ESTRUCTURA EXTERNA DEL CROMOSOMA EUCARIOTICO

Dr. Misael Guevara P.

ESTRUCTURA EXTERNA
Forma, tama o ! "#mero $romos%mi$o. Forma.& O'serva(a e" )ro*ase ! meta*ase, se a)re$ia $o"stitui(o )or (os $romati(ios +e"rollamie"to )le$to",mi$o -. .Meta$,"tri$o .Su'meta$,"tri$o .Su'telo$,"tri$o o a$ro$,"tri$o .Telo$,"tri$o,$o"*irmaro" su e/iste"$ia Gime"e0&Mart1" et al. +2345-, Comi"6s ! O7a(a.

TAMA8O
Dura"te la meta*ase mit%ti$a, $lasi*i$9"(ose e" lar6os ! $ortos +S:a"so", 234;< =>ite, 23?@-. Cromosomas lar6os +2;A ! B; A -C Mo"o$otile(%"eas.

Trillium @; A, Lillium, Allium, Tra(es$>a"tia, Ort%)teros ! A"*i'ios.

Cromosomas $ortos @&5 AC Di$otile(%"eas, la ma!or1a (e los a"imales, el >om're. Mi$ro$romosomas, )rese"tes e" al6u"as aves ! re)tiles.

Di$ia *a'a

Eomo sa)ie"s sa)ie"s

NUMERO
La ma!or1a (e las es)e$ies se $ara$teri0a" )or te"er $,lulas (i)lo"tes +B"- ! (i)lo>a)lo"tes +"-. E" los a"imales el "#mero es varia(o, >a! or6a"ismos $omo Paras$aris u"ivale"s, "F2! Paras$aris eGuorum "F B, Gue tie"e" est, "#mero e" su l1"ea 6ermi"al, mie"tras Gue e" la som9ti$a )rese"ta" (i*ere"te "#mero B"F 4;. E" la >ormi6a australia"a M!rme$ia )ilosula, )rese"ta u" solo $romosoma e" los ma$>os +>a)loi(e- ! e" las >em'ras (os +(i)loi(e-. E" la ma!or1a (e Le)i(%)teros $omo L!sa"(ra atl9"ti$a, el "#mero >a)loi(e "F B2?&B@@.

EL CARIOTIPO
Com)leme"to $romos%mi$o +*orma, "#mero, tama o-. Or(e"amie"to (e los )ares (e >om%lo6os e" rela$i%" a su tama o ! *orma. La re)rese"ta$i%" 6r9*i$a sim)li*i$a(a (el $arioti)o $o"stitu!e el i(io6rama
I(io6rama $o" 'a"(as G

EERRAMIENTAS
. Dalores (e lo"6itu( relativa.& Rela$i%" e"tre la lo"6itu( (el $romosoma ! la lo"6itu( (el $om)leme"to >a)loi(e. .H"(i$e $e"trom,ri$o.& Lo"6itu( (el 'ra0o $orto ! la lo"6itu( total (el mismo. .Telo$,"tri$o.& i$ F ;. .Meta$,"tri$o.& i$ F ;.5 .I"(i$e (e 'ra0o.& Rela$i%" e"tre las lo"6itu(es (e los 'ra0os $orto ! lar6o (el $romosoma. .Telo$,"tri$o F ; .Meta$,"tri$o F 2

IANDEO CROMOSOMICO
Easta 234J las t,$"i$as $itol%6i$as )ermit1a" (ete$tar so're los $romosomas meta*9si$os, las $o"stri$$io"es )rimarias +$e"tr%mero- !, e" o$asio"es, la se$u"(aria. El )rimer )aso e" la (i*ere"$ia$i%" (e los $romosomas )or 'a"(eo tra"sversal (e los $romati(ios se (e'i% a la t,$"i$a (e *luores$e"$ia, utili0a"(o la mosta0a (e Gui"a$ri"a ! (eriva(os.

Carioti)o (e u" >om're "ormal 'a"(as KGL

MFGC Ia"(as M )or *luore$e"$ia, usa"(o Gui"a$ri"a. GTCC Ia"(as G, )or tratamie"to e"0im9ti$o $o" tri)si"ma utili0a"(o Giemsa. RFAC Ia"(as R )or *luore$e"$ia usa"(o "ara"Na (e a$ri(i"a. REGC Ia"(as R, me(ia"te (es"aturali0a$i%" t,rmi$a utili0a"(o Giemsa. TEGC Ia"(as T )or (es"aturali0a$i%" t,rmi$a em)lea"(o Giemsa. CIGCIa"(as C )or >i(r%/i(o (e 'ario, utili0a"(o Giemsa.

TECNICAS DE IANDEO

Ia"(as M,G,C,R,T ! Feul6e"

T,$"i$a (e Fis> (e Ae6ilo)s s)eltoi(es

Tra"slo$a$io"es $o" 'a"(as KCL

SIGNIFICADO DE LAS IANDAS

.Ia"(as C.& Eetero$romati"a $o"stitutiva +si" 6e"es-. .Ia"(as GO ! MO.& Ri$as e" A F T +B;P (e los 6e"es >uma"os-, si" 6e"es $o"stitu$io"ales +>ouse 7ee)i"6 6e"es-. .Ia"(as R.& 6e"es $o"stitu$io"ales +>ouse 7ee)i"6 6e"es-. .Las islas C)G, aso$ia(as $o" el 5;P (e 6e"es >uma"os, se )ue(e" usar $omo mar$a(ores $romos%mi$as usa"(o las 0o"as (e re$o"o$imie"to (e las e"(o"u$leasas (e restri$$i%" se"si'les a metila$i%" ! so" utili0a(as e" las t,$"i$as (e FISE +)i"ta(o (e $romosomas-.

Los iso$oros (e IERNARDI +se6me"tos lar6os (e ADN >omo6,"eos Gue )or su $om)osi$i%" )ue(e" su'(ivi(irse e" u" "#mero )eGue o (e *amilias $ara$teri0a(as )or su $o"te"i(o GG-. E" los verte'ra(os los iso$oros (e sa"6re $alie"te se )rese"ta" e"tre @;P a 4;P, se i(e"ti*i$aro" (os *amilias +L2! LB- (e 'aNo $o"te"i(o e" GC, re)rese"ta" u" 4BP (el 6e"omio ! tres ri$as e" GC +E2, EB ! E-+ BBP, 3P, @res)e$tivame"te (el 6e"oma. E" rela$i%" $o" las 'a"(as $romos%mi$as, se >a (emostra(o Gue los iso$oros )o'res e" GC est9" lo$ali0a(os e" las 'a"(as G, mie"tras Gue los ri$os e" GC est9" lo$ali0a(os e" las 'a"(as R ! e" las 'a"(as T.

AUTOMATIQACIRN DEL ANSLISIS GENTTICO

El $arioti)a(o autom9ti$o im)li$aC . . . . . Ca)tura (e la ima6e".& e" )i/eles +valor (e i"te"si(a(- se alma$e"a" e" el CPU +(atos )ara el a"9lisis-. Se6me"ta$i%".& Aislamie"to (e los valores (el $romosoma res)e$to a su e"tor"o. Me(i$i%".& Se reali0a a)li$a"(o *ormulas matem9ti$as al $o"Nu"to (e )i/eles. Clasi*i$a$i%".& Se >a$e a)li$a"(o u" tratamie"to esta(1sti$o. Mo(elo.& I"ter)reta$i%" (e la ima6e" (i6itali0a(a.

CITOGENETICA DE FLUUO
Permite se)arar ! )uri*i$ar $romosomas es)e$1*i$as e" )eGue as $a"ti(a(es +Gra!, 23J3-. El a"9lisis e" $romosomas >uma"os utili0a (os *luoro$romos Eoe$>st @@B5J $o" es)e$i*i(a( AT ! $romi$i"a $o" es)e$i*i$i(a( e" GC +Gra! et.al.23?3-. Los $romosomas $o" la (o'le ti"$i%" )ue(e" ser se)ara(os )or su $o"te"i(o (e ADN ! )or la )ro)or$i%" (e sus 'ases. Esto )ue(e servir )ara $o"struir 'i'liote$as (e ADN es)e$1*i$os (e u" $romosoma (etermi"a(o, o )ara la t,$"i$a (e FISE.

PINTADO CROMOSOMICO

ELECTROFORESIS
Carioti)a(o ele$tro*or,ti$o.& Utili0a"(o ele$tro*oresis e" 6el e" $am)o )ulsa(o +PFGE- +se)ara $romosomas $om)letos e" or6a"ismos u"i$elulares- ).e Sa$>arom!$es $erevisae. As1 $omo la ele$tro*oresis $o"ve"$io"al e" 6el (e a6arosa, )ermite se)arar >asta u" l1mite su)erior (e B; V', la PFGE, )ue(e al$a"0ar l1mites (e >asta 4 a 2B M' +me6a'ases-, i"$lu!e"(o )or ta"to, el tama o (e los $romosomas (e or6a"ismos u"i$elulares $omo al6u"os >o"6os ! )roto0oarios.

Secuencia de pasos para la Electroforesis

EIIRIDACIRN IN SITU
T,$"i$as (e >i'ri(a$i%" i" situ +ISE- (e 9$i(os "u$lei$os i"tro(u$i(as )or Ritosa ! S)ie6elma" +2345-, Gall ! Par(ue +W343-, sirve" )ara lo$ali0ar so're los $romosomas la i"*orma$i%" $orres)o"(ie"te e" ADN o ARN< utili0a(as $omo so"(as mar$a(oras ra(ioa$tivame"te. Posteriorme"te el mar$aNe ra(ioa$tivo (e la so"(a *ue sustitui(o )or u" mar$aNe "o ra(ioa$tivo $omo 'ioti"a ! la 'i6o/i6e"i"a, (a"(o lu6ar a la >i'ri(a$i%" i" situ $o" *luores$e"$ia +FISE-.

ESTRUCTURA INTERNA DEL CROMOSOMA EUCARIOTICO

DIFERENCIACIONES ESTRUCTURALES
Di*ere"$ia$i%" lateral.& E" $itolo61a $l9si$a el $romo"ema se (e*i"e $omo la *i'ra es)iral i0a(a Gue $o"stitu!e el $romosoma telo*9si$o o a"a*9si$o tar(1o (e la mitosis ! $o"si(era tres )ostula(osC 2. El $romo"ema se tra"s*orma e" el arma0%" o estru$tura reti$ular (el "u$leo. B. Ea! u"a i(e"ti(a( i"(ivi(ual e"tre las *i'ras $rom9ti$as (e la )ro*ase ! las (e la telo*ase a"terior. @. Se )ro(u$e u"a (ivisi%" lo"6itu(i"al (e la *i'ra (ura"te la )ro*ase +=ilso", 23B5-. Postula(os Gue >o! >a" si(o e"riGue$i(os.

Co" re*ere"$ia a la (i*ere"$ia$i%" lateral se )la"tea lo si6uie"teC . Teoria mo"o*i'rilar, su)o"e Gue el $romati(io es la ultima u"i(a( i"(ivisi'le (el $romosoma. .Teoria )oli*i'rilar.& Su)o"e Gue el $romati(io est9 $o"stitui(o )or (os su'$romati(ios ! estos a su ve0 )or me(ios su'$romati(ios +IaNer, 2345< Gime"e0& Marti" et al-, 234@. .La $itolo61a mole$ular, asi $omo la mi$ros$o)ia ele$tr%"i$a (emostraro" la teor1a mo"o*i'rilar +Calla", 234?< Comi"6 a"( O7a(a, 23?@< Du )ra:, 23?;, e"tre otros, Gue es la Gue se a$e)ta e" *orma u"iversal.

DIFERENCIACIRN LONGITUDINAL
Re*erei(o a estru$turas (istri'ui(as a lo lar6o (el $romosoma. .Tel%meros.& (e"omi"a(os as1 )or Muller +23@J-, se re*iere al e/tremo (e los $romosomas, Ksell9"(olosL. .Las i(eas i"i$iales (e Muller ! Eer7o:it0, a$er$a (e lo i"(is)e"sa'le (e ,stos )ara la esta'ili(a( $romos%mi$a *ue $orro'ora(a )or estu(ios reali0a(os )or Ro'erts +23?5e" (ele$$io"es (el $romosoma X (e Droso)>ila mela"o6aster.

ESTRUCTURA MOLECULAR DE LOS TELRMEROS

Los tel%meros so" $om)leNos (e ADN termi"al ! )rote1"as, "e$esarios )ara la esta'ili(a( $romos%mi$a. Evita" la u"i%" (e los e/tremos $romos%mi$os, as1 $omo Gue sea" ata$a(os )or e/o"u$leasas. Uo>"so" et al +23JX-, (e*i"i% al tel%mero $omo $a(a u"o (e los t,rmi"os (e u"a mol,$ula li"eal (e ADN $elular "e$esaria )ara la re)li$a$i%" $om)leta (e la mol,$ula, se6ui(a )or la resolu$i%" ! se6re6a$i%" a)ro)ia(a (e las mol,$ulas re)li$a"tes.

La se$ue"$ia telom,ri$a >uma"a 5YCCCTAA@Z, (e la >,li$e ri$a e" KCL )ue(e )ro(u$ir u"a estru$tura $ua(ru)le/a )or el a)areamie"to (e la $itosi"a )roto"a(a CCCO +A>me( et al< 233X-.
ORGANISMOS SECUENCIA REPETIDA +ETLICE RICA EN G-

Tetra>!me"a Parame$ium O/!tri$>a Plasmo(ium Tr!)a"osoma D!tiostelum Ara'i(o)sis Eomo

5YTTGGGG@Z 5YTT+T[G-GGG@Z 5YTTTTGGG[G@Z 5YTT+TC-AGGG@Z 5YTTAGGG@Z 5YTG2&J@Z 5YTTTAGGG@Z 5YTTAGGG@Z

REPLICACION DEL ADN TELOMTRICO

Dura"te este )ro$eso la >,li$e ri$a e" G es si"teti0a(a )or la telomerasa, ,sta es u"a es u"a ri'o"u$leo)rotei"a $u!o $om)o"e"te (e ARN $o"tie"e u"a se$ue"$ia $om)leme"taria a la (e la se$ue"$ia re)eti(a telom,ri$a, )u(ie"(o a$tuar $omo u"a termi"al tra"s*erasa [Ila$7'ur", 233B< Lee et al, 233@, Mori", 23J3-.

CROMRMEROS
Se (e*i"e" $omo )art1$ulas (is$retas (e $romati"a or(e"a(as li"ealme"te a lo lar6o (el $romosoma +=ilso", 23B5-. E" al6u"as es)e$ies se )rese"ta u" )atr%" $romom,ri$o )aGuit,"i$o $ara$ter1sti$o. A(Guiere" "om'res es)e$1*i$os \)or la u'i$a$i%"& $rom%meros $e"trom,ri$os, e" los $romosomas )olit,"i$os se (e"omi"a" 'a"(as ! $romiolos e" los )lumula(os.

CENTRRMERO
La $o"stri$$i%" )rimaria o $e"tr%mero, es la re6i%" Gue se aso$ia a las *i'ras (el >uso e" la mitosis ! meiosis. E" esta 0o"a el $i"eto$oro es la 0o"a es)e$1*i$a (el $e"tr%mero Gue se aso$ia $o" los mi$ot#'ulos, a)are$e e" el mi$ros$o)io $omo u"a $o"stri$$i%" a$rom9ti$a +>etero)i$"osis "e6ativa-.

TIPOS DE CENTRRMEROS
.Ce"tr%mero lo$ali0a(o .& Ci"eto$oro e" u"a sola )osi$i%". .Ce"tr%mero (i*uso.&Cua"(o las *i'ras (el >uso se )ue(e aso$iar a to(a e/te"si%" $romos%mi$a +e" )la"tas (el 6,"ero Lu0ula, ! al6u"as al6as ! >o"6os. .Cromosomas >olo$i",ti$os.& m#lti)les $e"tr%meros. .Cromosomas )oli$,"tri$os.& m#lti)les $e"tr%meros, u"o al la(o (el otro As$aris me6alo$e)>ala.

La6o:s7i ! $ol +23?@- e" O"$o)eltus *as$iatus, e"$o"traro" se$ue"$ias (e ADN re)etitivo (e se$ue"$ia $orta ! (istri'ui(as a lo lar6o (e los $romosomas $o" $e"tr%meros (i*usos. Los $romosomas )ue(e" serC .Mo"o$,"tri$os .Di$,"tri$os.& Co"se$ue"$ia (e u"a tra"slo$a$i%" re$1)ro$a. .Como $o"se$ue"$ia (e la rotura $romos%mi$a, mis(ivisi%"C .Telo$,"tri$os. .Iso$romosomas. .U"ivale"tes e" a"illo. .Neo$e"tr%mero.

CROMOSOMAS ARTIFICIALES.
Co"o$i(os ! aisla(os los *ra6me"tos (e ADN Gue $o"stitu!e" los $e"tr%meros ! los tel%meros, se >a" )o(i(o $o"struir los $romosomas arti*i$iales., Murra! ! S0osta7 +23J@, 23J5'-, usa"(o u" )lasmi(io, u" mar$a(or (e ADN $e"trom,ri$o ! Sa$$>arom!$es. La t,$"i$a >a )ermiti(o $o"struir 'i'liote$as (e ADN (e 6ra" tama o e" (iversos or6a"ismos.

ORGANIQADOR NUCLEOLAR
Al6u"os $romosomas, )rese"ta" a(em9s $o"stri$$i%" se$u"(aria $o"o$i(a $omo re6i%" or6a"i0a(ora "u$leolar +NOR-, M$ Cli"$to$7 23@X.

Co"tri'u!e a$tivame"te a la *orma$i%" (e "u$leolo, ! es >etero)i$"%ti$a "e6ativa. De u'i$a$i%" su'termi"al e" el 'ra0o $orres)o"(ie"te, lo Gue ori6i"a u" *ra6me"to $o"o$i(o $omo SAT.

E" el >om're los $romosomas 2@,2X,B5,B2 ! BB so" or6a"i0a(ores "u$leolares.

Los 6e"es $o(i*i$a" ADN ri'osomal +ADNr-, este varia (e u" or6a"ismo )ara otro. E" eu$ario"tes *orma" "i$>os KClustersL +Ritossa- ! S)ie6elma", 2345-. E"tre las $o)ias su$esivas se )rese"ta" 0o"as es)a$ia(oras Gue "o se re)li$a" ! Gue $o"stitu!e" eleme"tos re6ula(ores.

Meta*ase mit%ti$a (e u" var%" $o" 'a"(as KGL

GENES DE EISTONAS DE LA MOSCA DE LA FRUTA

COMPETENCIA NUCLEOLAR
El "u$leolo, *ue a"ali0a(o $o" m,to(os (e ti"$i%" ar6,"ti$a (i*ere"$ial e" a"imales+Goo(s)asture a"( Iloom, 23?5< ! e" )la"tas +E!0ume et al., 23J;-.

Nu$leolos e" Allium $e)a

Colora$i%" ar6,"ti$a

Se (e*i"e )or $om)ete"$ia "u$leolar al >e$>o Gue "o to(os los "u$leolos so" *u"$io"alme"te a$tivos, la e/)resi%" $itol%6i$a (ela $om)ete"$ia es la a"*i)lastia Gue *ue visuali0a(a $istol%6i$ame"te e" >1'ri(os i"teres)e$1*i$os.

ANFIPLASTIA
El )ro$e(imie"to $o"siste e"C Co"o$er $ua"tos NORs a$tivos est9" )rese"tes e" las $,lulas e i(e"ti*i$ar los $romosomas SAT +Colora$i%" ar6,"ti$a ! 'a"(eo C-. El a"9lisis se reali0a e" los alo)oli)loi(es o e" los >1'ri(os i"ter es)e$1*i$os. La t,$"i$a resulta #til )ara a"ali0ar la )ote"$iali(a( "u$leolar. +La$a(e"a et al, 23JJ< Giral(e0 et al, 23?3-.

Es)e$ie

Ge"omio A I D R ED E

Cromosoma SAT 2A, 5A 2I, 4I 5D, +?D2R 5ED , 4ED 5E, 4E

Triti$um mo"o$o$$um Ae6ilo)s s)eltoi(es Ae6ilo)s sGuarrosa Se$ale $ereale Eor(eum vul6are A6ro)!ro" elo"6atum

Ae6ilo)s um'ellulata

IU, 5U

Cromosomas SAT e" Triti$um )orta(ores (e NOR

Iie"ve"i(as las )re6u"tas