Asignatura

Análisis Instrumental
ICQ166 - ICQ302

Cledir Santos

UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA
Departamento de Ciencias Química
y Recursos Naturales
Cuando uno acerca la mano a una llama puede "sentir" el calor que se emite por
el fuego, pero lo que está sucediendo?...
 Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja

La radiación infrarroja fue descubierta en 1800

por William Herschel.

William Herschel fue un músico y astrónomo,

reconocido internacionalmente, quien descubrió
el planeta Urano.

William Herschel, en sus investigaciones, quería

saber si cualquier color particular, se asociaba al
calor de la luz solar. William Herschel
 Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja

En 1835 Ampere demostró que la única

diferencia entre la luz y lo que él
denominaba "radiación infrarroja" era su
longitud de onda.

André-Marie Ampère

A continuación, en 1864 James Maxwell escribió

"Esta velocidad (de la fuerza electromagnética) es
tan cerca de la luz que podríamos concluir que la
luz por ella misma (incluyendo el calor radiante y
otras radiaciones) es una perturbación
electromagnética en forma de ondas que se
propagan a través del campo electromagnético de
acuerdo con leyes electromagnéticas ".
James Clerk Maxwell
Cuando uno acerca la mano a una llama puede "sentir" el calor que se emite por
el fuego, pero lo que está sucediendo?...

El fuego produce la luz y la radiación infrarroja (IR).

En un incendio la mayor parte de la radiación emitida es infrarrojo cercano (NIR).
Parte de la radiación NIR es absorbida por las moléculas de agua en la piel. Esto
eleva la temperatura del agua y resulta en un aumento de temperatura en el
tejido circundante que es detectada por los nervios en la piel.
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:

Las ondas electromagnéticas estás constituidas por una onda

eléctrica y una onda magnética.

Cada onda electromagnética posee un valor de energía (E),

así como de frecuencia (ν), longitud de onda (λ) y un número
~
de onda (ν); los que se relacionan entre sí a través de las
siguiente expresión:

constante de Planck: h
velocidad de una energía electromagnética: c
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:

ET = Etrans + Erot + Evibr + Eelectr

Etrans = Energía de translación: Es la energía cinética que posee una molécula
debido a su movimiento de translación en el espacio.

Erot = Energía de rotación: Es la energía cinética que posee debido a la rotación

alrededor de sus ejes que convergen en su centro de masa.

Evibr = Energía de vibración: Es la energía potencial y la energía cinética que posee

debido al movimiento vibracional de sus enlaces.

Eelectr = Energía electrónica: Es la energía potencial y energía cinética de sus

electrones.
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja
La espectroscopía infrarrojo es una técnica antigua usada para la
identificación molecular a través de la detección de los enlaces covalentes en las
moléculas.
La radiación infrarroja es originada desde una emisión térmica en una
fuente de calor y es generalmente especificada por “número de onda” (número de
ondas por centímetro) denotado por ‘‘ν’’ (nu) y expreso por la unidad cm-1.
 Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja
La radiación infrarroja se extiende entre 10 - 10.000 cm-1. Esa radiación es divida
en: infrarrojo cercano/próximo (“near”, NIR, ν = 4000 – 10.000 cm-1), medio
(“middle”, MIR, ν = 200 e 4000 cm-1) y lejano (“far”, FIR, ν = 10 - 200 cm-1)

Santos, C. Fraga, M.F., Kozakiewicz, Z., Lima, N. (2010) Fourier transform infrared as a powerful technique for the
identification and characterization of filamentous fungi and yeasts. Res. Microbiol. 161, 168-175.
FT-IR y FT-NIR: Espectros

FT-IR Spectrum of lactose

FT-NIR Spectra of lactose

Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones

A grandes rasgos, las vibraciones pueden ser de dos tipos:

estiramiento y flexión:

Vibración de estiramiento
(Alta energía)

Vibración de flexión
(Baja energía)
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones

Las vibraciones de estiramiento son aquellas en las

que los átomos de un enlace oscilan alargando y
acortando la distancia del mismo sin modificar el eje ni
el ángulo de enlace:
Vibración de estiramiento
(Alta energía)
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones

Las vibraciones de flexión son aquellas que modifican

continuamente el ángulo de enlace:

Vibración de flexión
(Baja energía)
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones

Vibraciones de flexión en el plano y fuera del plano:

+ + + -

Balanceo Torsión

+, - = vibraciones perpendiculares al plano del papel.

Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones
Fundamentos de la Espectroscopía Infrarroja:
Tipos de Vibraciones

2-hexanona

Las vibraciones de una molécula de 2-hexanona no están, por supuesto, limitadas al

simple estiramiento del enlace carbonilo.

Los diversos enlaces carbono-carbono también se estiran y doblan, al igual que los
enlaces carbono-hidrógeno, y todos estos modos de vibración también absorben
diferentes frecuencias de luz infrarroja.
Centrar los análisis en esta región. Aquí es Región de huella dactilar:
donde aparecen la mayoría de las frecuencias compleja y difícil de interpretar
de estiramiento. de forma confiable.
NOTAS IMPORTANTES:

1 -» La vibración de estiramiento requiere más energía que la vibración de

flexión. Por lo tanto, las absorciones de los enlaces que sufren vibración de
estiramiento requiere radiación de longitud de onda más corta (alta
frecuencia) que los enlaces que presentan vibración de flexión.
NOTAS IMPORTANTES:

2 -» Los enlaces dobles y triples requieren progresivamente mayor energía

para la excitación vibracional. Por lo tanto, en una u otra vibración de
estiramiento o de flexión, C≡C absorbe radiación en frecuencias más altas
que C=C, que por su vez absorbe radiación en frecuencias más altas que
C-C.
NOTAS IMPORTANTES:

3 -» Mientras mayor es la masa de un sistema, más pequeña es la energía

requerida para causar excitación vibracional y, por ende, más pequeña es
la energía de radiación necesaria. Por lo tanto, los estiramientos C-O > C-C
ocurren en frecuencias de energías más bajas que O-H y C-H . De forma
similar, el estiramiento O-D debe ocurrir a frecuencias más bajas que el
estiramiento O-H.
Espectro de infrarrojo
Los fundamentos de la espectroscopia infrarroja ascienden a partir de la observación
de que los diferentes grupos funcionales tienen diferentes frecuencias de absorción
características.
En una cetona, el enlace de carbonilo se absorbe típicamente en el rango de 1750 -
1650 cm-1, dependiendo de la molécula. El triple enlace carbono-carbono de un
alquino, por otra parte, absorbe en el rango 2150 - 2075 cm-1.
Espectro de infrarrojo
La técnica es, por lo tanto, muy útil como medio para identificar qué grupos
funcionales están presentes en una molécula de interés.

Si pasarnos la luz infrarroja a través de una muestra desconocida y descubrirnos que

se absorbe en el rango de frecuencia de carbonilo pero no en el rango de alquino,
podemos entonces inferir que la molécula contiene un grupo carbonilo pero no un
alquino.
Alquenos
=C-H Vibración de estiramiento ocurre a 3300-3000 cm-1.

C=C Vibración de estiramiento, en la región de 1675-1600 cm-1, a menudo son

bandas débiles.
Alquinos

≡C-H Vibración de estiramiento ocurre alrededor de los 3300 cm-1

C≡C Vibración de estiramiento cerca de 2150 cm-1

Espectro de infrarrojo

…¡PERO!...

Algunos tipos de vibraciones son inactivas en infrarrojos. Las vibraciones de

estiramiento de enlaces dobles y triples completamente simétricos, por ejemplo,
no dan como resultado un cambio en el momento dipolar y, por lo tanto, no
producen ninguna absorción de luz (pero otros enlaces y modos vibratorios en
estas moléculas sí absorben la luz IR).
Aromáticos
=C-H La absorción por estiramiento es a la izquierda de 3000 cm-1.

C-H Flexión fuera del plano en la región de 900-690 cm-1, este tipo de absorción
permite determinar el tipo de sustitución en el anillo. Consultar tabla.

C=C Absorciones en pares a 1600 cm-1 y 1400 cm-1 -> Son características del anillo
aromático: C=C aromatic 1600-1400 cm-1 weak.

Espectro de IR del tolueno:

Aromáticos
Alcoholes
O-H Vibración de estiramiento. Para un alcohol es una banda intensa y ancha en la
región de 3700-3000 cm-1. Un alcohol de bajo peso molecular produce una banda
aguda en 3640-3610 cm-1.

C-O Vibración de estiramiento localizada en 1100-1000 cm-1.

Espectro de IR del 2-butanol:

Aminas
N-H Bandas de estiramiento en la zona de 3500-3300 cm-1.
Las aminas primarias tienen dos bandas.
Las aminas secundarias tienen una banda, a menudo débil.
Las aminas terciarias no tienen banda de estiramiento N-H.
C-N La banda de estiramiento es débil y se observa en la zona de 1350-1000 cm-1.
N-H Banda de flexión en el plano (tijera) se observa en la zona de 1640-1560 cm-1,
banda ancha.
N-H Banda de flexión fuera del plano, que se observa en la zona de 650-900 cm-1.
Espectro de IR de la sec-butilamina:
Compuestos carbonílicos
Los aldehídos, las cetonas, los ácidos carboxílicos y sus derivados, dan la banda del
grupo carbonilo, este grupo es uno de los que absorben con una alta intensidad en la
región del infrarrojo en la zona de 1850-1650 cm-1.
Aldehídos
C=O Banda de estiramiento en 1725 cm-1.

C-H Banda de estiramiento del hidrógeno aldehídico en 2850 cm-1 y 2750 cm-1.

Espectro de IR del n-butiraldehído:

Cetonas
C=O Banda de estiramiento aproximadamente a 1715 cm-1.

Espectro de IR de la 2-butanona:

Estiramiento C-H
Ácidos orgânicos/carboxílicos
O-H Banda de estiramiento, generalmente muy ancha (debido a la asociación por
puente de hidrógeno) en la zona de 3000- 2500 cm-1. A menudo interfiere con la
absorción del C-H.

C=O Banda de estiramiento, ancha, en la zona de 1730-1700 cm-1.

C-O Banda de estiramiento, fuerte, en la zona de 1320-1210 cm-1.

Espectro de IR del ácido propiónico:

 Ésteres
C=O Banda de estiramiento cercana a 1735 cm-1.

C-O Banda de estiramiento, aparecen dos bandas o más, una más fuerte que las
otras, en la zona de 1300-1000 cm-1.

C-H banda intensa en 2981 cm-1.

Espectro de IR del acetato de etilo:
Éteres
Tensión C-O: 1300-1100 cm−1
Hibridación sp3 C-H: 2850-3000 cm−1
Los dialquil éteres (R-O-R) presentan una banda a 1120 cm−1
Los alquil vinil éteres (CH2=CH−O−R) presentan dos bandas a 1220 y 850 cm−1. Esta
última muy débil.
Los aril alquil éteres (Ar-O-R) presentan dos bandas a 1250 y 1040 cm−1.
Bandas en un espectro infrarrojo
Bandas en un espectro infrarrojo
Ejercicio 1:
Las dos moléculas a continuación son isómeros. Una de ellas es un éter, la otra es un
alcohol. Indique cual de las dos es un achol y justifique su respuesta.

Molécula A – PM = 46.07 g/mol Molécula B – PM = 46.07 g/mol

Ejercicio 2:
Los espectros A y B a continuación corresponden a las moléculas de un aldehído y
de un alcohol. Indique cual espectro corresponde a cada molécula y justifique su
respuesta.

B
Espectro de Infrarrojo de Alcoholes
La característica más destacada del espectro infrarrojo de un alcohol con hidroxilo involucrado
en el enlace de hidrógeno, la especie que nos presenta con mayor frecuencia, es una banda
ancha y fuerte, en la región de 3700 - 3000 cm-1, debido a la distensión de O-H.

C – H 2.991 cm-1
(estiramiento)

Estiramiento C = C en 1.664 cm-1

Estiramiento O – H en 3.350 cm-1

“Rocking” (balanceo) = C – H en 921 cm-1

But-3-en-2-ol
Espectro de Infrarrojo en otros grupos funcionales

Butan-2-ona

Butanal
C – H alifático -» Intensidad de absorción: de fuerte a medio

C – H 2.991 cm-1
(estiramiento)

C = O 1.715 cm-1 (estiramiento)

Si se sospecha que un compuesto es una cetona, hay que observar el espectro y
verificar la existencia de una banda alrededor de 1.715 cm-1 -» Estiramiento C=O.

Estiramiento C=O en:

Cetonas alifáticas: 1.715 cm-1
Cetonas alfa y beta-insaturadas 1.685-1.666 cm-1
Butan-2-ona
Si se sospecha que un compuesto es un aldehído, hay que observar el espectro y
verificar la existencia de una banda alrededor de 2850 cm-1 y 2750 cm-1.
-» Estiramiento H–C=O (que generalmente aparece como una banda con un
“hombro”).
Estiramiento C=O en:
Aldehídos alifáticos: 1740-1720 cm-1
Aldehídos alfa y beta-insaturados
1710-1685 cm-1
Estiramiento H–C=O: Butanal
2.830–2.695 cm-1
Oxidación de alcoholes primarios
Aplicaciones del Infrarrojo
Artículo: Spectroscopy as a tool for detection and monitoring of Coronavirus (COVID-19)
Expert Rev Mol Diagn. 2020 : 1–3.

Fuente: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7256345/
 Aplicaciones del Infrarrojo

The objectives of this study

were to evaluate the
Letters in Applied Microbiology 2004, 39, 148–155

feasibility of visible and

short-wavelength near-
infrared (SW-NIR) diffuse
reflectance spectroscopy
(600–1100 nm) to quantify
the microbial loads in
chicken breast muscle and
to develop
a rapid methodology for
monitoring the onset of
spoilage.
 Aplicaciones del Infrarrojo
Letters in Applied Microbiology 2004, 39, 148–155

The first PLS calibration loading of chicken

breast (Fig. 6) represents primarily protein
functional group, such as R-CO-NH2, R-NH2, R-
CO-NH-R and R-NH-R, with absorption band in
the region of 1000–1060 nm.
Letters in Applied Microbiology 2004, 39, 148–155
Aplicaciones del Infrarrojo
Aplicaciones del Infrarrojo

Figure 4 Fourier transform

infrared (FT-IR) spectrum of (a)
Chem-AgNPs, (b) Bio-AgNPs
synthesized by Penicillium
chrysogenum MUM 97.19 and
(c) Bio-AgNPs synthesized by
Aspergillus oryzae MUM
03.22.
Tarea (Grupo):

Leer los artículos enviados por correo para posterior conversa en la clase.

Reglas:

1. Deben ponerse de acuerdo para formar los grupos.

2. Los grupos serán los siguientes:

Grupo 1: Artículo “Arrieta et al. 2015”.

Grupo 2: Artículo “Castorena-García et al. 2011”.
Grupo 3: Artículo “González et al. 2013”.
Grupo 4: Artículo “Iturbe et al. 2013”.
Grupo 5: Artículo “Mendoza et al. 2011”.

3. Tendrán 20 minutos para leer los artículos. Deben enfocar la lectura en el

resumen del artículo; en la metodología y resultados específicamente en las
partes que hablan de infrarrojo.

4. Después de haber leído los artículos, indicar durante la clase en qué fue útil
la técnica de infrarrojo en cada artículo y justificar respuesta.
No es necesario hacer presentación ppt. Basta indicar la información hablando.
Espectro de Infrarrojo de Hidrocarburos
En hidrocarburos, las bandas debidas a la tensión de los enlaces carbono-carbono pueden
aparecer a aproximadamente 1500 y 1600 cm-1 para enlaces aromáticos, a 1650 cm-1 para
enlaces dobles (desplazados a 1600 cm-1 si hay conjugación) y a 2010 cm-1 para enlaces
triples. Sin embargo, esas bandas a menudo no son confiables.

Tensión =C-H: 3100 cm-1; Tensión -C=C-: 1600 y 1475 cm-1; Flexión =C-H (fuera del plano): 900-690 cm-1

Flexión fuera del

plano (oop):
Out of plane

Adaptado de: https://www.quimicaorganica.org/espectroscopia-infrarroja/781-espectro-infrarrojo-de-benceno-y-aromaticos.html

Bandas en un espectro infrarrojo
 Contenido de elementos químicos: Na, K, P, etc.

El NIR mide las vibraciones de los enlaces químicos de las moléculas en función de
la absorción de energía por estas moléculas en la región NIR;

El "contenido de los elementos químicos (Na, K, P, etc.)" en una muestra se mide por
el balance de energía en el conjunto de conexiones entre estos elementos químicos
que forman las moléculas.
Equipamento de FT-NIR

NIR: ν = 4000 – 10.000 cm-1

λ = 760 – 2600 nm
FT-IR: Análisis sin pre-tratamiento

Sonda de FT-NIR

Microrganismo
Microscópio acoplado a FT-IR
Preparación de muestras para identificación de microrganismos

Secado de biomasa y
análisis por FT-IR o FT-NIR

(2)
Microrganismo
(1)

%T

4000 400
Número de ondas (cm-1)
Identificación del microorganismo.
en una base de datos (4)
Espectro
1. Aislamiento y crecimiento de material biológico en medio de cultivo; (3)

2. Secado del micelio y análisis por FT-IR o FT-NIR;

3. Obtención y edición de los espectros, exportación de los espectros a una base de datos;

4. Identificación de cepas y comparaciones rutinarias en una base de datos / obtención de dendrogramas.

 Análise por FT-NIR
Muestreo para:

Sólidos: polvo, granos,

serrín, etc.
*Muestreo giratorio

Geles, pastas, cremas: polvo, granos,

Sólidos y líquidos: polvo, granos, serrín, etc. serrín, etc.
*Permite ajuste de temperatura *Permite ajuste de temperatura
Análisis por FT-IR

Soporte para ventanilla de KBr

Equipamiento de FT-IR

Soporte para análisis de películas