POTENCIA

ANTIBIÓTICA
VALORACIÓN MICROBIOLÓGICA
DE ANTIBIÓTICOS

 Se basa en la comparación de la
inhibición del crecimiento de
microorganismos sensibles,
producidos por concentraciones
conocidas de antibióticos a
examinar y de una sustancia de
referencia
 RECURSOS
MEDIOS DE
CULTIVO

CEPAS EQUPOS

MATERIAL DE
MATERIALES
REFERENCIA
 CEPAS MICROBIANAS

 HOMEGENEIDAD
 GENÉTICA
 ESTABILIDAD
 CERTIFICADAS (ATCC)
 SER SENSIBLES
 FÁCILMENTE CULTIVABLES
 FACTORES QUE INFLUYEN
 EDAD DEL CULTIVO
 CONCENTRACIÓN DEL INÓCULO
 CONSERVACIÓN DE LA CEPA
 Deben realizarse los controles de
pureza y los ensayos bioquímicos
que sean necesarios.

Todas las fases del proceso han de

estar documentadas y se debe
mantener un registro detallado de
todas las operaciones realizadas.
 MEDIOS DE CULTIVO
 PRUEBA DE PROMOCIÓN DE
CRECIMIENTO
 ESTABILIDAD.
 DEBE PROPORCIONAR
TODOS LOS NUTRIENTES
 LOS CONSTITUYENTES DEL
MEDIO NO DEBEN
INTERFERIR
 1. MEDIOS DE CULTIVO


EQUIPOS
EQUIPOS
 MATERIALES

CILINDRO
Diámetro interno 6+/- 0.1 mm
Diámetro externo 8+/- 0.1 mm
Altura 10 +/- 0.1 mm
MATERIALES DE REFERENCIA
1. HOMOGÉNEO
2. ESTABLE
3. SER CUALITATIVAMNETE
IDENTICA A LA
SUSTANCIA QUE SE VA
IDENTIFICAR
4. SER DE UNA SOLA
COMPOSICIÓN QUÍMICA
ESTÁNDAR DE REFERENCIA
PRIMARIO
SUSTANCIA DE REFERENCIA OFICIAL, DE
UNIFORMIDAD COMPROBADA Y QUE DEMUESTRA
TENER PROPIEDADES ADECUADAS PARA LOS FINES
PROGRAMADOS.
SU VALOR Y DEMOSTRACIÓN DE APTITUD, ASEGURADO
POR PROCEDIMIENTOS DE ALTO ORDEN
METROLÓGICO, ES RECONOCIDO Y ACEPTADO SIN
COMPARACIÓN CON OTRA SUSTANCIA QUÍMICA
(ESTÁNDAR PREEXISTENTE)
 ESTÁNDAR SECUNDARIO
SUSTANCIA DE UNIFORMIDAD COMPROBADA Y
PUREZA ADECUADA, CUYAS CARACTERÍSTICAS
ESTÁN ASIGNADAS Y/O CALCULADAS POR
COMPARACIÓN CON SUSTANCIAS DE REFERENCIA
PRIMARIAS.
 MÉTODO DE DIFUSIÓN EN
PLACA
 Difusión radial de una
solución de antibiótico
desde un reservorio
 El límite de la zona de
inhibición se forma
cuando
se alcanza la
concentración
crítica del antibiótico
 MÉTODO EXCAVACIÓN
PLACA CULTIVO
 Se basa en la
difusión del
antibiótico
contenido en
una
excavación, a
través de una
capa de agar
en un área
circular.
 FACTORES QUE AFECTAN
 SUSTANCIA DETERMINAR
• PROPIEDAD DE INHIBIR O ESTIMULAR
• DIFUNDIR A TRAVES DEL AGAR
 MEDIOS DE CULTIVO
• ESPESOR DE LA CAPA
 pH DEL MEDIO DE CULTIVO /
DILUYENTE
 INCUBACIÓN
 INOCULACIÓN DEL MICROORGANISMO
DE ENSAYO
 ESTÁNDAR
Potencia estándar 643.4 ug/mg
Peso 18.12 mg
Humedad 6.94 %
Peso real 16.862472 mg
Volumen (FIOLA) 10 mL
Conc Sol Standard Stock 1084.93145 ug/mg
Volumen final 50 mL
Nº mL VALOR TEORICO VALOR REAL UNIDADES
S1 0.0295 0.64 0.640109554603200 ug/mL
S2 0.0368 0.80 0.798509546081280 ug/mL
S3 0.0460 1.00 0.998136932601600 ug/mL
S4 0.0576 1.25 1.249841028648960 ug/mL
S5 0.0720 1.5625 1.562301285811200 ug/mL
 Muestra
5mL contiene 250 mg del principio activo

250 mg (250) 1000 ug/mL

Concentración Final 1000 ug/mL

0.5 mL (50) 10.00 ug/mL

1 mL (10)
M3 1.00 ug/mL
ESQUEMA DE TRABAJO

ESTÁNDAR MUESTRA
 ENSAYO DE POTENCIA ANTIBIÓTICA

OPERACIONES PRELIMINARES PREPARACIÓN DE LAS PLACAS

3ER DIA
COLOCAR 15
1ER DIA PLACAS CON
Lectura
21mL C/U DE
MEDIO
SEMBRAR ANTIBIOTICO
LA CEPA
ATCC
DEJAR
PREPARACION DEL INOCULO SOLIDIFICAR

INCUBAR
COLOCAR 15
PLACAS CON
4mL C/U DE
PREPARACION DEL ESTANDAR MEDIO
ANTIBIOTICO
PREPARACION DE LA MUESTRA
COLOCAR LOS CILINDROS
PREPARACION DE DILUCIONES
2DO DIA
INCUBACION DE
LAVAR CON 3ML SEGUN FORMULA
PLACAS
DE NaCl Y C1 V1 = C2 V2
VACIAR A UN
FRASCO ROUX
M3

S1 S2 S3 S4 S5

INCUBAR
LECTURA DE PLACAS
MUCHAS GRACIAS
BENDICIONES