Universidad Autnoma de Nuevo Len

Facultad de Ciencias Biolgicas

Biotecnologia Industrial

Qumico Bacterilogo Parasitlogo

Conservacin de microorganismos de importancia

industrial.

EQUIPO 4
Maestro titular
Antonella Lilibeth Elizalde Rojas 1541597
Dra. Myriam Elas Santos
Kristhel Jazmn Ramrez Posada 1526210
Karla Daniela Saucedo Rojas 1577924
Grupo: 271

San Nicols de los Garza, N.L. a 27 de enero del 2016.

 Conservacin de microorganismos
Los objetivos de la conservacin de los cultivos se podran resumir en los
siguientes aspectos:

Mantener los cultivos viables a lo largo del tiempo.

Mantener los cultivos puros, sin contaminaciones.
Mantener los cultivos sin cambios en sus caractersticas, es decir estables.
Preservar los niveles de productividad inicial.
Facilidad y seguridad en el transporte y manejo.
 Conservacin por congelacin.
La tcnica involucra el crecimiento del cultivo hasta la fase estacionaria
Utilizar una densidad celular elevada.
Usar un agente crioprotector. El ms empleado es glicerol al 10%, aunque otros agentes como
dimetilsulfxido, glucosa, dextranos, sacarosa, suero de conejo, lactosa y extrato de malta, han sido
tambin empleados.
La velocidad de congelacin debe ser lenta y una rpida descongelacin.
En cuanto a la temperatura de conservacin, se recomienda -70 C (si no se cuenta con nitrgeno
lquido), en agar o perlas de vidrio estriles recubiertos con el microornanismo.
Nitrgeno lquido de -156 a -196C. Se utiliza para la conservacin de bacterias, levaduras, hongos,
algas, protozoarios, virus y lneas celulares.
En caso de nitrgeno lquido, la conservacin podra prolongarse por aos, asegurando una buena
provisin del mismo y disponiendo de equipos con sistemas de alarma en caso de fluctuaciones de
temperatura.
 Crioproteccin
El tipo de proteccin que ejerce los crioprtectores :
depende de su permeabilidad
Son altamente hidroflicos.

Los que permean totalmente ligan agua intracelular y reducen el efecto

soluto: Me2SO, Glicerol, Metanol.

Los semipermeables forman entre la pared y la membrana celular una

capa que protege la clula del dao mecnico: mono y disacridos,
aminocidos, polmeros de bajo PM(PEG 600-1000).
Los no permeables se adsorben en la superficie celular incrementando la
viscosidad local lo cual mantiene el hielo en forma amorfa evitando dao
mecnico: Polmeros de alto PM (protenas, polisacridos).
 Conservacin por liofilizacin.
Es el mtodo ms adecuado para la preservacin de microorganismos.
Tcnica involucra el congelamiento de un cultivo seguido por un secado al vaco, lo cual
resulta en la sublimacin de agua de la suspensin celular.
La liofilizacin es apropiada para la conservacin de la mayora de las bacterias, esporas,
actinomicetos, hongos y levaduras.
Las Gram + sobreviven mejor que las Gram -.
No es adecuada para clulas animales, algas y hongos en fase de micelio.
 Conservacin por liofilizacin.
Este proceso consta de tres etapas, la pre congelacin del producto para asegurar una estructura
completamente congelada; el secado primario con el que se elimina la mayor parte del agua por
sublimacin; y el secado secundario con el que se remueve el agua que queda ligada. En las clulas
conservadas por este mtodo no hay crecimiento puesto que la actividad de agua es cero igual que en la
congelacin pero a diferencia de la primera, los lifilos no tienen agua en el medio debido a la sublimacin.
Desecacin en suelo, arena, silicagel.
Se aaden las clulas a estos sustratos que las protegern al desecar. Los microorganismos
productores de esporas se pueden conservar durante bastante tiempo por este mtodo
Conservacin por
transferencia peridica o
subcultivo.
Es un mtodo en el que los organismos permanecen
activos durante el proceso. Consiste en la inoculacin
de microorganismos en un medio de cultivo
adecuado,la incubain a una T adecuada para obtener
crecimiento y finalmente el almacenamiento bajo unas
condiciones adecuadas. El proceso es repetido a
intervalos que garanticen la obtencin de un cultivo
fresco antes de la prdida del viejo.
 Conservacin por suspensin en agua
destilada o en agua de mar estril.
Es un mtodo alternativo muy usado y que da altos porcentajes de viabilidad
en diversos tipos de microorganismos, tanto hongos filamentosos como en
levaduras y algunas bacterias.
Consiste en suspender en agua estril unas cuantas clulas o esporas del
cultivo que se quiere conservar.
Para los hongos filamentosos que no esporulan, se puede poner en
suspensin pedazos pequeos de agar con el crecimiento del hongo.
En el caso de microorganismos marinos, la suspensin se hace en agua de
mar diluida.
Pueden durar hasta 1 ao.
Desecacin en sal gorda para halobacterias.
Para su conservacin por este mtodo se mezclan las clulas con sal y se dejan
desecar espontneamente. Debido a la higroscopicidad de la sal, la desecacin no es
total, pero las clulas dejan de multiplicarse por ser insuficiente el nivel de agua
disponible. La desecacin es un mtodo simple para la preservacin de
microorganismos, el trabajo no es muy intenso, el costo es pequeo y la contaminacin
de los subcultivos es menos probable que con los subcultivos peridicos. Adems,
puede utilizarse para el almacenamiento de un gran nmero de cultivos.
 Comparacin de algunos mtodos de
preservacin
Almacenamiento
Mtodo Ventajas Desventajas
(aos)
Secado del agar, baja
Simple, bajo costo,
Agar 0.5-2 estabilidad gentica, riesgo
equipamiento requerido bajo
contaminacin
bajo costo, equipamiento trabajo moderado, baja
Aceite mineral 2-20
requerido bajo estabilidad gentica

Equipamiento requerido bajo, Requiere protectores, Alto

Congelamiento 4-5
buena estabilidad gentica costo de freezer (-80C).

Preparacin rpida, buena Suministro regular de N

N lquido infinito
estabilidad gentica lquido, Alto costo
Bajo riesgo de contaminacin,
Liofilizacin 15-20 buena a regular estabilidad Alto costo de equipamiento
gentica
Simple , bajo costo, bajo
Agua 1-5 Estabilidad gentica regular
equipamiento requerido
Simple , bajo costo, bajo
L-drying 3-10 estabilidad gentica?
equipamiento requerido
 Bibliografa
Floccari M. Mtodos de conservacin de cultivos bacterianos. Rev Argen
Microbiol, 30, 42-51, 2000.
Garca, M. D.; F. Uruburu: La conservacin de cepas microbianas. Coleccin
Microbiana de Cultivos Tipo (CECT) Universidad de Valencia, Act SEM 2000;
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