Universidad Nacional Mayor de San

Marcos
Facultas de Farmacia y Bioqumica
Escuela de Farmacia y Bioqumica
QUMICA ORGNICA II
INTEGRANTES:

- Karen Kheyd, Chvez Dvila.
- Arnaldo Joseph, Navarro Soto.
- Carlos Alberto, Carreal Gmez.
- Richard Kevin, Guerra Caballero.

PROFESOR: Csar Mximo, Fuertes Ruiton.

LUGAR DE LA RECOLECCION DE
LAS MUESTRAS
Playas de Ancn (Lima Per),exactamente
en una lugar llamado por sus pobladores
como Playa los descalzos encontrado en
esta zona una variedad de animales marinos
, sobre todo de invertebrados.
CARACTERISTICAS DE LAS MUESTRAS

Stichaster Striatus ( estrella de mar)
Familia: stichasteridae
Clase :asteroidea.
Phymactis papillosa (anmona de mar)
Familia: actiniidae.
Clase : anthozoa
Tetrapygus niger (erizo de mar)
Familia : equinodermos.
Clase : equinoideos
PARTE EXPERIMENTAL:

INVERTEBRADO: Phymactis papillosa (Anemona de mar) y
Tetrapigus niger (erizo de mar)
1. PESADO DE LAS ANMONAS Y ERIZOS DE MAR :
18 anmonas de mar y 33 erizos de mar
2. SECADO :
Porcentaje de humedad: 78,64%
(anmona), porcentaje de
humedad (erizo): 85 %

PULVERIZADO DE LA MUESTRA
Una vez secada la muestra de estrellas de mar , se trituro
manualmente y se pulverizo usando un mortero ,
convirtindolo hasta polvo (toda la muestra).
Anmona de mar
Estrella de mar
Erizo de mar
MACERADO DE LA MUESTRA
Se dej reposar por una semana la muestra del pulverizado de la
muestra, extrayendo los metabolitos que son afines en polaridad
al solvente, estando entre estos los alcaloides
IDENTIFICACION DE ALCALOIDES
ESTRELL
A DE
MAR
ANEMO
NA DE
MAR
ERIZO DE
MAR
Cromatografa en capa fina
silica gel.
Fase mvil:
cloroformo/metanol
(3ml:1,5ml).

Anemona>Estrella> Erizo
Se uso reactivo de
dragendorff.
AISLAMIENTO DE ALCALOIDES EN
ANEMONA DE MAR
El extracto etanlico se
acidulo con HCl
concentrado obteniendo el
clorhidrato del alcaloide y
luego se llevo a la pera de
bromo .
La fase acuosa se alcaliniz
con NaCO3, luego se lavo
con cloroformo
consecutivamente 3 veces
obteniendo finalmente el
alcaloide puro.
1. PESADO DE LAS ESTRELLAS DE MAR :
Peso : 1247g
2. SECADO :
Peso despus del secado:387,2 g
Porcentaje de humedad igual a
68,95%.

19 estrellas de mar (stichaster striatus)
Se extrajo 1g de la muestra de
estrella mar y se disolvi con
una cierta cantidad de
cloroformo en un tubo de ensayo,
luego se procedi a agitarlo
fuertemente y constantemente
durante varios minutos , a final
dio como resultado espuma que
se mantuvo durante 1 minuto.
Prueba de ndice afrosimtrico
MACERADO DE LA MUESTRA:
Se macer 100g de la muestra
en 200ml de etanol, dejndolo
as durante una semana ,
agitndolo cada 24 horas para
que el solvente extraiga los
metabolitos de la muestra (
saponinas ).
FILTRADO DEL MACERADO
se hizo el filtrado del extracto
etanlico obteniendo 130ml.
Se extrajo 10ml del extracto
etanlico en un beaker y se
evaporo en bao maria.
1 gramo y lo colocamos en un
tubo de ensayo y le agregamos
6ml a 10 ml de agua y se
procedi a hacer la prueba de
espuma nuevamente, dando
resultados positivos.
COMPROBACION DE SAPONINAS EN CROMATOGRAFIA EN CAPA
FINA
Se prepar el revelador : Reactivo de vainillina , para la comprobacin de saponinas.
Fase estacionaria: placa silica gel
Se hizo 3 cromatografias en capa fina con diferentes sistemas de solventes:
Fase mvil A: Fase mvil B : Fase mvil C:
(n-butanol; cido actico; agua) (Acetato de etilo ; metanol; agua (2ml de acetato de etilo
(7:1:2) y acido actico) (7.5:2 : 0.3:0.2) +4 gotas de metanol)
Cada placa fue
revelada con el reactivo
de vainillina usando el
atomizador , los
resultados dieron
positivo con la fase
mvil A , donde se
hall presencia de
saponinas en lugar del
sembrado con el
extracto etanlico.
Sembrado de las muestras
AISLAMIENTO DE SAPONINAS:
Se prepar la cromatografa en columna
donde se uso:
- Kieselgel 0.2 0.5 mm (30 70 mesL
ASTM), (Silica gel para cromatografa
en columna)
-Lana de vidrio.
b)Se pes la silica gel ( en polvo) siendo
su peso 15,4 g.
se prepar el sistema de solventes
n-butanol , cido actico y agua
(7:2.1) . Total: 100ml.
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
Se us 79 viales donde
cada vial tuvo
aproximadamente 0.5ml de
la muestra de saponinas
aislada en el proceso del
goteo.

Obtencion de l
aislamiento.
IR
PARTE EXPERIMENTAL
INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Se han propuesto muchas reacciones de color par
detectar la presencia de estos compuestos, siendo los
mas usuales: la reaccin de Liebermann Burchard.
PROCEDIMIENTO:

Muestra problema pocas gotas de HOAc 3 ml de Ac2O/H2SO4 (50:1)
Las saponinas triterpenoide dan color rosado
o purpura, mientras que las saponinas
esteroidales dan azul-verdoso
PARTE EXPERIMENTAL
INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Prueba de hemlisis
Se aplic una
gota de sangre
Luego de adicionar una gota
de sangre se coloc una gota
de saponina
PARTE EXPERIMENTAL
INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
ndice Hemoltico
MATERIALES :
-Centrifuga, micropipeta , fiola ,
pipeta ,sangre humana, tubos de
ensayo y suero fisiolgico.
Centrifugado
por 15 minutos
Se agrega los
elementos formes
separado del
plasma a la
fiola.
Se enrasa con suero
fisiolgico 9% hasta
aprox. 100ml. Se agrega la M.S y M.E a los tubos en
cantidades de 0.1,0.2,... Hasta 1ml,
luego se completa hasta 5ml con la
solucin de la fiola. En total fueron 10
tubos para la M.E y 10 tubos para la
M.S
RESULTADOS:

INVERTEBRADOS: Tetrapygus niger (erizo de mar), Phymactis
papillosa (Anemona de mar) y Stichaster striatus (estrella de mar)

Anmona de mar
Erizo de
mar
Estrella de mar
RESULTADOS:

INVERTEBRADO: Phymactis papillosa (Anemona de mar)
Extracto
clorofrmico
Extracto
etanlico
Mancha naranja, obtenida
despus del aislamiento
RESULTADOS:

INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Prueba de
espuma
CCF con el reactivo de
vainillina sulfrica
Prueba de
cromatografa en
columna
Extracto
clorofrmico
Extracto
etanlico
Siembra a
partir de los
viales con
saponina
Espuma estable por
ms de 5 minutos
RESULTADOS:

INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Prueba de Liebermann-Burchard
Se observ que en el orificio A
cambi de coloracin a un
rojizo tenue evidenciando que
la muestra posee saponinas de
tipo triterpenoide
A B
C
RESULTADOS:

INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Prueba de hemlisis
Una gota de
sangre
diluida
Una gota de
sangre
diluida
Saponina
estndar
Saponina de
la estrella de
mar
Una gota de
sangre
diluida sin
saponina
RESULTADOS:
INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
ndice Hemoltico
Actividad
Biolgica
Muestra estndar , con
resultado positivo.
0,1; 0,2; 0,3;0,4; 0,5;0,6;0,7;0,8;0,9 ;1ml
0,1;0,2;0,3;0,4;0,5;0,6;0,7;0,8;0,9; 1ml
La muestra de las saponinas que contena
0.1g de nuestro muestra seca ms 10ml de
suero fisiolgico.
1 2 3 4 ....
A partir del tubo 4 de la M.S , los tubos
restantes mostraron hemolisis de la sangre
iguales que en la muestra estndar, tenan
coloreado de rojo (liberacin de la Hb).Por
tanto se considera un resultado positivo.
Tubo de ensayo numero 4
En esta imagen se muestra 2 tubos ( el de
0,1ml y el 0,2 ml) y se nota los eritrocitos
que han sedimentado , ya que la muestra
de saponinas en esos tubos se llenaron con
una concentracin baja , parecindose a la
muestra en blanco. Se concluye que en
nuestra muestra de saponinas a mayor
concentracin a un volumen determinado
en los tubos surge la hemolisis .
En el tubo 1 ,
cuyo contenido
es de 0,1ml de
M.S ; se observa
los eritrocitos
que no han sido
afectados y han
precipitados.
En el tubo 2, cuyo
contenido es de
0,2,ml de M.S , la
coloracin ha
aumentado ,debido
a la concentracin
de M.S.
Esta imagen
pertenece a la
muestra
estndar ,
muestra pura
de saponinas,
donde la M.E.
reacciono con
toda las
saponinas.
Clculos: ndice Hemoltico
0,1g saponina MP ------------------> 10ml suero fisiolgico

X ------------------> 0,4 ml

X= 0,004 g

0,004 g ------------------> 5 ml

1 g ------------------> X

X = 1250,00 (I.H)
RESULTADOS:
INVERTEBRADO: Stichaster striatus (estrella de mar)
Espectroscopia
Infrarroja (IR)
Se presume que
entre las seales
1385-1380 cm -1
se encuentra el
gen dimetil
Este pico
demuestra el
grupo -OH
Discusiones
Aislamiento
de
saponinas
Cromatografa en
columna: teora
de platos tericos.
Desplazamiento
(elucin) con
eventual
separacin de
constituyentes
Discusiones
Actividad hemoltica: interaccin entre saponina y
membrana de eritrocito (lisis)
HEMLIS
IS
Discusiones
Alcaloides son los nicos metabolitos que pueden
pasar de medio cido a bsico y reestablecer su
estructura
Sales
(clorhidratos)
Alcaloides
Discusiones

SAPONINA ESTEROIDAL
Absorciones del
espiroacetal (4 bandas)
entre 800 y 1000 cm
-1

SAPONINA
TRITERPENOIDE
Grupo gem(1380 cm
-1
)

Conclusiones

% humedad: (erizo>anmona>estrella de mar)
CCF con Rvo Dragendorff : resultado
positivo.

Solventes utilizados: para saponinas: (n-butanol, ac.
acetico y agua), para macerado (etanol y cloroformo)

Conclusiones
Identificacin
de saponinas
ndice
afrosimtrico
Ensayo de
Lieberman-
Bouchman
Espectroscopa
IR
Cromatografa
en columna
Conclusiones
Comprobacin de actividad hemoltica,
caracterstico de las saponinas, lo que indica que
este animal tiene compuestos muy prometedores
para el mbito farmacutico y a nivel de industria.