la Eadeeas

dasffff / MAS DISMINUYEN

reacciones que catalizan

feat Ud .
TUEI tía . .

LAS
• Desolvatando a las moléculas ( S)
→ Aiuste
• Alineamiento de
gpos funcionales
.

inducido
•
Control de las distorsiones de los sustratos .

las enzimas proporcionan un entorno mas

confortable para el estado de transición , al

brindar una superficie complementarla en su :

Progreso de una reaccion Estereoquímica

-

-
Polaridad

daformaciónde enlaces entre

el
-

carga
COMPLEJO ES semana
a cabo mediante
DIVERSOS MECANISMOS .
B. Catálisis covalente

Implica la formacion de un enlace covalente

A. Catálisis ácido-base general .

transitorio entre la enzima
y
el sustrato .
Ej . la

Existe transferencia de protones las

. hidrólisis de los gpos A y B .
.

cadenas laterales de los aminoácidos H, O

actúan como donadores

y aceptores A B + ✗:
- →
A ✗+B -
→ A + ✗: +
B
de protones en el sitio activo de la

enzima .
C Catálisis
.

por iones metálicos

los metales participan de diferente forma en la

R COOR
,
-

,
+ HA ←
R , COOH + Mi OH
-
reaccion . Casi 43 de las enzimas requieren tomas
iones metálicos .

[ | µ | ( G (N }/ M | Interacciones la orientación
-

iónicas :
ayudan a .

del s y estabilizan los estados de transición .

Se encarga del estudio de la determinación -

Facilitan reacciones REDOX mediante :

de la velocidad de la reaccion y del modo cambios reversibles en el estado de oxidación .

en que esta cambia en respuesta a cambios ( transferir é)

en los parámetros experimentales .

FACTOVCS que AFECTAN a Es difícil medir la [S] conforme transcurre la reaccion,

la VELOCIDAD de VCACCÍÓM se hace una aproximación

que simplifica
los experimentos
• concentracion del sustrato .

cinéticos al medir las velocidades iniciales de la reacción

• Temperatura ( Vo) .

•
pH
Ecuación
de MKHACIIS MCMTCM -

Leonor Michaelis 1913

y Maud Menten en

el
postularon que la enzima se combina con

sustrato [ S] de manera reversible, formando

el complejo ES el , cual se descompone en

enzima libre [E) y producto [ P] .

K,
EL
STE I ES → ETP
K,

Dado que la 2da reacción sucede de manera

v. !
:#
más lenta , esta es la reacción limitante , y
=

por lo tanto , la velocidad global será

[ ES] que
proporcional a la reacciona en

el 2do paso . Considera :

• Un estado transitorio .

Uf [ Es] Vi [ES]
=

DFTGVM / NACIÓN deeaf GUQCIÓN . La [E) es constante durante toda la

de MICHAELIS Menten -
catálisis .

• La KM se relaciona con las constantes de

SFE ES -4 ETP velocidad de las etapas individuales .

K,

VELOCIDAD de DISOCIACIÓN [ Es]

VELOCIDAD de FORMACIÓN [ Es] .

Vd [Es] =
(K -
,
+14) [ ES]

4- [ Es] = K> [ E) [ S]
°
" " " " "" "" "° existe pérdida de , ,

Se asume que la Rx está en estado enzima :

transitorio : [E ],
=
[ ES] + [ E] IEC 2)
.

" [ E) [5) =
( K , + 4) [ [ g]
.
, E, ,,
 Sustituyendo [ E] libre de (2) en 11) : • Recordando que KM se relaciona con las

← constantes de velocidad de las etapas

/
K, [ E, ]
-

[ ES]) [S] (14,1-14) [ ES]=

individuales mediante : km = constante de

Michaelis Menten -

K, / [Es] [S] [ES] [S] )

te
(14+14) [ ES] Km K¡¡ concentración de S
-
=
=

a la cual este a
la
- mitad de la Vmax .

[ E, ] [ S] [ES] [ S]
- =
Km [ES]
°
Recordando 9K la velocidad de disociación
Añadiendo el término [ Es] [g] a ambos del [ ES] para la formación del producto es :

lados de la ec .
:

[ E ] [ S] [ES] Km [ES] [S] Vo Kz [ES] →

=
[ ES] ¥

[
= + =
,

Factorizardo :

[E,] [ D= [ ES] / Km + •
Recordando que Vmaákr [E ] ,

Despejando a [ ES] :

[Es
]=¥?¥→
1
v. =

YETI

¥.EE?#r.=E:*;-Tiaueirasawmanaar.p esea MITAD de Vmax

a

Diviendo entre VMAX toda la ecuación :

VMAX-z-evmaxf.SI
km ] + [S

Km + [ S] =
2 [ S ] → Km [ S] =
A mayor km→ la enzima tiene menor

Necesita más moléculas afinidad por el sustrato .

de [S] para saturar

NOTA : Isoenzimas → catalizan la mima RX .

a la enzima .
Ej GIK.
en hígado .

A menor km → la enzima tiene mayor

Velocidades de Rx son proporcionales a la [S] afinidad por el sustrato .

↳ KML . Ej .
Hexocinasa en

músculo .

Se necesita mas [S] y la Km T .

/
 Ecuación
IIMFWF Nff BWk
• " " Es
-

de RECÍPROCOS

mxtb
y =

:-#
Y
1- = +
1-
Vo VMAX

SIGNIFICADO de
las VAIOVGS
de KM y Vmax
El valor de km de una enzima depende de

Entonces la constante de disosiacióñ del 4 sustrato en particular y de las condiciones

complejo ES viene dado por :

de T, pH y fuerza iónica .

Km
-
_

4¥ =
Kes =

"¥¥_ La KM tiene 2 significados :

1s
En esta condición KZLCK, , km es la constante • Concentracion a la cual la mitad de los

de disociación del complejo ES .

centros activos están ocupados , por lo
tanto , podemos conocer la fracción de

centros llenos ,
f- Es ,
a cualquier [ S] a partir
de :

✗
FES =

Vmax
=

[S] + Km
• Se relaciona con la constante de velocidad

de las etapas individuales del esquema

catalítico :

"
km =

Si K, » Ka→ la disociación del ES es

mucho más rápida que la formacion de E

yP .
 SIGNIFICADO Valores la Vmax revela
de
el número de recambio de una
eos "
"
turn over la
Vmax Yde Kcat / KM
enzima , humber , si se conoce
de
concentracion de centros activos [Es ] porque: ,

Número de recambio de una enzima

Es el número de moléculas de sustrato ✓ Max

=
Kz [ ET]
convertidas en producto por unidad

de tiempo , por una molécula de Cuando [ S] < < Km la [ E ] es aproximadamente

enzima cuando esta se encuentra la concentracion de la ET se tiene que:

totalmente saturada de S . Esto es

Kz
✓ # [S] [Es]
la constante cinética
igual a .
=

KM
Si la velocidad de formación del Por consiguiente cuando [S] « km la

producto lka) es mucho más rápido velocidad enzimática dependerá del valor de

que la velocidad de disociación del

Kz / km y de [S] :

complejo [ ES] IK, ) , entonces

kz / Km

l
4-
se aproxima a kr . Y así la velocidad
=

del encuentro entre la enzima

y el K - itkz
Sustrato está controlada por la difusion .

La eficiencia catalítica de una enzima

K, no puede superar los valores de la difusión viene dada por :

108 y
" '
10 M "
"
-

s con estos valores se ha

÷
,

alcanzado una perfeccion cinética .

MHIBKIÓMCNIIMAHCA
Hay 2 tipos :

•
Reversible No competitiva, competitiva ,
:
INHIBICIÓNCOMPFHTVATA
A- competitiva, Mixta .
• El inhibidor es estructuralmente similar
•
Irreversible al sustrato , por lo que compite por unirse

al sitio activo de la enzima .

•
Para superar la inhibición , se debe aumentar

la concentración de S en la reacción ,
así •
Ej . las estatinas , se unen a la HMG-CoA -

la KM aumenta
y la VMA ✗ no se altera . reductasa para disminuir los niveles de

la afinidad disminuye .
colesterol en la sangre .
 G. G-
•

INHIBICIÓN
NOCOMPCHHVA
• El inhibidor se une a un sitio diferente del

sitio activo de la enzima .

A este sitio

tambien se le conoce como sitio alostérico .

• El equilibrio de la Rx NO se altera , puesto

que el S sigue uniéndose al sitio activo .

• Se forma un complejo [ ESI] , que impide

la formacion de producto .

• Hasta que el I en algún punto se libere de la

E ,
y se pueda formar el P .

• Se observa que la KM no se altera, sin

embargo , la Vmax disminuye porque no toda

la E podrá estar unida al S .

•
Ej .
el ácido oxámico , inhibe a la

Lactato DH asa, bloquea la gluconeogénesis

afectando los niveles de GIC .

NOTA : El Inhibidor se puede unir a la E

y el complejo ES .

F
Las Rx son reversibles .
sin I

con I

Sustrato
Al unirse estos 3 , la cambia la afinidad de la

molécula se inactiva enzima por el sustrato .

Inhibido? pero se puede revertir .

Es]
?⃝
 INHIBICIÓN
MIXTA
• Este tipo de inhibidores se unen

tanto a la E como al complejo ES

con diferente afinidad .

• La Km aumenta , porque interfiere con

Diferente
Vmax .

la unión del S al E .

• La Vmax disminuye porque no toda la E

•

podrá estar unida al S , disminuyendo •

la capacidad de catálisis .

• • o

Diferente
KM

INHIBICIÓN
AIOMPCHHVA
• El inhibidor solo se unirá a la enzima

cuando ésta se une a su S .

• La formacion del complejo [ ES] propiciará

sitio alostérico al cual,
que se genere un

el Irihibidor a competitivo podrá unirse .

• Este tipo de inhibición SÍ Altera el

equilibrio :
- La [ ES] disminuye al formar [ ESI?
haciendo que la Rx se desplace a la

derecha .

- El # de recambio kz disminuye Por9" " E

no está completamente saturada , así la Vmax - g¡ la [ g] disminuye entonces 19

disminuye . KM disminuye y la enzima se vuelven

más afín al S .
 Problema
NOTA : Enzimas alostéricos .

[
o

Vmax = 5.8

km Y=

[S]

① solución
Sacar km

YU
.

/[S]
^

② Solución
Vm*×
"
el # donde
_

Si es se estancó la

velocidad , el KM Será la concentracion

la mitad de la Vmax
ffypffg f)
del S en .

Unidades enzimáticas

ma.
±÷ :#
÷
|

.fi?..a::::
I

!
Km
Rx orden 1

[ S]