LABORATORIO DE

BIOCATÁLISIS ENZIMÁTICA
ICB 536

Prof. Zaida Cabrera Muñoz

zaida.cabrera@pucv.cl
MARZO 2019
Efecto del pH sobre la velocidad de reacción

Cada enzima tiene un pH óptimo para su actividad

El pH afecta las interacciones iónicas
Efecto del pH sobre la velocidad de reacción

Básicos Ácidos

Polares

Apolares
 Efecto del pH sobre la velocidad de reacción

-+ - Alteración de la interacción enzima-sustrato

+-
+ + 1. Ionización de los AAs del sitio activo de la enzima
2. Ionización del sustrato
Enzima Sustrato 3. Cambios estructurales en la proteína (pHs extremos)
 Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reacción

Cada enzima tiene una temperatura óptimo para su actividad

La temperatura afecta la energía cinética de las moléculas
Temperatura v/s Estabilidad

ESTABILIDAD
ACTIVIDAD

TEMPERATURA

Existe un efecto opuesto sobre la velocidad de

reacción y estabilidad enzimática.
Actividad enzimática de β-galactosidasa

Hidrólisis de la lactosa
β-galactosidasa

Medición de glucosa mediante un Kit enzimático “glucostat”

 Actividad enzimática

Blancos de la reacción:

1)Blanco del sustrato:

Sustituir el sustrato por tampón

2)Blanco del preparado enzimático:

Sustituir la enzima por tampón

3)Blanco del sustrato y del preparado enzimático:

Se utiliza la enzima inactivada