MANUAL DE LABORATORIO

DE TOXICOLOGÍA
Código – QFB 635

CENTRO UNIVERSITARIO
INTERAMERICANO

ESCUELA DE QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

MANUAL DE PRACTICAS DE LA BORATORIO DE

TOXICOLOGÍA

ELABORÓ:
QFB. LIZETH HIDALGO REZA
QFB. CECILIA LUZ BALDERAS VÁZQUEZ
 MANUAL DE LABORATORIO
DE TOXICOLOGÍA
Código – QFB 635
Objetivo general del laboratorio:
El presente manual tiene como objetivo sentar las bases, lineamientos y cuidados
necesarios para la correcta realización de las prácticas de laboratorio de
Toxicología como parte de la formación profesional de los alumnos para poder así
entender y observar los fenómenos toxicológicos.
Objetivos particulares del laboratorio:
Observar y entender los efectos tóxicos dependiendo de la vía de administración
Observar y entender los efectos tóxicos debidos a la interacción sinérgica de dos
sustancias.
Observar y entender los efectos tóxicos de una sustancia producidos por
antagonismo competitivo.
Observar y entender los efectos tóxicos de una sustancia producidos por
antagonismo por disposición.
Observar y entender los efectos tóxicos de una sustancia por variación en la
eliminación de fármacos.
Observar y entender las técnicas para detección de tóxicos.
Duración del curso:
El laboratorio de Toxicología comprende:
1 seminario de inducción sobre el uso y manejo de animales de
laboratorio
6 prácticas de laboratorio dividido en dos secciones, cada sección realizará su
práctica de forma quincenal y reportará de la misma forma.
Entrega de reportes:
El laboratorio de Toxicología se calificará con la entrega de reportes, los
resultados obtenidos y la participación de los alumnos en el mismo. Las
características del reporte serán las siguientes.
Portada institucional
Objetivo general de la práctica
Objetivos particulares de la práctica
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Introducción (Con contenidos relacionados con la práctica y los resultados
obtenidos)

Materiales y equipo empleado en la practica

Metodología y desarrollo de la práctica
Diagrama de trabajo

Resultados y análisis de resultados (discusión)

Cuestionario
Bibliografía

Referencias bibliográficas recomendadas

● Casareto & Dolly

Manual de Toxicología
Curtis D. Lassen
John B. Watkins III
Editorial: Mc Graw Hill

● Loomis´s
Essential og toxicology
Ted A. Loomis
A. Wallace Hayes
Editorial: Academic Princess

● A text book of: Modern Toxicology

Ernest Hodgson
Patricia E. Levi
Editorial: Elsevier

● Environmental Toxicants
Edited by Morton Lippmann
Editorial: VAN NOSTRAND REINHOLD

Antecedentes:
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El laboratorio de Toxicología, se considera como un laboratorio experimental, por
'lo que es importante que antes de iniciar el laboratorio, el alumno tome en cuenta
las siguientes medidas de seguridad.
Utilizar bata de laboratorio desde el ingreso y hasta el término de la práctica
(recuerde que está en un laboratorio y que debe seguir todos los lineamientos
para garantizan su seguridad y los resultados de las prácticas).
Utilizar guantes, cofia, cubre-bocas y gafas de seguridad durante la realización
de todas las prácticas (recuerde que está tratando con sustancias químicas puras,
animales y residuos potencialmente biológico-infecciosos, por lo que su seguridad
es primero).
No usar zapatos abiertos o de tacón en los laboratorios (el uso de sustancias
químicas y de animales, en este laboratorio será frecuente, por lo que el riesgo de
que algo se derrame es constante, evite lesiones hacia su persona)
No introducir alimentos ni bebidas durante las prácticas (si se consumen
alimentos D bebidas durante las prácticas, se corre el riesgo de ingerir alguna
sustancia tóxica' que ponga en riesgo la salud).
No utilizar celular en clase (ya que se corre el riesgo de cometer errores durante
la realización de las prácticas y además se puede contaminar el celular con las
sustancias utilizadas en el laboratorio, por lo que existe el riesgo de exposición).
Si tiene dudas, pregunte al responsable de laboratorio, evite distraer a los
compañeros y obtener información incompleta o insegura, acérquese responsable
de laboratorio
Trate siempre con respeto y cuidado a los animales de laboratorio, las prácticas
que se realizarán, tienen como objetivo el entendimiento y la observación de
fenómenos toxicológicos, para posteriormente poder aplicarlos en casos reates,
por lo que debe cuidar el manipular correctamente a los animales
En caso de accidente, derrame accidental o cualquier otro imprevisto, informe al
responsable de laboratorio o profesor más cercano, por mínimo que sea, la
seguridad det alumno es primero.
Registre con lapicero las actividades tanto en su bitácora de laboratorio como en
las bitácoras de los equipos y coloque las observaciones correspondientes, en
caso necesario informe al profesor de cualquier problema que encontrado.
No tomar ninguna sustancia con tus manos o con tu boca, pues se corre el riesgo
de ingerir sustancias tóxicas.
No tener las uñas largas, en ellas pueden quedar almacenadas sustancias
tóxicas o biológicas que pueden poner en riesgo su salud.
Revise sus prácticas de laboratorio antes de comenzar tus actividades y en caso
de duda, pregunte al encargado de laboratorio.
Nomenclatura de laboratorio:
Unidades de Peso: expresado en gramos (g), kilogramo (kg) y miligramos (mg) o
cualesquiera de sus múltiplos o submúltiplos. Recuerde que después de estas
unidades, no se utiliza el punto.
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Unidades de volumen: expresado en litros (L), mililitros (mL) o cualquiera de sus
submúltiplos Utilice siempre una "L" para evitar confundir esta letra con el número
1.
Unidades de temperatura: expresado siempre en grados Celsius (0 C), para fines
de laboratorio, siempre se utilizará esta unidad de medición.
Unidades de tiempo: expresadas en segundos (s), minutos (min.) o cualquiera de
sus múltiplos y submúltiplos.
Unidades de dosis: expresado en unidades de peso/ volumen, volumen/volumen,
peso/peso, etc. (Por ejemplo: g/mL, g/L, mL/L, g/kg, mg/kg, etc.). La concentración
de las sustancias utilizadas se debe colocar entre dos corchetes (1--1) para poder
diferenciarlo.
Toxoide: Es una sustancia (animal, vegetal, orgánica, inorgánica, etc.) que en un
organismo vivo es capaz de producir una respuesta nociva, que puede ir de leve
hasta grave y deseniazar en muerte Q pérdida de alguna función.
Signos: en las intoxicaciones, se define como las manifestaciones físicas que
presenta una persona cuando has sido expuesta a un agente tóxico (veneno,
metales pesados, agentes corrosivos, etc.) y que es visible ante cualquier
observador (como son enrojecimientos de la piel, erupciones cutáneas,
quemaduras, etc.).
Síntomas: en las intoxicaciones, se define como las manifestaciones anormales en
el organismo que sólo la persona intoxicada, es capaz de percibir cuando ha sido
expuesta a un agente tóxico y que no son fácilmente observables por otras
personas (como puede ser la desorientación, la sordera, el entumecimiento, etc.).
Estas últimas son muy peligrosas, ya que la persona expuesta a un toxoide, puede
no manifestar más que síntomas de una intoxicación y que en veces se ignoran y
se confunden con otro tipo de manifestaciones.
Dosis Letal (DL50): La dosis letal cincuenta o DL50es la concentración de una
sustancia (fármaco, metal, planta, etc. por unidad de peso (o volumen) a la cual el
50% de una población muere. Este
concepto es muy importante ya que la DL50 es muy particular para cada especie,
esto quiere decir por ejemplo que de una sustancia "X", para un ratón, la DL50
puede ser de $ mg/kg, mientras que, para un humano adulto, la 01-50 de esa
misma sustancia puede ser de 200 mg/kg. Debemos tener especial cuidado con
este concepto, ya que el hecho de que las DL50 puedan ser muy diferentes y muy
grandes entre especies, los efectos tóxicos pueden manifestarse aun a dosis muy
bajas, por lo que aun que se traten de DL50 específicas para una especie, el
alumno deberá manejarlas siempre con precaución.
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PRÁCTICA No.1
EFECTO DE LA VÍA DE ADMINISTRACIÓN SOBRE LA TOXICIDAD.

Objetivo general:
Observar el efecto de las diferentes vías de administración sobre la toxicidad de
una sustancia
Objetivos particulares:
s/ Observar el efecto de la administración de solución salina isotónica en rata por
diferentes

vías de exposición.
Observar el efecto de la administración de Pentobarbital sódico en rata por
diferentes vías de exposición.
Observar el efecto de la administración de solución salina hipertónica en rata por
diferentes vías de exposición
Introducción:
En la actualidad, el ser humano se encuentra expuesto a miles de sustancias
químicas, orgánicas e inorgánicas, debidas a su propia actividad (industria,
comercio, agricultura, minería, etc.), las cuales pueden encontrarse ampliamente
distribuidas en todo el medio ambiente (agua, suelo y aire), por lo que los estudios
sobre los efectos de determinadas sustancias toxicas, ha tomado gran interés.
Estos estudios, han demostrado que los efectos tóxicos de muchas sustancias
dependen de varios factores, como son: tiempo de exposición, concentración y vía
de administración. Así pues, se ha demostrado que una sustancia puede o no
puede ser tóxica, por una determinada vía de administración.
Muchas sustancias, debido a sus características físico-químicas, son totalmente
inofensivas por una determinada vía de exposición y otras más, son letales por
una vía de administración en particular.
Dependiendo de su solubilidad (agua/aceite), coeficiente de partición (log P, Log
su metabolismo (hepático, renal, pulmonar, etc.), unión a proteínas (albumina,
hemoglobina,
glicoproteínas, etc.) y de su eliminación (heces, orina, leche, sudor, saliva, etc.), la
toxicidad de una sustancia puede verse afectada no solo en tiempo, sino también
en especies, géneros, raza y sexo.
Actualmente, la Toxicología se encarga del estudio sobre todos estos factores, así
como la determinación de sus efectos sobre los organismos vivos, los ecosistemas
y la población en general.
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Materiales por equipo
5 ml- de solución salina
3 Ratas macho (cepa Wistar)
hipertónica
1 Balanza para roedores 5 rnL de solución salina isotónica
1 Estuche de disección 3 Cajas petri
1 Navaja para rasurar (por
1 Lupa
equipo).
1 frasco Pentobarbital sódico (por
3 Jeringas de insulina
sección)

Desarrollo:
1. Cada equipo deberá tomar 3 ratas de laboratorio, deberá marcarlas con un
plumón de color diferente para identificarlas y posteriormente deberá pesar cada
una en la balanza para roedores y registrar su peso.
2. Una vez calculado el peso, selecciones una de las siguientes vías de
administración:
A. Oral
B. Intraperitoneal
C. Subcutánea (rasurar la parte donde se realizará la punción)
D. Tópica (deberá rasurar al animal y dejar expuesta la piel)
3. Una vez que se ha seleccionado la vía de administración, cada equipo
deberá administrar cada una de las siguientes sustancias.
A. Pentobarbital sódico
B. Solución salina hipertónica
C. Solución salina isotónica
4. Una vez seleccionada una de las sustancias, el alumno procederá a administrar
8C mg/kg de peso (realice sus cálculos y regístrelos) de Pentobarbital sódico a una
de las ratas por la vía seleccionada.
5. Posteriormente se deberá administrar solución salina hipertónica a una
dosis de 5 mL/kg de peso a otra de las ratas por la misma vía que se administró el
Pentobarbital.
6. Finalmente se deberá administrar solución salina isotónica a una dosis de 5
mL/kg de peso a la última rata.
Sustancia tóxica
Vía de administración peso del roedor:
g Dosis administrada:

_g (anexe cálculo roedor:

Dosis administrada:

(anexe cálculo)
Oral
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Intraperitoneal
7. Coloque los animales y observe cuales son los efectos en cada roedor.
8. Registre los efectos de cada sustancia en función a la vía de administración
de acuerdo a

la siguiente tabla.

Sustancia
Pentobarbital sódico Solución salina hipertónica Solución salina isotónica
tóxica
Dosis Dosis Dosis
Vía de peso del peso del peso del
administrada: administrada: administrada:
administració roedor: roedor: roedor:
_______g _______g _______g
n _______g _______g _______g
(anexe cálculo) (anexe cálculo) (anexe cálculo)

Oral

Intraperitoneal

Subcutánea

Tópica

9. Proceda a sacrificar a las ratas y realice la disección y observe los órganos

de cada uno de ellos.
10. Registre sus observaciones y describa las posibles causas de la muerte
(compare sus resultados con los de la rata administrada con solución salina
isotónica)
Cuestionario:
1 . ¿Cuál es la dosis letal de Pentobarbital en rata Q
2 Describa la estructura química del Pentobarbital
3 Describa los efectos del Pentobarbital y relaciónelo con sus efectos tóxicos
4 ¿Cuál es el efecto de la solución salina hipertónica en rata?
5 Describa la estructura química de la solución salina hipertónica
6 Describa los efectos de la solución salina isotónica y los efectos de la solución
salina hipertónica
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7 ¿Cuál es la vía de administración en la que se observaron mejor los efectos
tóxicos de Pentobarbital en rata?
8 ¿Cuál es la vía de administración en la que se observaron mejor los efectos
tóxicos de la solución salina hipertónica en rata
9 Mencione 3 sustancias tóxicas en el hogar
10 Mencione 3 sustancias tóxicas a tas que usted pudiese estar expuesto en la
calle
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PRÁCTICA No.2
OBSERVACIÓN DE EFECTOS TÓXICOS SINÉRGICOS.

Objetivo general:
Observar el efecto tóxico como resultado de la interacción entre sustancias
comunes (sinergismo).
Objetivos particulares:
Observar el efecto de la administración del alcohol en ratas, sobre la actividad
farmacológica del Pentobarbital sódico. Observar el efecto de la administración del
ambroxol en ratas, sobre la actividad farmacológica del Pentobarbital sódico.

Introducción:
En algunos casos, los efectos de las sustancias (fármacos, venenos, productos
alimenticios, industriales, etc.), no son nocivos pese a su exposición prolongada o
cuando uso es el adecuado. Sin embargo, la interacción de algunas otras
sustancias (tabaco, fármacos, alcohol, pelo de animales, etc.), puede desencadenar
reacciones graves (más que si se administrase sola la sustancia pura).
En muchos casos, la conjugación de dos o más sustancias, es la responsable real
de los efectos tóxicos en los organismos vivos. El alcohol, como uno de los
principales productos de venta a nivel mundial, es responsable de muchos efectos
tóxicos en pacientes con medicación, pacientes enfermos u otras sustancias
tóxicas. En ocasiones, las personas asocian los efectos tóxicos manifestados a la
toma de medicamentos y no al consumo del alcohol.
Esto se debe en parte, a que el alcohol, inhibe varias funciones del sistema
nervioso central, deteriora la función hepática, modifica el tiempo de sangrado y la
concentración de varios iones. Es por eso que y en especial, no se recomienda el
consumo del alcohol con diversas sustancias.

Materiales por equipo

3 ratas macho (cepa Wistar) 2 ml de solución salina isotónica

1 Frasco de Pentobarbital sódico (por sección) 3 jeringas de insulina

1 cronometro 5 ml alcohol comercial ( de cualquier marca)

El alumno deberá traer 5 ml de jarabe para la tos (ambroxol)

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DESARROLLO

1. Cada sección deberá tener 3 ratas de laboratorio.

2. Proceda a pesar a cada animal de laboratorio y registre su peso.
3. Al primer roedor administre 1 rnL de solución salina isotónica por vía oral y
esperar 2 minutos, posteriormente administrar 40 mg/kg de peso de Pentobarbital
sódico por vía intraperitoneal, tome el tiempo en el cual aparecen los efectos con
ayuda del cronómetro una vez que haya inyectado el fármaco.
4. Al segundo animal le deberá administrar por vía oral 1 ml de alcohol por vía
oral y esperar 2 minutos, posteriormente administrar 40 mg/kg de peso de
Pentobarbital sódico por vía intraperitoneal, tome el tiempo en el cual aparecen los
efectos con ayuda del cronómetro una vez que haya inyectado el fármaco.
5. Al tercer animal le deberá administrar 1 ml- de ambroxol por vía oral y
esperar 2 minutos, posteriormente administrar 40 mg/kg de peso de Pentobarbital
por vía intraperitoneal.
6. Registre los efectos producidos en cada roedor en la siguiente tabla

Pentobarbital solo +
Combinación Pentobarbital + SSI Pentobarbital + alcohol
ambroxol

Roedor Efectos observados

Cuestionario:
1. ¿Qué es un sinergismo positivo y por qué es de interés toxicológico?
2. ¿Qué es un sinergismo negativo y por qué es de interés toxicológico?
3. ¿Cuál es el efecto del alcohol cuando se administra con el Pentobarbital?
4. ¿Cuál es et efecto de la solución salina con el Pentobarbital?
5. Mencione 5 interacciones entre diferentes sustancias
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PRÁCTICA No.3
DETERMINACIÓN DEL EFECTO ANTAGÓNICO COMPETITIVO

Objetivo general
Observar el efecto tóxico corno resultado de la interacción entre medicamentos
(antagonismo competitivo).
Objetivos particulares:
Observar el tiempo de coagulación en personas con administración de ácido acetil
salicílico.
Determinar el cambio en el tiempo de coagulación en personas con administración
conjunta de ácido acetil salicílico y naproxeno.

Introducción:
Parte de la Toxicología, no involucra el estudio únicamente de venenos aplicados a
los seres vivos Muchos de los efectos tóxicos de interés, son los problemas
relacionados con: medicamentos (PRM). Estos son de particular interés, ya que, en
algunos casos, la administración de un fármaco, se acompaña de la ingestión de
otros más (politerapias)
En algunos casos, la administración de un fármaco en conjunto con otro, puede
causar efectos tóxicos incrementando el mismo efecto terapéutico de alguno de los
dos agentes (potenciación), por Io que, si se trata de un agente vasodilatador, que
se administra junto con Otra que produzca el mismo efecto, se logrará que la
persona caiga en un estado de hipotensión severa que puede producir su muerte.
En otros casos, la interacción es capaz de disminuir su efecto terapéutico
(antagonismo), por lo que, si a una persona se le administra un vasodilatador, pero
este efecto, es antagonizado por otra sustancia, ¡no se lograra e! efecto hipotensor
y la persona corre riesgo de sufrir un derrame sanguíneo (hemorragia o embolia).
Es muy común, hoy en día, que los médicos administren conjuntamente distintos de
antiinflamatorios (de la familia de los AINE's), sin saber, que la gran mayoría de
interaccionan (antagonismo competitivo) y por tanto su efecto terapéutico se pierde
fácilmente, provocando que el paciente no se alivie. Una característica de los
AINE's, es que la gran mayoría de ellos modifican el tiempo de coagulación

Materiales por equipo:

3 lancetas estériles 1 cronómetro

El alumno deberá traer: 2 tabletas de naproxeno sódico

2 tabletas de ácido acetil salicílico

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Desarrollo:
1 Registre los datos del paciente (Nombre, edad, sexo)
2 A uno de los alumnos, no administre ninguna sustancia y espere 30 minutos.
3 Al segundo alumno, administre por vía oral 2 tabletas de ácido acetil salicílico y
espere 30 minutos.
4 Al tercer alumno, administre por vía ora: 2 tabletas de acetil salicílico, espere 1
minuto y administre inmediatamente 2 tabletas de naproxeno y espere 30 minutos.
5 Transcurridos los 30 min., proceda a realizar una punción en el dedo índice de la
mano izquierda de cada alumno y tome el tiempo de coagulación en cada caso (no
olvide limpiar la zona de la punción).
6 Registre los resultados de tiempo de coagulación en cada caso.

Administración a cada paciente de:

Persona
Sin administrar Ácido acetil salicílico Ácido acetil salicílico + Naproxeno

Cuestionario:

1 . ¿Qué es un AINE?
2 ¿Cuál es el principal uso de los AINE's?
3 ¿Qué otros tipos de interacciones medicamentosas existen?
4 ¿Cómo se relaciona e: efecto terapéutico de los AINE 's con el
cambio en el tiempo de coagulación?
5 ¿Cuál es el tiempo de coagulación normal?
6 ¿Qué importancia tiene el tiempo de coagulación?
7 ¿En qué casos no se recomienda el uso de AINE's?
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Practica No. 4
DETERMINACIÓN DEL EFECTO ANTAGONICO POR DISPOCISION

Objetivo general:
Observar el efecto tóxico como resultado de la interacción entre medicamentos
(antagonismo por disposición)

Objetivos particulares:
Observar el efecto antagónico por disposición de fármacos por vía oral
Determinar, el cambio en la absorción del Sulfatiazol sódico

INTRODUCCION

Otro de los grandes PRM, es que muchas veces, es la administración

concomitante de fármacos. Es muy común que los médicos realicen la prescripción
de un fármaco y que el paciente, en casa, tome algunos medicamentos de venta
libre (O TC), sin consultar a ningún especialista.
La toma de estos medicamentos, en varias ocasiones, modifica la cinética de los
fármacos a nivel intestinal. Una de las interacciones más comunes, es la torna de
antiácidos y otros compuestos (como caolines y pectinas) que interfieren con la
absorción de los fármacos.
Al verse modificada la absorción de fármacos, se ve disminuida la concentración de
fármaco disponible en sangre y, por tanto, el efecto terapéutico se ve disminuido.
Esta es una de las causas más comunes por tas que las personas, no logran el
éxito de los tratamientos y por lo tanto aseguran, que los medicamentos no
funcionan

Materiales por equipo:

1 rata macho (cepa Wistar) 1 papel filtro o algodón

20 tubos de ensayo 8 embudos

10 pipetas 10 ml de agua destilada

2 jeringas para insulina 2 ml de N-naftiletetilendiamina

1 gradilla 2 ml de Sulfamato de amonio

1 equipo de disección 2 ml de Nitrito sódico (0.1%)

1 frasco de Sulfatiazol sódico de uso
15 ml de NaOH 0.1 N
veterinario
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3 ml de ácido tricloroacetico

1 mortero de porcelana

El alumno deberá traer: Suspensión de Caolí/pectina (pepto bismol)

1. Se procederá a marcar y pesar las ratas

2. Administre por vía oral 60 unidades de caolín/pectina a cada rata.
3. 1 equipo, deberá sacrificar a una de las ratas sin administrar el Sulfatiazol.
4. Los tres equipos restantes deberán administrar le Sulfatiazol como se
describe a continuación:
5. Calcular el volumen a administrar de Sulfatiazol sódico, si la dosis
recomendada debe ser de 200 mg/kg y administrarlos por vía oral.
6. Esperar 15, 30 y 45 minutos a partir de la administración del Sulfatiazol
7. Sacrificar a todos los animales y extraer 1 g de cada órgano que se
describe a continuación:

ÓRGANO
Hígado
Riñón
Cerebro
Sangre

8. Colocar la muestra en el! mortero y proceder a moler.

9. Coloque la muestra en un tubo 1 0 Agregar 10 ml de NaOH 0.1 N.
1 1. Homogenice
12. Dejar reposar 15 minutos
13. Tomar 2 ml- del sobrenadante y agregar 2 ml- de ácido tricloroacetico
14. Agregar a este mismo tubo 6 ml- de agua destilada.
15. En un embudo colocar el papel filtro o el algodón y proceda a filtrar la
muestra hasta que este clara la solución.
16. Agregar 5 ml de! filtrado a otro tubo de ensayo limpio y adicionar 1 ml- de
nitrito de sodio y dejar reposar 3 minutos.
1 7. Agregar 1 ml- de Sulfamato de amonio al 0.5% y dejar reposar por 3 minutos.
1 8. Agregar 'l mL- de N-naftiletetilendiamina al 0 < 0/0 19 Leer en el
espectrofotómetro a 545 nm.
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20 Grafique la concentración de Sulfatiazol en los diferentes órganos para los 4
tatas
Registre sus observaciones.
Observaciones: Factor de dilución utilizado por el método de Bratton-Marshall: 10.
Utilice la siguiente tabla para determinar la concentración real. Clarifique usando
papel milimétrico.

Tabla 1: Relación absorbancia vs. Concentración

Concentración (µg/5 ml) Absorbancia
1.25 0.032
2.5 0.063
5 0.121
10 0.240
20 0.476
40 0.921

Cuestionario:
1. ¿Cuál es el mecanismo de acción del caolín/pectina?
2. ¿Cuál es el uso del Sulfatiazol?
3. Explique el fundamento del método de Bratton-Marshall
4. Explique el mecanismo por el cual no se absorbe el Sulfatiazol y sus
consecuencias.
5. ¿Qué otros agentes pueden modificar la absorción de fármacos â
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PRÁCTICA No.5
VARIACIÓN EN LA ELIMINACIÓN DE FÁRMACOS

Objetivo general:
Observar cambios en la eliminación renal que pueden resultar en una toxicidad por
acumulación de fármacos.

Objetivos particulares:
Determinar la eliminación renal de fármaco por vía renal.
Observar el cambio en la eliminación renal de ácido acetil salicílico cuando se
administra con bicarbonato.
Observar el cambio en la eliminación 'renal de ácido acetil salicílico cuando se
administra con cafeína.

Introducción:
Uno de los mecanismos de toxicidad de fármacos, está relacionado con la
acumulación excesiva de los mismos. ¡Esto se puede deber a un cambio en el
proceso de filtración norma! de los riñones (enfermedad) o por el uso de otras
sustancias (farmacológicos o no farmacológicas).
Al irse acumulando los fármacos, estos por su mismo efecto terapéutico o bien, por
sus efectos secundarios, pueden causar un detrimento de la función corporal,
generando intoxicaciones en diferentes niveles. Muchos fármacos, debido a su
misma naturaleza, deben ser monitoreados constantemente, para verificar que su
eliminación no se vea afectada. Un método muy sencillo es medir directamente el
fármaco en la orina

Materiales por equipo:

3 tubos de ensayo 1 cuadro de papel filtro

2 pipetas 1 pipeta de 1 ml

2 embudos 1 pipeta de 2 ml

4 tiras para medir pH 1 pipeta de 5 ml

10 ml de ácido clorhídrico (HCL) 0.1 N 2 ml de reactivo de Trinder

2 tabletas de ácido acetil salicílico
El alumno deberá traer: (500 mg) +bicarbonato (o cualquier
presentación equivalente)
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2 tabletas de ácido acetil salicílico (500 mg)

2 tabletas de ácido acetil salicílico (500 mg) + cafeína

Desarrollo:
I. El primer voluntario deberá tomar 1000 mg de ácido acetil salicílico con 500 ml-
de agua Durante el curso del experimento tomar más agua.
2. El segundo voluntario deberá tomar 1000 mg de ácido acetil salicílico + g
de bicarbonato de sodio, junto con 500 ml- de agua (puede dividir en 2 el agua y
disolver el bicarbonato de sodio común si no se cuenta con una presentación
mixta).
3. El tercer voluntario deberá tomar 1000 mg de ácido acetil salicílico +
cafeína, con 500 ml de agua.
4. Colectar muestras de orina a los 0 (antes de la toma), 20, 40, 80 y 160
minutos posteriores a la administración de cada fármaco.
5, Posteriormente, medir con las tiras de papel, el pH y el volumen de orina
eliminado en cada tiempo.
6. Tomar una alícuota de 2 ml- de orina y adicionar 8 ml- de HCI, 0 1 N
7. Agite suavemente la muestra por 2 minutos.
8. Filtrar la mezcla.
9. Tomar 5 ml- del filtrado y adicionar 1 mL- de reactivo de Trinder.
10. Calibrar el espectrofotómetro con la orina basal, ajustando a 0 la
absorbancia (lea a 540 nm).
1 1. Registre sus resultados de absorbancia (A) y pH en la siguiente tabla

Tiempo 0 20 40 80 140
Muestra
Parámetro A pH A pH A pH A pH A pH

ácido acetil salicílico

ácido acetil salicílico + Bicarbonato de sodio

ácido acetil salicílico + cafeína

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Observaciones: Factor de dilución utilizado: 10. Utilice la siguiente tabla para
determinar la concentración real. Utilice papel milimétrico para graficar

Tabla 1: Relación absorbancia vs. Concentración

Concentración (µg/5 ml) Absorbancia
1.25 0.123
25 0.21
50 0.413
100 0.82

Cuestionario

1. ¿Qué importancia tiene la eliminación de fármacos?

2. ¿Por qué el bicarbonato modifica la eliminación de ácido acetil salicílico?
3. ¿Por qué la cafeína modifica la eliminación de ácido acetil salicílico?
4. Se requiere de un tratamiento para eliminar un agente tóxico, ¿Cuál es su
propuesta terapéutica?, basado en lo observado en esta práctica
5. ¿Cómo es la eliminación de ácido acetil salicílico en un paciente con
insuficiencia renal?
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PRÁCTICA No.6
DETECCIÓN DE ANFETAMINAS EN ORINA HUMANA
Objetivo general:
Observar uno de los métodos analíticos para la determinación de algunos
psicotrópicos.
Objetivos particulares:
v/ Aprender el uso correcto de las pruebas de determinación de anfetaminas en
orina humana.
Observar la interferencia que pueden producir algunas sustancias sobre las
pruebas de laboratorio.
Introducción:
Parte importante de la Toxicología, no solamente implica el entendimiento de los
mecanismos de toxicidad, sino también, el desarrollo de métodos analíticos que
permitan la identificación de los agentes tóxicos. Estos métodos analíticos, pueden
ser muy amplios, e incluyen el uso de reacciones específicas con grupos
funcionales de los agentes tóxicos o con el uso de anticuerpos específicos, que
reconocen a las sustancias tóxicas o alguno de sus metabolitos en orina, heces u
otros fluidos.
En la actualidad, estos métodos se han facilitado, desarrollándose cartuchos en
los cuales, los reactivos ya se encuentran colocados, para únicamente esperar el
depósito de la muestra. Sin embargo, conocer los fundamentos básicos, las
limitaciones, las características de control de calidad de cada prueba, permiten
una correcta interpretación de resultados y en caso necesario, la detección de
posibles alteraciones en la obtención de los mismos.
El uso de anfetaminas hoy en día, es un grave problema toxicológico, ya que la
sociedad se encuentra gravemente expuesta al uso de estas sustancias, en
especial, los adolescentes. El uso de las pruebas antes mencionadas, permiten la
detección del consumo de esta clase de agentes, que también se consideran
como sustancias tóxicas, por los graves efectos fisiológicos y psicosociales que
generan no solo en la persona que las consume, sino también en la familia y la
sociedad.
 MANUAL DE LABORATORIO
DE TOXICOLOGÍA
Código – QFB 635
Materiales por equipo
5 ml de agua 2 goteros
papel de estraza 1 muestra de orina
5 gr alumbre
El alumno deberá de traer: 1 vaso para muestra de orina

Desarrollo:
1. Coloque las muestras y déjelas atemperar.
2. Abra el sobre sellado (asegurándose que no se encuentre alterado),
sáquelo de su empaque junto con la pipeta (cuidando de no tocar los pozos) y
rotúlelo con el nombre, sexo y edad del paciente.
3. Con el gotero, tome una alícuota de orina (sólo unas gotas, equivalentes a
0.2 mL) y colóquela en el pozo correspondiente a la muestra cómo se ilustra a
continuación
4. Espere de 3 a 8 minutos y observe la aparición de las bandas de color que
indicarán los resultados (positivo o negativo).
5. Posteriormente, disuelva 1 g de alumbre en 5 ml- de agua.
6 De esta solución, deposite 1 ml- de la solución de alumbre en la
orina y agite
7. Tome otra alícuota de orina y deposite unas gotas (0.2 mb) en el pozo de
un estuche nuevo para la detección de anfetamina.
8. Interprete los resultados en un intervalo de 3 a 8 minutos.
9. Registre sus resultados y observaciones.
Cuestionario:
1. ¿Cuáles son los efectos tóxicos de la anfetamina?
2. ¿Con que otros nombres se le conoce a la anfetamina?
3. ¿Qué es un anticuerpo?
4. ¿Qué es antígeno?
5. ¿Cuál es el problema del uso de anticuerpos en un método analítico?
 MANUAL DE LABORATORIO
DE TOXICOLOGÍA
Código – QFB 635

Bibliografía
Albiano, N. & Villaamil, E. (2015). Toxicologia laboral
Gianuzzi.L 1era edición Toxicología general y aplicada Autor Universidad Nacional
de la Plata
Rodríguez D.(2017) Introducción a la toxicología.