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Semana 04
Sesión 10
Contenido
1. Introducción 13. Métodos experimentales para medir actividad
2. Definición de enzima y sus características enzimática
3. Propiedades de las enzimas 14. Estrategias catalíticas
4. Generalidades de las enzimas 15. Integrando lo aprendido: Conclusiones
5. Definiciones relacionadas con las enzimas
6. Comportamiento de una enzima
7. Mecanismo de acción enzimática
8. Pasos de la reacción enzimática
9. Modelos sobre la forma en que el S se une al centro
activo de la E
10. Nomenclatura de enzimas
11. Factores que influyen en la actividad enzimática 3
12. Parámetros enzimáticos
Resultado de aprendizaje de la sesión
4
Reflexión desde la experiencia
5
Enzimas
Enzimas
https://n9.cl/17fii
de la
de ntro tiene
ón e a
Regi a qu ada par
m o
enzi a adecu substrat
form el
que ione
c
reac
La catálisis se lleva a cabo en el Centro
(sitio) activo de la enzima 9
https://n9.cl/p7ktw
Como catalizadores, las enzimas tienen
ciertas propiedades
010
Generalidades
o Las enzimas son proteínas que tienen una secuencia exclusiva de aminoácidos (estructura
primaria y secundaria) y estructura tridimensional (ESTRUCTURA TERCIARIA).
o Además, algunas ENZIMAS tienen estructura cuaternaria (formadas por dos o más cadenas de
polipéptidos).
https://n9.cl/nxxsw
011
https://n9.cl/alsqz
Definiciones relacionadas con enzimas
• Existen enzima que no requieren para su actividad más grupos químicos que sus
residuos de aminoácidos.
• Existen enzimas que son proteínas conjugadas y contienen un COFACTOR
(compuestos inorgánicos, iones metálicos, u orgánicos).
012
https://n9.cl/cb2i8
Definiciones relacionadas con enzimas
o Cofactor esta unido a un compuesto orgánico, se denomina
COENZIMA (las vitaminas). Ej: NAD+, NADP+ y pridoxal
5 fosfato.
o Iones metálicos (Fe+2, Zn+2, Cu+2, Mg+2, Mn+2), se encuentran
como componente estructural.
o Coenzimas o iones metálicos enlazados de manera covalente
a los enzimas se denominan GRUPO PROSTÉTICO.
o Enzima catalíticamente activa unido a su grupo prostético, se
denomina HOLOENZIMA.
o La parte proteica del enzima recibe el nombre de
https://biologiageologia.com/biologia2/451_estructura_de_las_enzimas.html
013
APOENZIMA O APOPROTEÍNA.
Definiciones relacionadas con enzimas
o Cofactor esta unido a un compuesto orgánico, se denomina
COENZIMA (las vitaminas). Ej: NAD+, NADP+ y pridoxal
5 fosfato.
o Iones metálicos (Fe+2, Zn+2, Cu+2, Mg+2, Mn+2), se encuentran
como componente estructural.
o Coenzimas o iones metálicos enlazados de manera covalente
a los enzimas se denominan GRUPO PROSTÉTICO.
o Enzima catalíticamente activa unido a su grupo prostético, se
denomina HOLOENZIMA.
o La parte proteica del enzima recibe el nombre de
https://biologiageologia.com/biologia2/451_estructura_de_las_enzimas.html
013
APOENZIMA O APOPROTEÍNA.
Apliquemos lo aprendido
Apliquemos lo aprendido
015
El comportamiento de
una enzima
El comportamiento de una
enzima
o Las reacciones químicas se dan a cierta velocidad (Cinética).
o En las reacciones químicas se produce la ruptura o formación de enlaces entre átomos.
o Las enzimas proporcionan el ambiente óptimo para que se den las reacciones química,
de manera energéticamente favorable.
https://acortar.link/Xwpby0
https://acortar.link/MRsOeU
Diagrama Energético de una Reacción
019
https://acortar.link/V47prw
Pasos de la reacción enzimática
https://n9.cl/8mbez
021
Pasos de la reacción enzimática
022
https://n9.cl/8mbez
Pasos de la reacción enzimática
3.
4.
022
https://n9.cl/8mbez
Modelos sobre la forma en
que el S se une al centro
activo de la E
Modelo de llave y cerradura
(Emil Fischer, 1894)
026
Sin importar el mecanismo de actividad catalítica,
la forma en que la enzima distorsiona el sustrato
reduce la energía de activación necesaria para
acelerar la transformación del sustrato en
producto.
https://n9.cl/adul2
027
NOMENCLATURA
DE LAS ENZIMAS
o Nombres comunes
o Principio de la Clasificación Internacional
NOMENCLATURA DE LAS ENZIM
Nombres comunes
o En muchos casos son formados añadiendo el sufijo –asa al nombre del substrato
Por ejemplo:
o Tirosinasa cataliza la oxidación de la tirosina
o Celulasa cataliza la hidrolisis de la celulosa
029
NOMENCLATURA DE LAS ENZIM
030
NOMENCLATURA DE LAS ENZIM
031
www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme
NOMENCLATURA DE LAS ENZIM
032
https://proteopedia.org/wiki/index.php/Alcohol_dehydrogenase
Factores que influyen en
la actividad enzimática
N°
Factores que influyen en la actividad
enzimática
o En el plasma la cantidad de enzima es muy baja.
o En el laboratorio generalmente se determina la actividad enzimática.
o La unidad de actividad enzimática se expresa en unidades internacionales (U/L).
o Cambios de pH
Factores que afectan la velocidad de o Cambios de temperatura
reacción o Concentración de sustrato
o Concentración de la enzima
o Activadores 034
o Inhibidores
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Cambios de pH
o Las enzimas presentan un pH donde su actividad es óptima.
o Los cambios en la ionización de la enzima o del sustrato
explican los efectos del pH.
o Al producirse ionización de los grupos aminados en el sitio
activo o cerca de él, conlleva a desnaturalización de la enzima.
Grupos ionizables en las
E:
-COOH
-NH 2
-SH
-OH
035
https://acortar.link/9quQjk
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Cambios de temperatura
036
https://acortar.link/PfjcFx
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Fase II Reacción es de orden cero la velocidad es independiente de conc. S
Concentración de sustrato
https://acortar.link/H0R2qb https://n9.cl/kuuqx
037
https://acortar.link/wbaTur
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Concentración de sustrato Concentración de Michaelis-Menten (Km)
Velocidad máxima:
A mayor cantidad de sustrato disponibles, se enlazan
con los sitios activos de la enzima, lo que permita que
la E ejerza su actividad al máximo de la velocidad.
https://n9.cl/dabo8
038
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Fase I:
Cinética de primer orden: La
velocidad de reacción es directamente
proporcional a la concentración del
II sustrato.
Fase II:
I Cinética de orden cero: La velocidad
de reacción es independiente a la
concentración del sustrato.
La enzima esta saturada de sustrato.
https://n9.cl/k6s4b
039
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Concentración de la Enzima
El valor de Km es independiente de
la concentración de la enzima.
https://n9.cl/gbw14
042
Apliquemos lo aprendido
N°
Apliquemos lo aprendido
¿Cómo sería el comportamiento de la velocidad de reacción si se varía la concentración del sustrato
y se deja fija la concentración del enzima?
040
https://n9.cl/k6s4b
Factores que influyen en la actividad
enzimática
Activadores enzimáticos: Molécula o ion que al unirse a la enzima produce un aumento en la
velocidad de la reacción catalizada.
Pueden ser:
1. iones: Zn+2, Mg+2, Fe+2, Mg+2, Ca+2
MECANISMO DE ACCIÓN ACTIVADORES ENZIMÁTICOS TIPOS IONES:
a. Proporcionar un sitio activo electropositivo que atrae a los grupos cargados
negativamente del sustrato.
b. Función estructural y ayudan a estabilizar la estructura terciaria y cuaternaria de la
enzima.
044
https://acortar.link/yHkcPb
Factores que influyen en la actividad
enzimática
046
https://acortar.link/uQY7Mz
Parámetros enzimáticos
Parámetros enzimáticos
Km
(constante para cada enzima) = concentración de S a
la que Vo es ½ Vmáx. Es una medida de la afinidad
de la enzima por S. Cuanto menor es Km, mayor es
la afinidad de la enzima por S.
Kcat
(constante para cada enzima) = número de recambio
= número de moléculas de sustrato convertidas en
producto por molécula de enzima y unidad de
tiempo, en condiciones saturantes del sustrato.
Vmax
Velocidad máxima teórica = la velocidad cuando
todos los centros activos están ocupados con
sustrato. 047
Parámetros enzimáticos
048
https://n9.cl/5ogfs
Parámetros enzimáticos
Constante catalítica (kcat)
o Sólo puede conocerse cuando se tiene a la enzima pura y por tanto se conoce su concentración.
o Si uno de los pasos es limitante de la velocidad, kcat es la constante de velocidad de este paso.
o A kcat también se le conoce como número de recambio, porque indica el número máximo de ciclos
catalíticos por sitio activo y por unidad de tiempo.
o Parámetro muy útil para comparar diferentes enzimas o la misma enzima con diferentes sustratos.
o El valor máximo teórico de la constante de especificidad es denominado límite de difusión tiene un valor de
108-109 (M-1 s-1), a las enzimas con esta propiedad se les llama enzimas catalíticamente
perfectas o cinéticamente perfectas.
049
Parámetros enzimáticos
050
https://n9.cl/224fq
Parámetros enzimáticos
https://n9.cl/o64ey
051
Apliquemos lo aprendido
Apliquemos lo aprendido
https://n9.cl/ugji7
Vmax = Kcat x Et
056
Gráfico de Lineweaver-Burk
y= m x+ b
IMPORTANCIA:
1. Mecanismo regulatorios de las células.
2. Estudios de vías metabólicas.
3. Estudio de la estructura, especificidad y mecanismo cinético.
4. Diagnóstico. 058
5. Terapéutica. https://n9.cl/1ft1t
Factores que afectan la actividad
enzimática
Clasificación de los Inhibidores
IRREVERSIBLES REVERSIBLES
o Se unen fuertemente a la enzima, por
lo general formando enlaces o Se unen reversiblemente al E,
covalentes. complejo E-S o ambos.
o No se restaura la actividad o Al remover el inhibidor el enzima
enzimática recupera su actividad
o La disociación complejo E-I es muy
lenta o no ocurre
Tipos:
Tipos: o Inhibición competitiva
o Inhibidores de grupo específicos o Inhibición no competitiva
o Inhibidores dirigidos al sitio activo o Inhibición acompetitiva
o Inhibidores suicidas 059
o Análogos del estado de transición
Inhibidores irreversibles
Inhibidores irreversibles
Grupo Específicos
061
https://acortar.link/bEGQyW
Inhibidores irreversibles
Grupo Específicos
062
Inhibidores irreversibles
https://acortar.link/lhz7L1
Inhibidores irreversibles
Inhibidores suicidas
• Compuestos relativamente no
reactivos hasta que se unen al
centro activo del enzima
065
http://www.herrerobooks.com/pdf/REVE/9788429176025.pdf
Inhibidores irreversibles
Susbtrato
Estado de transición
+ Productos
Análogo de
estado de transición 066
https://acortar.link/JaPuzL
Inhibidores reversibles
Inhibidores reversibles
o ISOSTÉRICO
El inhibidor se une al mismo sitio que el sustrato
(sitio activo).
o ALOSTÉRICO
El inhibidor se une a un sitio diferente al que se
une el sustrato (sitio alostérico).
068
https://n9.cl/ugji7
Inhibidores reversibles
069
Inhibidores reversibles
070
Inhibidores reversibles
o El incremento de la concentración de I
y= m x + b resulta en varias líneas rectas con
intersección común en el eje 1/Vo pero con
pendientes diferentes.
o Como la intersección sobre el eje 1/Vo es
igual a 1/Vmáx podemos ver que Vmáx no
cambia.
o Hay variaciones en el Km aparente.
071
Inhibidores reversibles
Inhibición competitiva
072
http://www.pharmacy180.com/article/inhibition-of-enzyme-activity-1849/
Inhibidores reversibles
Inhibición no competitiva
Es un tipo especial de inhibidor que se une con igual
afinidad al enzima libre y al complejo enzima-sustrato
Ki Kii
073
Kii=[ES][I]/[ESI]
Inhibidores reversibles
074
Inhibidores reversibles
Inhibición no competitivo
075
http://www.pharmacy180.com/article/inhibition-of-enzyme-activity-
1849/
Inhibidores reversibles
Inhibición acompetitivo
076
Inhibidores reversibles
Inhibición acompetitiva
o El I se une al complejo ES (EIS) solamente, no a la enzima
libre.
o Esta inhibición es rara, decrecen los valores de Vmax y Km.
o La reacción puede retrasarse pero no impedirse Se presenta cuando
hay más de un sustrato en la reacción
077
Inhibidores reversibles
078
https://acortar.link/9WpDJB
Apliquemos lo aprendido
Apliquemos lo aprendido
080
https://acortar.link/rp7Q3Y
Métodos experimentales para
medir actividad enzimática
Métodos experimentales para medir actividad
enzimática
Diseño experimental
082
Métodos experimentales para medir actividad
enzimática
Métodos continuos en el espectrofotómetro:
083
https://acortar.link/ThCIFr
Métodos experimentales para medir actividad
enzimática
Sustratos sintéticos se pueden usar para medir actividad
https://acortar.link/QoFAgk
Métodos experimentales para medir actividad
enzimática
Actúa donde
hayan Arg o Lys
085
https://acortar.link/ODSiXh
Integremos lo aprendido
Integremos lo aprendido
1. Definir una enzima y sus propiedades
¿Qué aprendiste
hoy? - No son alteradas durante la reacción.
2. Definir términos relacionados con enzima: Cofactor. Coenzima. Grupo
prostético. Apoenzima. Holoenzima.
- Son muy selectivas y muchas enzimas requieren coenzimas no
proteicos o cofactores para cumplir su función catalítica.
Video
o 1. Enzimas
https://youtu.be/UVeoXYJlBtI
o 2. Cofactor y coenzimas
https://youtu.be/LK5HzcAOmyA
o 3. Enzyme catalytic strategies
o https://youtu.be/Qviwe17Br3I
Lectura
o Modo de acción de las enzimas.
https://acortar.link/3495bu
o https://biolanhealth.com/
mecanismos-de-accion-de-las- 089
enzimas/
Referencias Bibliográficas
DE CONSULTA
Cuadros Trillos, G. (2019). Mapas conceptuales en bioquímica (1.a ed.). El Manual Moderno
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/128368
Melo, V. y Cuamatzi, O. (2019). Bioquímica de los procesos metabólicos. Reverté, S.A. https://elibro.net/es/ereader/ucsur/127790
Müller-Esterl, W. (2020). Bioquímica: fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté, S.A.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/129564
Piña Garza, E., Martínez Montes, F., Riveros Rosas, H., Laguna, J. y Pardo Vázquez, J.P. (2018). Bioquímica de Laguna y Piña (7.a
ed.). El Manual Moderno.
Pulido Villamil, X. C. (2019). Prácticas de bioquímica y estudios de casos en ciencias de la salud. Universidad de Tolima.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/142510
Simes, L. E. (2020). Introducción a la bioquímica: interpretación de análisis clínicos. Universitas. 090
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/172171
Referencias Bibliográficas
OBLIGATORIAS
Bittencourt, J. (2018). The Power of Carbohydrates, Proteins, and Lipids (4.a ed.). CreateSpace, An Amazon.com Company.
https://www.researchgate.net/publication/322473648
Macías Alvia, A., Hurtado Astudillo, J. R., Cedeño Holguín, D. M., Cedeño Holguín, F. A., Scott ÁLava, M., Vallejo Valdivieso, P. A.,
Macías Alvia, M. J., Santana Sornoza, J. W., Espinoza Macías, M. J., Ubillús Saltos, S. P., Arteaga Espinoza, S. X., Torres
Macías, O. E., Pigüave Reyes, J. M., Pigüave Reyes, Chavarría Cedeño, D. I., & Intriago Sánchez, K. J. (2018). Introducción al
estudio de la bioquímica (1.a ed.). Área de Innovación y Desarrollo, S.L https://doi.org/10.17993/CcyLl.2018.28
Nelson, D. L., y Cox, M. M. (2017). Lehninger Pinciples of Biochemistry (7.a ed.). W.H Freeman Macmillan Learning.
Navarro, M., Salazar, J., Salazar, Y. Zarkovic, G. (2022). Manual de prácticas de laboratorio. Bioquímica. Universidad Científica del
Sur.
091
BIOQUÍMICA
Semana 02
Sesión 10
https://acortar.link/3iVOU7
04
Reflexión desde la experiencia
https://acortar.link/hyjzaz
05
Mecanismo de acción de las enzimas
06
https://n9.cl/lvxv7
Mecanismos de acción de
las enzimas
Mecanismo de acción de las enzimas
08
Tipos de estrategias catalíticas
1. Catálisis covalente
2. Catálisis ácido-base
3. Catálisis por aproximación
4. Catálisis por ion metálico
09
Catálisis covalente
Catálisis covalente
1. Grupos nucleofílicos: reactivos que suplen un par de electrones. Están usualmente cargados
negativamente o positivamente.
2. Grupos electrofílicos: Reactivos que tienen un orbital vacío, los cuales pueden aceptar un
par de electrones. Están cargado positivamente y negativamente.
011
Catálisis covalente
o Es secretada por los acinos del
sina
ip páncreas, como enzima inactiva
iotr (zimógeno).
im
Qu o Convertida a quimiotripsina por la
tripsina, y posterior auto-digestión de la
quimiotripsina (intestino delgado)
https://n9.cl/w9hum
https://n9.cl/es7rx
Catálisis covalente
Quimiotripsina Rompe los enlaces peptídicos del extremo carboxilo de aminoácidos con
grupo R aromáticos y apolares alifáticos
013
Catálisis covalente
Rompe a las proteínas en el Quimiotripsina
extremo carboxilo de
aminoácidos aromáticos o
hidrofóbicos
014
Catálisis covalente
in a
ri ps Grupo
i ot
i m nucleofílico Ser
Qu 195
https://n9.cl/n67ty
015
Catálisis covalente
Triada catalítica
Quimiotripsina
La conformación de estos
residuos es estabilizada por
puentes de hidrógeno
https://n9.cl/vcpz9
016
Catálisis covalente
Lugar de ruptura
ComplejoE-S
Estado de transición Complejo acil-E
1er. Intermediario Acil- +H2O H2O transfiere el Generar la
E H+ a la His y el OH enzima libre
(Hidrólisis para
liberar el ácido al sustrato
carboxílico y
liberar la E) 017
https://n9.cl/3f4s5
Catálisis covalente
https://n9.cl/vcpz9
Quimiotripsina Tripsina Elastasa
189
019
Catálisis ácido-base
Catálisis ácido-base
021
Catálisis ácido-base
022
Catálisis ácido-base
https://n9.cl/n67ty
o Tres centros de
coordinación ocupados
por anillos de imidazol de
tres His (94, 96 y 119).
o Un centro de
coordinación adicional
formado por H2O o por
OH dependiendo del pH.
025
Catálisis ácido-base
Anhidrasa carbónica
1. Zn+2 facilita la liberación de un protón de una molécula de H2O,
generando un ion OH
https://n9.cl/sx9d2
026
Catálisis ácido-base
Anhidrasa carbónica
027
Catálisis ácido-base
Anhidrasa carbónica
031
https://n9.cl/sx9d2
Apliquemos lo aprendido
Apliquemos lo aprendido
¿Cuál es el mecanismo de
catálisis de la tripsina y
anhidrasa carbónica?
https://acortar.link/4YumWk
033
Catálisis por iones metálicos
Catálisis por iones metálicos
035
Catálisis por iones metálicos
El ion facilita la formación de nucleófilo como el ion OH
Metaloenzimas:
Anhidrasa carbónica
036
Catálisis por iones metálicos
037
Catálisis por iones metálicos
038
Integremos lo aprendido
Integremos lo aprendido
Participamos en la siguientes pregunta
1. Catálisis covalente
2. Catálisis ácido-base
3. Catálisis por aproximación
4. Catálisis por ion metálico
https://acortar.link/ttywjs
040
Actividad asincrónica
Actividad asincrónica
Video
o 1. Enzimas
https://youtu.be/UVeoXYJlBtI
o 2. Cofactor y coenzimas
https://youtu.be/LK5HzcAOmyA
o 3. Enzyme catalytic strategies
o https://youtu.be/Qviwe17Br3I
Lectura
o Modo de acción de las enzimas.
https://acortar.link/3495bu
o https://biolanhealth.com/
mecanismos-de-accion-de-las- 042
enzimas/
Referencias Bibliográficas
DE CONSULTA
Cuadros Trillos, G. (2019). Mapas conceptuales en bioquímica (1.a ed.). El Manual Moderno
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/128368
Melo, V. y Cuamatzi, O. (2019). Bioquímica de los procesos metabólicos. Reverté, S.A. https://elibro.net/es/ereader/ucsur/127790
Müller-Esterl, W. (2020). Bioquímica: fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté, S.A.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/129564
Piña Garza, E., Martínez Montes, F., Riveros Rosas, H., Laguna, J. y Pardo Vázquez, J.P. (2018). Bioquímica de Laguna y Piña (7.a
ed.). El Manual Moderno.
Pulido Villamil, X. C. (2019). Prácticas de bioquímica y estudios de casos en ciencias de la salud. Universidad de Tolima.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/142510
Simes, L. E. (2020). Introducción a la bioquímica: interpretación de análisis clínicos. Universitas. 043
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/172171
Referencias Bibliográficas
OBLIGATORIAS
Bittencourt, J. (2018). The Power of Carbohydrates, Proteins, and Lipids (4.a ed.). CreateSpace, An Amazon.com Company.
https://www.researchgate.net/publication/322473648
Macías Alvia, A., Hurtado Astudillo, J. R., Cedeño Holguín, D. M., Cedeño Holguín, F. A., Scott ÁLava, M., Vallejo Valdivieso, P. A.,
Macías Alvia, M. J., Santana Sornoza, J. W., Espinoza Macías, M. J., Ubillús Saltos, S. P., Arteaga Espinoza, S. X., Torres
Macías, O. E., Pigüave Reyes, J. M., Pigüave Reyes, Chavarría Cedeño, D. I., & Intriago Sánchez, K. J. (2018). Introducción al
estudio de la bioquímica (1.a ed.). Área de Innovación y Desarrollo, S.L https://doi.org/10.17993/CcyLl.2018.28
Nelson, D. L., y Cox, M. M. (2017). Lehninger Pinciples of Biochemistry (7.a ed.). W.H Freeman Macmillan Learning.
Navarro, M., Salazar, J., Salazar, Y. Zarkovic, G. (2022). Manual de prácticas de laboratorio. Bioquímica. Universidad Científica del
Sur.
044