PROCESO

Congelar el agua libre de las clulas

Eliminacin del agua

Agua congelada Sublimacin

Vapor de agua

1 Fase de la Desecacin

2 Fase de la Desecacin

Tipos de Liofilizadores
Liofilizador con

centrifugacin
Se utilizan ampollas de vidrio

Liofilizador con estantes

La suspensin se prepara en

taponadas La suspensin se centrifuga durante la 1 fase de la desecacin Se estrechan las ampollas y, despus de conectarlas a una bomba de vaco, se sellan.
Ventajas: Se utiliza la centrifugacin para que el proceso de congelacin sea suave y de forma homognea

viales y es precongelada a T muy bajas antes de aplicar el vaco. La segunda etapa de la desecacin se realiza tambin en el liofilizador. Ventajas: La Desecacin es de manera progresiva y continuada

Cundo aplicar la Liofilizacin?

Es un mtodo ampliamente utilizado para conservar distintos Microorganismos. SI -Bacterias,Levaduras, Hongos,Algunos virus,Algas Ejemplos:Rhodospirillum, ,Azospirillum,vibrio y dems bacterias marinas. -Levaduras miceladas con dificultad en la esporulacin. -Hongos con grandes conidios o con dificultad en la esporulacin. NO -Dificultad de un crecimiento Adecuado. -Microorganismos delicados que no resisten el paso de congelacin. -A tamaos de clulas mayores, menos efectivo es el proceso Protozoos,Clulas animales, Clulas vegetales,Arqueobacterias y bacterias delicadas

FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIN POR EL PROCESO DE LIOFILIZACIN

Condiciones de Cultivo
El medio de cultivo Depender del tipo de microorganismo y sus requerimientos nutricionales. Fase de crecimiento del cultivo. F.exponencial. Suspenciones celulares de 108-109 Clulas/ml en bacterias, algo inferiores en hongos y levaduras.

Condiciones de incubacin. T,aerobiosis, anaerobiosis, etc.

FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIN POR EL PROCESO DE LIOFILIZACIN

Temperatura durante la sublimacin. Debe ser lo ms baja posible, sin subir por encima de 50C. Grado de deshidratacin alcanzado. Lo ms alto posible. Atmsfera de oxgeno en el tubo. Las clulas liofilizadas se guardan en tubos al vaco para evitar Rehidratacin o presencia de gases (como el oxgeno) que pueden daar las clulas. Condiciones de almacenamiento. La temperatura debe ser constante a 18C y sin bajar de los 0C y, en oscuridad

Debe trabajarse, por tanto, por debajo del punto triple del agua (273,16 K y 6,105 kPa).

DESVENTAJAS
-El alto coste inicial del equipo.

-La preparacin de forma incorrecta de los distintos lotes puede desembocar en un estancamiento de la viabilidad y/o en prdidas en la estabilidad de los caracteres de los microorganismos