Emiliano Romero Cano

Sección: 12L
Laboratorio de microbiología
Horario: jueves de 5:00 p.m.-7:00 p.m. y viernes de 5:00 p.m.-6:00 p.m.

Práctica No. 11
Efecto de los agentes químicos sobre el crecimiento de los microorganismos
Resultados
Agentes químicos E. coli S. aureus S. pyogenes Alcaligenes sp.
Claritromicina Error 0 mm 0 mm 18 mm
Gentamicina 10 mm 13 mm 25 mm 13 mm
Ceftazidina 30 mm 17 mm 25 mm Error
Oxiciclina 13 mm 22 mm 25 mm 22 mm
Cloxacilina 0 mm 0 mm 0 mm 0 mm
Oxacilina 0 mm 0 mm Error 0 mm
Rifampina 9 mm 23 mm Error 8 mm
Microdin 10 mm 9 mm 9 mm 12 mm
Cloro 2 mm 21 mm 50 mm 16 mm
Solución
8 mm 0 mm 14 mm 8 mm
antiséptica
Microdazin 0 mm 0 mm 11 mm 7 mm
H2O2 9 mm 27 mm 62 mm 27 mm
Alcohol Error 0 mm 8 mm 9 mm
Miconazol 26 mm 0 mm 10 mm 11 mm
Pinol 5 mm 0 mm 10 mm 10 mm
Jabón de manos 16 mm 11 mm 25 mm 25 mm
Desinfectante
0 mm 12 mm 0 mm 0 mm
industrial
Gel antibacterial Error 0 mm 0 mm 0 mm
Benzal 18 mm 40 mm 30 mm 30 mm
Fabuloso Error 20 mm 28 mm 0 mm
Lysol Error 12 mm Error 20 mm
Salvo 15 mm 19 mm Error 17 mm
Yodopovidona 13 mm 22 mm Error 14 mm
POE 0 mm 16 mm Error 0 mm
Metrodol 10 mm 16 mm Error 8 mm
Cristal violeta 8 mm 21 mm 24 mm 30 mm
Safranina 0 mm 29 mm Error 0 mm
Violeta 10 mm 19 mm 17 mm 0 mm

Discusión
Los errores observados en la práctica, especialmente relacionados con el crecimiento bacteriano y la
efectividad del agente químico, son comunes en estudios de susceptibilidad antimicrobiana.
1. Errores en la técnica de siembra: La distribución incorrecta del agente antimicrobiano en el medio
de cultivo puede conducir a zonas de inhibición desiguales o ausencia de halo. Es importante
asegurarse de que la siembra se realice de manera uniforme para obtener resultados precisos.
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2. Contaminación: La contaminación de las placas de cultivo puede interferir con el crecimiento

bacteriano esperado, lo que resulta en la ausencia de crecimiento o en la formación de halos de
inhibición irregulares. La esterilización adecuada de los instrumentos y medios de cultivo es esencial
para evitar esta situación.

3. Caducidad o deterioro del agente antimicrobiano: Los agentes antimicrobianos pueden perder su
efectividad con el tiempo o debido a condiciones inadecuadas de almacenamiento, como la exposición
a la luz solar o temperaturas extremas. Es importante verificar la fecha de caducidad y almacenar los
agentes según las recomendaciones del fabricante.

4. Concentración inadecuada del agente antimicrobiano: Las concentraciones incorrectas de los

agentes antimicrobianos pueden afectar la formación del halo de inhibición. Es fundamental preparar
las diluciones correctamente según las pautas establecidas en los protocolos de laboratorio.

5. Variabilidad biológica: La susceptibilidad bacteriana puede variar incluso dentro de una misma
especie debido a factores genéticos y fenotípicos. Esto puede influir en la presencia o ausencia de
halos de inhibición, especialmente cuando se utilizan concentraciones bajas de agentes
antimicrobianos.
Para abordar estos problemas y mejorar la calidad de los resultados, es importante revisar y ajustar la
técnica de laboratorio, así como garantizar la calidad y el manejo adecuado de los materiales y
reactivos utilizados en el estudio. Además, la replicación de los experimentos y la realización de
controles de calidad pueden ayudar a identificar y corregir posibles fuentes de error.
Conclusión
Los resultados que se han observado reflejan la variabilidad en la eficacia de los agentes químicos
para inhibir el crecimiento bacteriano en diferentes especies bacterianas. Los halos de inhibición de 0
mm indican una falta de efectividad del agente químico para inhibir el crecimiento bacteriano en esas
placas específicas. Esto puede deberse a una variedad de razones, como una concentración
insuficiente del agente antimicrobiano, resistencia bacteriana al agente antimicrobiano, o incluso
errores en la técnica de siembra o preparación del medio de cultivo. En el caso de la Escherichia coli
tuvo mayor dificultad para crecer ceftazidina (30 mm) y miconazol (26 mm), S. pyogenes el que tuvo
una mayor eficiencia son el agua oxigenada (62 mm), cloro (50mm) y benzal (30 mm), S. aureus fueron
la oxiciclina (22 mm), rifampina (23 mm), cloro (21 mm), agua oxigenada (27 mm), benzal (40 mm),
fabuloso (20 mm), Yodopovidona (22 mm), cristal violeta (21 mm) y safranina (29 mm), en el caso de
Alcaligenes sp. fueron la oxiciclina (22 mm), agua oxigenada (27 mm), jabón de manos (25 mm), benzal
(30 mm), lysol (20 mm) y cristal violeta (30).
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Como podemos notar en Escherichia coli tuvo un mayor halo de inhibición en la yodopovidona (13
mm) y violeta (10 mm), los demás agentes químicos no inhibieron efectivamente POE (0 mm) y
rifampina (9 mm). Tiene sentido que el antibiótico utilizado no marcara un gran halo de inhibición debido
a que la rifampina es un antibiótico contra bacterias Gram positivas y la Escherichia coli es un bacilo
Gram negativo.
Cuestionario
1. Menciona un ejemplo de compuesto cuaternario de amonio y sus principales aplicaciones.
Un ejemplo común de compuesto cuaternario de amonio es el cloruro de benzalconio. Se utiliza como
desinfectante y antiséptico en una variedad de aplicaciones, como en la desinfección de superficies
en entornos médicos y hospitalarios, en productos de limpieza domésticos, en productos de cuidado
personal como enjuagues bucales y desinfectantes de manos, y en la industria alimentaria para la
desinfección de equipos y superficies de procesamiento.
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2. Describe el procedimiento para preparar el nefelómetro de MacFarland.

El nefelómetro de MacFarland es utilizado para estandarizar la densidad de una suspensión bacteriana
para pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. El procedimiento para prepararlo es el siguiente:
• Se toma una pequeña cantidad de sulfato de bario y se disuelve en ácido sulfúrico diluido.
• Se preparan una serie de diluciones de sulfato de bario hasta obtener concentraciones que
correspondan a turbideces específicas, generalmente de 0.5 a 4.0 en la escala de turbidez de
McFarland.
• Se ajusta la densidad óptica de la suspensión bacteriana al compararla visualmente con las
suspensiones estándar en un nefelómetro o en una cámara de cuarzo.

3. Indica un método para evaluar la eficacia de un agente químico diferente al empleado en esta
práctica.
Un método común para evaluar la eficacia de un agente químico es el ensayo de dilución en agar. En
este ensayo, se preparan diluciones seriadas del agente químico y se colocan discos impregnados
con las diluciones en placas de agar sembradas con la bacteria objetivo. Después de la incubación,
se mide el tamaño del halo de inhibición alrededor de cada disco para determinar la susceptibilidad de
la bacteria al agente químico.
4. Investiga cual es la concentración óptima recomendada de etanol para eliminar a los
microorganismos y explica la razón.
La concentración óptima recomendada de etanol para eliminar microorganismos suele ser del 60 al
70%. Esta concentración es efectiva para desnaturalizar las proteínas de las membranas celulares de
los microorganismos, lo que conduce a la lisis celular y la muerte microbiana. Concentraciones más
altas pueden evaporarse rápidamente antes de que se produzca la acción desinfectante completa,
mientras que concentraciones más bajas pueden no ser lo suficientemente efectivas para una
eliminación completa de los microorganismos.
5. Explica la importancia de realizar un antibiograma a los microorganismos asilados de un
paciente enfermo.
Realizar un antibiograma es crucial para determinar la susceptibilidad de los microorganismos a los
diferentes antibióticos disponibles. Esto permite seleccionar el tratamiento antimicrobiano más efectivo
y evitar el uso inapropiado de antibióticos, lo que puede contribuir al desarrollo de resistencia
bacteriana. Además, el antibiograma ayuda a monitorear la resistencia bacteriana en una población
específica y a guiar las decisiones de tratamiento empírico mientras se espera los resultados de los
cultivos microbiológicos.