,con
unacortaexposicinalaluzdelda,cuandoestgerminando,llegaaun100%.Laluzroja
de660nanmetrosylarojalejana"farred"de730nanmetrossonfrecuentementelas
mas efectivas en la regulacin de las reacciones de la planta a la luz; reacciones que van
desde germinacin, coloracin de frutos, formacin de tubrculos y bulbos hasta la
floracin de plantas, de da largo y de da corto, es decir todo lo relacionado con el
fotoperodo.

Laluzfluorescentecomnemiteconsiderableluzrojaperopocarojalejana,mientrasque
laluzincandescente(bombilloscomunes)emiteconsiderableluzrojalejana.Otroaspecto
interesante es que una doble capa de papel de celofn rojo detiene casi toda la luz roja
lejana dejando pasar solo la roja de 560 nm, as mismo si se combinan capas de celofn
rojo y azul se puede detener casi toda la luz roja dejando pasar solo la roja lejana de
730nm.
Debetenerseencuentaademsquelafotoreaccinquepermitequelagerminacindela
semillaseinicieesdetiporeversiblela,energaradiantedelaluzrojaladirigehaciauna
direccin y la de la luz rojalejana hacia otra direccin opuesta. El pigmento responsable
deestasreaccionesreversibleseselfitocromo.

OBJETIVO
Comprobar que luz de cierta longitud de onda favorece la germinacin de semillas que
requierenluz.

MATERIAL
Semillassensitivasalaluzcomolechuga"GrandRapids",Lepidio,pastoazul,pastobromo,
pastobermuda,tabaco,etc.

Trescajasdepetri
Papelfiltroodegerminacin
Tres cajas cerradas hermticamente contra luz de aproximadamente 20 x 30 cm. de
anchoyde12a15cmdealtocontapasmviles.Hacerunaaberturade10x20cm.enla
parte superior de dos de las tapas. Sobre la abertura colocar dos capas de papel celofn
rojopegndolosconcintatransparente.Sobrelaaberturadelasegundatapacolocardos
capas cada una de celofn rojo y azul pegndolas con cinta. La otra caja se deja
totalmente cerrada contra la luz. Una fuente de luz fluorescente de 40 W. y un bombillo
incandescentede100a150w.

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PROCEDIMIENTO
Prepare tres platos de petri colocndoles dos capas de papel de filtro en el fondo y
humedecindolos perfectamente; coloque en cada uno 100 semillas de lechuga "Grand
Rapids" tpelas e identifquelas en tal forma que se pueda determinar al tacto cual es el
plato uno el dos o el tres. Coloque los platos en la caja completamente oscura y deje las
semillasqueembebanaguaporunperodode16a24horas,aunatemperaturade20a
25C. Al cabo del periodo indicado efecte los tratamientos siguientes, teniendo cuidado
detrabajarenlaoscuridad.

1.Expongaelplato1aunaluzfluorescentepor15minutosyconfiltrorojo,paralocual
elplatosecolocaenlacajacontapaquetieneelpapelrojo.Laluzdebeestara30cmde
distancia.
2.Expongaelplato2,bajoluzfluorescentepor15minutosdentrodelacajaconfiltrorojo
y luego 15 minutos bajo luz incandescente y dentro de la caja con filtro azulrojo. La luz
debeestara30cmdedistancia.
3.Elplato3debequedarportodoeltiempodegerminacinencompletaoscuridad,para
locualsedebeenvolverenpapeldealuminio.

Deje transcurrir cuatro das y remueva las tapas de los platos y observe y cuente el
nmerodesemillasgerminadasencadauno.

Coloquelosresultadosenlatabla


Tratamiento Porcentajedegerminacin
1.luzrojade660nm
2.luzrojayluegoluzrojalejanade730nm
3.testigoenlaobscuridad
Cuadro1.Importanciadelacalidaddelaluzparalagerminacin

Discutalosresultados

BIBLIOGRAFIA
Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y


Winston,NewYork

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PRACTICANo.6
TITULO: CRECIMIENTO Y DESARROLLO PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA
DETERMINARLAVIABILIDADDELASSEMILLAS.

INTRODUCCION
Cuandosetratadenutrirlasplantas,esimportantesaberqueellaselaboranlamayorade
sustejidosprincipalmenteapartirdeunacombinacindedixidodecarbonoambientaly
aguaobtenidadelsuelo.
Durante el crecimiento, la formacin de los tejidos de las plantas sigue bsicamente tres
pasos: la divisin (o mitosis) de las clulas embrionarias para formar nuevas clulas, el
agrandamientoy/oalargamientodeestasclulasysudiferenciacin

OBJETIVO
Conocerypracticarunapruebarpidadelaboratorioparadeterminarsilassemillasestn
vivas(viables).

MATERIAL
Clorurode2,3,5trifeniltetrazolio
PapelindicadordepH
KH
2
PO
4

Na
2
HPO
4
.2H
2
0
Semillasdemazysoya.

PROCEDIMIENTO
Preparacin de la solucin estndar de tetrazolio al 1%: Se prepara disolviendo 5 g de la
sal con 500 cc de agua destilada. El pH de la solucin debe estar entre 6 a 8 para lograr
unaactividadptima.
CuandoelpHfinaldelasolucinesde4omenossedebeagregar1.82gdeKHP0
4
y3.56g
deNa
2
HP0
4
.2H
2
0.

REPARACIONDELASSEMILLASAEVALUAR
l.Lassemillasdemaz,arroz,sorgodebenserremojadas(embebidas)enaguaporunas12
horasparaquesuembrinseactiveyademssepuedahacerfcilmenteelcorte.
2.Paraelcasodelmazhagauncortelimpioen100semillas(sinmagullaroestropearel
embrin)alolargodelejelongitudinaldelgrano.Descartelamitaddecadagrano.
3. Coloque las 100 mitades en cajas de petri y cbralas con la solucin de tetrazo1io al
0.5%.
4. Coloque las cajas de petri en un encubador a 40C por un tiempo de 30 a 60 minutos
hastaqueelembrincoloreederojo.
5. Analice las semillas coloreadas comparando con figuras patrn que hay en el
laboratorioyobtengaelporcentajedesemillasviables.

NOTAS:a)Elembrineselnicoquecoloreaentodassuspartessiestnvivas.
15

b) En semillas de soya luego de remojarlas se les quita la cubierta y se colocan en la


solucin) 1% y a temperatura de 40C por 2 a 4 horas hasta obtener una coloracin roja
brillante.Silasemillaestvivadebecolorear:loscotiledonesyelejeplmularadcula.

BIBLIOGRAFIA
Ross.W.C.1974.PlantPhyslologyLaboratoryManual.Wadsworth.Belmont,California.

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PRACTICANo.7
TITULO:CLULASYTEJIDOSVEGETALES

INTRODUCCIN
Laclulaestaformadadeunprotoplasmaounidadvivaenlaquesedistingueunsistema
de membranas, el citoplasma y el ncleo. Las clulas vegetales presentan una gran
diversidadensutamao,forma,estructurayfuncindependiendodelvegetalydeltejido
delqueformeparte.

OBJETIVO
Observacindeclulasytejidosvegetales

MATERIAL
Safranina,porteobjetos,tallo,raz,bistur.

PROCEDIMIENTO
Obtengaunaporcinpequeaydelgadaporcortetransversaldetalloyraz,tialamisma
conSafraninaycolquelaenunportaobjetoyobservealmicroscopio.
Observelossiguientestejidosdelarazyeltallodeplantasdepapaya:epidermis,corteza,
endodermis,cilindrocentral,hacesvascularesdexilemayfloema.
Dibujeloobservadoydiscutasusresultados.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a. de. MacMillan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant.

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PRACTICANo.8
TITULO: ESTRUCTURAS ANATMICAS QUE INTERVIENEN EN EL
TRANSPORTEDEAGUA

INTRODUCCIN
Lasplantas estnconstituidasbsicamenteporcuatrosistemasdetejido:meristemtico,
epidrmico, fundamental y vascular. Cada una de las clulas que forman estos tejidos
estninmersasenaguayconstituidasporella.Estaaguaestdistribuidaendosregiones
biendefinidasdelcuerpodelasplantas:1)Elapoplasto,queconstadetodaslasparedes
celularesylosespaciosintercelulares(consideradounsistemamuerto);y2)elsimplasto,
que est formado por todos los protoplastos de las clulas, los cuales estn unidos por
plasmodesmosformandouncontinuo(considerandounsistemavivo).
Eltransportedeaguadesdelarazatodaslaspartesdelasplantassellevaacaboatravs
del tejido vascular. Este tejido est formado por xilema y floema. El xilema est
consideradoenelapoplastoyeselencargadodeltransporte(encantidad)deagua;est
formadoporunsistemadetuboscapilaresquerecorrenlaplanta(traqueidasyelementos
delvaso).Elfloemaestconsideradodentrodelsimplastoyestformadotambinporun
sistema de tubos capilares (elementos cribosos) a travs de los cuales tambin se lleva a
cabotransportedeagua,peroenmenorcantidad.

OBJETIVO
Observar el tejido vascular (xilema y floema) en diferentes rganos de las plantas (raz,
talloyhoja).

MATERIAL
Raz,talloyhojadelasplantasqueseelijan
Navaja
Portaycubreobjetos
Microscopio
Fluoroglucinaal2%enalcohol,etanolal95%ycidoclorhdricoconcentrado.

PROCEDIMIENTO
Hagauncortetransversallomsdelgadoqueseaposible,deraz,tallouhojaycolquelo
en el portaobjetos, aada una gota de fluoroglucina al 2% y agregue una o dos gotas de
cido clorhdrico concentrado y deje reposar durante dos minutos aproximadamente.
Transcurridoestetiempocoloqueelcubreobjetosyobserveenelmicroscopiolostejidos
quesetienderojo.
Dibujeloobservado
Discutalasdiferenciasentrexilemayfloema

BIBLIOGRAFIA
Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de
FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.
18

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde
laOEA.CECSA,Mxico,D.F.

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PRACTICANo.9
TITULO:MADURACINDEFRUTOS

INTRODUCCIN
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,B)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la
floracin. C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas
desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica.

OBJETIVO
Evaluarelefectodeletilenoenlamaduracindefrutos.

MATERIAL
Campanaybasedevidrio
Mangosmadurosyverdes

PROCEDIMIENTO
Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la
campanacongrasa.
Observecomosevadandolamaduracindelosfrutos.

BIBLIOGRAFIA
Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall,
EnglewoodCliffs,NewYersey.

HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.
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PRACTICANo.10
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOGIBERELINAS.

INTRODUCCION
Las giberelinas son hormonas vegetales cuya estructura bsica es el grupo gibano
(Figura1).Unadelasgiberelinasmsconocidaseselcidogiberlico(GA3).Lasgiberelinas
se identifican por un subndice que indica aproximadamente el orden en que fueron
descubiertas en las plantas (Hill, 1977).En las plantas superiores la ruta de sntesis de las
giberelinas Incluye como precursores compuestos como el mevalonato primero y
posteriormenteotroscomoel()kaurenoyelestaviol(Figura1).

Figura1.Estructurabsicaysntesisdegiberelinas

En los esfuerzos dentro de la sntesis de las giberelinas se han generalizado substancias


que pueden bloquear las reacciones que conducen a su produccin; a este grupo de
substanciasselesdenominaretardadoresdelcrecimiento.EnelCuadro1semuestrauna
listadevariosretardadoresdelcrecimientoycomoseobserva,unmismoretardadortiene
diferentesnombres.
____________________________________________________________
AMO1618CARDAVANACPCCLOROMEQUATCCCCICOCEL.DAMINOZIDEoBo
ALARSADHB995.PHOSPHONCBBP(Luckwill1981).
Retardadoresdelcrecimiento.

Tanto las giberelinas como los retardadores del crecimiento tienen muchas aplicaciones
en la agricultura. Como es de esperarse, la accin de los retardadores del crecimiento es
casisiemprecontrariaaladelasgiberelinas.
Algunosejemplosdeusoson:

Giberelinas:
.Estimulanelcrecimiento(alargamientodeltalloyentrenudos).
.Estimulanladivisincelular.
.Provocanenciertasespeciesyenciertascondicioneslafloracin.
.ControlanlaexpresinsexualhaciamasculinidadProvocanpartenocarpia.
.Controlanlamovilizacindenutrientes.
21

.Puedenayudaraestimularlagerminacin.

Retardadoresdecrecimiento:
.Inhibenelalargamientodeltallo(sepuedenusarparaevitarelacame).
.Inhibenladivisincelular.
.Puedenprovocarlafloracinenfrutales.
.Controlanlaexpresinsexualhaciafemeneidad.
.Permitenllevaracabounadesviacindelosnutrientes.
.Aumentantoleranciaasequa.

Para una discusin ms detallada de stas y muchas otras aplicaciones de estas


substanciasconsultenaLuckwill(1981)yWeaver(1980).

OBJETIVOS
.DemostrarlaestimulacindelcrecimientoylaInhibicindelmismoconcido
GiberlicoyCicocelrespectivamente.

MATERIAL
Alargamientoyreduccindeentrenudos
6plntulasdefrjolde15a20dasdegerminadas
Acidogiberlico50ppm
Cicocel5000ppm
3aspersores

PROCEDIMIENTO
Asperjecadatercerda,tresveces,lotesde2plantasconcidogiberlico,cicocelyagua
destilada.
Al cabo de 12 das despus de los tratamientos mida la longitud de los entrenudos y
cuenteelnmerodeestosparacadatratamiento.
Al asperjar procure cubrir con la solucin el follaje y que el roco de un tratamiento no
alcancealasplantasdeotro.

BIBLIOGRAFA
HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.

Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain.
Primo.Y.E.yR.Cuat.1968.HerbicidasyFitoreguladores.Edit.Aguilar.Espaa.

Rojas, G. M. 1976. Manual Terico Prctico de Herbicidas y Fitoreguladores. Ed. Limusa.


Mxico.

Weaver,R.J.1980.ReguladoresdelCrecimientodelasPlantasenlaAgricultura.
Trillas,Mxico.
22

PRACTICANo.11
TITTULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOCITOClNlNAS

INTRODUCCIN.
Las Citocininas forman el grupo de fitohormonas descubiertas ms recientemente. Se
llegaconocerestaclasedehormonasporestudiosdelcrecimientodeclulasvegetales
como las del tallo del tabaco en condiciones estriles sobre medios nutritivos sintticos,
donde se induce la divisin celular aadiendo al medio de cultivo extracto de malta o
lechedecoco.

A pesar de que pronto se hallaron muchos extractos vegetales que contenan sustancias
con dicha actividad, no fue hasta 1964 que por fin se pudo determinar qumicamente la
primeracitocininanaturaldenominadazeatina.
Actualmente se conocen varios compuestos vegetales naturales, pertenecientes a este
grupodehormonas,talescomolaisopenteniladeninayladihizeatinaapartedelacinotina
ylabenciladeninasintticas(SalisburyyRoss,1994).Losefectosdeestassustanciasenlas
plantassonvariados,siendoalgunosejemploslossiguientes:

Retrasodelasenescenciadelashojas.
Senescencia o envejecimiento es la fase de crecimiento vegetal que comprende de la
plenamadurezalamuerteysecaracterizaporlaacumulacindeproductosmetablicosy
prdidadepesosobretododehojasyfrutos.
En las hojas la senescencia se pone de manifiesto por el amarillamiento, construccin de
RNA,protenasyclorofila.

La benciladenina es el regulador que mas frecuentemente se aplica para retrasar la


senescenciavegetal.Suaccinconsisteenmantenerunaltoniveldesntesisdeprotena
retrasandoladegradacindelaclorofilaylasprotenas,educiendoelritmoderespiracin
yengeneralmanteniendoelvigordelasclulas.

Porlocomnlashojasseparadasdelaplantaolasqueseencuentranentallos:portados
envejecen con rapidez. Con frecuencia en las nervaduras uno de los resultados comunes
delasenescenciaeslapodredumbreenalmacenamientodebidodesarrollodebacteriay
hongos en aminocidos y otras sustancias nutritivas, que se pierden de las clulas que
estnenvejeciendo.

Rupturadeladominanciaapical.
LadominaciaapicaleslaInhibicindelcrecimientodelasyemaslateralesporelpicede
unaplanta.Siseeliminaestepicelasyemaslateralescomienzanacrecer,ramificndose
la planta. Este efecto es bien conocido en la poda de frutales y en la jardinera. Se ha
demostrado que la dominancia apical est controlada por las auxinas producidas por el
pice.Enelcasodelascitocininassehademostradoquesiseagreganaunayemalateral
que no se encuentra en crecimiento y que est dominado por el pice del tallo, con
frecuencia la yema lateralcomienza acrecer(SalisburyyRoss, 1994). Este efecto ha sido
23

utilizado en la horticultura ornamental para aumentar el nmero de hijuelos. En el


aspecto patolgico las citocininas producidas por la bacteria Corynebacterium fascians
producelaramificacinexcesivaenlaenfermedadllamadaescobadebrujaencrisantemo
ychcharo(SalisburyyRoss.1994).

OBJETIVOS.
1. Observar el efecto de la benciladenina (BA) sobre el envejecimiento de hojas de apio
mediantelacuantificacindeclorofilas.
2. Observar el efecto de las aspersiones de BA sobre la ruptura de la dominancia apical.

MATERIAL
A)Retrasodelasenescenciaenhojasdeapio.
El trabajo se dividir en dos partes, en la primera se aplicar el regulador (BA) y en la
segundasecuantificarlaclorofila.

AplicacionesdeBA
2vasosdeprecipitado250mI
SosolucinBA
10mg/l
Bandejasdeplstico
Plantasdeapiodebuenaspecto.

Cuantificacindeclorofila
50mldeacetona80%
1Embudodevidrio
2Tubosdeensaye
1Probeta50ml
1MorteroyPistilo
Espectrofotmetro

PROCEDIMIENTO
AplicacionesdeBA
a) De una planta de apio seleccione 4 hojas del mismo tamao y apariencia, lvelos con
aguadestiladayescrralos.
b)Sumerja2hojasenlasolucindeBA(10mg/l)durante5minutos.Squelasysacudael
excesodesolucin.Sumerjaotras2hojasenaguadestilada.stasservirncomotestigos.

c)Coloquelashoja1tratadasconBAenunvasodeprecipitadoconaguayenotrovaso
lashojastestigo.
d) Repita este tratamiento 2 veces ms cada tercer da lo que har un total de 3
aplicaciones.
e) Despus de 15 das o cuando note diferencias marcadas realice sus mediciones de
clorofila.

Cuantificacindeclorofilasa,bytotal.
a)Pese0.2gdetejidos(hoja)deunodelostratamientos.
b) Muela en el mortero adicionando 20 ml de acetona 80%. Procure extraer todo el
pigmentodeformaquelosrestosdetejidoquedenblanquecinos.
c)Filtreenelembudoconunagasa.Recibaelextractoenlaprobetade50ml
d)Completeconelrestodeacetona80%elvolumendelextractoa20mI
24

e) Haga lecturas de absorbancia en el espectrofotmetro a 645 y 663 nm. Use acetona


80%comoblanco.
f)Repitaelanteriorprocedimientoparacadatratamiento.

Paracalcularlacantidaddeclorofilassubstituyeenlassiguientesfrmulas:
.mgclorofilaa/ghoja=12.7(A663)2.69(A645)XV
1000XW

.mgclorofilab/g=22.9(A645)4.68(A663)XV
1000XW

.mgclorofilastotales/ghoja20.2(A645)+8.02(A663)XV
1000XW
Donde:
.A663=Absorbanciaa663
.A645=Absorbanciaa645
.V=Volumenfinaldelextracto(20mL)
.W=Pesofrescoengramosdeltejido(0.2g)
Consusresultadoslleneelsiguientecuadro:

Cuadro2.Cantidaddeclorofilaa,bytotalenlashojasdeapiotratadasconBA,alcabodedas.

BRupturadelaDominanciaApical.

Realizaraatravsdelasaspersionesdecitocininas.

MaterialesyMtodos.
3Plntulasdefrjolde2semanas.
SolucindeBA200ppm
+GA50ppm+Tween0.5%(Agentehumectante)

ACadaunadelasplantasapliquelosiguiente:
a)AspersinconBA200ppm+Ga350ppm+Tween0.5%.
b)Aspersinconagua+Tween0.5%.
c)Plantasinpice,elcualsecorta.

BIBLIOGRAFA.
Gaiston, A.W. y P.J. Davies. 1970. Control Mechanims In Plant Development: Prenatice
Hall,EnglewoodCliff.NewJersey.

Leopold,A.C.yM.Kawase,1964.Bensyladenineeffeetsonbeanleafgrowthand
senescenee,AmerJ.Bol.5(3):294298.
TRATAMIENTO CLOROFILAa CLOROFILAb CLOROFILASTOTALES
Testigo
BA10mg/L
25

Salisbury,F.S.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edil.Iberoamrica,
Mxico,D.F.

Withan,F.M.,Blaydes,D.E.YDevlin,R.M.1971.ExperimentsinPlantPhyslology,
vanMostrandReinHoldCo.,NewYork,Toronto,Melbourne.

26

PRACTICANo.12
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOETILENO.

INTRODUCCIN.
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
comounahormonavegetal:a)lasantiguasobservacionesdequelosfrutosmaduranms
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,b)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo Inicie y
sincronicelafloracinyc)laInduccindelacadadelashojasdelosrbolesapartirdel
gasdesprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpblicaamediadosde1864
(SalisburyyRoss,1979).
No se acept al etileno como hormona sino hasta la dcada de los sesentas en que se
aclarqueeletilenoesunmetabolitonormalproducidoporclulassanasyqueejerceun
control regulador sobre fenmenos morfognicos de las mismas, a pesar de las dudas
respectoasucapacidaddetransporte(Weaver,1980).
En la actualidad se conocen muchas respuestas de las plantas controladas directamente
por etileno aparte de aquellos casos en los que posiblemente otros reguladores del
crecimiento ejercen sus efectos teniendo al etileno como intermediario (tal como ocurre
enciertascondicionesconlasauxinas).Algunasdelasrespuestasdelasplantasaletileno
sonlassiguientes:

Senescenciadeflorcortada.
Respecto al envejecimiento de las flores se ha observado que el clavel est controlado
principalmente por el etileno producido por la flor misma o por el smog de la
contaminacin atmosfrica y que ste acelera el marchitamiento de los ptalos, lo que a
su vez causa prdidas durante el manejo en el mercado y disminucin de su vida en el
florero. Dado lo anterior se han Investigado centenares de substancias que puedan
prolongarlavidadelasflorescortadas.
Recientemente se ha encontrado que los iones de plata han producido los mejores
resultados en la conservacin de flores cuando han sido asperjados o absorbidos por el
tallo.Deestamanera,tenemosqueRedyCol.(1980)lograronqueeltiosulfatode plata
absorbidoporeltalloprolongarhasta66.9dasmslavidaenelflorerodeclavelesde
la variedad Orchird Royalette. Descubrimientos como este han desencadenado estudios
que nos Indican el tiempo de aplicacin, concentracin, variedades, temperaturas que
produzcanlosmejoresresultados,ascomoelmecanismodeaccin.
En lo que se refiere al mecanismo de accin se piensa que la plata es un agente anti
etileno que Impide que ste desencadene el proceso de envejecimiento. Entre las
evidencias a favor de este tenemos el trabajo de Halavy y Kofranek (1977) que nos
demuestra que la plata contrarresta los efectos del etefn (una substancia que libera
etilenoalserabsorbidaporlasplantasyqueporlotanto,aceleraelenvejecimientodelas
flores.

27

Formacindezonadeabscisin.
La cada de las hojas y de los frutos ocurre porque se presenta la formacin de una(s)
capa(s) de clulas especializadas llamada zona de abscisin. Dependiendo de la especie
estazonadeabscisinpuedeformarsemuytempranoduranteeldesarrolloo solamente
cuandosealcanzalamadurez.Antesdequesecaigaelrganoseproducencambiosenla
zona de abscisin tales como; a) divisiones celulares que forman una capa de clulas
pequeas y apretadas a lo largo de la base del pecolo, b) disolucin enzimtica de la
paredcelularodelalminamedia.c)taponamientodelosvasosdexilemayd)formacin
decorchoenlazonadeseparacin;entreotros.Estoscambiosdebilitanelpuntodeunin
yprovocandespuslaseparacinylacadadelrgano(GaistonyDavies,1970).
El etileno puede utilizarse para acelerar la formacin de la zona de abscisin y esto ha
resultadotilenaquellospasesenlosquesellevaacabolacosechamecnicadefrutales
comomanzana,cerezo,ctricos,olivo,pera,ciruelaynogal.Enestecasolascosechadoras
agitanelrbolyrecibenenlonasextendidaslosfrutos.Si stosestn dbilmenteunidos
serequerirmenorfuerzaparaagitarelrbolyseproducirmenosdaoaste,adems
dehacermasuniformelacosecha(Weaver,1976)..
Sinembargo,eletilenocomogasesdifcildemanejarenespaciosabiertos,porloquese
ha preferido usar substancias que liberen etileno, siendo una de ellas el etefn o ethrel
(cido cloroetilfosfnico). Este compuesto es estable en pH cido y se descompone
liberandoetilenoenpH bsico,producindoseentonceslaaccinde1etileno,yaquelas
plantastienenensustejidosunpHmsaltoqueeldeletefn.

CICH2CH2PO'+OH. CICH2CH2PO___
/ /
O' O'
EtefnH
CL+CH2=CH2+HP02'
Etileno 3

Cuadro3.Liberacindeetilenoporeletefn(Abeles,1973).

OBJETIVO
Controldesenescenciadeflorcortada.
a)Medirelaumentodelavidaenelflorerodeplantasdeclaveltratadascontiosulfatode
plata. .
b) Medir la disminucin de la vida en el florero causada por un aumento da la
concentracindeetileno.
e)Inducirlaformacindelazonadeabscisinenexplantesdefrjol.

MATERIAL
Senescenciadeflorcortada.
Induccindelazonadeabscisin
12Clavelescortados
5Frascosdevidrio
28

Etiquetas
Sol.deetefna50ppmSol.detiosulftodeplata
(Verapndice)

Plantasdefrjolde20a24das
degerminadas(20)
Etefn0.25%enlalonina
Lanolinasola
Cajasdepetri(1)
Agrolita
Aplicadoresdevidrio
(varilladevidrio)

A)Controldelasenescenciaenflorcortada.
Aumentodelavidaenelflorero
En este caso el tiosulfato de plata, debe ser absorbido por el tallo de la planta por
determinadotiempo.Solodebenintroducirse3plantasenlasoluci6npor20minutosy3
plantas ms por 40 minutos. Despus de este tiempo squelas de la solucin y
enjuguelas con agua corriente y col6quelas en los frascos de vidrio con agua. Ponga 3
plantassintiosulfatodeplataenotrofrascocomotestigo.
Disminucindelavidaenelflorero.
Coloqueunpocodelasolucindeetefnenunfrascoypongaah3claveles.
Para cuantificar la vida de las flores se tomar como dato para cada tratamiento el
nmero de das necesarios para que se marchite la primera flor. En general verifique la
aparienciadesusplantasapartirdeltercerda:Describasuapariencia.

B)Induccindelazonadeabscisin.
UnodelosmtodosInicialesenlosquesepruebansubstanciasquetengancapacidadde
Inducir la abscisin es el bioensayo de los explantes de frjol en los que se utilizan las
porcionesdelaplantaquesesealanenlaFigura2.

Figura2.Mtododelexplantedefrjolparabioensayodeabscisin.

29

En este caso se va a utilizar el etefn agregado a la lanolina aun cuando en forma


comercialsteseutilizaenformadesolucionesliquidasasperjndose.
Procederemosdelasiguienteforma:
a)Cortelosexplantes(20)delasplantasdefrjolydivdalosendosgruposde
10.
b) Coloque la vermiculita en las cajas de petri y entierre all la base de los explantes tal
comosevenenlaFigura3.Agregueunpocodeaguaaestavermiculita.

Figura3.Cajadepetriconlosexplantesdefrjol

c) Coloque con las varillas de vidrio un poco de lanolina o de lanolina con etefn a cada
lote. Mantenga en la obscuridad. Para verificar si ha habido abscisin despus de cierto
tiempopresionesuavementeconunlpizlospecolos.
Reporteelporcientodeabscisinalos4,7,10Y12dasdeiniciadoelensayo,paracada
tratamiento.

BIBLIOGRAFA.

Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London

Gaiston,A.W.yDavies,P.J.1970.ControlMechanimsinPlantDevelopment.PrenticeHall,
EnglewoodCliffs,NewYersey.

Halevy, A.H. y Kofranetz, A.M. 1977. Silver treatment of carnation flowers for reducing
ethylenedamageandextendinglongevity.J.Amer.Soc.Hort.Sci.102(1):7677.

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Reid, M.S., D.S. Farnham y E.P. McEnrva. 1980. Effecto of silverthiosulfata and
preservativa solutions on the vase lIte of miniature carnations. Hort Science 15(6):807
808.

Weaver, R.J. 1980. Reguladores del crecimiento de las plantas en la agricultura.Trillas,


Mxico.

Apndice
SolucindeTiosulfatodePlata.
Semezclanenunaproporcinde1:1unasolucindeAgN03mMyNa2S20.Mm:0.67969
AgNO.para0.51.2.52969Na2S20.
para0.5l.teirlosyformar1I.

30

PRACTICANo.13
TITULO: OTROS REGULADORES DEL CRECIMIENTO EFECTO DE EXTRACTOS
DEVARIOSFRUTOSSOBRELAGERMINACIONDESEMILLASDERABANO.

INTRODUCCIN.
El estado de Veracruz es el mayor productor de papaya de la repblica y los agricultores
obtienenporlogeneralsupropiasemillaponindolaasecarsinanteshaberremovidola
sarcotesta(capagelatinosaquecubrelassemillas).
Enestascondiciones,porlogenerallagerminaci6neslenta,yaquecomienzaalos15das
6msdespusdelasiembrayseextiendeporunperodoaproximadode15das6ms,
provocandoasundesarrolloheterogneodelasplantasenlosalmcigosloqueobligaa
extremar cuidados pues las plantas que ms tardan en brotar estn ms expuestas a ser
daadas por plagas debido a su menor rea foliar. Lange (1961), citado en Mosqueda,
1969), menciona que obtuvo germinacin ms temprana y en mayor porcentaje en
semillas sin sarcotesta probablemente porque la sarcotesta impide que se laven algunos
Inhibidoresdelagerminacin;GherardiyVallo(1976)determinaronquelosextractosde
lassemillasdepapayacontenaninhibidorescidosyneutros,posiblementedenaturaleza
fenolca.
Con estos antecedentes se plantea que si bien en el caso de la papaya la sarcotesta
aparentemente inhibe la germinacin de la semilla es probable que para otros frutos
carnosos donde sus semillas estn "embebidas" en la solucin acuosa circundante, esta
mismaseainhibitoriaparalagerminacindesupropiasemillaodeotras.

OBJETIVO
Enlapresenteprcticaseproponeverelefectodeextractosdejitomate,melnypapaya
(sarcotesta)sobrelagerminacindesemillasderbano.

MATERIAL
4CajasdePetriPapaya
AlgodnMeln
3VasosdeprecipitadoJitomate
1Probetade100mlAguadestilada
Gasa

Extraccin.
PAPAYA
a) Elimine la sarcotesta a semillas frescas en nmero suficiente para obtener
aproximadamente20mldeextractofiltradoendoblecapadegasa.
b)Aforeelextractoobtenidoa50mlconaguadestilada.

MELON
a)PartaelmelnyextraigalassemillasconsuJugo.
31

b) Colquelas directamente sobre tres capas de gasa y exprima sobre un vaso de


precipitado.
c)TomealIgualqueenelcasodepapaya20mlyaforea50mlconaguadestilada.

JITOMATE
a)Sigaelmismoprocedimientoqueparameln.
SIEMBRA
a) Separe cuatro lotes de 100 semillas de rbano y distribyalas sobre una caja de Petri
con algodn. Humedezca adecuadamente el algodn con el extracto respectivo cada
tratamiento.
b) Mantenga a temperatura ambiente durante un da. El cuarto lote de 100 semillas
utilcelocomocontrol.
c)Cuenteel%degerminacinalcabode24y48horas.Comparelostratamientos.nota:
Encasodequeseanecesariohumedecernuevamentealgunodelostratamientos,hgalo
conaguadestilada.

BIBLIOGRAFA.
Arumagan,S.AndK.G.Shanmgavelu.1975.Studiesofsarcotestaontheseedgermination
ofpapaya(Cariespapaya).SeedResearch.3(2):7:780.

Gherardi,E.yI.F.M.Valio.1976.Ocurrenceofpromotinginhibitorysubstancesintheseed
arilsofCaricapapayaL.J.Hort.Science.51:114.

Hartman,H.T.yD.F.Kester.1971.PropagacindePlantas.TraduccindeAntonioMirano
Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Machlis,L.yJ.G.Torrey.1956.PlantsinAction.ALaboratoryManualofPlantPhysiology.
W.H.Freeman,SanFrancisco.

MontesMeneses,J.1969.Correlacindelalongevidaddelassemillasdemazyfrjolcon
laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,uach

Mosqueda,V.R.1969.Efectodediversostratamientosaplicadosalasemillade
papayasobresupodergerminativo.AgriculturaTcnica.2(11):487491.

32

PRACTICANo.14
TITULO:DOMINANCIAAPICALYABSICINDEHOJA

INTRODUCCION
Enmayoradelasplantas,tantoherbceascomoleosas,layemaapicalesresponsable
del crecimiento del tallo principal. Aunque en las axilas de cada hoja hay una yema, por
regla general sta permanece enreposos por lo menos durante algn tiempo, 1o que da
por resultado la ramificacin empiece a cierta distancia del pice. Si por alguna razn la
yema apical se muere, muy pronto empiezan a brotar las yemas axi1ares cercanas al
pice. Efecto similar puede producirse con la aplicacin de ciertas sustancias orgnicas
que e1iminan la dominancia apical; en un experimento anterior se estudi el uso de la
tiourea para tal fin. En el caso de muchas conferas cuando la yema apical muere, las
ramas laterales p1agitropas ms cercanas al apice se orientan en posicin vertical,
originndoseunrbolconm1tiplesejesorttropos.

Se supone que la dominancia de la yema apica1 se debe a la alta concentracin de las


hormonasproducidasenella,lascualessetrasladanhaciaabajo.Laaltaconcentracinde
hormonas en la zona del tallo cercana al pice inhibe el crecimiento de las yemas
laterales, la cuales sin embargo, parecen ser estimuladas por concentraciones ms bajas.
Siseeliminalayemaapica1disminuyelaconcentracindehormonaseneltallo,bajando
a un nivel ptimo para la brotacin de las yemas laterales. Tal cosa sucede tambin a
cierta distancia del pice, ya que durante el traslado la concentracin de hormonas se
reducegradualmente.
Ademsdelasyemas,lashormonassonproducidasenlashojas,especialmenteenlasque
estn en desarrollo. Estas hormonas tambin se trasladan hacia abajo, a travs del
pecolo. Cuando las hojas alcanzan la madurez, la produccin de hormonas disminuye
considerablementeenellas.

En la base de cada pecolo (tambin en el pednculo de las flores) desde muy


tempranamenteempiezaaformarseuntejidoqueatraviesatodoelpecoloyqueconsiste
de clulas rectangulares con paredes muy delgadas. Mientras la concentracin de
hormonas se mantenga alta, el desarrollo de este tejido, llamado tejido de abscisin no
avanza. Tan pronto como la concentracin baja como ocurre en las hojas muy viejas, el
pecoloseseparadeltallocomoconsecuenciadeldesarrollodeltejidodeabscisinydela
disolucin de las lminas medias de sus paredes. En regiones con una estacin
desfavorableparaelcrecimiento,lacadadehojasesmuypronunciadaenmuchasplantas
leosas (plantas de hojas caducas), mientras que en algunas plantas herbceas del todo
nohaydesfo1iacin.

Existen varios factores fisiolgicos que aceleran o retardan la cada natural de las hojas.
Adems de la sequa deben citarse ciertas enfermedades o acciones parasticas, alta
humedad en el espacio radical, falta de carbohidratos o de ciertos elementos minerales,
etc.

33

OBJETIVO
En este experimento se demostrar primeramente la dominancia de la yema apical. Al
eliminarsta,seprovocalabrotacinyeldesarrollodelasyemaslaterales,loqueresulta
en una ramificacin abundante de la planta decapitada. En la segunda parte se
comprobar la importancia de la concentracin de hormonas producidas en las hojas
sobrelaabscisin,removiendolalminafoliar.

PROCEDIMIENTO
a)Dominanciaapical
Obtenga tres plantas de tomate o de Coleus, de unos 20 a 25cm de altura, con la yema
apicalencrecimientoactivo.Dejeunaplantacomotestigo.Eliminelayemadelasotras
dos por medio de un corte con una hoja de afeitar ms o menos 1cm ms abajo de la
yema apical. Deje una de estas plantas sin ningn otro tratamiento y a la otra aplquele
pastadelanolinaconhormonassobreelcorte.Repitaestaaplicacindespusdeunasdos
semanas.Estudielaaparienciadelastresplantasdespusdedos,cuatroyseissemanas.

Anotacindeobservaciones:

BIBLIOGRAFIA
Burd,D.YLomas,J.1976.Mtodosdemedicindelreafoliar:unestudiodeprecisiny
rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. lowa Slala
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Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

34

PRACTICANo.15
TITULO:REGULACINDELAABSCISINPORMEDIODEHORMONAS

OBJETIVO
Observelacadadelospecolos,delosdiferentestratamientos.Hagaunadiscusindelos
resultados.

PROCEDIMIENTO
Obtenga cinco plantas de Co1eus sembradas en macetas o en una caja de madera.
Aplique los tratamientos siguientes: Deje una planta intacta para que sirva como testigo.
En la segunda planta recorte con una hoja de afeitar las dos terceras partes de la lmina
detodaslashojasmenosdelasmsjvenes,muypocodesarrolladasdejandoelrestode
lalminapegadoalpecolo.Enlasdemsplantas,recortecompletamentelaslminasde
todas las hojas tambin con excepcin de las ms jvenes en su base, o sea en la unin
conelpecolo.Enunadeestasplantasapliquesobretodosloscortesdelospecolospasta
dehormonaenlanolina.Enlospecolosdeotraplantaapliquelanolinapura,sinhormona.
Dejelaltimaplantasintratar

Cuadro3.Reguladoresdelaabscisinpormediodehormonas

BIBLIOGRAFIA
Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas,
Mxico.

Testigocon
lamina
Plantasin
lmina
Plantacon11/3
delamina
Plantasinlmina
hormona
Testigosinlamina
lanolina
Cadadepecolos
Despusdedas...
35

PRACTICANo.16
TITULO: INDUCCIN DE ENRAIZAMIENTO DE ESQUEJES POR MEDIO DE
HORMONAS

INTRODUCCION
La mayora de las plantas "superiores" se propagan por medio de semillas. Sin embargo.
En algunas especies la propagacin vegetativa por medio de bulbillos, estolones,
tubrculos. etc., sustituye a la propagacin sexual. Si se mantienen partes de muchas
plantas. Inclusive de especies que se propagan exclusivamente por semillas, en
condiciones apropiadas estas partes se muestran capaces de producir una nueva planta
esta particularidad es aprovechada por el hombre en la multiplicacin de plantas por
medio de estacas, de hojas y an de pedazos de races; en esta forma se puede obtener
rpidamente un nmero grande de plantas de constitucin gentica uniforme
(propagacinclonal).
Desdehacemuchotiemposesabequeelenraizamientodeestacasesmsrpidocuando
stastienenhojasyespecialmenteyemas.Comoloscentrosprincipalesdelaproduccin
de hormonas son las yemas activas y las hojas jvenes. Puede presumirse que las
hormonasproducidasenestaspartes(tambinenmenorcantidadenhojasmaduras)son
trasladadas hacia la base de la estaca y provocan all la iniciacin de las races. La
aplicacindereguladoresartificialesdecrecimientoalabasedeestacasestimulatambin
la iniciacin de races. Especialmente en plantas en que la concentracin de hormonas
naturales no es lo suficientemente alta para iniciarlas; sin embargo no pueden inducirse
racesartificialmenteenpartesdondenormalmentenoseproducen.
Puestoquelaconcentracinnecesariadelahormonaparalainiciacinderacesesmayor
que la que se necesita para estimular su crecimiento posterior, debe tenerse cuidado de
que despus de la fase de iniciacin de las races la concentracin hormonal se reduzca
puesdelocontrariopuedeocurrirmsbienunainhibicineneldesarrollodelasracesya
formadas.
Debe mencionarse tambin que la concentracin ptima de la hormona para la fase de
iniciacinderacesvarasegnlaespeciedelaplanta.
Aunque las hormonas constituyen un factor sumamente importante en la formacin de
racesstasdependenenaltogradodelascondicionesfisiolgicasenqueseencuentrala
planta de la cual se toman las partes para la propagacin vegetativa. Adems de las
hormonas existen otras sustancias tambin esenciales para la iniciacin de races cuya
ausencia impide una accin positiva de las hormonas; entre las que se conocen deben
mencionarse algunas vitaminas del grupo B, como la tiamina y la piridoxina. La falta de
clorofila y de reservas de carbohidratos, lo mismo que de ciertos elementos esenciales
tambinpuedelimitarlaformacinderaces.

OBJETIVO
Conocer el efecto de dos sustancias hormonales del grupo de las auxinas sobre 1a
induccinderacesenesquejes.

36

MATERIAL
Acidoindolactico:AIA
acidonaftalenactico:ANA
EsquejesdeColeussp.Yuca,balsaminaosauce.
Cascarilladearroz
Nateraspequeas
Telaplsticoobolsasdeplsticotransparentes
Bandasdecaucho
Hipocloritodesodio

PROCEDIMIENTO
ApartirdesolucionesmadresdeAlAyANAde1000ppmprepare100mldecadaunade
lassolucionesquesernlosrespectivostratamientos:

Tratamiento Regulador Concentracion

1. AlA: 10ppm
2. AlA: 100ppm
3. AlA: 1000ppm
4. ANA: 10ppm
5. ANA: 100ppm
6. ANA: 1000ppm
7. Testigo H
2
0

Prepare 21 esquejes (Estacas) de Coleus u otra planta de fcil enraizamiento, lo ms


uniformes posibles en tamao y grosor. Desinfctelos con una solucin de hipoclorito de
sodio al 0.5%. Utilice 3 esquejes por tratamiento y sumerja las bases en las respectivas
soluciones dejndolos en contacto con las soluciones por 20 horas aproximadamente.
Luego colquelos en materos con cascarilla de arroz hmeda y cbralos con plstico
transparenteparaevitarexcesodehumedadatmosfricahgaleperforacionesalplstico.
Luegode15dastomelosresultadosdelaproduccinderaces.
Tomeelpromediodelnmeroylargoderacesporesqueje.

Tratamiento Nmeroxderacespor
esqueje
Largoxderacespor
esqueje.mm.
1
AlA: 10ppm

2
AlA: 100ppm

3
AlA: 1000ppm

4
ANA: 10ppm

5
ANA: 100ppm

6
ANA: 1000ppm

7 Testigo

Cuadro4.Induccindelenraizamientodeesquejespormediodehormonas

37

Hagaunadiscusindelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Hartman,H.T.yD.F.Kester.1971.PropagacindePlantas.TraduccindeAntonioMirano
Ambrosio,C.E.C.S.A.Mxico.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of


Methods.W.JunhN.V.theHague.

38

PRACTICANo.17
TITULO:REGULADORESDELCRECIMIENTOAUXINAS.

INTRODUCCIN.
Unodelosimportantessistemasdecontroldelcrecimientoenlasplantasloproporcionan
losllamadosreguladoresdelcrecimientovegetalofitohormonas.
Una hormona vegetal es una sustancia orgnica que es sintetizada en el interior de la
plantayque,abajasconcentraciones,puedeactivar,Inhibiromodificarcualitativamente
elcrecimientoejerciendonormalmentestaaccinenunlugardistintoaldeorigen.
Dentrodelosgruposimportantesdelashormonasvegetalesestnlasauxinas.
UnaspectoprcticodeestashormonasvegetalesenlaestimulacindelaIniciacindelas
races. La capacidad de muchas plantas para formar races en estaca colocados en
condiciones favorables de crecimiento tiene un gran valor en la propagacin de las
plantas.
Otra de las aplicaciones prcticas mas difundida de los compuestos sintticos de tipo
auxinicoeselcontroldelasmalashierbas.Lasmalezasquecompitenconloscultivospor
la luz, nutrientes y agua principalmente, son eliminados desde hace miles de aos en
forma manual, las tcnicas y las sustancias qumicas han desplazado paulatinamente el
deshierbe manual. Algunos herbicidas selectivos son molculas similares a los
fitoreguladores naturales, por ejemplo el 2.4D el cual dependiendo de las
concentraciones que se usen, puede tener efecto inhibitorio o de promotor del
crecimiento.
Tambin se ha visto que las auxinas participan en el control de la dominancia apical, ya
que la sustitucin del pice por una pasta de lanolina mantiene las yemas laterales sin
crecer(RobertsyWhitehouse,1976).SalisburyyRoss(1994)hacenunarevisindelpapel
delasauxinasenladominanciaapicalysobrelamedicindeestereguladorenlasyemas
lateralesdeplantasconysinpice.

OBJETIVO
. Determinar cul de las concentraciones de ANA acelera la formacin de races en
estacasdefrjol.
.Conocerelefectodel2,4D(2,4Diclorofenoxiactico)comoreguladordelcrecimientoy
comoherbicida.

MATERIAL
Enraizamientodeestacasactividadherbicida
Solucionesdiluidoes:6macetas
ANA5.10.2030mg/lplantasdemaz,frjolyvariasmalezas
Estacasdefrjol50,500y1000
Vasosdeprecipitadoapersonesmanuales

Dominanciaapical
Plntulasdechicharo.Frjol
AlA1g/lenlanolina
39

PROCEDIMIENTO
Enraizamientodeestacas
a) Se proporcionarn las plntulas de frjol para hacer estacas de 10 cm de longitud. su
profesordeprcticaleIndicarcmo.
b)Seusarn5estacasporconcentracindeANAyuntestigo.
c)Inmediatamentedespusseponenencontactoconlasdiferentesconcentraciones.En
10mldesolucin.
d)Eltiempodeinmersinvaadependerdelacapacidaddeabsorcindelasestacas.
e) Una vez absorbidos los 10 ml de solucin se le debe agregar agua suficiente para
mantenervivaslasestacasporunperodode10a15das.
La observacin del nmero y longitud de las races se har a los 15 das despus de
iniciadalaprctica.

TRATAMIENTO NUMEROPROMEDIO LONGITUDPROMEDIO


DELASRAICES(A
LOS___DIAS)
OBSERVACIONES
GENERALES
TESTIGO

5mg/l

10mg/l

20mg/l

30mg/l

Cuadro5.Reguladoresdelcrecimientoauxinas

Elaboraruncuadroconlosdatossiguientesparalasconcentracionesqueseaplicaron.
Actividaddeherbicidas.

a)Rotulecadaespecialidad.

1)Testigo3)500ppm
2)50ppm4)1000ppm

b)Cuandolasplantasalcancende15a30cmdealtura,apliqueporaspersinlasolucin
de2,4Dacadatratamiento.

c)Deberestaralpendientedesumaterialyregarsegnseanecesario.

Hagaobservacionessobrequemaduras,marchitamiento,deformacionesdespusde6,12,
24horasyalcabode2y5das.

DominanciaApical
40

Serequierenplntulasdefrjolconlaprimerahojatrifoliadatotalmenteexpandidaocon
un desarrollo similar en chcharo. Retire el pice de dos plantas y aplique lanolina con o
sin AIA. Deje una tercera planta como testigo, sin cortar el pice. Permita que se
desarrollenlasplantasyalcabodeuntiempoverifiqueeltamaodelasyemaslaterales.

BIBLIOGRAFIA
Hill, T.A., .1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.
Luckwill,L.C.1981.Growthregulatorsincropproduction.EdwardArnold,GreatBritain.

41

PRACTICANo.18
TITULO:METODOSPARALAMEDICIONDELAREAFOLIAR

INTRODUCCIN.
ElreatotaldelashojassedescribemedianteelllamadondicedereaFoliar
(IAF). Este valor Indica el nmero de unidades de rea por unidad de rea de terreno es
decir: IAF=readelashojas/readelsuelo
EI IAF sirve como un Indicador de la superficie disponible para la absorcin de luz y
suministra un denominador comn para discutir el potencial fotosinttico de un cultivo
determinado. El IAF puede variar drsticamente mediante la densidad de poblacin, la
distribucindelasplantasoporuncambiodevariedad.Nichiporovichen1960(Citadoen
Mitchell1970)hacenotarquelossiguientespuntossontilescomounabasedediscusin
cuandosetrabajeconelIAF.
a)ElIAFdebesersuficienteparainterceptartantaradiacincomoseaposible.
b)ElIAFdebedetenerunamagnitudtalqueprevengaelparasitismo,stoes,lacondicin
en la cual las hojas Inferiores usen los carbohidratos a una velocidad ms, alta de la que
losfotosintetizan.
c)ElIAFdebereunirlascondicionesypropsitosparaloscualeselcultivoestdestinado.
Un IAF mximo no siempre conduce a una mxima produccin de grano ni produce
siemprelosmximosdemateriaseca.
El IAF se registra en un estado especfico del crecimiento (por ejemplo a los 30das del
brote de las plntulas, durante la antesis, etc.), y las comparaciones entre variedades se
hacenenunmismoestadodedesarrollo.
ElIAFproporcionaademslabaseparaobtenerotrosparmetrostilesenladescripcin
de la fotosntesis de un cultivo. Por ejemplo un valor relacionado con el IAF es el de
duracin del rea foliar (DAF) y es utilizado, para describir el tiempo durante e1 cual el
rea foliar es funcional. Por ejemplo un campo de maz puede tener un IAF de 4.5 en el
momentodelapolinizacinperoseriatilconocercuntotiempoesmantenidoesteIAF.
Puede Incluso hacerse una comparacin usando la DAF para dos variedades, una de las
cuales mantiene un IAF de 4.5 durante 40 das y otra un IAF de 5.3 por 30 das. Estos
valores nos proporcionarn informacin acerca de cmo, usar estas variedades para un
medio ambiente con determinadas condiciones de radiacin, fertilidad o periodos de
sequa(Mitchell.1970).
Volviendo al IAF debemos hacer notar que en la medicin del rea de las hojas se
considera solamente un lado de stas. Ahora bien; en la determinacin del IAF el
problemabsicoeslamedicindelreadelashojas.Qumtodosexistenparamedirel
readelashojas?Mencionaremosenestecasocuatrodeellos:

1)Mtodogravimetrico
Consisteentrazarelcontornodelahojasobreunpapel,recortarlaypesarla.Elreadela
hojaescalculadamedianteelpesadodehojasdepapeldereaconocida,esdecir:
Pesodelpapelconreaconocida__________________reaconocida
Pesodelaimpresindelahoja_____________X(readelahoja)
42

2)Relacinentrelasmedidaslinealesyelreadelahoja.
Laformageneraldeestemtododeclculodelreadeunahojaes:
AF=bxAxL+a

Donde:
AF=readelahoja
A=Anchomximodelahoja
L=Largomximodelahoja
ayb=Coeficientes(dependendelahoja)
Deacuerdoasto,soloesnecesarioobtenerlasmediasnecesariasyconocerelvalordel
coeficienteaybparaobtenerelrea(AF)delahoja.EnelCuadro1seencuentranvarios
valoresdeaybparadiferentescultivos.

ESPECIE ECUACION
CACAO AF=156.188xL+9.178
TOMATE AF=0.1551Xl2
PEPINO AF=0.8663xL6.3985cv.Local
AF=0.8132x.LxA6.3985cv.Marketer
MAIZYSORGO AF=0.75xLxA
GIRASOL AF=0.6798xLxA
ALGODN AF=0.77xLxA
MANZANA AF0.708xLxA
TRIGO F=0.836xLxA(Fernndezyarias,1989)
VALORDEb,a=0
CEBADA 0.64
TRIGO 0.65
ARROZ 0.66
MAIZ 0.710.81
GRAMINEASENGENERAL 0.66
GIRASOL 0.610.76
TABACO 0.610.76
ALGODN 0.69
(TomadodeGestak,elal.1971)
(TomadodeGestak,elal.1971)
Cuadro 6. Ejemplos de coeficientes a y b utilizados para calcular el rea foliar de varias
especies.

En el apndice 1 se presenta un resumen de la metodologa para que se calculen los


modelosdecualquierotraespecie.

43

3)Mtododelconteodeintersecciones.
Estemtodoutilizaunaplacadevidrio,plsticouotromaterialsobrelacualsetrazauna
red con lineas horizontales y verticales de tal manera que aparecen cierto nmero de
Interseccionesocrucesentrelaslineas.
Para estimar la superficie de una o varias hojas necesitamos contar el nmero total de
Interseccionesquetocanlaslminasdelashojasysustituirenlasiguienterelacin(Hart,
1965):A=nxS/N
Donde:
A=readelashojas
n=NmerodeInterseccionesquetocanlaslminasdelashojas.
S=Superficietotaldelaplaca
N=numerototaldeInterseccionesdelaplaca
Se han llevado a cabo algunos trabajos que tratan de determinar cul es la densidad de
Interacciones ms adecuadas para obtener una medida ms confiable de la superficie
foliaryBurdyLomas(1976)sugierenqueunadensidadde100interseccionesen100cm2
eslamejor.Otraventajadeusarunarejilladeestasproporcionesquelarelacinanterior
seconvierteen:A=n

Esconvenientecontarvariasveceselnmerodeinterseccionesquetocanlalminadela
hoja y sacar un promedio. As mismo es importante saber qu intersecciones contar y
cules no. Para lograr formarse un criterio acerca de sto es conveniente practicar un
pocomidiendoelreadeunasuperficieconocida.
Porotraparte,deberecordarsequeelreaobtenidahastaahoraesestimadayquesise
deseamayorprecisinpuedetrazarseunagrficaquerelacionelasreasobtenidasenla
rejilla con reas verdaderas (medidas en otro mtodo mas exacto, planmetro por
ejemplo)yobtenerlaecuacinquelasrelacione.Deestamanera,cualquierotramedida
obtenidaconlarejillapuedesustituirseenlaecuacinyobtenerasunvalormscercano
alverdadero.

4) Planmetroptico.
Esteesunodelosmtodosmsprcticosyprecisosdemedirelreadeunamuestrade
hojas.Unplanmetroconstaesencialmente,deloselementosincluidosenlaFigura8.

Figura4.Elementosdeunplanmetroptico

44

En este dispositivo tenemos que la foto celda recibe una cantidad de luz constante,
produciendoasuvezunacorrienteconstante.Siinterferimoselpasodelaluzconlminas
de superficie conocida se producirn determinadas variaciones de la corriente. De esta
manera hacemos una calibracin del aparato. Despus Introducimos las hojas (superficie
desconocida)yobservamoslavariacindecorriente.

Las hojas se conocen por la curva de calibracin. Los planmetros comerciales hacen
directamente la conversin de variaciones de corriente a superficie, por lo que facilitan
muchoeltrabajo.Sinembargo,nosiempresedisponedeunplanmetro,porlocualestil
conocerotrosmtodosdemedicindelreafoliar.

Todos los mtodos anteriores excepto el segundo son destructivos (hay que arrancar las
hojas). Existen otros mtodos no destructivos que preservan hojas en la planta. Para
conocerestosmtodosconslteseaSestak,et,al(971).

OBJETIVO.
Conocer y comparar los resultados de cuatro mtodos de medicin del rea de las hojas
deunaespecie.

MATERIAL
Hojasdepapel
Tijeras
Balanzaelctrica
Regla.
Rejilla
Planmetro
Hojasdeunaplanta(sorgo,trigo,tabaco,etc.)

PROCEDIMIENTO
Medir el rea de un grupo de hojas por los cuatro mtodos descritos anteriormente.
Reportesusresultadosdeacuerdoalsiguientecuadro:

METODO AREAFOLIAR RELACIONAFx/AF4


1)Gravimetrico
2)medidaslineales
3)conteodeintersecciones
4)planmetro
Cuadro 7. Compare los valores obtenidos para cada mtodo y con ayuda de la relacin AFx/AF4
discutalosresultadosenfuncindelaexactitudyeltiempoempleadoparallevarlosacabo.

45

BIBLIOGRAFIA
Burd,D.YLomas,J.1976.Mtodosdemedicindelreafoliar:unestudiodeprecisiny
rapidez. WMO Sympoolum de Agrometeorologia del Cultivo de Maz. Iowa State
UniversityPress,Amea,lowa.TraduccindeE.,SolrzanoV.

Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

Kestah, Z. Carshy, J. y Jarvis, P.G. 1971. Plant Photosynthetic Production Manual of


Methods.W.JunhN.V.theHague.

Mitchell,R.C.1970.CropGrowthandculture.IowaStateUniversityPress.Ame,lowa.

APENDICE1
Para obtener los valores de a y b de los modelos lineales AF = b x L x A + a se procede
comosigue:
1) Obtenga una muestra de hojas de la especie de Inters. Los tamaos deben cubrir
desdelashojaspequeashastalas msgrandes.Numerecadaunadeellasyobtengasu
largomximoyanchomximo.
2)Conayudadelplanmetropticouotromtodoquetengaciertaexactitud(elmtodo
delasinteracciones,porejemplo)obtengaelAFfecadahoja.
ConestosdatosseobtieneunaecuacinderegresinlinealutilizandocomoXalproducto
deLxAoaLoAsolas.Lasecuacionessernentoncesdeltipo:
AF=LxAxb+a
AF=Lxb+a
AF=Axb+a
Seleccione el mejor modelo de acuerdo al valor de R2. A continuacin se presenta la
forma de Introducir estos datos en un programa SAS. Se presenta as mismo una de las
salidasyculessonlosparmetrosqueseutilizanparalaelaboracindelmodelo.

46

PRACTICANo.19
TITULO:DETERMINACINDELREAFOLIAR

INTRODUCCIN
La estructura de las plantas es una expresin del proceso conocido como desarrollo, el
queasuveztieneaspectoscuantitativos(crecimiento)ycualitativos(diferenciacin).
Elcrecimientosepuedeevaluaratravsdemedidasdelongitud,peso,volumen,reade
todalaplantaounapartedeella.

OBJETIVO
Estimarelreafoliardeuncultivoporunmtodoindirecto

MATERIAL
Hojasdefrjolypepino,papelmilimtrico,cartulina,sustratosymacetas.

PROCEDIMIENTO
Unmesprevioalaprctica,sembrarde10a15semillas(pormaceta)decadaespecie,de
unamacetacortalashojas,dibujarenunacartulinaelcontorno,medirlalongitudyancho
dehojayrecortarla,siguiendoelcontornomedirelpesodecadahojaydeltotaldehojas.
Por otro lado, recortar una cartulina de 10x10 cm. y medir el peso. Conociendo el rea
(100cm2)ypesodelacartulina,yconociendoelpesodecadahojaydeltotaldehojas,se
podr determinar por una simple regla de tres el rea foliar de cada hoja y el total de la
planta.Sellevaracabode10lecturascompletasendiferentesetapasdecrecimientode
laplanta,segraficaryseinterpretarlosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
AgrotecnicadeCu.15148.deResenss,SuelosyAgroqumica.Lahabana.Cuba.

Harl.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

47

PRACTICANo.20
TITULO:ESTRUCTURASDEABSORCINDEAGUAYNUTRIENTES

INTRODUCCIN
Cuandoregamosunaplanta,elmovimientodelaguavadelsueloalarazquelaabsorbe
principalmenteporlos pelosradicales,delarazpasaaltalloconducindolaalas hojasy
portranspiracinllegaalaatmsfera.
Para que el agua y nutrientes lleguen a los vasos del xilema y que ascienda el agua, se
tienedosvasorutas:apoplastoysimplasto

OBJETIVO
Distinguirlasdosvasdeabsorcindeaguaynutrientes:apoplastoysimplasto.
Identificarlosvasosascendentesconductoresdelxilemaylosdescendentesdelfloema

MATERIAL
Microscopio,cortestransversalesdetallodejitomate.

PROCEDIMIENTO
Se explicara la importancia de la absorcin de agua y nutrientes, as como las vas de
absorcinenformaesquemtica,yapartirdepreparacionespreviamenteelaboradas,se
observaranlostejidosconductores

BIBLIOGRAFIA
Kramer, P.J. 1974. Relaciones Hdricas de Suelos y Plantas. EDUTEX. Mxico. Salisbury,
F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.

Kramer. P.J. 1974. Relaciones Hdricas de suelos y Plantas (versin en espaol de edicin
de1969).L.Tejada(trad.)Edutex.Mxico,D.F.

48

PRACTICANo.21
TITULO:VELOCIDADDELFLUJODEAGUAENELSISTEMAVASCULAR

INTRODUCCIN
La continua prdida de agua de las hojas por transpiracin, se debe principalmente al
incrementodetemperaturadelaatmsferayaldficitdepresindevaporqueexisteen
staenrelacinconlaplanta.
Esta prdida de agua a travs de los tejidos genera una diferencia de potencial de agua
(A)entrelahojaylaraz,yprovocaunflujodeaguaatravsdelaplanta.Lavelocidad
de este flujo vara considerablemente dependiendo de la especie y, en general, es
directamente proporcional al gradiente de (A 1) entre el suelo y las hojas e
inversamenteproporcionalalasumaderesistenciaseneltrayectodelagua.

OBJETIVO
Determinar la velocidad a que el agua avanza en el sistema vascular de diferentes
especies.

MATERIAL
Diferentes plantas, charola de plstico, navaja, regla, colorantes (rojo congo, azul de
metileno,etctera).

PROCEDIMIENTO
Para demostrar que el agua avanza a diferente velocidad en el sistema vascular de las
diferentes especies, conviene utilizar plantas altas a las que se les haya quitado las hojas
inferiores.
Prepareunasolucinderojocongoenagua(ocualquierotrocoloranteaninico).Coloque
lasplantasenunacharolaquecontengalasolucincolorida,Corteeltallobajolasolucin
(connavaja)ymantngalosumergidodurantealgntiempo(25minutos).Ahora,squelo
y mantngalo en su posicin natural (perpendicular al piso) y registre el tiempo. Si la
velocidad de transpiracin es alta, el colorante penetrar en los haces vasculares y
avanzar ms rpidamente que en las plantas donde la velocidad de transpiracin sea
baja. Transcurridos aproximadamente 30 minutos, corte el tallo nuevamente en una
regin cerca de las hojas. De este punto empiece a hacer cortes delgados, con navaja y
obsrvelos en el microscopio. Registre la distancia que avanz el colorante desde el sitio
en donde hizo el corte original y multiplquelo por el tiempo en que se mantuvo en
posicinperpendicular.Assabraproximadamentelavelocidaddelflujodeagua.
Hagalomismoconcadaespecie.

49

Figura5.Sistemaideadoparademostrarelflujodelaguaporelxilema

BIBLIOGRAFIA
MontesMeneses,J.1969.Correlacindelalongevidaddelassemillasdemazyfrjolcon
laspruebasdetetrazolioygerminacin.Tesis,Fitotecnia,UACH.

50

PRACTICANo.22
TITULO: INFLUENCIA DE LA HUMEDAD ATMOSFRICA SOBRE LA
ABSORCINDEAGUAPORSEMILLASALMACENADAS.

OBJETIVO
Comprobarquelassemillasabsorbenaguadelmedioenqueestnalmacenadas.

MATERIAL
Semillasdesorgo,trigo,etc.
Acidosulfricoconcentrado,densidad1.84y95%deconcentracin.
Cincotubosdeensayodeunapulgadadedimetroy80cc.
Taponesdecauchoocorchoopapeldealuminio.
Malladealambretipoanjeo
Gradilla
Probetagraduadade100cc.
Balanza
Hornodesecado
Bandasdecaucho

PROCEDIMIENTO
Aplicando sus conocimientos del laboratorio de qumica y con mucho cuidado prepare
20cc de cada una de las soluciones de cido sulfrico siguientes colocndolas en los
respectivostubosdeensayomarcados.Useaguadelallavecomosolvente.

Tubol.H2S04al80%
Tubo2.H2S04al60%
Tubo3.H2S04al40%
Tubo4.H2S04al20%
Eneltubo5coloqueaguanicamente.

Pese 5 grupos cada uno de 3 gramos de semillas de sorgo o trigo y colquelas dentro de
cada tubo con ayuda de pedazos de malla de alambre detal manera que no queden las
semillasencontactoconlasolucin.
Tape bien los tubos y deje el experimento una semana bajo condiciones del laboratorio.

NOTA:EncadatuboseproducirunahumedadrelativadeacuerdoalacantidaddeH
2
S04quecontenga.

Cuadro8.Influenciadelahumedadatmosfricasobrelaabsorcindeaguaporsemillasalmacenadas.

Tubos
Humedad
Relativa%
Pesoinicial
(g)
Pesoluegode
8dasg
GananciaoPrdida
deagua(g)
Pesosecoa
100Cg
PorcentajeAguaen
Baseapesoseco
1 10
2 17.0
3 76.0.
4 90.0
5 100.0
51

Expliquelarazndelosresultados

BIBLIOGRAFIA
Pierre.W.H.,Kirkham.D.,Pesek.J.y.Shaw,.R.(Edo.)1996.PlantEnviromentandEfficient
WaltUse.4a.Reimpresin(1961).

52

PRACTICANo.23
TITULO: MECANISMOS DE ABSORCION Y TRANSPORTE DE AGUA EN LAS
PLANTAS

INTRODUCCIN.
Las plantas llevan a cabo la absorcin y transporte de agua a travs de dos mecanismos,
en el primero de ellos la raz se comporta como un osmmetro debido a la acumulacin
desalesmineralesenelesteledelaraz,loqueprovocaquehaya,cuandolosnivelesde
humedad del suelo lo permiten un fenmeno de osmosis. En el segundo mecanismo de
absorcin de agua se tiene que la transpiracin en las hojas provoca una tensin en la
columnadeaguadelxilema,tensinquesetransmitealolargodeltalloylarazyquejala
elaguadelsuelo,dndoseenformasimultneaunaabsorcinyeltransportedelagua

Figura6.AscensodeaguayTranspiracin

Mecanismosdeabsorcinytransportedeaguaenlasplantas.Alarazsecomportacomo
unosmmetro;B,larazyeltallopresentanunacolumnadeaguabajotensin.

En el caso de la absorcin y transporte de agua por osmosis sta debe pasar por
membranascelulares,porloquecualquierfactorqueafectelaestabilidaddeestosafecta
elprocesodeabsorcin.Porotrolado,enelcasodelaabsorcinytransporteportensin,
unodelosrequisitosesquehayatranspiracin(SalisburyyRoss.1994).

OBJETIVO
1)Demostrarlapresinradicalenlasracesdelasplantas.
2)Demostrarcmosellevaacabolaabsorcindeaguaporlatranspiracin.
3)Demostrarculessonlostejidosresponsablesdeltransportedelagua.

MATERIAL
3 Plantasdegirasol,jitomatede2mesesounaespecieleosa.
3 Mangueradeltex,trozosde5cm.
3 Tubodevidriode60100cm.
Navajadeafeitar
53

Solucindeazuldemetilenoal.0.1%
SolucindeNaCIal10%
Ligas
4Ramasdetrueno
Navajasderasurar
Vaselina
4Tubosdeensaye
Palitosdemaderaparaaplicarvaselina

PROCEDIMIENTO
Presinderaz.Seleproporcionarntresplantasdejitomate,girasolounaleosa.Riegue
abundantementecadaunadelasiguienteforma:
a)Aguadelallave.b)Solucin10%deNaCI

Corte el tallo a tres cm del suelo y elimnelo. Coloque sobre cada mun un trozo de
manguera de ltex del dimetro del tallo y amrrelo. Agregue unas gotas de azul de
metileno y conecte despus un tubo de vidrio en el otro extremo de la manguera,
amarrndolobien.


Figura7.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar

Para mantener el tubo capilar en posicin vertical, sujtelo a un palito de madera


enterradoenelsuelodelamismamacetaoaunsoporteuniversal.Cada15minutosmida
ladistanciarecorridaporlasolucineneltubocapilarhastacompletar60min.
Vuelva a medir a las 2 y 3 horas despus de efectuado el experimento (Fernndez y
Johnston, 1986). Anote las distancias recorridas por la solucin en el tubo capilar en el
siguientecuadro.

54

Tiempo Distancia Presin


15
30
45
60
120
180
Cuadro9.Distanciarecorridaporlasolucineneltubocapilar.

CalculeyanoteenlatablaanteriorencadaIntervalolapresinqueseestdesarrollando
tomandoencuentaqueacada1029.5cm(aprox.)correspondeunaatmsfera.
B)Tensinportranspiracinytejidosconductores.
Tome cuatro ramas de trueno que se hayan conservado en agua. Crteles un poco del
tallo y vuelva a colocarlas en el agua. A dos de las ramas elimneles 3 cm de corteza a
partirdelazonadelabase.
Sumerjalasramasentubosdeensayoconaguaconformealossiguientestratamientos:
a)Ramatestigo,sinvaselina.
b)Ramacubiertaconunabolsadeplstico.Tallosinvaselina.
c)Ramaconvaselinaenlacorteza.
d)Ramaconvaselinaenlamadera.

Midaelconsumodeaguaatravsdelaalturadeestaeneltubodeensayo.
Comparelostratamientos.

BIBLIOGRAFA.
Fernndez. G. y M: Johnston. 1986. Fisiologa Vegetal Experimental. Inst. Interamericano
deCooperacinparalaAgricultura(IICA),SanJos,CostaRica

55

PRACTICANo.24
TITULO:ACTIVIDADOSMTICADELASACAROSAYELALMIDN

OBJETIVO
Comprobar la actividad osmtica de la sacarosa (un cristaloide) en comparacin con el
almidn(uncoloide).

MATERIAL
Almidndeyuca
Sacarosa(azcarcomn)
Doszanahoriasgrandes
Dosbeakersde100mlorecipientessimilaresCuchillo
Esptula.

PROCEDIMIENTO
Por el extremo ms grueso de las zanahorias haga un hueco cnico de 3 a 4 cm de
profundidad en el corazn de cada una de ellas, dejando paredes delgadas
(aproximadamente 0.5 cm de espesor) pero cuidando de que no sean perforadas por el
cuchillo.

Lleneelhuecodeunazanahoriaconazcaryeldelaotraconalmidnyluegocolquelas
verticalmenteenvasosobeakers.Anotaloscambiosquesufrenlaszanahorias,elazcary
elalmidn.

Cuadro10.Actividadosmticadelasacarosayelalmidn

Presenteunadiscusindelporquedelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de
Divulgacin.No.21,Mxico.

Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Tiempo Zanahoriaconsacarosa Zanahoriaconalmidn


2horas
1da
3das

56

PRACTICANo.25
TITULO:REDISTRIBUCINDEAGUAENELINTERIORDELAPLANTA

OBJETIVO
Demostrar que el agua se mueve de sitios de almacenamiento a las hojas cuando las
condicionesasloexigen.

MATERIAL
1ramadenaranjaconfrutos.
1ramadenaranjasinfrutos
1calibradortipovernier

PROCEDIMIENTO
Deje en las dos ramas aproximadamente el mismo nmero de hojas y colquelas en un
lugardellaboratorioparaquesemarchiten.
Tomeeldimetrodelosfrutos.
Observecualdelasdosramassemarchitprimero
Durante los siguientes das vuelva a tomar el dimetro de los frutos para comprobar si
hubocambios.

Inicial2o.Da4o.Da8o.Da
Dimetro
Cuadro11.Redistribucindeaguaenelinteriordelaplanta

BIBLIOGRAFIA
Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.


57

PRACTICANo.26
TITULO:ELASCENSODELAGUAENLASPLANTAS

INTRODUCCIN
Desdequeseiniciaelprocesodegerminacindelassemillas,seestableceuncontinuode
aguaentreelsuelo,elsistemacapilardelasplantas(tejidovascular)ylaatmsfera.Este
continuo es dinmico y sigue un patrn parecido al de "fuente y demanda", en donde el
sueloeslafuenteprincipalylaatmsfera,lademandadeagua.
Emovimientodeaguaatravsdeestostressistemas(suelo,plantaatmsfera),obedece
alosplanteamientosdelasegundaleydelatermodinmica,lacualestablecequeelagua
siempresedesplazarhaciaabajodelas"colinas",esdecir,deunareginendondetiene
una gran energa potencial a otra regin de menor energa potencial, provocando una
disminucin de energa potencial. Por tanto, la energa potencial del agua en el suelo y
alrededordelasraces,esmayorquelaenergapotencialenlashojasyenelaire.
Para evitar hablar de energa potencial, los fisilogos vegetales hacen referencia al
conceptode"potencialdeagua"expresadoconlaletragriegapsi().Detalmaneraque
ahoraelflujodeaguasellevaracabohaciaabajodeungradientedepotencialdeagua.
Es importante aclarar que un gradiente de potencial de agua existe siempre y cuando el
potencial de agua en un punto es diferente del potencial de agua de otro punto. El
potencial de agua es un concepto termodinmico relacionado al potencial qumico del
agua,asuvez,sterelacionadoalaenergalibredelagua.
Las diferencias de potencial de agua (A) determinan el movimiento del agua en el
sentido: sueloplantaatmsfera, aunado a las fuerzas de cohesin de las molculas de
agua,lascualespuedensoportarunafuerzadetensinhastade350bariasprovocadapor
lacontinuaevaporacindelaguaenlashojasypermitenquelascolumnasdeaguaenel
sistemavascularnoserompan.

OBJETIVO
Demostrar que el ascenso de agua en las plantas se puede explicar en la misma manera
queelmovimientodeaguaenunsistemafsico.

MATERIAL
Soporteuniversal
Probeta
Manguera capilar de 0.1 mm de dimetro, copa porosa (sta puede ser de barro o
parecidaalasqueseusanenlaspeceras).

PROCEDIMIENTO
Arme su dispositivo, pegue la copa porosa a la manguera capilar del largo que desee.
Compruebequeformauncontinuo,sumergiendolapartelibredelamangueraenaguay
succionandoporlacopaporosa.
Despus,coloquelapartelibredentrodelaprobetagraduadaylapartedelacopaporosa
sostngalatanaltocomoseaposibleconlaspinzasdelsoporte.Llenelaprobetaconagua,
lacolumnadelamangueraylacopaporosaporsuccin.Unavezlogradoesto,marqueel
58

niveldelaguaenlaprobetaytomelecturasdelaprdidadeaguaendiferentesintervalos
(por ejemplo, cada dos o tres horas). Si desea, cree condiciones extremas para favorecer
eldesprendimientomsrpidodemolculasdeaguadelacopaporosa,seamedianteun
ventiladoroincrementandolatemperaturadellugar.Anotelavelocidadconqueelagua
es absorbida y desprendida. Fije condiciones extremas con el fin de saber si es posible
romperlacolumnadeagua.
Elaboregrficoscondatosquemuestrenlaprdidadeaguaporlacopaporosa,debidoa
losdiferentestratamientosquehayaestablecido.

Fig8.Dispositivoparademostrarelascensodelaguaenlasplantas.

BIBLIOGRAFIA
Rovalo, Merino, M. y Rojas Garcidueas, M. 197. Experimentos de Laboratorio de
FisiologaVegetal.ITESM,Monterrey,Mxico.

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.Miller,IICAde
laOEA.CECSA,Mxico,DF.

59

PRACTICANo.27
TITULO:MTODOSPARAMEDIRLATRANSPIRACIN

INTRODUCCIN
La transpiracin fue uno de los primeros fenmenos fisiolgicos descritos en plantas. Se
puede definir como la prdida de agua en forma de vapor que ocurre en las plantas;
depende del suministro de energa y del gradiente de presin entre la superficie
evaporanteyelaire.
Se puede considerar a la transpiracin como el proceso dominante en las relaciones
hdricasdelasplantas, debidoaqueproduceelgradientedeenerga,principalcausadel
movimiento de agua dentro y a travs de la planta y, por lo tanto, controla la tasa de
absorcin y el ascenso del agua. La tasa de transpiracin depende del suministro de
energa para evaporar agua, el gradiente en concentracin o presin de vapor y la
magnituddelaresistenciaalolargodeltejidovasculardelaplanta.
La transpiracin o evaporacin de agua se puede llevar a cabo a travs de lenticelas,
estomas y de la cutcula de las hojas. Sin embargo, la mayor parte del vapor de agua
escapaatravsdelosestomasdelashojas.
Se emplean diferentes mtodos para determinar la transpiracin pero, en general, todos
ellosestimanelcambiodepesoolaprdidadevapordeaguadeunaplantaodealguna
partedeella.

OBJETIVO
Estimar la transpiracin en diferentes especies de plantas mediante cinco tcnicas
diferentes.

MATERIAL
Plantasdejitomatecalabaza,tabacouotrotipo
Balanza,campanadevidrio
Manguera
Clorurodecalcioencartuchos
Bombapequea
Clorurodecobaltootiosanatodecobalto
Portaobjetos,tirasdepapelengomado
Estufa
Pipetagraduadade2ml
SoporteconpinzasytirasdepapelfiltroWhatmannm.1.

PROCEDIMIENTO
Prdidaenpesodeunaramadurantedeterminadoperiodo
Cortedosramassemejantesdecualquieradelasplantassealadas.Selleconparafilmu
otro material la parte en donde se hizo el corte. Pese inmediatamente y anote la hora.
Coloque la rama en las condiciones que desee de humedad relativa, temperatura, luz,
etctera. Cada cinco minutos pese hasta completar 30 minutos. Grafique tratamientos
60

contrastantes utilizando prdida de peso cm


2
de hoja contra tiempo. Como ejemplo de
condiciones contrastantes se sugieren las siguientes: con luz, con alta o baja humedad
relativa,altaobajatemperatura,etctera.
Transpiracinporunaplantacrecidaenmaceta
Serequierenplantasdejitomate,tabacouotrotipo,crecidasenmacetas.Riguelasbien.
Cubra con un plstico, papel aluminio u otro tipo de material, la parte de suelo que est
en contacto con el aire y deje libre nicamente el tallo. Despus, pese la maceta con
planta,anoteestepesoinicial.Coloquelaplantaenunlugarsoleadoypselacadahora,
hasta que se oculte el sol. Grafique entonces la cantidad de agua que pierde cada hora
contralahoradelda.

Si lo considera conveniente, compare dos macetas, cada una en condiciones


contrastantes.
Clorurodecalciocomocolectordeaguaquesetranspira.
Coloqueunaovariasplantasdentrodeunacampanaypermitaqueunacorrientedeaire
fluyaimpulsadaporunabombapequea.Alsalirelairedelacampanallevarconsigoaire
hmedo producto de la transpiracin. Este aire, al pasar por los cartuchos de cloruro de
calcio se secar. Como se anot el peso inicial de los cartuchos, la diferencia con el peso
inicialdespusdeunahora,darideadelacantidaddeaguatranspirada.Elexperimento
puederealizarsetanrpidocomosedeseeyexpresarsecomomgH
2
/cm
2
dereafoliar/h.
Sepuedeponerunatrampadehumedadantesdequeelairelleguealacampana.

Figura9.Sistemaparamedirlacantidaddeaguaquesetranspira.

Seutilizaclorurodecalcio.
Clorurodecobaltocomoindicadordeaguatranspirada
Este mtodo se basa en la propiedad del CoCI
2
para cambiar de azul a rosa
reversiblemente de acuerdo con la humedad existente. Esta tcnica semicuantitativa
indica el grado de apertura estomtica, si se acepta que por ah se pierde la mayor
cantidad de agua. Henderson cre una gama de tonos que van entre el azul y el rosa,
usando azul de metileno y eosina. Use tiras de papel Whatman nm. 1 que se tian con
CoCI
2
durante breve tiempo y se almacenan en un lugar fro y seco. Para usarlas,
61

colquelas apoyadas con pana objetos y stos con papel engomado. De acuerdo con la
transpiracin,lospedazosdepapelcambiandecolordeazul,cuandoestnsecos,arosa,
cuandosehumedecen;anoteeltiempoquetardanencambiardecolor.

Papeldeclorurodecobalto

Portaobjetos

Figura10.Medicindelatranspiracinempleandopapeldeclorurodecobalto.

Medicindelaguatranspiradaconunpormetro.
Utiliceplantastrgidas.Hagauncortebajoelaguaenlabasedeltallooramaeinsrtela
inmediatamenteenlamanguera(figura11).Procurequequedeunaburbujadeaireoque
elaguadelapipetaseestabiliceenunaporcinlegible.Sealesumomentoceroconun
cronmetro y anote a intervalos la cantidad de agua que consume. Finalmente, mida el
reafoliarytraceunagrficademl.deH
2
Ocm
2
dehoja,contratiempo.
62

Figura11.Pormetrosencilloparamedirlatranspiracin.

BIBLIOGRAFIA
Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.
Trillas,Mxico.

63

PRACTICANo.28
TITULO:TRANSPIRACINYFOTOSNTESIS:IRGAYELSENSORDEHUMEDAD

INTRODUCCIN
Se presenta un dilema a nivel estomtico debido al sistema de cierre y apertura. Si los
estomassemantienenabiertos,sepierdeagua,perohaymsdisponibilidaddebixidode
carbono(CO
2
).Siporelcontrariosecierran,laprdidadeaguaesmnima,perolafijacin
de CO
2
prcticamente se anula. Los estomas como sensores ideales de niveles de CO
2
se
abren o cierran, esto depende de la disponibilidad de este gas, como ya se indic.
Tambinlosnivelesdeaguaendgenospuedenafectarelgradodeaperturaestomtica.
Surgenuevamenteeldilema:prdidadeaguamenosfijacinCO2oahorrodeaguaiguala
pobreza de fijacin de CO
2
. Existen aparatos capaces de medir el nivel de CO
2
fijado, se
conocenconelnombredeIRGA(analizadordegasesenelespectroinfrarrojo).

PROCEDIMIENTO
El principio bsico de la construccin de estos aparatos es el siguiente. Las molculas de
gasqueestnconstituidaspordiferentestomos(heteroatmicas),absorbenradiacinen
laregindelespectroinfrarrojoycadagastieneunespectrodeabsorcincaracterstico.
Se ha utilizado el IRGA para identificar y cuantificar una amplia gama de molculas
heteroatmicas como: CO2, CO, S02, H2 O (vapor de agua) e hidrocarburos gaseosos. La
bandademayorabsorcindelCO2esten=4.25mconunpicosecundarioen=2.66,
2.77Y14.99J.mUsualmente,lanicamolculaheteroatmicapresenteenelaireconun
espectro de absorcin que se sobrepone con el de CO2 es el del vapor de agua (H
2
O);
ambasmolculasabsorbenradiacininfrarrojaenlareginde2.7m,portalmotivo,se
necesita hacer algunas modificaciones, como ya se mencion, para poder diferenciar las
dos molculas. La tcnica para estimar la tasa de fijacin de CO
2
prdida de agua
consiste enenclaustrar la planta o parte de ella, en una cmara que permitacontrolar el
flujo de gas que entre y/o salga. Dicha cmara debe estar hecha de tal manera que
tambinpermitamantenerunatemperaturaconstanteyelpasodeluzlomscercanaal
espectronatural.
Debe introducirse por las vlvulas de intercambio gaseoso un flujo constante del cual se
conoceelniveldehumedadydeCO
2
almicroambientedelaplanta.Lacalidaddeflujola
alterarnicamenteeltejidovegetal,quealserllevadofueradelacmara(flujodesalida
IFsl),seestimarelgradodecambioconrespectoalflujodeentrada(Fe),detectadosen
elIRGA.
Demaneraque:
Flujodeentrada(Fe)=CO
2
yhumedadconocidos
Flujodesalida(Fs)=CO
2
yhumedadconocidos
FsFe=a)DiferenciaenlosnivelesdeCO
2

=b)Diferenciaenlosnivelesdehumedadrelativa
SilosnivelesdeCO
2
enelFssonmayoresqueenelFe,entoncesseestarenposibilidad
dedecirquehaydesprendimientodeCO
2
poreltejido(porejemplo,enlaobscuridad).En
caso contrario, se podr decir cunto CO
2
se est fijando por el tejido vegetal (por
ejemplo,CO
2
cm
2
delminafoliar).
64

De la misma manera, se puede estimar la humedad que se est perdiendo por


transpiracin.
Lospasosquesesiguenparadeterminarlatranspiracinsonlossiguientes:

1.Humedaddesalidahumedaddeentrada=D
2.DXvelocidaddeflujo=E
3.EX60(min.)=F(mgH
2
O/h)
4.F=reafoliar=G(mgH
2
Odm
2
/h)
5.G=360000=H(mgH
2
Ocm
2
/seg.)=velocidaddetranspiracin

BIBLIOGRAFIA
Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.

65

PRACTICANo.29
TITULO:FACTORESQUEAFECTANLAVELOCIDADDETRANSPIRACION

INTRODUCCIN.
La transpiracin est controlada por tres factores: a) el gradiente de presin de vapor
entre la hoja y la atmsfera, b) la resistencia que ofrezca la hoja y c) la resistencia que
ofrezcaelaire.Elgradientedepresindevaporqueexisteentrelahojaylaatmsferaes
muyfuerteydependemsquenadadelatemperaturadelmedio,queasuvezcontrolala
humedad relativa. Es por esto que cuando aumenta la temperatura se presenta tambin
un Incremento de la transpiracin: La resistencia de la hoja tiene varios componentes,
siendodos,delosprincipaleslacutculaylosestomas.Deestasdos,laresistenciadelos
estomasesvariable,yaquepuedenocurriraperturayelcierredestos(Kramer.1974).El
funcionamiento de los estomas est controlado bsicamente por los niveles de
hidratacin de sus tejidos y por los niveles de CO
2
. Otros factores que influyen en el
comportamiento de los estomas, como la luz, temperatura y viento lo hacen
indirectamenteatravsdelosdosmencionadosanteriormente(SalisburyyRoss,1978).EI
ltimo factor es la resistencia que ofrezca el aire, determinada .por la denominada capa
limtrofe. La capa limtrofe es una capa de aire que rodea a la hoja y que tiene
propiedades diferentes las que presenta el esto, de la atmsfera. Principalmente tiene
mayorcontenidodehumedadymenorconcentracindeCO
2
.Aslapresenciadeunacapa
limtrofebiendefinidapuedeImpedirenciertogradolatranspiracin.Sistadesaparece,
lo que ocurre cuando hay viento, aumenta la transpiracin (Kramer. 1974). La mayor
cantidaddeaguasepierdeatravsdelosestomas.
Comopodemosverlainfluenciadefactorescomolaluz,temperaturaoelvientosobrela
transpiracinocurreavariosniveles.

OBJETIVO.
Determinar la velocidad de transpiracin en varias condiciones del medio ambiente
(Temperatura,vientoyluz).

MATERIAL
4Potmetros
1Calefactor
3Termmetros
1Ventilador
1Lmpara
Ramasdeunaplanta(trueno,etc.)

Parallevaracabolamedicindelatranspiracinseutilizarunpotmetro.Notequeen
esteaparatosemideelaguaabsorbidaatravsdeltallopero,comosabemoslacantidad
deaguatranspiradacorrespondealaguaabsorbida.Elpotmetroqueseutilizaraques
eldiseadoporCocklin(1973).(Figura11).

Sigalosincisosacontinuacin:
a)MonteeldispositivodelaFigura11tantasvecescomocondicionesdelmedioquevaya
aprobar.

66

b) Verifique en cunto tiempo la rama consume 0.2, 0.4 Y 0.6 ml de agua para cada
condicin del medio ambiente en los casos que se requiera, mida la temperatura (luz,
medio ambiente, calefactor). Repita 2 3 veces el ensayo y obtenga un promedio de
tiemporequeridoparaconsumir0.2mldeagua.

Conlosdatosdevolumendeagua,tiempoyreafoliarcalcule,paracadatratamientola
cantidad de agua perdida por unidad de superficie foliar por unidad de tiempo. Para la
determinacin del rea foliar de las ramas utilice un planmetro o mida el largo (L) y el
ancho(A)decadahojaycalculeelrea(A)conlasiguienteecuacinA=LxAx0.68llene
consusdatoselsiguientecuadro.

Cuadro12.Transpiracinenvariascondicionesdelmedio

Discutasusresultadosdeacuerdosilainfluenciaquepresentecadafactor.

Actividadparalela
Comoactividadparalelaaestapracticapuedenobtenerimpresionesdelosestomasdela
planta que se est trabajando. Estas impresiones pueden lograrse usando barniz
transparente de uas, colodin, etc. En este caso de se recomienda el mtodo de E.M.
Engleman(nopublicado)queusaelpegamentodenominadoKolaloka.Secolocaunagota
delpegamentoenunportaobjetoslimpio,seoprimestecontralasuperficiedelahojay
se deja secar durante 5 minutos. Desprenda el portaobjetos. Observe al microscopio.
Puedenhacersepreparacionesdelhazydelenvsycompararlas.

BIBLIOGRAFA.
Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant
Physlology.ASELab.Books.London.

Kramer,P.J.1974.RelacionesHdricasdeSuelosyPlantas.EDUTEX.Mxico.

Salisbury,F.B.,yC.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.

TRATAMIENTO

T mlDEAGUA TIEMPO AREAFOLIAR


TRANSPIRACIONml
AGUA/cm
2
/t
Testigo
Calefactor
Luz
Ventilador
67

PRACTICANo.30
TITULO:RESPIRACION;MEDICIONDELARESPIRACIONENSEMILLAS

INTRODUCCION
Larespiracineselprocesodeoxidacindediversossustratos(almidn,sacarosauotros
azcares, grasas, cidos orgnicos y, en ciertas condiciones, Incluso protenas, pueden
servircomosustratosrespiratorios)paraproducirCO
2
,H
2
Oyliberacindeenerga.Parte
de esta energa se pierde en forma de calor y parte se almacena en forma de ATP,
compuestoqueseutilizaendiversosprocesos,comoelcrecimientodelaplanta(Salisbury
yRoss,1994).
Cuandolassemillassesometenalprocesodehidratacinygerminacinpresentanporlo
regular,encuantoahidratacinyrespiracin,unpatrnsemejantealdelaFigura1(Ting,
1982).

Estecomportamientosehadivididoentresfasesyson:
ProcesofsicodehidratacinImbibicin.
Estabilizacindelpeso,iniciodemetabolismocelular,aumentodelarespiracin.
Iniciodelagerminacin,crecimientoderadiculasereiniciaabsorcindeagua.

OBJETIVO.
Determinar la velocidad de respiracin de las semillas en diferentes tiempos de
imbibicin.

MATERIAL
Semillasdechcharo,frjol,etc.2030gcon0,24,36Y48horasderemojo.
Aparatoderespiracin(verFigura12)
Hidrxidodebario0.025M
HCL0.1N
Indicadordefenoftalena
Bombadevaco
Buretade50ml
Soporteuniversalypinzasparabureta
Bombadevaco
MatrazKitasato2
Tapndehule,perforado2

PROCEDIMIENTO
A travs de la bomba de vaci (Figura 12) arrastre el aire del fondo del matraz durante
1.52 horas. Agregue 50 ml de Ba(OH) a 0.025 M en el otro matraz. Agregue unas 3 4
gotas de fenoftalena. El CO
2
de la respiracin se combina con el Ba(OH)
2
en la siguiente
relacin:

Ba(OH)2+CO2BaCO3+H2O
68

Despus de transcurrido el tiempo pertinente titule con NaOH 0.1 N la cantidad de


Ba(OH)
2
quesobr.Monteundispositivoigual,perosinsemillas;estesereltestigo

Figura12.Dispositivoparamedirlarespiracinporarrastredegases

CalculeelCO
2
desprendidoatravsdelasiguientefrmula:

Respiracin=(mgCO
2
min_1g1)(mlHClcontrolmlHCsemilla)x2(Tiempoxpesodesemillas)
1

Comparelosresultadosparacadatiempoderemojo.

BIBLIOGRAFA.
Machies, L. and J. G. Torrey. 1956. Plants in Action. A Laboratory Manual of Plant
Physiology.W'.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

Roberts, J. Y D.G. Whitehouse. 1976. Practical Plant Physiology. Laboratory Manuals.


LongnonGroup,GreatBritain.155p.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

69

PRACTICANo.31
TITULO: RESPIRACION LA PRUEBA DEL TETRAZOLIO PARA DETECTAR LA
ACTIVIDADDELASDESHIDROGENASASYVIABILIDADDELASSEMILLAS.

INTRODUCCION
Se puede definir como germinacin en una semilla al inicio del crecimiento activo del
embrinqueresultaenlarupturadelatestayemergenciadelanuevaplanta.
La viabilidad se puede definir como el grado en el cual una semilla est viva,
metablicamenteactivayposeelasenzimascapacesdecatalizarlasreaccionesnecesarias
paralagerminacinycrecimientodeIaplntula.
Existen varias pruebas para determinar la viabilidad de las semillas, dentro de stas la
prueba del tetrazolio es ampliamente utilizada y es un medio preciso de estimar la
viabilidad de las semillas. Este mtodo se desarroll en los 1940 en Alemania, por el
profesorGeorgeLakonyyactualmenteesunapruebaderutinaenmuchoslaboratoriosde
semillas.Lapruebadeltetrazoliodistingueentretejidosviablesymuertosdelembrinen
baseavelocidadesrelativasderespiracin,cuandolassemillasestnhidratadas.Aunque
son varias las enzimas que se activan durante la respiracin, la prueba utiliza la actividad
de las deshidrogenasas como un ndice de la actividad respiratoria y viabilidad de la
semilla. Las deshidrogenasas actan en reacciones de xidoreduccin permitiendo la
liberacindeioneshidrgenoquepuedenreaccionarconlasolucinoxidadaincolorade
saldetetrazoliolacualcambiaaformazn(colorrojo)cuandosereduceporlosionesde
hidrgeno.
Laviabilidaddelassemillasseinterpretadeacuerdoalpatrntopogrficodetincindel
embrineintensidaddelacoloracin.

OBJETIVO.
Obtenerelporcentajedeviabilidadygerminacindelaespecieasignada.

MATERIAL
3Cajaspetri
Solucindeclorurodetetrazolioal0.1%
Semillasdeespeciesdeclimatempladoydeclimaclido
1Frascodevidriocontapa
1Pinzadediseccinoagujadediseccin.
1Microscopioestereoscpico.
1.Utilice3gruposde50semillas.Enelcasodesemillasgrandesutilicesolamente25.

PROCEDIMIENTO
2.Primergrupodesemillas.
2.1. Al primer grupo djelo en Imbibicin durante 24 hrs. Despus de transcurrido este
tiempo corte longitudinalmente la semilla abarcando el eje del embrin; deseche una
mitadylaotracolquelaenunacajadepetriquecontenga3mIdesolucindeclorurode
tetrazolio.Elejedelembrindebeestarencontactoconlasolucin.
70

2.2.Despusdeunahoraconunaagujadediseccinoconunapinzavolteelamitaddela
semillayobservesisehacoloreado.Cuenteelnmerodesemillascoloreadas.Obtengael
%deviabilidaddelasiguientemanera:

%deviabilidad=No.desemillascoloreadasx100x(No.totaldesemillas)
1

3.Segundogrupodesemillas.
3.1. Desinfecte sus semillas. En un frasco de vidrio con una solucin de hipoclorito de
calcio al 3% deposite sus semillas, cierre el frasco agite y desheche la solucin del
hipocloritoylaveconaguaesterilizada23veces.
3.2.Enunacajadepetriesterilizadalacualtendralgodntendr5mldeaguatambin
esterilizada,coloquesussemillasdistribuyndolasadecuadamente.
3.3.Etiquetesucajadepetriconsugrupo,equipoyespecialidad.Colquelaenunaestufa
a2Cunloteyotrolotedjeloatemperaturaambiente.
3.4. Observe su material diariamente y anote el nmero de semillas germinadas por da.
Aada agua segn sea necesario. Con sus resultados elabore una grfica (tiempo vs.
nmerodesemillasgerminadas).
3.5. Una vez teniendo la suma de las semillas germinadas. Obtenga el % de germinacin
delasiguientemanera:

%germinacin=No.desemillasgerminadasx100(No.totaldesemillas)
1

Comparelosvaloresde%deviabilidadygerminacin

BIBLIOGRAFA
Ross,C.W.1974.LaboratoryPhyslologyLaboratoryManual.Wadsworth.Pb.Co.Belmont,
California.

Machles. L. and J. G, Torrey. 1956. Plants in Action. ALaboratory Manual of


Plant.Physiology.W.H.FreemanandCompany.SanFrancisco.282p.

71

PRACTICANo.32
TITULO:RESPIRACIONLAINUNDACINYLAFORMACINDE
AERENQUIMAENARROZ

INTRODUCCIN.
Durante el desarrollo de una planta puede haber ocasiones en que sta est sometida a
perodosmsomenoslargosdeexcesodeagua,loquellevaaundesplazamientodelaire
del suelo y en consecuencia a una falta de oxgeno. La falta de oxigeno produce a su vez
unainhibicindelciclodeKrebsenlarespiracinyseacumulaentoncesacidopirvico,el
cual se transforma mediante la formacin de acetaldehdo, en alcohol, finalmente si el
alcohol se acumula en exceso, pueden alcanzar entonces niveles txicos que aadan a la
raz(Medina,1977).
Sabemossinembargoquelasplantasterrestrespuedendiferenciarseporsutoleranciaal.,
exceso de agua o inundacin. Este tipo de tolerancia puede ser de dos tipos: tolerancia
morfolgicaytoleranciametablica(Medina,1977).""
Conrespectoalprimertipodetoleranciapuedemencionarsequeencasitodaslasplantas
terrestreshayunflujodeO
2
desdelaparteareadelaplantahastalasraces,peroporlo
general en las plantas tolerantes a la inundacin la conductividad de los gases desde el
tallo hasta la raz es mucho mayor. Esta conductividad mayor se debe a que en el
parnquimadeestasracesytallossepresentancavidadesqueformancanalespordonde
circula el aire, debido a esto el tejido se describe mejor con el nombre de aernquima.
Cuando una planta crece en condiciones de falta de oxgeno se ha observado que se
presentan incrementos en los niveles de la enzima celulosa que comienza a destruir
algunas de las clulas del parnquima para dar origen al aernquima. En consecuencia si
observamos unos cortes transversales de una raz sometida a inundacin y otros de una
razconaireacin,laprimerapresentarespaciosvacoscarentesdeclulasylasegunda
presentarunparnquimauniformesinorificios.
De esta manera la tolerancia de cultivos agronmicos y hortcolas a suelos con poco
oxgeno puede depender, al menos en parte, de su habilidad para desarrollar sistemas
conductoresdeaire;sehadetectadoaernquimaencebada,trigo,maz(Kawase,1979)y
enpartesdegirasolytomate(KawaseyWhitmoyer,1980)yenarroz.

OBJETIVO.
Observar cortes transversales de las races de una planta resistente a la inundacin (con
aernquima)ydeunaplantaconmenortoleranciaaesta(conparnquimauniformeenla
corteza).

MATERIAL
Racesdearrozcrecidoencondicionesdeinundacinydeotraespeciemssusceptiblea
esta(arrozyjitomate,porejemplo).
2Navajasderasurar.
Mduladesaucootrozosdepapa
1CajadePetri
72

1Agujadediseccin
2Portaobjetos
2Cubreobjetos
1Goteroconsolucindeazuldetoluidina
1Microscopioptico

PROCEDIMIENTO
Seleccione una porcin de raz que haya estado sometida a inundacin y otra que haya
tenidoaireacin.Colquelasenmediodedostrozosdemduladesaucoodepapayhaga
cortes lo ms fino posible con la navaja de rasurar. Monte los cortes con agua en los
portaobjetosycubreobjetos.Observelasestructuras,diferenciandounasdeotrastiendo
conelazuldetoluidina.
Esquematicelasestructurasencontradas.

BIBLIOGRAFIA.
Medina,E.1977.IntroduccinalaEcologiaVegetal.SecretaraGeneraldela
OrganizacindelosEstadosAmericanos.Washington.

Kawase,M.1979.Poleofcellulaseinaerenchymadevelopmentinsunflower.Amer.J.Bot.
66(2):183190.

KawaseyWhitmoyer,R.E.1980.Aerenchymsdevelopmentinwaerologged.plant.Amer.J.
Bol.67(1):1822. '.:.

73

PRACTICANo.33
TITULO:TCNICADEIMPRESINDEESTOMAS

INTRODUCCIN
Los estomas son poros formados por un par de clulas especializadas llamadas clulas
guarda y seencuentranen la epidermis de las partes areas de la mayora de las plantas
terrestres

OBJETIVO
Dominarlatcnicadeimpresindeestomas

MATERIAL
Plantasdemazyverdolaga,portaobjetosycubreobjetosconcolalocaymicroscopio.

PROCEDIMIENTO
En el porta objeto coloque cuatro gotas de cola loca e impresione el haz de las hojas
presionando fuerte durante un minuto, posteriormente retire la hoja cuidadosamente y
procedaaobservarenelmicroscopio.
Mediante la impresin de estomas se puede observar como estn distribuidos y en que
situacin se encuentran cerrados o abiertos. Tambin se pueden calcular el nmero
promedio de estomas. En monocotiledneas se disponen en lneas paralelas y en
dicotiledneasselocalizandispersos.

BIBLIOGRAFIA
Salisbury,F.B.yC.W.Ross.1979.PlantPhyslology.2a.Ed.Wadsworth,Salmont,California.

Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

74

PRACTICANo.34
TITILO:DISEODEEXPERIMENTOSDEFISIOLOGIAVEGETAL

OBJETIVO
ComprobarqueelcierredelosestomasafectalaentradadeCO
2
,alinteriordelashojasy
sedisminuyelaintensidaddelafotosntesis.

PROCEDIMIENTO
Consultando manuales de laboratorio de Fisiologa Vegetal, disee un experimento para
comprobarlaimportanciadelosestomasenlafotosntesis
EFECTODELTIPODELUZSOBRELAFOTOSNTESIS

OBJETIVO
Determinar cual tipo de luz (segn su longitud de onda) es la ms utilizada en la
fotosntesis.

PROCEDIMIENTO
Siguiendo el mismo procedimiento del ejercicio se pide disear un experimento que
permitamedircomoseafectalaintensidaddelprocesofotosintticosegnlalongitudde
ondadeluzquerecibalaplanta.

BIBLIOGRAFIA
Bidwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Cocklin,R.E.1973.Anunbreekeablepotometer.EnC.J.Clegg(Ed.)Plant
Physlology.ASELab.Books.London.

75

PRACTICANo.35
TITULO:FERTILIZACINFOLIAR

INTRODUCCIN
La fertilizacin foliar es una tecnologa complementaria a la fertilizacin edfica que,
permite ajustar los requerimientos nutricionales en funcin del estado del cultivo y
aportar nutrientes en momentos en que los requerimientos no pueden ser cubiertos por
lacapacidaddeabsorcinodebidoalimitantesambientalestalescomounPHextremoso.

OBJETIVO
Evalulosefectosdelafertilizacinfoliarenplantasctricas

MATERIAL
Aspersora,fertilizantefoliar,aguayplantasctricas

PROCEDIMIENTO
Modo de preparacin: en un litro de agua agregue 50grs de fertilizante foliar y aplique a
lasplantasquelonecesiten(ctricos).

BIBLIOGRAFIA
Fernndez, H.y E. Arios. 1989. Estimacin del rea Foliar en Plantas de Cultivo. Porte 1.
Agrotecnica de Cu. 15 148. de Resenss, Suelos y Agroqumica. La habana. Cuba. Harl
.P.H.1965.Ainthegridlosestimatingcreaofgrassleaves.AgronJ.57(e):634.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355

76

PRACTICANo.36
TITULO:MADURACINDEFRUTOS

INTRODUCCIN
Histricamente son tres los caminos que han conducido al establecimiento del etileno
como una hormona vegetal: A) las antiguas observaciones de que los frutos maduran
rpidamentesiselesencierraenuncuartoconhumo,B)elhechodequeenelcultivode
pia y mango se inicien incendios aledaos a los cultivos a fin de que el humo inicie la
floracin, C) la induccin de la cada de las hojas de los rboles a partir del gas
desprendidoenlaslmparasutilizadasparalailuminacinpublica.

OBJETIVO
Estimarelperiododemaduracin

MATERIAL
Campanaybasedevidrio
Grasa
Pltanosverdesymaduros

PROCEDIMENTO
Coloque dentro de la campana los pltanos verdes y maduros por separados y selle la
campanacongrasa,esteexperimentodemostraralacapacidadquetienenalgunosfrutos
deaportarhormonasdecrecimientoomaduracinsinnecesidadderecurriraotros.

BIBLIOGRAFIA
Abeles,D.S.1973.EthyleneinPlantBiology.AcademicPress.NewYork.London

HiII, T.A. 1977. Hormonas Reguladores del Crecimiento Vegetal. Omega, Barcelona,
Espaa.
77

PRACTICANo.37
TITULO:POSICINDELOSESTOMASENHOJASDEDIFERENTESAMBIENTES

INTRODUCCION
El ambiente lumnico tiene un efecto profundo sobre las plantas y en especial sobre la
estructura y el funcionamiento de las hojas. Su influencia puede ser observada a nivel
morfolgico, anatmico o fisiolgico, sea sobre las hojas que crecen en diferentes
posicionesdelacopadeunmismoindividuo,oentreecotiposdeunamismaespecieque
crecenenambientesdiferentes(Boardman1977).Estascaractersticasdistintivashansido
utilizadascomouncriteriomsparaclasificarlasespeciesforestalesengruposecolgicos
detoleranciaalasombraoengruposdesucesin.

OBJETIVO
Determinar la posicin de los estomas en plantas hidrfitas, mesfitas y xerfitas. De tal
maneraquesepuedaconocercomoelaguahasidounfactorevolutivoimportanteenla
ubicacindelosestomas.

MATERIAL
Hojasdecaf,loto(liriodeaguayhabano(neriumoleander)
placasportaobjetosycubres
zanahorias
cuchillasnuevas
platosdepetri
agujasdediseccin
microscopiocompuesto

PROCEDIMIENTO
Con ayuda de pedazos de zanahoria haga cortes bien finos de las hojas de los diferentes
ambientesycolque1asenlosplatosdepetriconagua.Conlaagujadediseccincoloque
los cortes ms delgados en portaobjetos agregndoles una gota de agua. Pngalos en
cubreobjetosyobsrvelosalmicroscopio.
Determine la posicin de los estomas en la epidermis del haz o del envs. Ubique la
posicindelosestomasenelcasodequeseencuentrenencavidadesocriptas.
Encadacasohagadibujosilustrativosdelestomaconlacmarasubestomtica.

BIBLIOGRAFIA
Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New
York

78

PRACTICANo.38
TITULO:CMOCONSTRUIRUNPORMETRO

INTRODUCCIN
Existen varias tcnicas para medir la apertura estomtica. En 1901, Buscaloni seal la
tcnica de microscopia en que se utilizan rplicas de una pasta plstica que se esparce
sobre las hojas. Las rplicas se pueden examinar en el laboratorio, adems de que son
preparaciones permanentes. Esta tcnica es sencilla, aunque muy poco precisa. Su
principal limitante es que, en muchas ocasiones, la apertura del estoma (poro) est ms
alldelalcancedelapastaplstica.

Existentcnicasindirectasparaestimarelgradodeaperturadelosestomas.Sebasanen
determinar la capacidad de las hojas. Estas dos son ms sensibles para detectar cambios
quelasmedicionesenelmicroscopio.
Bsicamente, existen dos tipos de instrumentos que miden la resistencia o conductancia
de las hojas. Ambos se basan en la capacidad de los esto ms para conducir gases:
pormetrosdeflujodemasasypormetrosdedifusin.

Los pormetros de difusin estiman la velocidad de difusin de vapor de agua de las


cavidades subestomticas hacia la atmsfera. El mtodo consiste en aislar
momentneamente una porcin de la hoja y medir su tasa de transpiracin en
determinado ambiente. Para ello, en la hoja se coloca un sensor que responda a los
cambiosenlahumedadcausadaporlatranspiracin.

Lospormetrosdeflujodemasasfuerzanelairedelaparteexternahaciaelinteriordela
hoja.Laresistenciadestaobien,latasadeflujo,esunindicadordelaaperturaocierre
de los estomas. Este tipo de pormetros es efectivo con hojas anfiestomticas porque
cuandoelairebajopresinseaplicaaunacaradelahoja(parteabaxialoadaxial),elaire
entraatravsdelestoma,atraviesaelespaciointercelulardelmesfilo,ysaledelahoja
por los estomas del lado opuesto. Por tanto, el flujo depende de la resistencia de los
estomasdeambosladosdelmesfilo.En1911,DarwinyPertzhicieronporvezprimeraun
pormetro de flujo, prototipo de todos los pormetros, slo que la manera de medir el
flujodeaireatravsdelashojassehamejoradonotablemente.

OBJETIVO
Construirunparmetrodeflujodemasas

MATERIAL
Manguera de hule, trampa de vidrio, probeta, tubo de vidrio con un dimetro 0.5 cm,
papelmilimtrico,soporteuniversal,taponesdehule,trozosdetermmetroyplantasde
mazdeaproximadamentemesymedio.

79

PROCEDIMIENTO
Monteelpormetro,lanicasalidadelflujodeairealolargodelsistemaesatravsdel
tapn, el cual se ajusta a la hoja por medio de otro tapn horadado. Esta salida de aire
estarreguladaporelgradodeaperturadelosestomas,detalmaneraquesistosestn
totalmente abiertos, todo el flujo de aire saldr a travs de ellos, pero si estn parcial o
totalmente cerrados, el flujo de aire se desviar parcial o totalmente hacia el tubo de
vidrioymoverlacolumnadeagua.Silosestomassevuelvenaabrir,lacolumnadeagua
semoverenelsentidocontrario.

Figura13.Porometrodeflujodemasa.

BIBLIOGRAFIA
Ting.I.P.1982.PlantPhyslology.AdisonWesleyPublishing.Co.U.S.A.

Vaver,R.J.1980.Reguladoresdelcrecimientodelasplantasenlaagricultura.
Trillas,Mxico.
80

PRACTICANo.39
TITULO:DETECCIONSEMICUANTITATIVADESALESMINERALESPOREL
METODODEMORGAN.

INTRODUCCIN.
Losanlisisdesalesmineralesenelsueloylostejidosvegetalespuedenayudaradeterminar
siunaplantatieneunsuministroadecuadoparasatisfacersusnecesidadesypueden,adems,
evitareldesperdiciodelosmaterialesfertilizantes(Luntetal.,1965).
EnelcasodelosanlisissemicuantitativosdeMorgansemidenlacantidaddesalessolubles
tanto del suelo como de los tejidos vegetales; este ltimo caso es posible debido a que las
plantas absorben mayor proporcin de nutrientes de los que requieren siempre y cuando
stosexistanencantidadesaltas.Estopermiteunaacumulacin,(Cooky Miller,1949).Enel
mtododeMorganelplangeneralesobtenerunextractodelsueloodelostejidosvegetales,
transferirpequeascantidadesaunaplacadevidriooatubosdeensayeyagregarreactivos
apropiadosparadesarrollaruncolorounaturbidez,segnlapruebadequesetrate(Luntet
al.,1965).Paracalcularlacantidaddesalesmineralessediseounatablade4coloresode4
lineas de visibilidad (ver mas adelante) que Indican otros tantos rangos de concentracin en
ppm.Deestemodoelcolordesarrolladoolaturbidezdenuestroextractopuedecompararse
con las tablas. Es posible disear tablas que Incluyan ms o menos pasos a la escala de
acuerdoalaexactitudquesedesee(Luntetal.,1965).
Una de las aplicaciones del mtodo del anlisis del suelo ser el clculo de las dosis de
fertilizacintalycomolohizolaSARHenunfolletopublicadoen1977(SARH,1977).Endicho
folleto se utilizan solo tres valores en la escala de concentraciones de los elementos y se les
denomina B, M y A (Bajo, Medio y Alto). De acuerdo a sto al analizar el suelo en los
elementosN,PyKlasconcentracionesdelosmismospuedentenerlosvaloresbajo,medioy
alto.
LoimportanteyqueinteresaresaltaraquesqueenelfolletoseIncluyeunatablaqueindica,
paradiferentescultivosladosisdeKgdeelementoquedebenaplicarseporhectrea(Cuadro
1)paracadacondicin.

CULTIVO ANALISISNPK CULTIVO ANALlSISNPK


B7127 B712 7
FRESA M5105 GLADIOLA M5105
A040 A000
B4106 B101210
FRIJOL M084 LINAZA M68 6
A040 A44 0
B4106 B126 4
GARBANZO M084 MAIZ M1050
A040 A 64 0
Cuadro13.DosisdefertilizacindeacuerdoalasproporcionesdaN.PYKexistentesenelsuelo.
Cadavalordebemultiplicarsepor10yalresultadoIndicaalnumerodekgdelelementoque
debenagregarseporha(SARH.1977)
81

Si se habla del muestreo de los tejidos es til recordar que existen cuadros donde se
indican las partes ms convenientes que deben muestrearse en diferentes cultivos. Un
ejemplodestoeselCuadro14.

CULTIVO NITRATO FOSFORO POTASIO


MAIZ Tallocercadelsuelo Tallocerca laminade
delsuelo lahoja
Pecolodelahoja
FRIJOL Pecolode pecolode
lahoja hoja
Pecolodelahoja
FRIJOLSOYA Pecolode Pecolode
lahoja hoja

Pecolodelahojao
tallo

PAPA Pecolo(dehoja Pecolode
Pecolodelahoja Tallo) hojatallo

GERANIO Pecolodehoja Pecolodehoja
Tallo
GRAMINEAS Tallo tallo
Cuadro14.Partesmasapropiadasparamuestrearenalgunoscultivos(CookeyMillar,1949)

EnelcasodegramneasMorgan(Lunt,elal.,1965)recomiendaelusodelashojas.
Para mas detalles acerca de estos temas consultar a Lunt, et al. (1965), Cook y Miller
(1949)yBould(1967).

OBJETIVO
Verificar los niveles de nutrientes en el suelo y en tejidos vegetales en cultivos o en
plantasdeornato.

MATERIAL
Paraobtenerelextractodelsuelo(a)odelostejidos(b):
a)1Embudodevidrio b)Navajaderasurar
CucharadeplsticoCarbnactivado
1Pipetade10mlTubodeensaye
Papelfiltro Embudodevidrio
GoteroPipetade10ml
SolucinextractoradeGotero
Morgan(verapndice)Papelfiltro

82

Parallevaracabolasdeterminacionesdelosnutrientesseusanlosmismosreactivospara
losextractosdelsueloydelosdetejidos.

Placaporcelanaounvidrioconfondoblanco.
2Agitadoresdevidrio
1Vasodeprecipitado250mlconaguadestilada
Toallaotrapoparasecar
2Tubosdeensayedefondoplano
Tabladeescaladeconcentraciones
ReactivoAparaNitrgenoNtrico.
ReactivoBparaNitrgenoNtrico
ReactivodeNessierparaNitrgenoAmoniacal
ReactivoAparaFsforo.
ReactivoAparaPotasio
ReactivoBparaPotasio.
ReactivoparaCalcio
ReactivoAparaMagnesio
ReactivoBparaMagnesio(verapndice).

PROCEDIMIENTO
ObtencindelExtracto.
Paraelsuelo:
a)Coloqueelpapelfiltroenelembudo.
b)Agregueunacucharaditarasadesuelo.Depreferenciasecadoalsol,nuncaenlaestufa.
c) Agregue 10 ml de solucin extractora de Morgan. Djese filtrar todo el lquido.
a1retirarelfiltrodelembudocomprmasesuavementeparaextraertejidoelliquidoque
seaposible.
d) Quite el embudo y ponga el gotero en el recipiente donde se haya recibido el
extracto.Paralostejidos
a)Cortarlamuestrafinamenteconlahojaderasurar.Mezclarbienelmaterial.
b)Tomarconunacucharitaunamuestradelmaterial(unvolumenaproximadode2.5 ml)
yponerloenuntubodeensaye.

c)Agregar7.5mldelasolucinextractoradeMorgan(9mlparapastos)ylapuntadeuna
cucharaditadecarbnactivado.Seagitadurante1minutoysefiltra.Estasolucinseusa
en los ensayos de la misma forma que los extractos del suelo. La nica diferencia es al
utilizarlastablasyaqueenelcasodelasmedicionesdlosextractosdetejidosvegetales
losvaloresobtenidosdebenmultiplicarsepor3yparapastosmultiplicarsepor3.6(Lunt
etal.,1965).

Estimacionesdelassalesminerales.

NitrgenocomoNitrato:
Ponga 3 gotas del extracto del suelo en una depresin de la placa. Agregue 2 gotas del
Reactivo A para nitratos y 7 gotas del Reactivo B. Mezcle bien. La lectura debe hacerse
83

inmediatamente o unos cuantos segundos despus o una vez que hayan transcurrido de
12a15minutos.Compareloscoloresconlalminacorrespondiente.

NitrgenoAmoniacal:
Ponga 4 gotas del extracto en la placa, agregue gotas del reactivo de Nessier y deje
reposarunminuto.Agiteycompareelcoloramarilloyanaranjadoresultanteconlaescala
decolorescorrespondiente.

Fsforo:
Ponga 10 gotas del extracto en la placa. Agregue 1 gota del reactivo A y 2 gotas del
reactivo B. Agtese, deje reposar 1 minuto (no ms de esto) y compare la intensidad del
colorconlaescalacorrespondiente.

Potasio:
Ponga10gotasdelextractoeneltubodefondoplano,agregue1gotadelreactivoAy12
gotas del reactivo B. Djese reposar 1 minuto, agtese suavemente y mantngase en
reposootros2minutos.Estimelacantidaddeprecipitadoamarilloutilizandolaescalade
comparacindeturbidezdelasiguienteforma:
Coloque el tubo de fondo plano en posicin vertical directamente sobre las lneas de la
escalayaunadistanciade6.2mmdelasmismas.Vaseporencimadeltubocomparando
con los diferentes grupos de lneas hasta encontrar el grupo que apenas se perciba la
cantidaddepotasioeslaquecorrespondeaestegrupodelneas.

Calcio:
Ponga10gotasdelextractoeneltubodefondoplano,agregueunagotadelreactivopara
calcio, agite vigorosamente y deje reposar 5 minutos. Estime la turbidez en la misma
formaqueelpotasio.

Magnesio:
Ponga 10 gotas del extracto en la placa agregue 1 gota de reactivo A para Magnesio y 3
gotas del reactivo B. Agite, deje reposar 1 minuto y compare la coloracin con la escala
correspondiente.
En este ensayo slo se miden algunos elementos. Ensayos para otros elementos como
aluminio, manganeso, fierro, azufre, nitrgeno en forma de nitrito, sodio, etc., pueden
encontrarse en el trabajo de Lunt et al. (1965). Reporte sus resultados apuntando los
datosobtenidosenelCuadro1delApndice.

BIBLIOGRAFA.
Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop
Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.

Lunt, H.A., H.G. M. Jacobson y C.L.W. Swanson. 1950. El sistema Morgan para anlisis de
suelos. Boletn 541, Mayo. Estacin Agr. Exp. Connecticut New Haven, USA. Este folleto
84

fue traducido y adaptado en la UACh con el nombre de Qumica Agrcola Aplicada por
Ojeda,O.D.yDelgadodeG.Z.enelaode1965,dedondesetomaronlosdatos.

SARH,SubsecretaradeAgriculturayOperacin,1917.Fertilizacinenfuncindelanlisis
del suelo (por el mtodo de Morgan). Servicio de Orientacin Tcnica al usuario, hoja de
Divulgacin.No.21,Mxico.

Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London

ANEXOS
SolucinextractoradeMorgan
Agregue 100 gramos de acetato de sodio (NaC2H302) a 500 ml de agua (10%). Despus
quelasalsedisuelvaagregue30mldecidoacticoglacial(3%)yaforea1litro.

ReactivoparaNenformadeNitrato
Disuelva0.05gdeDifenilaminaen25mldecidosulfricoconcentrado.Gurdeseenun
gotero de color mbar. La solucin resultante no debe tener ninguna sombra de color
azul; y tampoco deber producir ninguna coloracin cuando se agreguen 4 gotas de la
mismaaunagotadeaguadestilada.Siocurreestareaccinpreparedenuevoelreactivo.
Lasolucinessumamentecorrosivaynodebeestarencontactoconhule.

ReactivoparaNenlaformadeAmoniacoReactivodeNessier
Disuelva5gdeKIen.15mldeaguadestilada.Agregueunasolucinsaturadadecloruro
mercricohastaquecomienceaformarseunprecipitado.Acontinuacinponga40mlde
solucindeNaOHal80%.Aforea100mldjeseasentarduranteunasemana,decntesey
gurdeseenunfrascodecolormbar.Dosgotasdeestereactivoagregadasa4gotasde
lasolucinextractivanodebernproducirprcticamenteningunacoloracin.

ReactivoparaFsforo
ReactivoA.Disulvase12.5gdemolibdatodesodio,calentadopocoapoco,en100mlde
aguadestilada.Mzclense50mldecidoacticoglacialcon350mldeaguadestiladaen
un vaso de 600 ml. Agrguese la solucin de molibdato de sodio lentamente y agitando
continuamentealasolucindecidoactico.Gurdeseenunfrascodecolormbar.
Estereactivonodebecontenermsdeunsedimentomuyligero.Sielmolibdatotieneuna
tendenciadefinidaaprecipitarse,deberdesecharse.

ReactivoB. Solucinde OxalatoEstaoso.Este reactivodebeprepararseenelmismoda


de su utilizacin. Marque con lpiz una lnea a una distancia de 3 a 5 mm del extremo
ancho de un palillo de dientes. Todo el oxalato Estaoso que pueda tomarse con esa
porcindelpalilloseagregaa10mldesolucindeMorgan.Mzclesebiendemaneraque
todalasalsedisuelvaperfectamenteantesdeemplearelreactivo.

85

ReactivoparaPotasio
Reactivo A. Disuelva 5 g de Nitrato de Cobalto (CoCNO
3
)
2
CH
2
O) en 47.5 ml de agua
destilada y 2.5 ml de cido actico glacial. Gurdese en un frasco de color mbar.
Disulvanse 30 gr de Nitrito de Sodio (NaNO
2
) en agua destilada y dilyase a 59 ml
tambin con agua destilada. Gurdese en otro frasco obscuro. Mzclense estas dos
solucionesenpartesIgualesporlomenos24horasantesdeusarse.Cbraseelrecipiente
delamezclademaneraquelosgasesvenenososdexidontricopuedanescapardurante
la noche. Fltrese si es necesario y gurdese en un frasco de color mbar y con tapn de
vidrio esmeralizado. Esta Solucin final de cobaltinitrito de sodio puede descomponerse
enunascuantassemanassinoseguardanenunrefrigerador.

Reactivo B. Mzclense 90 ml de alcohol isopropilico con 10 ml de formaldehdo neutro.


Consrveseestereactivoenunfrascodetapaderoscaqueajustebien.

ReactivoparaCalcio
Mezcle10gdeOxalatodeSodiocon100mldeaguadestilada.Djesereposar24horasy
decantelasolucinclaraquesobrenadaamedidaquevayanecesitando.

ReactivoparaMagnesio
ReactivoA.Disuelva0.02deTiazolamarilloen100mldeaguadestilada.Gurdeseenun
frascocolormbar.

ReactivoB.Disuelva15gdeNaOHen100mLdeaguadestilada.

86

PRACTICANo.40
TITULO:SNTOMASDEDEFICIENCIAYTOXICIDADMINERAL

INTRODUCCION
EncuantoalosFertilizantes,stosdebenestarenproporcionesequilibradas.Elexcesode
uno puede producir la carencia o la toxicidad de otro. Un ejemplo sera la interaccin
nitrgenopotasio que, muy frecuentemente, deben estar en proporciones iguales. Otra
interaccin es la del potasiocalciomagnesio en la que el exceso de uno produce la
carenciadelosotrosdos;enmuchoscasos,deberanestarenproporciones4K:2Ca:1Mg.
El exceso de fsforo puede impedir la absorcin de zinc, hierro y cobre. Es decir, una
carencia puede ser causada por la inexistencia del elemento en el substrato o por el
excesodeotroelemento,apesarqueexistierancantidadessuficientesdelprimero.
PRIMERA PARTE: Presentacin de diapositivas correspondientes a deficiencias y
toxicidadesdenutrimentosmineralesendiferentescultivos.

OBJETIVO
Observacin de la sintomatologa de deficiencias y toxicidades de elementos minerales
encultivosdeyucaypastostropicales.

PROCEDIMIENTO
a) Presentacin de diapositivas sobre: Sntomas de deficiencia de macronutrientes y
nutrimentossecundariosenpastostropicales
b)presentacindediapositivassobre:Sntomasdedeficienciasdemicronutrientesyde
toxicidadmineralenpastostropicales
a)Presentacindediapositivassobre:"DesrdenesnutricionaldePlantadeyuca
b)Presentacin de diapositivas alusivas a sntomas deficiencias de macronutrimentos y
micronutrimentos en ctricos, caf, cacao, ajonjol, man, papa, palma africana, coliflor,
remolacha,repolloyalgunasplantasornamentales.

GUIADEDISCUSIONSOBRELASDIAPOSITIVASPRESENTADOS
1.Clasifiqueloselementosmineralessegnsumovilidadporelfloema
2.Culesdelosmacronutrimentosymicronutrimentoscausanclorosis
uniformeogeneralyculesclorosisintervienen?
3.Cmosediferencialadeficienciadenitrgenodeladeazufre?
Ladenitrgenodeladefsforo?
4.Describalossntomascausadosporlasdeficienciasdecalcioymagnesio
5.CmosediferencialadeficienciadeMndeladeFe?

BIBLIOGRAFIA
Bould,C.1968.Leafanalysisasadiagnosticmethodandadvisoryaldincrop
Nutrition.Exp.Agriculture.4:1727.

Cook,R.L.yC.E.Millar.1949.PlantNutritiondeficiencies.Agr.Exp.Sta.Specialbull355.
87

PRACTICANo.41
TITULO: EFECTO DE SOLUCIONES NO BALANCEADAS SOBRE EL
CRECIMIENTODEPLNTULAS

OBJETIVO
l. Observar el efecto de soluciones nutritivas no balanceadas en el crecimiento de
plntulas.
2.Comprobarelefectodelatoxicidaddesalesdemetalespesadosobre
Algunasplntulas.

PROCEDIMIENTO
Preparacindesolucionesnutritivas:
l. a) Prepare un litro de una solucin nutritiva completa. Pero en vez de 5 ml de a
disolucinmadredenitratodepotasio,agregue15ml.

b) Prepare un litro de solucin que contenga solamente 5 ml de la disolucin madre de


nitratodepotasio.
2.a)Prepareunlitrodelasolucinnutritivacompletayagregue1mldeunadisolucinde
su1fatodecobreal0.01M.

b) Prepare una solucin que consista de 1 ml de la disolucin de sulfato de cobre al


0.01M,agregadoaunlitrodeaguadestilada.

Vace las soluciones en diferentes frascos, coloque las plntulas en las ranuras de de los
tapones.

Fjelaseinserteestosenlosfrascos
Cuando en algunos tratamientos las plantitas hayan alcanzado una altura de 20 a 25 cm
comparesuaparienciaentodoslostratamientosyanote.Cosechelasp1ntu1asysepare
elvstagodelasraces.Midaellargodeltallojuntoconlashojasylarazmslarga.Seque
las racescon papelabsorbenteypselaslomismoqueel vstago.Trabajerpidamente.
Calculeelpromediodelasmedidasdelastresp1ntu1asdecadafrasco.Enformasimilar
aladelexperimentoanterior,sequelasplntulasyanoteelpesoseco.

BIBLIOGRAFIA
MULLER,L.E.Manualdelaboratoriodefisiologiavegetal.Turialba.Costarica.IICA.1964.
165p.

PEQUEO PEREZ, J. Prcticas de Fisiologa Vegetal. La habana. Cuba. Editorial pueblo y


educacin.1972.133p.

ROJASGARCIDUEAS,M. Experimentos de Laboratorio para el curso de Fisiologia


Vegetal.Monterey,Mexico.InstitutoTecnologicoydeestudiossuperiores.S.f.51p.

88

PRACTICANo.42
TITULO:CULTIVOSHIDROPNICOS

INTRODUCCION
Desde el punto de vista hortcola, la finalidad de cualquier medio de cultivo es conseguir
una planta de calidad en el ms corto perodo de tiempo, con costes de produccin
mnimos. En este sentido los cultivos sin suelo, tambin denominados cultivos
hidropnicos, surgen como una alternativa a la Agricultura tradicional, cuyo principal
objetivoeseliminarodisminuirlosfactoreslimitantesdelcrecimientovegetalasociadosa
las caractersticas del suelo, sustituyndolo por otros soportes de cultivo y aplicando
tcnicasdefertilizacinalternativas.

OBJETIVO
Cultivarhortalizasenunasolucinnutricincompleta.

MATERIAL
Sustrato:arena,carbonilla,gravadero,etc.
4materasgrandesocanaletas
Solucionesnutritivas

PROCEDIMIENTO
Laveelsustratoconagualimpiavariasveceshastaqueelaguasalgaclara.Agrgueleuna
solucin de hipoclorito de sodio al 0.5% y djela por 2 horas o ms. Lave de nuevo el
sustrato hasta que desaparezca el olor a hipoclorito Llene las materas o canaletas con el
sustrato; siembre las semillas previamente seleccionadas o transplante si hizo un
semillero.
Rieguediariamenteconlasolucinnutritivacompletaquesepreparasegnseindicaenel
Cuadrosiguiente:

a)Solucindeelementosmayores

Componentes gramos/litro
_____________________________________________________________
Nitratodecalcio 0.70
Nitratodepotasio 0.65
Superfosfatotriple 0.20
Sulfatodemagnsio 0.50
______________________________________________________________

b)Solucindeelementosmenores
______________________________________________________________
Salgramos/litro
______________________________________________________________
SulfatoferrosoFeS04.7H
2
O 0.00273
89

SulfatodemagnesioMnSO
4
.2H
2
O 0.00564
AcidobricoH
3
Bo
3
0.00420
SulfatodecobreCuSO
4
0.00030
______________________________________________________________
Cuadro15.Preparacindelasolucinnutritivacompleta

BIBLIOGRAFIA
WITHAM, F.H. et al. experiments in plan physiology. New York, Van Nostrand Reinhold
Company.1971.245p.

90

PRACTICANo.43
TITULO:NUTRICIONMINERAL

INTRODUCCION
Las investigaciones sobre nutricin mineral han hecho muchos progresos al fabricarse
compuestosqumicosconunaltogradodepureza,almismotiempodeponerenprctica
mtodos de cultivos hidropnicos, con soluciones de composicin qumica definida, que
aseguren el crecimiento normal de las plantas y que permiten un control preciso del
suministrodeionesnutritivosalasraces.ProbablementeWoodwarden1699,realizlos
primeros experimentos en cultivo de plantas en medio lquido, sin usar ningn sustrato
slido.En1804,deSaussurerealizunodelosprimerosintentosde analizarlosfactores
implicados en el cultivo de plantas en medios nutritivos, estableciendo la necesidad de
suministrar nitrato a la solucin de cultivo. Determinacin de materia seca y cenizas en
tejidosvegetales.

OBJETIVO
Determinarcuantitativamentelamateriasecaylascenizasenmaterialvegetal.

MATERIALES
Bolsasdepapel
Hornoconcirculacindeaire
Balanzaanaltica
Crisolde30mls
Materialvegetal(semillas,tubrculos,hojas,etc.)
Mortero
Mufla
Acidontricoconcentrado

PROCEDIMIENTO
a)Materiaseca
Coloque100gramosdematerialvegetalfrescoquepuedeser:semillas,tubrculos,tallos
yhojasenunabolsadepapelpreviamentepesadoyllvelosaunhornocontemperatura
90100Cpor24horasohastaqueenelmaterialnohayacambioenelpeso.

NOTA:Laspesadasrespectivassepuedenhacerconelmaterialfroparalocualluegodesacarlo
delhornosedebecolocarenundesecadorparaqueenfresincaptarhumedaddelaire.

Determineelporcientodemateriasecayeldeagua.
b)Cenizas
Luego de determinar materia seca, macere la muestra en un mortero hasta que quede
finamente molida. De esta muestra tome la cantidad suficiente para llenar el crisol de
porcelana, previamente pesado, hasta las 2/3 partes. Vuelva a pesar el crisol con el
contenido. Lleve el crisol a una mufla con temperatura entre 400 y 500C Y deje el
materialhastaquelacenizaestlibredecualquiercolornegroogris.Sipersisteelcolor
91

gris, enfre, humedezca cuidadosamente la ceniza con 1 2 mls de cido ntrico


concentrado y contine calentando. Luego de la obtencin de las cenizas, enfre (use un
desecador)yvuelvaamedirelpesodelcrisolysucontenido.
Determineelporcientodecenizas.

BIBLIOGRAFIA
Weaver, R.J. 1980. Reguladores del Crecimiento de las Plantas en la Agricultura. Trillas,
Mxico.
Wallace,T.1961.Thediagnosisofmineraldeficienciesinplantbyvisualsymptoms,acolor
atlas.HerMajesty'sStationaryOffice,London.

92

PRACTICANo.44
TITULO:FOTOMORFOGNESISLALUZENELDESARROLLODELAS
PLNTULASYLALIGNIFICACIONDELOSTALLOS.

INTRODUCCIN.
Alcontroldeldesarrollopormediodelaluzseledenominafotomorfognesis.Losefectos
de la luz sobre el desarrollo de las plantas abarcan diversos aspectos, desde la
germinacindelassemillas,elcrecimientodelasplntulas,hastalafloracinyformacin
de rganos de reproduccin y la preparacin de la planta para entrar en el reposo.
Particularmente en el crecimiento de las plntulas la influencia de la luz se ve en la
produccindeclorofila,laexpansindelashojas(enmenormedidaenmonocotiledneas
que en dicotiledneas), el tamao del tallo y las partes que crecen en el mismo, la
presencia de un gancho en el pice de las dicotiledneas (Salisbury y Ross, 1994) y la
cantidad de depsitos de Iignina en las clulas de la corteza del tallo (Maynard yBassuk,
1996).
Esteltimoaspecto,laIignificacindelasclulasenpresenciadelaluz,hasidoestudiado
en relacin a la capacidad de enraizamiento de las estacas de diversas especies. Por
ejemplo, Maynard y Bassuk (1996) mencionan que la Iignificacin acentuada y el fuerte
desarrollo de las fibras y esclereidas de la vaina perivascular de las dicotiledneas est
correlacionadaconunacapacidaddeenraizamientopobre,ocurriendoalgosemejanteen
especies forestales, en donde las especies de enraizamiento pobre presentan una fuerte
lignificacin de las fibras del floema, ms desarrollo de esclereidas un cambio menos
activo y menos clulas de los radios en crecimiento activo, lo que produce un anillo
continodeesclernquima.Sinembargosehavistoqueesteaspectopuedeser

manejadoatravsdelaetiolacin,yaqueeldesarrollodelasplantasenausenciadeluz
provoca un retraso en la formacin de las esclereidas y la disminucin de la vaina
perivascular, lo que ha coincidido con un aumento de la capacidad de enraizamiento del
material tomado de las plantas, notndose que junto a la reduccin de estas
caractersticas hay un aumento de la capacidad meristemtica de los radios,
concluyndose de manera general que, aunque no se ha establecido la causa de este
fenmeno,alparecerhayunarelacinentrelapresenciadetejidoesclerenquimatosoyla
reduccindelacapacidaddeformarraces'(MaynardyBassuk,1996).

OBJETIVOS.
1) Evaluar los cambios morfolgicos y de crecimiento de plntulas crecidas en la luz y la
obscuridad.
2) Observar las diferencias de Iignificacin de las clulas del tallo entre plantas
desarrolladasenlaluzyenlaobscuridad.

MATERIAL
Semillasdechicharo,frjolymazotrigo.
2Frascosdevidriode11.5Its.
93

Papelaluminioocartnnegro.
Navajasderasurar.
Portaobjetosycubreobjetos
Microscopioptico
Algodn

PROCEDIMIENTO
Coloqueenelfondodelosfrascosdevidriounacapadealgodn,humedzcalayescurra
elexcesodeagua.Siembrelassemillas(23dcadaespecie)ytapeunolosfrascoscon
lacartulinanegrademodoquenopenetrelaluz.Mantengalosfrascosenunsitiofresco,
donderecibanlaluzdurante1012dasalcabodeloscualesabralosfrascosytomelos
siguientesdatos:
Alturadelaplanta
Sitiosdeltalloquecrecieron(epicotlioohipocotilo)
Lugarendondeseencuentranloscotiledones(ensucaso)Anchodelashojas
Formaenlaqueseencuentraelpice.
Anchodelashojas(enlasplantasdondesepuedamediresto)Colordelaplanta.
Hagauncuadroquecomparelascaractersticasentrelasplantasdeluzysombra.
Una vez: tomados los datos anteriores haga cortes transversales del tallo de frjol de las
plantas de luz y sombra y observe en el microscopio ptico. Dibuje las diferencias
anatmicas entre ambos tipos de tallo. Discuta estas en funcin de la capacidad de
enraizamientodelostalloscmolostratamientosdeetiolacinseusancomomtodode
facilitarelenraizamientodealgunasespecies.

BIBLIOGRAFA.
Maynard, B.K. N.L. Bassuk. 1996. Effects of stock plant etiolation, shading, bandingand
shootdevelopmentonhistologyandcuttingpropagationofCarpinusbetulusL.fastigiata.
J.Amer.SocHort.Sci.12(5):853860.

Salisbury.F.B.yC.W.Ross.1994.FisiologaVegetal.Gpo.Edit.Iberoamrica,Mxico.D.F.

94

PRACTICANo.45
TITULO:EFECTODELALUZSOBREELDESARROLLODELAPLNTULA.

INTRODUCCION
Lacaptacindeenergalumnicalarealizaelcloroplasto atravsdebloquesdesistemas
depigmentos(clorofila,carotenosyxantofilas)denominados"antenas"queasociadoscon
protenas configuran los complejos cosechadores de luz (CCL). Las reacciones que
explicaremos a continuacin se desarrollan en sendos centros: en el fotosistema I y II,
cuyoscomponentesfotoactivossonlaclorofilaa,denominadosrespectivamenteP700y
P680.LaletraPsignificapigmentoylosnmerosserefierenalaslongitudesdeondade
laluzabsorbida

OBJETIVO
Comprobarquelaluzincidenotablementeenlamorfognesisdelasplntulas.

MATERIAL
Plntulasdemazydefrjolgerminadasen:
a)Luznormal,b)luzdeficiente,c)oscuridad.
Regla

PROCEDIMIENTO
Examineplntulasdemazyfrjolquehansidogerminadasenluznormalluzdeficientey
oscuridad.Observesucoloracinyhagamedicionesdeltallo,hojas,etc.SegnelCuadro
Siguienteparacadaespecie.

Plntula
Maz Luznormal Luzdeficiente Oscuridad
grosordeltallo
largopromediodehojascm.
anchopromediodehojas,cm.
largodelmesocotilo,cm.
Colordehojas
consistenciageneral
Frjol
grosordeltallo,Mm.
largopromediodehojas,cm.
anchopromediodehojas,c.
Cuadro16.Efectosdelaluzsobreeldesarrollodelaplntula

Hagaunadiscusindecmoafectalaluzlamorfognesisdelaplanta.

95

BIBLIOGRAFIA
ALVIM,PaulodeT.cursoInternacionaldeBasesFilolgicasdelaProduccinAgrcola.Vol.
11. Practicas de Laboratorio. Lima, Per. IICA. Zona andina. 1959. (sin paginacin
consecutiva).

96

PRACTICANo.46
TITULO:ALGUNASPROPIEDADESDELASCLOROFILAS.

INTRODUCCION
Utilizando tcnicas cromatogrficas se han identificado un grupo de sustancias en las
plantas verdes llamadas clorofilas, siendo las representantes la a y b. La clorofila a
esta integrada por un ncleo de Mg, 4N, C y H. Para que se pueda formar la clorofila es
indispensablelapresenciadelFe.Lasformulasdelaclorofilason:
Clorofilaa:C
55
H
72
O
5
N
4
Mg
Clorofilab:C
55
H
70
O
6
N
4
Mg

OBJETIVOS:
Observaryanalizarlafluorescenciaylafotodescomposicindelasclorofilas.

MATERIAL
Extractodeclorofila
Fuenteluminosa:proyector
Vasodeladosplanos
Beakerde250ml.

PROCEDIMENTO
A.Fluorescencia
EnunfrascoconladosplanosviertapartedelextractodeclorofilaIlumnelopormediode
un haz paralelo (por ejemplo el que emite un proyector). Observe fluorescencia de las
clorofilas.

B.Fotodescomposicin
Compareelcolordelextractodeclorofilasconeldelextractoquehasidodejadoporms
de 12 horas a la luz. Mida en cada uno la absorbancia a 660 nm calibrando el
fotocolormetroconacetonaal80%.
Cuadro17.Algunaspropiedadesdelasclorofilas

BIBLIOGRAFIA
Michell,J.W.,etal.TestMethodswithplant_regulatingchemicals.Agriculturehandbook
No.126.utitedstatesdepartmentoagiculture.Washitong,D.C.1958.68p.

Color Absorbanciaa660nm
Extractofresco
Extractodemsde12hrs.
97

PRACTICANo.47
TITULO: PIGMENTOS NO FOTOSINTETICOS: CAMBIOS DE COLOR DE LOS
PIGMENTOSFLAVONOIDES

INTRODUCCION
Las antocianinas (griego anhtos, flor y ciano, azul oscuro) son pigmentos coloreados que
por lo comn se encuentran en flores rojas, azules y prpuras. Tambin se presentan en
muchasotraspartesdelaplanta,comoenciertosfrutos,tallos,hojaseinclusoraces.Con
frecuencia,losflavonoidesseencuentranconfinadosaclulasepidrmicas.Lamayorade
los frutos y muchas flores deben sus colores a las antocianinas, aunque algunos, como
varias flores amarillas y los frutos del tomate, son coloreados por carotenoides. Los
coloresbrillantesdelasenotoosedebenengranpartealaacumulacindeantocianinas
endasfrosybrillantes

OBJETIVO
En este experimento se comprobara que las diferencias de coloracin no se deben
exclusivamente a la presencia de uno u otro pigmento flavonoide, o a un cierto tipo de
mezcladeestos,sinotambinalareaccindeljugocelular.Unosolodeestospigmentos
es capaz de desarrollar diferentes coloraciones segn el pH celular, correspondiendo los
coloresrojo,violetayazulareaccincida,neutraybsica,respectivamente.

MATERIAL
Razderemolacha
Floresrojas,azules,blancasyamarilla
Dosbeakersde250ml
Doscampanasdevidrio
Hidrxidodeamonioconcentrado
Acidoclorhdricoconcentrado
Acidoactico0.2N
Hidrxidodesodio0.1N
PapelindicadordepH.

PROCEDIMIENTO
A.EfectodelpHenelcolordelabetacianina(pigmentodelaremolacha).

Prepareunextractodelpigmentodelaremolachaenlasiguienteforma:hiervaporunos
minutosde20a30gramosdeunraspadoderazderemolachaconunos100mldeagua
destilada.Enfrielextractounpocoyfiltre.

Del extracto filtrado tome 5 ml en un tubo de ensayo. Por medio de un papel indicador
determinesupH.Despusagreguegotaporgota,unadisolucindecidoacticoal0.2N.
Tanprontocomosenoteuncambioenelcolor(comparecontinuamenteconelextracto
original)noagreguemscido.

98

EfecteluegounanuevadeterminacindelpH.Agregueotrasgotasdelcidoparaversi
ocurrenotroscambiosdelcolor.
Tratamiento Color pH
Extractooriginal
Conlaadicindelcidoactico
Conlaadicindehidrxidodesodio
En otro tubo de ensayo repita el procedimiento, aadiendo en lugar de cido una
disolucin de hidrxido de sodio al 0.1 N. En este caso deben ocurrir varios cambios
sucesivoshastaqueladisolucinadquierafinalmenteuncoloramarillo.

Expliquelacausadelosresultados
Tratamiento Color pH
Extractooriginal
Conlaadicindelcidoactico
Conlaadicindehidrxidodesodio
Cuadro18.Pigmentosnofotosintticos:cambosdecolordelospigmentosflavonoides

B.Cambiosdecolorenlasfloresbajoatmsferascidasobsicas.
Endosbeakersconaguacoloquefloresrojas,azules,blancasyamarillas.Coloquejuntoa
cadabeakersunplatodepetri.Enunplatoviertahidrxidodeamonioconcentradoytape
todo el conjunto con una campana para crear una atmsfera de vapores de amonaco
alrededordelasflores.

Repita el procedimiento con el otro conjunto pero vierta un poco de cido clorhdrico
concentradoenelplatodepetri.

Cambiosdecolorobservadosenlasflores
Tratamiento
Rojas Azules Blancas Amarillas
Conanhdridodeamonio
Concidoclorhdrico
Cuadro19.Observeloscambiosdecolordelasfloresencadacaso.

Hagaunanlisisdelarazndelosresultados.

BIBLIOGRAFIA
Bldwell, R.G.S. 1979. Plant Physiology. 2a.de. Mac Millan, New York. Devlin, R.M. 1975.
FisiologaVegetal.Ed.Omega.Barcelona,Espaa.Hall,D.O.yK.K.Rao.1978.Fotosntesis.
De.Omega.Barcelona,Espaa.

Salisbury,F.B.yC.Ross.PlantPhyslology.2nd.De.WadsworthPublishingCo.
Inc.Cal.U.S.A.

99

PRACTICANo.48
TITULO: EFECTO DE LA INTENSIDAD DE LA LUZ Y DE LA CONCENTRACIN
DELCO
2
ENLAFOTOSNTESIS.

OBJETIVO
TeniendoencuentalaleydelosFactoresLimitantescientficamentecomprobadaparala
fotosntesis,setratadedemostrarquesiseaumentalaintensidaddelaluz,laplantano
puede aprovechar para la fotosntesis esa mayor energa disponible a menos que la
concentracin del CO
2
aumente al mismo tiempo proporcionalmente, siempre que los
demsfactoresnosean1imitantes.
Estacorre1acinfcilmentesepresentaenelcampodeahlaimportanciadeconocerlos
puntosdecompensacindeluzydeCO
2
.

PROCEDIMIENTO
Siguiendolabibliografaconsultadaparalosejerciciosinmediatamenteanterioressepide
disear un experimento que permita interpretar el aumento de intensidad de la luz y el
contenidodeCO2enrelacinalaintensidaddefotosntesisdeunaplantacualquiera.

BIBLIOGRAFIA
Arditti, J. y A. Dunn. 1969. Experimental Plant Physlology. Holt, Rinehart y Winston, New
York.

Richter,G.1972.FisiologadelMetabolismodelasPlantas.TraduccindeL.
Miller,IICAdelaOEA.CECSA,Mxico,D.F.
100

PRACTICANo.49
TITULO: PIGMENTOS FOTOSINTETICOS SEPARACIN, ESPECTRO DE
ABSORCIONYFLUORESCENCIA

INTRODUCCIN.
Lasplantascontienenvariospigmentosqueabsorbenlaenergadelaluz.
Entre stos los que se encuentren en mayor proporcin son la clorofila a de color verde
azulado y la clorofila b de color verde amarillento, en ambas es diferente la estructura
qumicalaadsorcinylasolubilidad.
Los carotenoides son pigmentos de color amarillo y anaranjado Si contienen oxigeno en
su molcula reciben el nombre de xantofilas; mientras que los carotenos solo estn
constituidos por carbono e hidrgeno. Sin embargo, no son estos todos los tipos de
pigmentosfotosintticos,enelcuadroacontinuacinseproporcionaunalistadeellos:

PIGMENTO ORGANISMOSENLOSQUESEPRESENTA LUZADSORBIDA


Clorofilaa Todaslasplantasverdes Rojoyazulvioleta
Clorofilab Plantasverdes Rojoyazulvioleta
Clorofilac Algascafs,diatomeas Rojoyazulvioleta
Clorofilad Algasrojas Rojoyazulvioleta
Protoclorofila Plantasetioladas Rojocercanoazulvioleta
Bacterioclorofila Bacteriaprpura Rojocercanoazulvioleta
Bacterioviridina Bacteriaverdessulfurosas Naranjarojo
Ficocianina Algasazulverdes Verde
ficoeritrina Algasrojas Azuly
Carotenosy
xanthofilas
lamayoradelasplantas,bacteria
AzulyAzulverde
Cuadro20.Pigmentosfotosintticos.(Biwell,1993)

Laextraccindelospigmentosdehojasresultamejorcuandoselestrituraendisolventes
orgnicos, tales como acetona alcohol y otros similares (Richter, 1972). La separacin se
haceatravsdelecromatografa.
En la cromatografa de papel la mezcla a separar se aplica 10 gotas en el mismo sitio,
esperando a que seque en cada aplicacin y se desarrolla el cromatograma. La distancia
viajadaporuncompuestoparticularbajocondicionesconstantesdetemperatura,sistema
de solventes, direccin del flujo y otros es caracterstico y puede ser utilizado para
identificarlo. La relacin entre la distancia viajada por un compuesto y la del solvente se
conocecomovalorRf(ArdittiyDunn,1969).ElRfsecalculacomosigue:

Rf=distancia(desdeelorigen)Queviajelcompuesto/distancia(desdeelorigen)queviajelsolvente

101

Cuadro21.ValoresRfparacromatografaenpapel,consolventes(a)100partesdeterdepetrleocon20
partesdeacetonapuray(b)100partesdeterdepetrleocon12partesdeacetonapura(modificacinde
clegg.1973).

Para obtener un espectro de absorcin, primero se extrae el pigmento y despus se


determinaqulongitudesdeondadelaluzabsorbedichopigmento.
Lasclorofilaspresentandosmximosdeabsorcin,unoenlaparterojayotroenlaparte
azul. Mientras que los carotenoides (carotenos y xantofilas) solamente absorben en la
parte verdeazul y violeta del espectro visible. Cuando los pigmentos fotosintticos en la
clula absorben luz los electrones acceden a niveles superiores de energa en donde son
capturadosporunaseriedecompuestosreceptoresdeelectrones,porlocualseconserva
la energa luminosa, convirtindola en energa qumica. Sin embargo cuando los
pigmentosestnaislados(oaundentrodelahojacompleta,sana)avecesloselectrones
regresan a su estado basal y emiten la energa absorbida en forma de luz, fenmeno al
queselellamafluorescencia(Bldwell.1979).

OBJETIVO.
1. Extraccin de los pigmentos fotosintticos ms importantes por medio de solventes
orgnicosylaseparacineidentificacindelosmismosconayudadelacromatografaen
papel.
2.Determinarelespectrodeabsorcindelospigmentosfotosintticosextrados.
3.Demostrarelfenmenodefluorescenciaenlaclorofila.

MATERIAL
A)CromatografaBaoMariaBa)espectrodeAbsorcin
1Micropipeta1embudo1vasodeprecipitado
1Vasodeprecipitadode100mlTachueladel00ml
1Morteroypistilopapelfiltrol0mldeacetona
2Tubosdeensayegrande5gdematerialvegetall0mldeterdepetrleo
2Taponesdehule5g30mldeacetonabencinadepetrleo
1Gradilla

PROCEDIMIENTO
PIGMENTOS COLOR VALORESSOLVENTEA RFSOLVENTEB
Caroteno Amarillo 0.98 0.90
Feofitina Gris 0.44 0.28
Xantofilas Amarillo 0.350.10 0.22
Clorofilaa Verdeazul 0.28 0.11
Clorofilab Verdeamarillo 0.17 0.10
102

Tomar 8 ml de solvente (pueden usarse 100 partes de ter de petrleo y 1 parte de


benceno (Rovalo y Rojas, 1977) observe que para el primer caso se tienen los valores Rf,
paracomparar,paraelsegundo,No).
1TiradepapelfiltroWhatmanNo.1,de2x20cm
LmparadeluzUV

1.Obtencindelextracto.Muelalashojasenelmorterohastaextraerlospigmentosdela
hoja. Filtre el extracto y recbalo en el vaso de precipitado. Concentre el extracto en el
baoMariaafuegolento,procurandoquenohierva

2. Obtencin del cromatograma. Monte el dispositivo de la Figura 19. Con ayuda de la


micropipeta, coloque 2 3 gotas del extracto en la lnea Inicial (marcada con lpiz). De
preferencia corra el cromatograma en la obscuridad. Espere 20 30 minutos y marque
con un lpiz las distancias corridas por el solvente y por los pigmentos. Obtenga los
valoresRfparacadauno.

Figura14.Espectrodeabsorcin

B) EspectrodeAbsorcin
De las tiras de cromatografa en papel obtenidas anteriormente, recorte las partes que
contienencadaunodelospigmentosysecolocanporseparadoenunvasodeprecipitado
quecontenga10mldesolventeadecuadoparacadapigmento.

Pigmento
ClorofilaaClorofilabCaroteno
103

Solvente
Acetona
Acetona
BencinadePetrleoterdepetrleoterde

Mezclarperfectamentehastadisolverlospigmentos,retireelpapelycoloqueelextracto
coneltubodelespectrofotmetroparadeterminarelespectrodeabsorcin.

Determinacindelespectrodeabsorcin.
Siguiendo las Instrucciones de manejo del espectrofotmetro realizar lecturas de
absorbanciade340a700nmenIntervalosde20nm.GrafiqueIalongituddeondavs.La
absorbanciaparacadapigmento.

C)FluorescenciadelosPigmentosFotosintticos
Con el resto del extracto de la parte B observe primero su color con la luz solar y luego
obsrveloconunalmparadeluzultravioleta(tengacuidadoenevitarqueestaluzllegue
asusojos,yaquepuedequemarlos).

BIBLIOGRAFA.
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PRACTICANo.50
TITULO:IDENTIFICACINDEPLANTASC3YC4

INTRODUCCIN
Los aspectos morfolgicos de las plantas estn estrechamente relacionados con los
aspectos fisiolgicos y estos a su vez dependen del medio ambiente en donde se
desarrollalamisma.EstasmodificacionessehandivididoenlostiposfotosintticosC3,C4
y MAC xerfitas. Estos tipos de plantas han agregado el ciclo bsico de fijacin de CO2.
UnaformadediferenciarlasplantasC3YC4esatravsdesuanatoma,yaquelasplantas
C3presentantpicamenteclulasdeparnquimaenempalizadamientrasquelasplantas
C4tienenclulasdelhazdelavainayclulasdelmesfilo.

OBJETIVO
IdentificarplantasC3yC4atravsde:Cortesanatmicosfijos

MATERIAL
PreparacionesfijasdeplantasC3YC4.
HojasfrescasdeplantasC3yC4(verdolaga,frjol,maz,).
UtensiliosparabaoMaria.
Vasoprecipitadode100ml.
Alcohol80%.
Lugol.
Microscopioestereoscopico

PROCEDIMIENTO
Se le proporcionar un juego de preparaciones fijas para observar al microscopio. Para
retirarlaclorofiladelashojasyteirconLugolprocedecomosigue:
a)sumerjalahojaenaguahirviendodurante1minuto
b) transfiera la hoja a alcohol 80% en un vaso de precipitado. Ponga todo a bao mara
hastaquetodoelcolordesaparezcadesta.
c) coloque la hoja en una caja de petri con agua para que adquiera una consistencia
flexible.
d)tireelaguayagregueunasgotasdeLugolsobrelahoja.Despusde5minutoslavela.
Observe a coloracin y su distribucin en la lmina foliar utilizando un microscopio
estereoscpico.

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