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Tipos de Pigmento
Tarea
PIGMENTOS. DEFINICIN
CITOQUMICA
PUEDE SER SUSPENDIDA EN UN LQUIDO PARA SU APLICACIN A UNA SUPERFICIE (PIGMENTUM LATINO, PINTURA)
EN BIOLOGA: INCLUYE MATERIALES INSOLUBLES COLOREADOS O VISIBLES EN VIRTUD DE SER REFRACTARIOS O BIRREFRINGENTES.
CLOROFILA
ANTOCIANINAS
CAROTENOIDES
HEMOGLOBINA
METALOPROTENA COLOREADA PORTADORA DE OXGENO DE LA SANGRE
INSOLUBILIZABLE MEDIANTE FIJACIN
PROTENA BSICA CON ALTA AFINIDAD TINTORIAL POR COLORANTES
ANINICOS COMO EOSINA.
EN LA PATOLOGA, SE ENCUENTRAN FRECUENTEMENTE DEPSITOS
INSOLUBLES ANORMALES, AMARILLOS, MARRONES O NEGROS SIN
MANCHAS, Y NO MANCHADOS DE FORMA DISTINTA CON H & E.
IV) Carotenoides
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
NATURALEZA DE LOS PIGMENTOS
Artefactos introducidos generalmente por la tcnica empleada (p.e., un fijador a base de mercurio producir un
precipitado pigmentado)
Asociados a efectos del fijador: Aunque este no deje precipitados puede alterar las sustancias internas (p.e.,
material sanguneo para producir pigmentos como el pigmento formolado)
Pigmentos endgenos: Forman parte de los procesos biolgicos o patolgicos; sern nuestro foco de
atencin
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUCIDOS POR ARTEFACTOS
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
IDENTIFICACIN
rea hemorrgica:
Campo Claro: Zonas ms oscuras
de color caf a negro
Luz polarizada: Birrefringente
PIGMENTOS PRODUCIDOS POR ARTEFACTOS
PIGMENTO MALRICO
Pigmento especial muy particular parecido al pigmento formolado, aunque menos soluble.
Hemazona, que se forma en el interior de glbulos rojos que contienen el Plasmodium falcparum u otros plasmodium
por interaccin de stos con la Hb
Plasmodium al parasitar los glbulos rojos detoxifica las molculas heme que contienen hierro formando un compuesto
polimerizado.
IDENTIFICACIN
Remocin: Tratamiento con Alcohol-cido pcrico, ms prolongado que para pigmento formolado.
Microfotografa de
pigmento malrico
HEMATINA
Se forma y acumula en rganos congestionados y que es captada por las clulas del S.R.E.
IMPORTANCIA CLNICA
EXTRACCIN
Se forma cuando los tejidos no son lavados adecuadamente despus del uso de este
tipo de fijadores
Las sales de cromo que reaccionan con alcohol forman precipitado de tonalidad
amarillo parduzca en los tejidos
ORIGEN
Hemtico
CLASIFICACIN
Tipo porfirinas
Porfirinas
Hemoglobinas: No existen mtodos especficos histoqumicos de deteccin de stas porque
los reactivos disponibles destruyen los tejidos, slo se detecta por su coloracin tpica.
Citocromos
Mioglobina
PIGMENTOS ENDGENOS
CLASIFICACIN
Metaloprotenas no porfirinas
Con hierro: Hemosiderina.
Con cobre: Ceruloplasmina (circulante); acumulacin de cobre.
Pigmentos biliares: Importantes por su presencia en patologas
Bilirrubina
Biliverdina
Urobilina
Estercobilina
CLASIFICACIN
CLASIFICACIN
CLASIFICACIN
PIGMENTOS BILIARES
METABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA
Sntesis de hemoglobina a partir de precursores que parten desde porfobilingeno hasta el grupo hem y la
hemoglobina.
A partir de hemoglobina, y por un proceso catablico, se libera el hierro que es recuperado para ser empleado
nuevamente en la sntesis de eritrocitos
Queda libre el grupo hem, que se puede abrir, como veremos a continuacin, transformndose en biliverdina y
por reduccin de ste en bilirrubina, que puede ser transportada en sangre por albmina hasta el hgado donde
es capturada y conjugada, hacindose ms hidrosoluble y luego eliminada por las vas biliares como bilis.
En las vas biliares puede estar como bilirrubina o biliverdina si est oxidada, o bien transformarse en
urobilingeno y ser reutilizado por dilisis o pasar a uro o estercobilina para ser excretado por intestino (estos
pigmentos biliares transformados son los que dan el caracterstico color pardo a las heces).
CLASIFICACIN
a
Hemoglobina (Hb):
Esquema general
Grupo Hem:
Un grupo terapirrlico (es decir, formado
por 4 grupos pirroles)
Un ncleo central de hierro (grupo Hem)
UTILIDAD CLNICA
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
Cirrosis biliar
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
Resumen de la reactividad de los
pigmentos biliares con diferentes
mtodos histoqumicos (el color que
dan).
La reaccin de Raia es equivalente
a la de van der Berg.
Adems, se muestra una tabla de
comparacin entre los distintos
mtodos y pigmentos que
estudiamos, que se tom de Zugibe.
Cabe recordar que los grnulos
cromafines, no corresponden a
pigmentos, sino a componentes del
sistema APUD (enteroneuroendocrinos),
que son ms bien detectados por IHQ,
que no se ven con tinciones corrientes,
dada su naturaleza hormonal.
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUC IDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
Pigmentos
Endgenos
OTROS PIGMENTOS ENDGENOS
LIPOPIGMENTOS
LIPOFUSCINA
CEROIDES
CARACTERSTICAS
Pigmentos heterogneos (en cantidad y composicin), al parecer dependiendo del grado de oxidacin (mayor
antigedad) que posean sus componentes.
Lipofucsina (lipocromo,pigmento de usar o tirar, o
pigmento de envejecimiento, pigmento de desgaste)
LIPOFUSCINA
IMPORTANCIA CLNICA
Pacientes de edad avanzada: Torna las vsceras de color pardo y disminuye su volumen (atrofia parda).
Lipofucsina
CEROIDE
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS ENDGENOS
Sudan black B post inclusin en parafina (por ello se llaman lipopigmentos, dan reacciones
para lpidos)
Schmorl (variable)
PAS (variable)
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
Microfotografa de
Hgado afectado por
aflatoxina
Tirosinasa cataliza la
oxidacin: tirosina a Es el nico pigmento
No derivado de la Hb, marrn-negro.
dihidroxifenilalanina en los endgeno marrn-negro
melanocitos
PIGMENTOS ENDGENOS
MELANINA
Pigmentos importantes para nuestra adaptacin al ambiente, pues ha facilitado nuestra supervivencia a las radiaciones,
especialmente a las UV.
Pigmentos especiales que capturan y absorben prcticamente todo el espectro de luz visible y por ende, al estar localizado
en piel nos protege de las radiaciones solares.
Las personas que carecen de estos pigmentos como los albinos, son muy susceptibles a desarrollar cnceres de piel.
Localizacin
Melaninas cutneas,
Unin Dermo/Epidrmica
Folculos pilosos
Neuromelanina
Melanina ocular
Melanina retinal
Melanina iridal
PIGMENTOS ENDGENOS
FUNCIONES DE LA MELANINA
IMPORTANCIA CLNICA
Por efectos del sol se da en zonas ms expuestas: cara, manos, mamas, mejillas
ALCANCES CLNICOS
FACTOR TNICO
Razas blancas se desarrollaron aparentemente en reas menos expuestas al sol (Europa, Norte de Europa,
zonas ms fras)
MELANOCIT
O
PIGMENTOS ENDGENOS
MELANINA
VARIANTES DE MELANINA
MELANOGNESIS
En trminos generales se sintetiza a partir de tirosina por accin de la dihidroxifenilalanina oxidasa (DOPA oxidasa)
Se forma fenilalanina a partir de tirosina por accin de DOPA oxidasa.
Los grnulos de melanina que permanecen en citoplasma y que estn rodeados, habitualmente, por membranas.
VARIANTES DE MELANINA
Adems de las melaninas cutneas, existen neuromelanina, que confiere un color al cuerpo oscuro en el cerebro,
tambin presente en coroides; tambin hay melaninas retinales e iridales (responsables estas ltimas del color de la
pupila ocular).
MELANOGNESIS
MELANOGNESIS
Dentro de este grnulo se encuentra polimerizado (en alguna forma) este pigmento de color caf que es la
melanina.
Estos grnulos pueden ser traspasados de una clula a otra, lo que ocurre en melanocitos (clulas de la piel
que tienen la DOPA oxidasa y por ende son capaces de producir la melanognesis)
Los melanocitos pueden traspasar estos grnulos de pigmento a otras clulas vecinas (epiteliales de la
epidermis, algunas de ellas, especialmente en las capas basales, estn llenas de melanina)
Tambin pueden traspasarlas a clulas con caractersticas fagocticas, los melanfagos o melanforos (del Gr.
Phoros: portador de), que no generan melanina.
Los melanocitos son de origen embriolgico neuroectodrmico, lo que se sabe por su inmunofenotipo.
Comparten la reaccin de S-100 (marcador tpico de tejido neuroectodrmico)
PIGMENTOS ENDGENOS
IMPORTANCIA CLNICA
Relevancia patolgica:
Albinismo: Condicin congnita en que hay ausencia de pigmentacin generalizada, en piel, en folculos pilosos, y con nula o
escasa pigmentacin iridal y retiniana
Bitiligo: Ausencia de melanina en reas focales, zonas blancas de piel desprovistas de melanina en un individuo de coloracin
normal
Diverso origen: psicosomtico, en individuos con ciertas caractersticas de personalidad, en quienes la aparicin de bitligo crea
un crculo vicioso (se siente socialmente inhibida por sus manchas y ms aparecen); secundarios a inflamaciones locales u
otras lesiones.
LESIONES TUMORALES
Se pueden decolorar con agentes oxidantes : H2O2, KMnO4, HCl, FeCl3, cido ascrbico y clorato de
potasio
Son insolubles en solventes orgnicos, mientras que tienen buena solubilidad en NaOH 1N.
MELANOMAS
Tambin es necesario investigar el pigmento en lesiones tumorales, como por ejemplo el melanoma
(tumor maligno relacionado con la exposicin al sol), que simula otros tumores, y da metstasis difciles
de diagnosticar; en su sitio primario de origen no es difcil de identificar morfolgicamente, pero en
metstasis es muy difcil.
PIGMENTOS ENDGENOS
Las melaninas parecen estar firmemente unidos a protenas, por lo que son muy difciles de extraer (se
ve fcilmente en cortes pasados por xilol, alcoholes, fijadores) a menos que se utilicen agentes cidos
que destruyen los tejidos. S se pueden decolorar con agentes oxidantes como: H2O2, KMnO4, HCl,
FeCl3, cido ascrbico y clorato de potasio, son insolubles en solventes orgnicos, mientras que tienen
buena solubilidad en NaOH 1N.
INMUNOHISTOQUMICA
INMUNOFLUORESCENCIA
MELAN-A
HMB-45
Melanoma amelantico
REACCIN DE SCHMORL
Los cortes se incuban en una solucin que contiene cloruro frrico y ferricianuro de potasio y se forma un
precipitado de color azul semejante al azul de Prusia.
Otra caracterstica de la melanina es la capacidad de formar quelato con iones ferroso si stos le son
proporcionados, como ocurre en la reaccin de captura del ion ferroso de Lillie, que veremos a continuacin.
Se basa en la capacidad de las melaninas para formar quelatos con el hierro ferroso (sulfato ferroso) que
quedan capturados dentro del pigmento y se forma una melanina ferrosa
Posteriormente se incuban los cortes con ferricianuro de potasio formndose ferricianuro ferroso semejante a
azul de Turnbull.
Piel normal
Schmorl
a
Piel normal
Lillie
REACCIN DOPA
Demuestra la actividad de la enzima DOPA oxidasa, requiere el uso de una mezcla incubadora que contiene
D.L.3:4 dihidroxifenilalanina (DOPA) en buffer fosfato a pH 7.4
Se incuban cortes por congelacin sin fijar a 37C por 45 min a 2 horas, y las reas de actividad enzimtica se
observan de color pardo oscuro; se pueden hacer cortes por congelacin.
Otros mtodo usados como elementos diagnsticos tambin son aquellos que implican la decoloracin de la
melanina.
DECOLORACIN DE MELANINAS
Las melaninas se decoloran con agentes oxidantes, al parecer por ruptura de su anillo fenlico que tendra
dobles enlaces que le dan la caracterstica de color caf, que al hacer la oxidacin se perdera el cromforo de
la melanina; se pueden emplear:
PIGMENTOS ENDGENOS
Mtodo clsicamente utilizado: Tratando los cortes por varias horas se decoloran. Es de utilidad diagnstica para
identificar melanina, al igual que el cido ascrbico pues son especficos.
Permanganato de potasio: Puede aplicarse a 60 en estufa o en microondas; como inconveniente, decolora otros
pigmentos, por lo que no sirve para hacer diagnstico de melanina.
Sin embargo, la decoloracin que ocasiona puede ser til cuando se requiere ver todo lo que oculta la melanina o el
enmasacaramiento de cromgenos como DAB (de color similar a melanina) usados en IHQ, en que por ejemplo en el
caso de melanoma se requiere saber donde est la reaccin en clulas pigmentadas
Siempre hay que hacer la decoloracin antes de hacer la IHQ facilitndose la interpretacin de resultados
La decoloracin en perxido de hidrgeno puede tomar hasta 48 horas lo que vara para las diferentes melaninas; se
puede controlar la decoloracin.
No es necesario esperar que se decolore para hacer el diagnstico. Para caracterizar melanina se pone una lmina en
perxido y se hacen otras tcnicas.
Melanoma Primario
Melanoma amelantico
PIGMENTOS ENDGENOS
MTODOS NZIMTICOS
IHQ: S-100, vimentina o antgenos especficos como el Melan-A que identifica melanomas y el HMB-45,
que tambin identifica melanoma y reemplazan a la DOPA.
Enzimohistoqumica para DOPA oxidasa: En el tumor de la imagen anterior, esta tcnica hubiera
permitido demostrar si era melanoma o no, pues si daba DOPA (+) significaba que estas clulas eran
melanognicas, es decir, tenan la maquinaria enzimtica necesaria para producir melanina aunque no
la estuviesen produciendo.
MELANOMAS
Tambin es necesario investigar el pigmento en lesiones tumorales, como por ejemplo el melanoma
(tumor maligno relacionado con la exposicin al sol), que simula otros tumores, y da metstasis difciles
de diagnosticar; en su sitio primario de origen no es difcil de identificar morfolgicamente, pero en
metstasis es muy difcil.
cido homogentsico
CAROTENOIDES Y CLOROFILA
LIPOSOLUBLES
NO OBSERVABLES EN CORTE HISTOLGICOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
DEPSITOS DE COBRE
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
Enfermedad de
Wilson
PIGMENTOS PRODUCIDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares
PIGMENTOS PRODUCIDOS POR ARTEFACTOS
Pigmento formlico
IMPORTANCIA: Debe ser reconocido para no confundirlo con otros pigmentos y extraerlo si es necesario
Pigmentos intracelulares
Pigmentos extracelulares