FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

BIOLOGÍA MOLECULAR Y GENÉTICA

NOMBRE: Ginaris Tous Salas

1-2. Una enfermedad humana dominante ligada al X ocurre cuando hay más de 40 repeticiones
del trinucleótido CGG en un gen particular. La secuencia única afuera de la región repetida se
muestra abajo:

5' CAGTATGCA------ (CGG)n-------ATGCGTAAT 3'

3' GTCATACGT------ (GCC)n-------TACGCATTA 5'

En el freezer de tu laboratorio encuentras 5 primers con secuencias diferentes (se muestran

abajo). Si se quisiera amplificar la región repetida del gen usando PCR:

1- cuáles primers se usarían?

R//
- #4) 5'-CAGTATGCA-3' (PRIMER FORWARD)
- #1) 5'-GTCATACGT-3' (PRIMER REVERSE)

2- En qué dirección extenderían? Indicar primer forward y primer reverse.

R//
El primer forward se extendería en dirección 5”- 3” y el primer reverse se extendería en
dirección 3”- 5”

Primer:
#1) 5'-GTCATACGT-3'
#2) 5'-ATTACGCAT-3'
#3) 5'-ATGCGTAAT-3'
#4) 5'-CAGTATGCA-3'
#5) 5'-TGCATACTG-3'

3. Estás haciendo un experimento de clonación. Quieres insertar el gen yfg en un plásmido

circular pUC. En tu freezer tienes otros dos plásmidos, X y Y, que contienen el gen yfg. Cuando
digieres los tres plásmidos con la enzima de restricción EcoRI, los resultados son los siguientes:

pUC plasmid X plasmid Y

EcoRI EcoRI EcoRI

7.0 kb 7.0kb 7.0kb
1.0kb 1.0kb

a) Cuál es el tamaño de pUC en kb?

R// 7.0 kb
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b) Cuál es el tamaño de yfg en kb?

R// 1.0 kb

c) Cuántos sitios de restricción EcoRI contiene pUC?

R// Puc contiene un sitio de restricción EcoRL