Rev. Fac. Agron. (Maracay) 33:165- 178.

2007

Utilizacin de inulina y carragenina en la elaboracin de salchichas de carne bajas en grasa

Daniel E. Ruiz Martnez* Emperatriz Pacheco-Delahaye*

ABSTRACT
Two formulations of low fat pig sausages were elaborated in fatty type Wieners, by means of the use of substitutes of fat: 3.5% inulina and 1.08% caragenan. When evaluating the nutritional composition of the formulated sausages, it was found that all of them fulfilled the chemical requirements of proteins, fat, ashes and humidity, established in the Norma Covenin 412:1995. The results showed contents of protein of 13.28% in the sausage with inulina compared with 12.02% in the control; as for the content of fat, the sausage with inulina do have a low percentage (4.46%), that makes it attractive for special diet regime. The color demonstrated values of red (a*) higher in the sausage with inulina. In the microbiological evaluation, it was appreciated the absence of Escherichia coli and total coniformes, the psicrotrofos turned out to be smaller to the inferior limit pointed out by the Norma Covenin 412:1995. About the sensorial evaluation preferences went for the sausage control and that of inulina. The results demonstrate that it is possible to obtain foods of high consumption with low contains of fat, using inulina or carragenina like hidrocoloide, maintaining the sensorial characteristics. Key words: Caragenan, inulin, low-fat sausages
Aceptado: 2007 * Laboratorio de Bioqumica de Alimentos del Instituto de Qumica y Tecnologa, de la Facultad de Agronoma de la Universidad Central de Venezuela, Maracay, estado Aragua, Venezuela. Cdigo Postal 2105. e-mail: Olivier@telcel.net.ve

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COMPENDIO
Se elaboraron dos formulaciones de salchichas de cerdo bajas en grasa tipo Wieners, por medio de la utilizacin de sustitutos de grasa: 3.5% de inulina y 1.08% de carragenina. Al evaluar la composicin nutricional de las salchichas formuladas, se encontr que todas cumplieron con los requisitos qumicos de protenas, grasa, cenizas y humedad, sealados en la Norma Covenin 412:1995, en tal sentido, los resultados arrojaron contenidos de protena de 13.28% en la salchicha con inulina comparado con 12.02% en el control; en cuanto al contenido de grasa destaca la salchicha con inulina con un bajo porcentaje (4.46%), lo cual la hace atractiva para regmenes de dietas especiales. El anlisis del color demostr valores de rojo (a*) ms altos en la salchicha con inulina. En la evaluacin microbiolgica, se apreci la ausencia de Escherichia coli y coniformes totales, los psicrotrofos resultaron ser menores al lmite inferior sealado por la Norma Covenin 412:1995. En la evaluacin sensorial se destacaron preferencias por la salchicha control y la de inulina. Los resultados demuestran que es posible obtener alimentos de alto consumo con bajos contenidos de grasa empleando inulina o carragenina como hidrocoloides, manteniendo las caractersticas sensoriales. Palabras clave: carragenina, inulina, salchichas bajas en grasa

INTRODUCCIN
En la actualidad, el procesamiento de la carne y de los productos crnicos est siendo orientado hacia el desarrollo de productos bajos en grasa. Estos, denominados light son percibidos por los consumidores como saludables con caractersticas organolpticas muy aceptables y relativamente econmicos (Yang et al., 2001). El desarrollo de productos reducidos en grasa, no puede basarse en una simple remocin de la misma, ya que esta provee suculencia, textura y sabor, lo cual puede ser alterado por la falta de dicho constituyente, adems es fuente de vitaminas y cidos grasos esenciales, sin embargo, el consumo de grasas saturadas est asociado al incremento del riesgo de padecer obesidad, algunos tipos de cncer, alto colesterol sanguneo y enfermedades cardiovasculares (Steenblock et al., 2001; Sangnark y Noomhorm, 2003).

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Una gran variedad de mtodos han sido propuestos para reducir el contenido de grasa en crnicos sin afectar substancialmente la textura: uso de materiales crudos bajos en grasa, adicin de agua, sustitutos y mimticos de grasa (Chin et al., 2000). En productos crnicos, muchos de esos ingredientes y un nmero de protenas, carbohidratos entre otros aditivos, han sido estudiados (Mendoza et al., 2001). Gran parte de los reemplazantes se usan en muy bajas cantidades, lo cual es muy importante, ya que es bien conocido que productos bajos en grasas y fibra se han asociado con la reduccin del riesgo de sufrir cncer de coln, obesidad y enfermedades cardiovasculares (Garca et al., 2000). La inulina, es una fibra soluble dietaria compuesta por una mezcla de polmeros de fructosa extrados de plantas con un rango de polimerizacin desde 2 a 60, ha sido empleada con frecuencia como sustituto de grasa, debido a que mejora la palatabilidad, resalta el sabor y disminuye el valor calrico (1.0 kcal/g) (Izzo y Franck, 1998). Asimismo, la carragenina es otro hidrocoloide que puede tener mayor funcionalidad que otras gomas, y es posible obtener productos crnicos bajos en grasa y textura aceptable (Barbutt y Mittal, 1996). Cuando la carragenina fue utilizada a un nivel de 0.5% en carnes con 8% de grasa, las caractersticas sensoriales fueron similares a hamburguesas con 20% de grasa (Troy et al., 1999). En vista de lo sealado anteriormente, y considerando que en Venezuela el consumo de productos crnicos tipo salchicha, se ha incrementado en los ltimos aos, debido al bajo costo, los objetivos de la presente investigacin fueron caracterizar salchichas bajas en grasa empleando los mimticos de grasa, la inulina y carragenina por medio de una evaluacin de las propiedades fsicas, qumicas, sensoriales y microbiolgicas.

MATERIALES Y MTODOS
Materiales Para la elaboracin de las salchichas de cerdo tipo Wieners bajas en grasa, se utilizaron dos mimticos de grasa: inulina y carragenina. Las salchichas de carne de cerdo fueron fabricadas por la empresa Plumrose Latinoamericana C.A., ubicada en el estado Aragua, Venezuela. Las cantidades aplicadas de los sustitutos de grasa fueron las siguientes: 3.5% de inulina y 1.08% de carragenina. Las cuales fueron fijadas despus de varios ensayos, basados en la evaluacin sensorial de los expertos catadores

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de este producto industrial. Las salchichas fueron almacenadas bajo refrigeracin a 4C para estudiar los parmetros fsicos, qumicos, microbiolgicos y sensoriales. Con fines comparativos se evalu como control una salchicha de carne comercial. Elaboracin de las salchichas tipo Wieners bajas en grasa La produccin de salchichas tipo Wieners se fabricaron segn la frmula de la empresa Plumrose Latinoamericana C.A., se obtiene aplicando el siguiente proceso: Recepcin de la materia prima: la carne de cerdo que se recibe en planta proviene del matadero de la empresa, estos cortes se mantienen congelados (-18C) hasta su utilizacin. Mezclado: consiste en combinar todos los ingredientes en una mezcladora, a una velocidad y tiempo predeterminados con la finalidad de formar una pasta que posteriormente ser refinada, en esta etapa se aaden la inulina y carragenina. Refinado: a travs del uso de refinadoras se obtiene una pasta crnica con una granulometra ms fina, esto para que el producto sea ms agradable al paladar. Embutido: en esta operacin se introducen las pastas en tripas artificiales, la zona de embutido se encuentra distante de la zona de preparacin de pastas. Coccin: se efecta en un horno continuo con tratamiento trmico tiempo/temperatura que vara segn el tipo de salchicha. Enfriamiento: se enfra el producto por medio de un sistema Brine Chill donde la temperatura del agua debe estar por debajo de 0C, hasta que el producto alcance una temperatura de 2 a 4C. Empaque: en esta fase se llenan los envases flexibles. Sellado: se realiza en una mquina al vaco, quedando los envases totalmente sellados, listos para pasar al proceso de post-pasteurizacin o directamente a las cajas. Post-pasteurizacin: tratamiento trmico al que suelen ser sometidas las salchichas luego del sellado, las relaciones tiempo/temperatura son predeterminadas. Encajado: las salchichas ya empacadas son embaladas en cajas y pasan a una zona de almacenamiento refrigerado. Anlisis fsico-qumicos Se determin: cenizas, humedad, protena cruda y grasa de acuerdo a los mtodos oficiales del AOAC (1990). Color: para la medicin del color se emple un colorimetro.

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Evaluacin microbiolgica Para determinar la calidad microbiolgica de las salchichas bajas en grasa, se efectuaron anlisis de contaje de Escherichia coli y coniformes totales por la metodologa de las placas Peltrifilm, mientras que el mtodo de contaje en placas establecido por la AOAC (1990) se utiliz en la determinacin de microorganismos psicotrficos y mohos- levaduras. Estas determinaciones se efectuaron al comienzo (da uno) y al final del almacenamiento (30 das) a 4C. Los medios utilizados fueron: Agar nutritivo (microorganismos psicotrficos), Malta sal agar (mohos) y Agar extracto de levadura (levaduras). Evaluacin sensorial A fin de evidenciar la calidad organolptica de las salchichas, se realizaron pruebas de catacin, al inicio del almacenamiento, a travs de un panel no entrenado de 30 personas (en cada una de las evaluaciones) con edades comprendidas entre 18 y 30 aos, con esto se determin la salchicha de mayor preferencia y se compar con el producto comercial. A cada panelista se le suministr un modelo de planilla de evaluacin sensorial integrada por diversos atributos organolpticos (color, olor, sabor, textura, jugosidad y preferencia global). Diseo experimental Todas las variables que cumplieron con los supuestos del anlisis de varianza (normalidad de los errores, homogeneidad de varianza de los errores, aditividad de los efectos e independencia de los errores) se les realiz un anlisis de varianza y una comparacin de medias a travs de la prueba de rangos mltiples de Duncan, para ello se utiliz el programa estadstico (SAS, 1997). En las variables que no cumplieron con dichos supuestos (resultados de la evaluacin sensorial), se les practic un anlisis estadstico no paramtrico, que consisti en la prueba de Friedman.

RESULTADOS Y DISCUSIN
En el Cuadro 1, se muestran los valores promedios obtenidos de la composicin proximal de cada una de las salchichas tipo Wieners formuladas con mimticos de grasa. Para el contenido de protenas se encontraron diferencias estadsticas significativas entre todas las formulaciones,

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la salchicha con inulina obtuvo 13.28%, mientras que las que contenan carragenina exhibieron el menor contenido con 11.42%. Pietrasik y Duda (2000) elaboraron salchichas escaldadas bajas en grasa utilizando una mezcla protena de soya y carragenina en proporcin 3:1, con dicha mezcla denominada Gelpro al aplicarla en niveles de 1.5 a 3%, el producto tena un contenido proteico entre 9.0 a 10.45% que son muy cercanos al valor de 11.42% obtenido en la salchicha con carragenina. Investigadores fabricaron salchichas fermentadas secas bajas en grasa utilizando inulina, al evaluar la composicin qumica de las mismas, se encontr un contenido de protena de 12.40% en las que tenan 6% de inulina, valor que es similar al de 13.28% encontrado en las salchichas con inulina del presente trabajo (Mendoza et al., 2001). Cuadro 1. Composicin qumica de las salchichas bajas en grasa con carragenina e inulina comparadas a salchicha comercial en base hmeda
Componente g/100g Protena Grasa Ceniza Humedad Salchicha Control Salchicha con Carragenina (1.08%) 11.42 c 0.03 10.08 b 0.01 2.98 a 0.01 64.24 a 0.67 Salchicha con Inulina (3.5%) 13.28 a 0.03 4.46 c 0.23 3.14 a 0.0702 65.56 a 0.17

12.02 b 0.08 16.83 a 0.05 2.22 b 0.09 58.27 b 0.56

Letras diferentes en una misma fila denotan diferencias estadsticas significativas (p0.05)

En lo que respecta al contenido de grasa, se obtuvieron diferencias estadsticas significativas entre los tipos de formulacin, resultando ser las salchichas con inulina las de menor contenido graso (4.46%) seguidas por aquellas con carragenina (10.08%), cabe destacar que dichas formulaciones tenan un 28 y 8.5% menos de grasa que el control respectivamente, el cual mostr un 16.83% de este componente. De acuerdo con el contenido graso de las salchichas formuladas y tomando en cuenta la Norma Covenin (1995), la salchicha con inulina; es una salchicha cocida baja en grasa con una cantidad menor o igual a 6g/100 g, mientras que la salchicha con

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carragenina; es definida como el producto con grasa menor o igual a 10g/100 g de salchicha. Publicaciones sealan, salchichas fermentadas secas suplementadas con inulina (fibra diettica soluble) como sustituto de grasa, obteniendo un producto crnico con 6.6 y 6.4% de grasa, cuando la inulina fue aplicada a razn de 6.0 y 7.0%, respectivamente. Xiong et al. (1999) reportaron valores de grasa de 3.8% a 4.4% en salchichas de res bajas en grasa formuladas con 0.5% de gomas de polisacridos como carragenina, goma algarrobo y goma xanthan, dichos valores fueron ms bajos a los obtenidos en la salchicha con carragenina, pero cercanos a los encontrados en este estudio para la que tena inulina. Ahora bien, para el contenido de cenizas tambin se apreciaron diferencias estadsticas significativas entre todos los tratamientos. Para las fermentadas secas adicionadas con 6 y 7% de inulina, se han sealado valores de cenizas entre 2.7 y 3.1%, respectivamente (Mendoza et al., 2001), estos son muy cercanos a los hallados en esta investigacin en todas las salchichas analizadas, tambin son comparables a lo investigado por Barbutt y Mittal (1996), quienes obtuvieron 3% de cenizas en salchichas Frankfurt con carboximetilcelulosa. Con respecto al contenido de humedad, se apreci que las muestras con inulina fueron las de mayor porcentaje de humedad con un 65.56% siendo estadsticamente diferentes a las dems salchichas. La Norma COVENIN (1995) seala como requisito qumico para salchichas cocidas un porcentaje mximo de humedad ms grasa de 87%, en tal sentido, si se toma en consideracin el mximo de humedad obtenido en este estudio, 65.56%, el cual corresponde a la formulacin con inulina y se le suma a su respectivo contenido de grasa, 4.46%, resulta en un valor de humedad ms grasa de 70.02% que cumple con los parmetros de dicha Norma. Por su parte, Ordez et al. (2001) sealaron para salchichas tipo Frankfurt adicionadas con carragenina un porcentaje de humedad de 67.07%, mientras que Mendoza et al. (2001) resean para las fermentadas secas suplementadas con 6% de inulina un 65.70% de humedad, a pesar de que estas determinaciones no se hicieron con el tiempo, los valores son comparables a los obtenidos en el presente trabajo al inicio del almacenamiento. En lo que respecta al color, cuando se analizaron estadsticamente los resultados obtenidos de la medicin de color, el anlisis de varianza indic la presencia de diferencias significativas para cada una de las formulaciones

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evaluadas, en relacin a los valores de luminosidad (L*), rojo (a*) y amarillo (b*) a travs del tiempo de almacenamiento (Cuadro 2). Con respecto a la luminosidad se encontr que la mayora de las muestras alcanzaron valores mayores a 50, por lo tanto pueden considerarse muestras claras, la ms luminosa fue el control a los 15 das de almacenamiento con un valor de 53.52, mientras que la menos luminosa fue la salchicha con carragenina a los 21 das con 49.31, valor que tiende a ser el ms oscuro de todos los dems obtenidos. Cuadro 2. Cambios en el color de las salchichas bajas en grasa durante el primer da, 15, 21 y 30 das de almacenamiento refrigerado a 4C
Tipo de salchicha Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** L Da 1 53.30 a 50.46 c 51.03 b Da 15 53.52 a 50.85 b 50.43 b Da 21 53. 34 a 49.31 b 49.54 b Da 30 52.87 a 50.02 b 50.45 b 8.08 a 8.60 a 8.54 a 11.35 ab 10.81 b 11.18 ab 7.51 b 8.58 a 8.88 a 11.50 a 9.89 b 10.44 b 7.35 c 6.89 d 8.21 a 11.05 ab 11.09 ab 10.88 b 8.24 b 7.69 d 8.80 a 10.90 b 10.99 b 10.91 b a b

Letras diferentes en una misma columna y un mismo da de almacenamiento, indican diferencias estadsticas significativas con un nivel de significacin de 0.05%. *carragenina 1.08% **inulina 3.5%

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El parmetro a* indica que tan roja o rosada es una muestra dada de salchicha (en una escala positiva), para el primer da de almacenamiento se observa como la que tiene inulina fue la ms roja (8.80) y significativamente diferente a las dems, seguida por el control con 8.24. Para el da 15 la tendencia se mantuvo, todas presentaron una coloracin rosada estadsticamente diferente, a los 21 das las salchichas con inulina fueron nuevamente ms rojas (8.88) pero sin diferencias significativas a las muestras con carragenina, finalmente a los 30 das, la salchicha con carragenina fue la ms rosada con 8.60, siendo estadsticamente igual al control y a la salchicha con inulina, exhibiendo una tendencia a hacerse ms rosada con el tiempo de almacenamiento. Mientras, que el parmetro b* que indica la intensidad del color amarillo (escala positiva), mostr al primer da, valores estadsticamente diferentes en las formulaciones, mientras que ya a los 30 das el amarillo tendi a ser ms uniforme en todas las muestras. Mendoza et al. (2001), elaboraron salchichas bajas en grasa, a travs de una mezcla de protenas de soya y carragenatos, a dicha mezcla la denominaron GELPRO, la cual no ocasion cambios significativos en los parmetros de color (L*, a* y b*), sin embargo el color rosado mostr una tendencia importante a aumentar, pero esto fue atribuido a la disminucin del contenido de grasa, provocando una mayor exposicin de carne magra, y no a la utilizacin de la mezcla de mimticos de grasa, lo cual coincide con lo expresado por Barbutt y Mittal (1996) quienes trabajaron con salchichas tipo Frankfurt bajas en grasa, adicionadas con tres gomas de celulosa y con salchichas tipo Frankfurt reducidas en grasa aplicando 2% de maltodextrinas (Crehan et al., 2000). Esto podra explicar porque las salchichas con inulina fueron ms rojas, ya que ese tipo de salchichas obtuvo el menor porcentaje de grasa (4.46%) (Cuadro 1) y debido a la mayor exposicin de carne magra fueron ms rojas, pero no por la accin del mimtico de grasa, en este caso con inulina, esto se podra extrapolar a las dems salchichas, en ese sentido, las diferencias estadsticas significativas en el color rojo, podran tener origen en los diferentes contenidos de grasa de las salchichas elaboradas. Los productos crnicos, son alimentos ricos en protenas y grasas, por lo tanto pueden ser fcilmente atacados por microorganismos, sin se cumplen las normas bsicas de higiene y control de calidad, durante el manejo de la materia prima, procesamiento y almacenamiento del producto final, por otra parte, si la materia prima posee un elevado contenido

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microbiano el producto final tambin lo tendr, independientemente de los tratamientos trmicos aplicados. Por lo antes dicho, es vital la evaluacin microbiolgica de la materia prima y del producto final, ya que de ello depende la salud del consumidor. En el Cuadro 3, se muestran los resultados de la evaluacin microbiolgica de las salchichas bajas en grasa almacenadas en refrigeracin. Tanto en el primer da, como a los 30 das se aprecian contajes muy bajos de todos los microorganismos analizados. Para el caso de E. coli y coliformes total se apreci una ausencia de los mismos, por lo que se aplic la metodologa del Petrifilm (placas para el recuento de E. coli y coliformes totales), mientras que en las restantes determinaciones se utiliz la tcnica del contaje en placas. Cuadro 3. Resultados de la evaluacin microbiolgica de las salchichas bajas en grasa, almacenadas en refrigeracin a 4C
Tipo de salchicha Microorganismo Control Da 1 Escherichia coli (ufc/g) Coliformes totales (ufc/g) Psicrotrofos (ufc/g) Mohos (ufc/g) Levaduras (ufc/g) Escherichia coli (ufc/g) Coliformes totales (ufc/g) Psicrotrofos (ufc/g) Mohos (ufc/g) Levaduras (ufc/g) 0 0 < 1.0 x 10 < 15 < 30 Da 30 0 0 < 1.0 x 10 < 15 < 30
2 2

Carragenina (1.08%) 0 0 < 30 < 15 < 30 0 0 < 30 < 15 < 30

Inulina (3.5%) 0 0 < 30 < 15 < 30 0 0 < 30 < 15 < 30

La determinacin de psicrotrofos es muy importante en salchichas, ya que estos microorganismos son capaces de crecer a temperaturas de refrigeracin, en este anlisis se obtuvo en las salchichas con carragenina, salvado de arroz e inulina, valores menores a 30 ufc/g (das primero y 30),

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mientras que en el control se hallaron valores ligeramente ms altos, siendo menores a 1.0 x 102 (das primero y 30), sin embargo estas diferencias son poco significativas, si se toma en cuenta que las colonias contables para el caso de bacterias oscilaban entre 30 a 300, y en el control se obtuvieron menos de 100 colonias (ufc/g). La Norma Covenin (1995) para salchichas cocidas sugiere un valor mnimo de mohos de 1.0 x 102 y un mximo de 1.0 x 103, en tal sentido, en este trabajo de investigacin, todas las salchichas elaboradas presentaron en ambos tiempos de almacenamiento valores menores de 15 ufc/g. Para el caso de levaduras, dicha norma establece un mnimo de 1.0 x 104, mientras que todas las salchichas estudiadas exhibieron valores inferiores a 30 ufc/g en todo el almacenamiento. Garca et al., 2000 trabajaron con salchichas fermentadas secas suplementadas con inulina y fibras de cereales-frutas, respectivamente, obtuvieron luego de la maduracin un aumento significativo de las bacterias cido lcticas, mientras que las Enterobacteriaceas decrecieron rpidamente del valor inicial de 103 ufc/g, a valores menores que 10 ufc/g esto luego de cinco das, que son contajes microbianos bastante bajos y comparables a los obtenidos en esta investigacin, a pesar de ser salchichas tipo Wieners no maduradas. Con el objeto de evaluar la calidad organolptica de cada una de las salchichas formuladas, se realiz una evaluacin sensorial a fin de comparar la salchicha comercial alta en grasa (control) con sus similares bajas en grasa, para ello se tomaron en consideracin atributos sensoriales como: color, olor, sabor, textura, jugosidad y preferencia global, adems de una pequea encuesta, todo esto para poner de manifiesto el grado de preferencia de los catadores, en relacin a las nuevas salchichas con respecto a la comercial. En el Cuadro 4, se sealan los resultados de las pruebas sensoriales de las salchichas formuladas bajas en grasa a los siete das de almacenamiento, correspondiendo ste al grado de aceptacin de los 30 panelistas segn la escala hednica utilizada. Al efectuarse la prueba no paramtrica de Friedman para los resultados de la evaluacin sensorial de las salchichas luego de siete das de almacenamiento, se hall que no existen diferencias estadsticas significativas entre los diversos tipos de salchichas, indicando que todos los catadores, presentaron estadsticamente el mismo grado de aceptacin en cada uno de los atributos.

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Cuadro 4. Resultados de las pruebas sensoriales realizadas a las salchichas bajas en grasa a los 7 y 30 das de almacenamiento refrigerado
Atributo sensorial Color Tipo de salchicha Control Carragenina* Inulina** Control* Carragenina** Inulina** Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** Control Carragenina* Inulina** 7 das 120a 126.5a 146.5a 125.5a 131a 129a 127.5a 136.5a 138a 144a 134a 145a 127.5a 135a 144.5a 145a 128a 150.5a 30 das 130.5a 135.5a 125a 127.5a 128a 146.5a 144a 125.5a 145a 138a 150.5a 143a 124a 139.5a 127a 136.5a 127.5a 138a

Olor

Sabor Textura

Jugosidad

Preferencia global

Letras diferentes en una misma columna y un mismo da de almacenamiento, indican diferencias estadsticas significativas con un nivel de significacin de 0.05%. *carragenina 1.08% **inulina 3.5%

CONCLUSIN
Los resultados demuestran que es posible obtener salchichas donde los anlisis qumicos y microbiolgicos cumplen con las Normas de seguridad. Desde el punto de vista nutricional las salchichas son de bajo contenido de lpidos debido a los mimticos de grasa: inulina y carragenina que permiten mantener las caractersticas sensoriales; considerando que las salchichas de carne son alimentos de consumo masivo y que una de las principales causas de muerte son las enfermedades coronarias, bajar el contenido de grasa animal en las salchichas de carne de cerdo podra ser atractivo para personas con regmenes alimenticios especiales.

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AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen el financiamiento del CDCH-UCV al proyecto 0137447-02, la colaboracin de la Tcnico Gloria Pinto y al Proyecto Alma Mater (CNU).

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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