REGULACIÓN DE LA

EXPRESIÓN POR MEDIO DE

RNA DE INTERFERENCIA 
Grupo 06:
- Crisóstomo Quispe, Stefany Elizabeth

- Félix Chanduvi, Karen Geraldine

- Gutiérrez Rojas, Johnny Omar

- Meléndez Montoya, Marlon Alberto

1. CLASIFICACIÓN DE LOS
RNAs
Codificantes No Codificantes

Sintetizan proteínas Regula funciones

Bloquea o activa la transcripción celular

miRNA
2. DESCUBRIMIENTO

En 1928, Wingard
Recuperación de plantas
con virus de la mancha
anular del tabaco (TRSV)

La reincorporación del
virus no produjo
modificación en las hojas
 2. DESCUBRIMIENTO

Se usó la terminología: En 1976, Zaitlin

- inmunidad adquirida
- exclusion de sobreinfeccion
mutantes de TMV que producen CP
- protección cruzada
no funcional también brindan
protección cruzada contra cepas de En 1984, Palukaitis
TMV relacionadas y Zaitlin

Las moléculas de ARN

Sugirieron que la proteína funcionaban de una manera
de la cubierta (CP) del específica de secuencia
virus protector podría ser la durante la protección
molécula funcional cruzada de virus e incluso
de viroides
3.
IMPORTANCIA
Crecimiento
RNAi Regulación de genes celular

Degradación del RNAm Diferenciación de

tejidos

Silenciamiento Formación de
postranscripcional heterocromatina
Silenciamiento
transcripcional
Proliferación
celular

Virus
Defensa
Hongos
de
Insectos
actividad
Bacterias
4. MECANISMO MOLECULAR DEL
RNAi
Proteinas comunes 

Argonauta DICER
Endonucleasa Enzima endoribonucleasa clase
Contiene 4 dominios: III
terminal-N, PAZ. Medio y Pose diversos dominios, pero
Piwi-terminal-C los mas importantes son los
dominios PAZ, helicasa
y ARNasa
4.1 MECANISMO MOLECULAR:
siRNA

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4.2 MECANISMO MOLECULAR:
miRNA
Modelo de protección del RNA-cortado y entrada al RNAi

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Ciclo Feed-forward del RNAi
4.3 siRNA vs miRNA

siRNA miRNA
Antes de entrar al DICER Ingresa dsRNA con un Ingresa con una estructura de
contenido de 30-100 horquilla un pre-miRNA que
nucleotidos contiene de 70-100
nucleotidos 
Estructura 21-23 nucleotidos de RNA 19-25 nucleotidos con RNA en
duplex duplex
Complementaridad Completamente Parcialmente complementario
complementario al mRNA al mRNA, normalmente
apuntando a la zona 3' del
mRNA
Objetivo del mRNA  Uno Multiples
Mecanismo de regulación de Corte endonucleolitico del .Represión translacional
genes mRNA .Degradción del mRNA
.Corte endonucleolitico del
mRNA(solo cuando hay alta
compatibilidad)
5. SÍNTESIS DE dsRNA in vitro: siRNA
5. SÍNTESIS DE dsRNA in vitro: siRNA

Numata et al (2014)
 5. SÍNTESIS DE dsRNA in vitro: siRNA

T
7

T
7
Gen
 5. SÍNTESIS DE dsRNA in vitro: siRNA
RNA polimerasa T7 ssRNA

Producto de la PCR

RNA polimerasa T7

ssRNA

RNA polimerasa T7
95 °C
5 minutos

5´ 3´
Kit T7 RiboMax 3´ 5´
dsRNA
5.1 ESTRATEGIAS: siRNA
Cadena relativamente
Selección de la cadena inestable

Lam et al (2015)
5.1 ESTRATEGIAS: siRNA

Actividad por G/C

<9 C

CC C GG G C C C C C C CC C G C

CC C C C GG GG GG G G G

<9 G
≈ 30 –50 %

Eficiencia

Lam et al (2015)
5.1 ESTRATEGIAS: siRNA

Efectos fuera del objetivo

Lam et al (2015)
5.1 ESTRATEGIAS: siRNA

Efecto similar al miRNA Estimulación inmune

5´ 3´
3´ 5´
dsRNA

DICE
R
Evitar:
siRNA
GUCCUUCAA
UGUGU
21-23 nt
UGU
30 nt UGGC 

Sistema inmune activo

Lam et al (2015)
 6. RNAi PARA EL CONTROL DE PLAGAS EN PLANTAS

DC
ARNi derivados del ARN
Detección del ARN viral  L
bicatenario viral

RDR ARN bicatenario viral en

Amplificación del
s células receptoras
silenciamiento génico 

Realiza el silenciamiento 
siARN

DEFENS ARNdc
DICE miARN
RISC
R
A 
RESISTENCIA
ARN BICATENARIO MEDIADO POR ARNi

HAUSTORI
O
 INSECTOS:
C. Vías de aplicación
A. Selección del blanco C1. Métodos usados en
laboratorio: Aplicación
tópica e inyectada
aplicación oral mediante
dietas artificiales y
método de la gota. 
B. Producción de moléculas
desencadenantes

C2. Estrategias de
liberación en campo

C2A. Aplicación de
moléculas desencadenantes
formuladas.
C2C. Uso de plantas C2B. Aplicación a través
hospederas transgénicas de vectores (bacterias y
virus)