UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA
Laboratorio de Hematología

PRÁCTICA NO. 7 Grupo: 1804 Equipo:1

Asesora: Q.F.B. Ixel Venecia González H.

Recuento •
Integrantes:
Hernández Hinojosa Diana Rosalba

plaquetario •
•
•
Melo Forjas Ariadna Daniela
Narváez Murillo Misael Isaac
Perea Resendiz Francisco Javier
• Rodríguez Piedra Celic Yolotzin
 Objetivos

● Conocer los métodos directos e indirectos para el recuento de

plaquetas.
● Reconocer los valores de referencia normales para las
plaquetas en un ser humano.

● Realizar los cálculos correspondientes para obtener el

resultado de plaquetas por mm3.
● Conocer las patologías asociadas a valores fuera de los rangos
de referencia
Un poco de Historia...

Alfred George George Giulio

Donné Gulliver Hayam Bizzozero
1842 1841

William
Franz
Addison
Simon
1842 Microscopia electrónica
Década de los 40-50.
 Plaquetas

Tiene forma de disco tienen un diámetro

aproximado 2.5 µm  
y ocupan un volumen 8-10 fL solución isotónica 

Periodo de vida es aproximadamente de 7 - 10

días.

Su célula precursora es el megacariocito.

Carecen de núcleo.
Tipos de granulación.
Gránulos α
Gránulos densos
Lisosomas
Microperoxisomas
Figura 1. Plaqueta
Figura 2. (A) Megacariocito (B) Esquema interno

Reynolds. Basic Clinical Laboratory Techniques. 6ed. Cengage Learning. USA. 2012. pp371
 Figura 3.
Rodak Fritsma Keohane. Hematology clinical priciples and aplications. 4ed. Elselvier Suanders. St Louis Missouri. 2012. PP77 Figura 4.

Reynolds. Basic Clinical Laboratory Techniques. 6ed. Cengage Learning. USA. 2012. pp291
Figura 5

Rodak Fritsma Keohane. Hematology clinical priciples and aplications. 4ed. Elselvier Suanders. St Louis Missouri. 2012. PP169
 Funciones

Liberan
Procoagulantes
l

Plaquetas ● Nucleótidos La Agregación

activadas ● Proteínas adhesivas plaquetaria y se da la
● factores de formación de un trombo
crecimiento
● Procoagulantes
 Fases de la trombopoyesis

Diferenciación terminal
Progenitor
Endomitosis Hay diferenciación
megacariocito.
Forma de mitosis que morfológica.
Hay diferenciación por
carece de telofase y Da lugar a MK-I
influencia de la TPO.
citocinesis. (megacarioblasto)
Aparecen tres linajes.
desarrollo de
estructuras
citoplásmicas.

Formación de plaquetas
Se dan los tres estadios
terminales.
MK-I, MK-II, MK-III
 Estructura plaquetaria

Sistema tubular denso DTS

Es un vestigio del endotelio
plasmático rugoso.

Secuestra el Ca2+ y las enzimas

activadoras de la cascada de
coagulación.
Fosfolipasa A2
Ciclooxigenasa
Tromboxano sintasa

Figura 6 .Membrana plaquetaria en reposo

Reynolds. Basic Clinical Laboratory Techniques. 6ed. Cengage Learning. USA. 2012. pp158
 Hemostasia
Se refiere a parar la pérdida de sangre que viene desde los vasos sanguíneos.

Figura 7

Estrigge, Reynolds. Basic Clinical Laboratory Techniques. 6ed. Cengage Learning. USA. 2012. pp371
 Rutas de la coagulación
Cuadro 1. Rutas de la coagulación
Extrínseca Intrínseca Vía común

Se llama así por la Estos factores se encuentra Se da como resultado de la

activación de uno de los
factores que no está
presente en la coagulación,
factor III.
Actúa como cofactor de los
factores VII y VIIa
El calcio es liberado desde
las plaquetas.
Conversión del factor X a
Xa
en la circulación sanguínea.
Es iniciado cuando el factor
XII entre en contacto con
alguna superficie
específica.
Se lleva a cabo la
conversión del factor VIII a
VIIIa.
conversión factor X a Xa.
Activación del factor V con
la presencia de fosfolípidos
y calcio ionizado.
Trombina actúa como
catalizador en la conversión
del fibrinógeno.
El coágulo es estabilizado
por el factor XIIIa
 Métodos manuales

Recuento de plaquetas

Utilizan: 
Cámaras Neubauer 
Líquidos en disolución

Figura 8. Pipetas de Thoma

 Hemocitómetro o cámara de
Neubauer

Figura 10. Campos en la cámara de Neubauer

Figura 9. Cámara de Neubauer
hemocitómetro.Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed Editorial
médica Panamericana. Buenos aires, México, 2005, pp 157
  Ramírez G. Utilidad del azul de metileno para el recuento de plaquetas en la cámara de
Neubauer [Tesis]. Lima: Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina,
Escuela Profesional de Tecnología Médica; 2018. disponible en
:https://core.ac.uk/download/pdf/323349757.pdf
 Métodos Unopette

Unopette son dispositivos de dilución automática 

Compuesto: 
• Micropipeta de vidrio con autollenado
 que es desechable 

• Leucocitos
• Eritrocitos 
• Plaquetas

Figura 11. Métodos Unopettee

 Método de REES ECKER

Utiliza líquido diluyente de solución

hipotónica 
Provoca :
• Plasmólisis de GR
• Impedir agregación plaquetaria 
• Adhesión de elementos

Figura 12.
 Composición

Cuadro 2.

Azul de cresilo brillante ……..1 g/L

Citrato de sodio ………………..38 g/L Ventajas  Desventajas 
Formol neutro  …………………. 22 mL 
Agua Destilada ………………...978 mL
Personal
Plaquetas se
experimentado 
observan de
color azul 
 Microscopio de fases

La precisión de este método tiene un CV de

aproximadamente un 8%

● Recuento manual de
plaquetas por medio de
microscópico de contraste
de fases de Brecher y
Cronkite
● Utiliza sangre venosa entera
con antocuagulante de
EDTA
● Diluyente oxalato amonio al
1%
Figura 13
 Calcular el número de plaquetas por Litro

Ejemplo: conteo de 200 células

plaquetarias

Figura 15.

Figura 14.
Fig. Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed
Editorial médica Panamericana. Buenos aires, México, 2005, pp 157
 Recuento electrónico
“Contador de Coutler”
Determinación completa de eritrocitos, plaquetas y leucocitos con
recuento diferencial en tres componentes

Figura 16.
 Citometría de Flujo
Su objetivo es estudiar partículas en
suspensión en un medio líquido (tejidos
humanos) como:
● Sangre
● Líquido cefalorraquídeo
● Pleura (lavado bronquial)

Determinando las características físicas

y/o antigénicas de las células
hematopoyéticas neoplásicas.

Labor en actividades rutinarias de

diagnóstico y seguimiento de pacientes
(reproducible).
Fig. 17
La citometría de flujo en el análisis funcional de las plaquetas .
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
79732002000300001
 Citométro

Figura 19
https://www.directindustry.es/prod/hamama
tsu/product-13622-538344.html
Figura 18
https://notiwiener.net/2020/10/analisis-e-interpretacion-del-hemograma-en-
analizadores-hematologicos-de-5-partes-parte-1/Figura
 Método indirecto

Materiales e instrumentos:
•Sistema de extracción
sanguínea
•Tubo Vacutainer con EDTA
•Porta y cubreobjetos
•Tubos capilares
•Microscopio Figura 22
•Cámara de Neubauer

Reactivos:
•Alcohol isopropílico al 70%
•Tinción de Wrigth
•Aceite de inmersión
•Solución de hipoclorito al 10%
Figura 21. Microscopio óptico

Figura 20
 Método

Etapa 1

1) Toma de muestra sanguínea

2) Frotis sanguíneo

3) Tinción de Wright

4) Recuento de eritrocitos y

plaquetas Figura 23. Frotis sanguíneo

 Frotis sanguíneo

1) Tomar una muestra sanguínea

2) Colocar una gota de sangre anticoagulada en un
portaobjetos
3) Colocar el filo de otro portaobjetos en contacto
con la sangre, en un  ángulo de 30 – 45°
4) Realizar, de un solo movimiento,  la extensión
de la sangre a lo largo del primer portaobjetos
5) Dejar secar

Figura 24. Técnica para realizar frotis

sanguíneo
Figura 25. Errores al realizar un frotis sanguíneo Figura 26.
 Tinción de Wright
Cuadro 4. Características para la tinción de Wrigth

Componentes:

•Eosina
•Azul de metileno
•Metanol

Figura 27.
 Técnica:

1) Colocar los frotis sobre una rejilla y

cubrirlo por completo con el colorante
de Wright
2) Dejar reposar por 5 minutos, cuidando
que el colorante no se seque
3) Adicionar por goteo, la solución
amortiguadora hasta que se forme
una capa metálica sobre la superficie
4) Dejar reposar durante 10 minutos más
5) Escurrir y lavar  con agua corriente
hasta eliminar el exceso de colorante
6) Dejar secar

Figura 28.
 Eritrocitos: Color rosa o rosa - anaranjado.
Plaquetas: Color violeta pálido o púrpura.

Neutrófilos: Núcleo violeta oscuro.

Citoplasma: rosado con granulaciones
rojo violeta.
Eosinófilos: Núcleo violeta. Citoplasma azul
con gránulos rojos o rojo
anaranjado.
Basófilos: Núcleo azul oscuro o púrpura.
Gránulos púrpura casi negros.
Linfocitos: Núcleo púrpura. Citoplasma azul
celeste.
Monocitos: Núcleo laxo violeta. Citoplasma
Figura 29.
azul celeste.
 Recuento de plaquetas

Recuento con hemocitómetro

1. Observar el frotis sanguíneo con el objetivo de

2. inmersión del microscopio.

Elegir, para su examen, una zona de la

preparación sanguínea en la que las células no
están superpuestas y en la que se conserva la
3. morfología de las mismas.

Contar el número de plaquetas y de eritrocitos

4. presentes en 10 campos microscópicos.

Se cuenta el número de plaquetas que hay por Figura 30

cada 1000 eritrocitos.
Figura 31
Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed Editorial médica
Panamericana. Buenos aires, México
Figura 32
 Método

Etapa 2

1) Toma de muestra sanguínea

2) Dilución de la muestra sanguínea
3)  Conteo de eritrocitos totales en
cámara de Neubauer
4) Calcular el número de
plaquetas/mm3 

Figura 33. Cámara de Neubauer

Figura 34. Fórmula
 Factores que interfieren en
la determinación

1. Mezcla inadecuada y a obtencion defectuosa de la

muestra pueden provocar aglutinación de las plaquetas
en el hemocitómetro.
2. La suciedad en la pipeta, en el hemocitómetro o en el
líquido diluyente.
3. Si se cuentan 50 plaquetas en cada lado, el
procedimiento debe repetirse diluyendo la sangre 1:20
con pipetas con émbolo
4. Si se cuentan más de 500 plaquetas en cada lado debe
hacerse una dilución 1:200.
5. El fenómeno de satelitosis plaquetaria puede producirse
cuando se usa EDTA.

Figura 35 Satelitosis plaquetaria

Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed Editorial médica Panamericana. Buenos aires, México, 2005. pg 159
 Valores de referencia

Cuadro 5 Valores de referencia obtenidos en la Baptist Memorial Health Care Corporation, Memphis
Tennessee

EDAD RECUENTO PLAQUETAS (X 10 9 / L )

Primera semana de vida 150 a 340

1 semana a 2 meses 200 a 400

2 meses a adulto 150 a 500

Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed Editorial médica Panamericana. Buenos aires, México, 2005. pg 159
 Patologías

Trombocitopenia: conteo bajo de plaquetas (menor a 150 000 /μL )

● Wiskott-Aldrich (hereditarios)
● Fármacos:
○ tamoxifeno
○ Ibuprofeno
○ Vancomicina
○ muchas sulfonamidas

Figura 36
 Patologías

Trombocitosis: Conteo elevado de plaquetas

● Deficiencia de hierro
● Inflamación
● cáncer
● Infección
● Transtorno mieloproliferativo
● Síndrome coronario agudo----
Figura 37.
>Trombos
 Fundamento

En el método directo con cámara de recuento

Se mezcla la sangre capilar o venosa anticoagulada en una pipeta de thoma
para eritrocitos.
Es preciso actuar con rapidez para evitar la aglutinación de las plaquetas; las
demás células pueden o no destruirse según el líquido utilizado
Suelen persistir los eritrocitos y las plaquetas se cuentan en un hemocitómetro

Ríos G. Manual de prácticas para el laboratorio de hematología. SGC-FESZ-ML25. México: Facultad de estudios superiores Zaragoza. 2017
 Material, instrumentos y
reactivos

Sangre con EDTA

Boquilla
Pipeta de thoma para eritrocitos
Agitador para pipetas de thoma
Cámara de Neubauer
Cubrehemocitómetro
Microscopio

Reactivo: Oxalato de amonio al 1%

Método
Con la pipeta Limpiar la sangre
en posición adherida a las
horizontal paredes externas.
aspirar sangre
Recolectar 5 mL de hasta la marca
sangre venosa con 1,0
EDTA Introducir la pipeta en
forma vertical solución
oxalato de amonio
1%. hast ala marca de
Colocar parafilm en ambos 101.
extremos de la pipeta.
Colocar en el agitador
mecánico 15 min
 Colocar el cubreobjetos
sobre las dos superficies Desechar las primeras 4 o
elevadas para cubrir las 5 gotas de la pipeta
dos cuadriculas

Cargar ambos lados de la

Se deja
Se deja reposar cámara.
sedimentar
10 min. Fuera de
durante 15-20
la caja Petri
min.
45°

Localiza el cuadro central

Las plaquetas se Tienen aspecto

cuentan en 10 redondo u oval
cuadros. 40x

Movimiento Browniano
  

N= Número de células contadas

10= Número de cuadros cuaternarios contados
(0.2)2 = Área de cada cuadro cuaternario
0.1= altura de la cámara
100= Dilución de la muestra
 Ejemplo
 

N= 117 plaquetas
#cuadros contados = 10 Sustitución
Área de cada cuadro= (0.2 mm)2
Altura de la cámara = 0.1 mm
Dilución = 100

Cuadro 6 .Valores de referencia

Método Plaquetas/ mm3

Directo 150 000 a 500 000

Indirecto 140 000 a 350 000 Tinción de Wrigth

500 000 a 1 000 000 Azul de Cresil brillante
     

N= Número de células contadas

Factor = 2 500

Este factor variará si cambia el número de cuadros contados

Cuadro 7. Factor para diferentes cuadros contados

Cuadros contados Factor

5 5 000

7 3 571

9 2 778

11 2 273
Referencias

1. Rodak, B, Hematología :Fundamentos y Aplicaciones Clínicas, 2da Ed Editorial

médica Panamericana. Buenos aires, México, 2005, pp 157
2. Ramírez G. Utilidad del azul de metileno para el recuento de plaquetas en la
cámara de Neubauer [Tesis]. Lima: Universidad Nacional Mayor de San Marcos,
Facultad de Medicina, Escuela Profesional de Tecnología Médica; 2018. disponible
en :https://core.ac.uk/download/pdf/323349757.pdf
3. Ríos G. Manual de prácticas para el laboratorio de hematología. SGC-FESZ-
ML25. México: Facultad de estudios superiores Zaragoza. 2017
4. Rodak Fritsma Keohane. Hematology clinical priciples and aplications. 4ed.
Elselvier Suanders. St Louis Missouri. 2012 .
5. Estrigge, Reynolds. Basic Clinical Laboratory Techniques. 6ed. Cengage Learning. USA. 2012.
6. Mckenzie B. Shirlyn. Hematología cl{inica. 2ed. El manual moderno. México. 2000.
7. Colomber. Fontcubeert, Muñiz. Manual de técnicas de laboratorio en hematología, 4ed, Elservier
Masson. España. 2014
Videos de apoyo

1) Lectura de extendidos de sangre periférica. Disponible en:

https://www.youtube.com/watch?v=O2_IMDdyK6M&ab_channel=Hematolog%C3%ADaCl%C3
%ADnica

2) Elaboración del frotis sanguíneo y coloración. Disponible en:

https://www.youtube.com/watch?v=kOrsI-VWDrc&ab_channel=CatedraHematologia