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DIAGNOSTICO
Medio de cultivo
es Aislamiento,
Desarrollo identificación,
Utilidad Propagación,
Conjunto de nutrientes, factores
Microorganismos Conservación
de crecimiento
Estudios
Clasificación
Líquidos Básicos
Empíricos
Caldos Nutrientes mínimos y
Humedad Sustancias de
necesarios. (Caldo)
descomposición
un)tritivo, agar, etc.
(carne, levadura,
etc) Sólidos Enriquecidos
Fuente de Carbono
Se les agrega Medios básicos más
Energía (oxidación)
un solidificante Vitaminas, proteínas,
y estructura Sintéticos
aminoácidos, etc
Se conoce su composición Semisólidos
exacta. Para crecimiento
de bacterias y Se les añade agua,
Fuente de nitrógeno Diferenciales
metabolismo útil para mortalidad de
Síntesis de microorganismos Inhibidor,
aminoácidos, Ác.Nu y sustrato,
coenzimas (peptonas) indicador,
Semisinteticos
Agen. Reductor
Gérmenes estrictos
2. Realiza un diagrama de flujo
FIN
CUESTIONARIO
1. Defina cuál es un medio de cultivo y cuál es su utilidad
R: Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes que contiene los nutrimentos necesarios
y condiciones fisicoquímicas (humedad, pH, oxigeno, presión osmótica, etc) para fomentar el
crecimiento y desarrollo de los microorganismos con el objeto de aislar diferentes especies
bacterianas, proceder a su identificación y llevar a cabo una serie de estudios complementarios
2. ¿Cómo se clasifica los medios de cultivo de acuerdo a su consistencia?
Semisólidos. Son medios de cultivo líquidos a los que se añade una concentración de agar baja
o gelificante (para cambiar la consistencia del líquido) en una proporción de 0.35 o 0.5 %, según
la consistencia que se quiera obtener. Se emplea exclusivamente para botellas y jugos. Se
utiliza principalmente para observar la movilidad de las bacterias al igual que las reacciones
bioquímicas
Algunos ejemplos son: agar blando, agar MIO, agar SIM, gelatina nutritiva, etc.
6. Explique en qué consisten los siguientes medios de cultivo y cite tres ejemplos de cada uno:
a) Básicos: Aquel medio que tiene Únicamente poseen los requisitos nutricionales mínimos
para que se desarrolle el crecimiento bacteriano o microorganismo no tiene ningún agente
selectivo. Contiene a grandes rasgos: Caldo nutritivo, Agar nutritivo y Agar BHI (Infusión
cerebro corazón) Ejemplos: extracto de levadura, extracto de carne y los que contienen
peptonas
b) Enriquecido: Se refiere a un medio básico al que se le agregan ciertos suplementos
nutricionales adicionales (aminoácidos, vitaminas, proteínas, factores de crecimiento,
lípidos esenciales, etc).
El medio para un cultivo de enriquecimiento puede ser líquido y proporciona nutrientes y
condiciones ambientales que favorecen el desarrollo de un microorganismo en particular
pero no de otros. Está destinado a aumentar las cantidades pequeñas de microorganismo
deseado hasta niveles detectables.
Se utiliza para aquellos organismos que son más exigentes en su nutrición.
Algunos ejemplos son Agar sangre, Agar chocolate, Agar Columbia, etc.
c) Selectivo y/o diferencial: Los medios selectivos están diseñados para suprimir el
crecimiento de bacterias no deseadas y favorecer el crecimiento de las deseadas; es decir,
contienen inhibidores. Estos inhibidores pueden ser: iones metálicos, colorantes,
antibióticos, Concentraciones elevadas de NaCl, sacarosa en altas concentraciones y sales
biliares
Algunos ejemplos son: Salmonella shigella, Verde brillante, MacConkey, Sal manitol, etc.
Los medios diferenciales contienen una sustancia que ponen de manifiesto alguna
característica de la especie, permiten distinguir con mayor facilidad las colonias de
microorganismos deseados de otras colonias que crecen en la misma placa. Están formados
de sustratos, indicadores, inhibidores.
En términos generales tanto los medios selectivos como los diferenciales van de la mano y
hace referencia a los mismos ejemplos anteriormente mencionados. Sin embargo; cabe
resaltar que todos los medios diferenciales son selectivos, pero no todos los selectivos son
diferenciales.
d) Especial o de ensayo: Existen una gran cantidad de bacterias que no se han podido
cultivar de manera exitosa en el laboratorio por lo que se suelen realizar en otras
condiciones. Por ejemplo; algunos laboratorios disponen de estufas de dióxido de carbono
especiales en las que cultivan las bacterias aerobias que requieren concentraciones de
dióxido de carbono más altas o más bajas que las que se encuentran en la atmósfera. Un
ejemplo es el caso del bacilo de la lepra suele utilizarse el crecimiento en armadillos que
poseen una temperatura corporal relativamente baja equivalente a la que requiere el
microorganismo.
7. ¿Cuál es la diferencia entre agar sangre y agar chocolate?
Agar sangre Agar Chocolate
Permite el crecimiento de la mayoría de las Es un medio enriquecido muy parecido al
bacterias con importancia clínica. agar sangre, la diferencia es que los
Contiene eritrocitos obtenidos de sangre glóbulos rojos están lisados y liberan al
animal, es un medio diferencial porque medio nutrientes como la hemoglobina,
permite comprobar si las bacterias son factor X y factor V. La hemólisis le confiere
hemolíticas. un color marrón característico parecido al del
Se prepara a base del agar básico agregando chocolate. Se utiliza para el cultivo de
componentes sanguíneos a temperaturas bacterias exigentes
bajas (45°C) Se prepara a base del agar básico
agregando componentes sanguíneos a
temperaturas altas (caliente)
10. Realice una tabla para los siguientes medios de cultivo: EMB, Mac, Conkey, Sal y Manitol, S-
110, SS, AN, ASC 5%, Agar Chocolate, Agar verde brillante, Agar triglicolato, Agar Mueller
Hinton y Agr base leche. Dicha tabla deberá contener la siguiente información : Nombre del
medio de cultivo, Clasificación de acuerdo a su composición química, Composición química,
Fundamento del medio, Utilidad e Interpretación
Si cambia a un
color rojo, hay
Es selectivo ya Sirve para el bacterias
Sales que las sales aislamiento e fermentadoras
biliares, biliares y el identificación de de lactosa, si
peptonas, cristal violeta Enterobacterias permanece
mezcla de impiden el (bacterias Gram incoloro o
Diferencial y peptonas, crecimiento de negativas como amarillo no se
Mac selectivo lactosa, Gram positivos la Salmonella y la encuentran
Conkey NaCl, Agar, y hongos. E. Coli)
Rojo neutro También es
(indicador), diferencial ya
cristal violeta que la bacteria
y pH: 7.1 fermentadora de
lactosa acidifica
el medio y
cambia de color.
Estafilococos
La sal impide el positivos a la
crecimiento de coagulasa
Nutrientes, la mayoría de Diferenciación de producen
sal al 7.5% las bacterias. Al estafilococos colonias y un
Selectiva y peptonas y llevarse a cabo positivos a la medio
Sal- diferencial extractos de la fermentación coagulasa de los circundante de
manitol carne bovina. del manitol, se negativos color amarillo.
Rojo fenol cambia el pH y Los negativos
es visible a la producen
gracias al colonias de
indicador color rojo y no
hay un cambio
del indicador
rojo fenol.
Medio selectivo La
Agar En este medio que se utiliza fermentación
bacteriológic la peptona para aislar del manitol
o, fosfato provee la fuente estafilococos produce
dipotásico, de carbono, patógenos de ácidos y la
gelatina, nitrógeno, muestras clínicas adición de
Selectivo y cloruro vitaminas y y no clínicas, con azul de
diferencial sódico, minerales, el base en la bromotimol
S-110 peptona de extracto de fermentación de revela
caseína, levadura manitol, la colonias
Dmanitol, proporciona formación de bacterianas de
lactosa y vitaminas del pigmento y la color amarillo.
extracto de complejo B, la hidrólisis de La gelatina es
levadura alta concentraci gelatina. el sustrato
ón de cloruro de para la enzima
sodio tiene gelatinasa
efecto en el
desarrollo
selectivo de los
Estafilococos.
La lactosa y el
D-manitol, son
los hidratos de
carbono
fermentables
Sales biliares Sus Es Selectivo para Si hay
y Colorantes componentes especies de Salmonella; no
Selectivo y como fucsina impiden el Salmonella y hay color pero
SS diferencial ácida y azul crecimiento de Shigella si un
de otros precipitado de
bromotimol microorganismo color negro Si
s dejando solo hay solo
aquellos que Shigella
son deseados, permanece
además la incoloro.
fermentación Si hay
cambia el pH Lactosa
del medio por lo cambia a rojo-
que se logra rosado.
distinguir
gracias a los
colorantes.
El extracto de
La pluripeptona Medio de cultivo carne
y el extracto de que se utiliza proporciona al
Pluripeptona, carne para propósitos medio una
extracto de constituyen la generales, para fuente de
carne , fuente de el aislamiento y carbohidratos,
AN No selectivo cloruro de carbono, recuento de de nitrógeno y
sodio, agar, nitrógeno y microorganismos vitaminas.
pH final 7.3 aportan con escasos
nutrientes para requerimientos
el desarrollo nutricionales
bacteriano, el
agregado de
cloruro de sodio
mantiene el
balance
osmótico y el
agar es el
agente
solidificante
La infusión de
músculo de Es un medio muy Este medio
corazón y la nutritivo de uso permite la
peptona, general para el visualización
otorgan al aislamiento y el de las
Peptona, medio un alto cultivo de reacciones
cloruro de valor nutritivo, el microorganismos hemolíticas
ASC 5% Enriquecido sodio, Agar, cloruro de sodio exigentes y no descritas para
pH final 7.3 mantiene el exigentes a partir cada
balance de muestras microorganism
osmótico, el clínicas. o en sangre
agregado de 5% de cordero.
de sangre
desfibrinada
estéril
promueve el
desarrollo de
bacterias
exigentes
Agar Se produce una Se utilizan para En un medio
chocolate lisis de los bacterias como de cultivo de
Enriquecido glóbulos rojos al Neisseria agar chocolate
agregar la base gonorrhoeae se observa de
Glóbulos del agar a la forma café,
rojos lisados, sangre, de esta debido a la
hemina y forma se lisis de los
NAD proporcionan eritrocitos.
nutrientes
necesarios,
como el factor X
y V provocando
la proliferación
de bacterias
exigentes
El verde Aislamiento de la Si hay
brillante inhibe Salmonella presencia de
la flora de excepto bacterias
Extracto de algunos Salmonella typhi fermentad ras
levadura, microorganismo Y Salmonella se forman
Agar Selectivo y lactosa, s. La lactosa y paratyphi colonias
verde diferencial sacarosa, sal sacarosa son amarillo
brillante y rojo fenol los componente verdosas
fermentable y el rodeadas por
rojo fenol el un halo color
indicador de amarillo
dicha verdoso. De lo
fermentación a contrario, hay
partir del pH colonias
blanco-
rosadas o
transparentes
rodeadas por
un halo rojizo.
Agar Enriquecimient Extracto de La glucosa, Se utiliza en El crecimiento
tioglicolat o levadura, peptona y procedimientos se demuestra
o dextrosa, extracto de cualitativos para por turbidez
digerido levadura la prueba de en los tubos
pancreático proporcionan esterilidad y para
de caseína, factores de el aislamiento y
sal, crecimiento cultivo de
tioglicolato bacteriano aerobios como
sódico res anaerobios y
azurina. microaerófilos
que no son
exigentes en
exceso.
Agar Enriquecido Carne Debido a su Realización de Se observa
Mueller bovina, composición pruebas de crecimiento
Hinton almidón, promueve el sensibilidad de microbiano
ácido de desarrollo antibióticos
caseína microbiano
Se basa en la Medio utilizado Color rosado
capacidad de en la selección en el medio de
Glucosa ciertos de cultivo:
anhidra, microorganismo microorganismos fermentación
extracto de s de producir productores de de la lactosa,
Agar base Selectivo levadura, determinadas proteasas. la rx. Es ácida
leche leche reacciones -Color azul en
desnatada metabólicas en el medio de
en polvo , medios con cultivo: no hay
digerido leche. Estas fermentación
enzimático reacciones se de la lactosa
de caseína, ponen en pero el
agar manifiesto microorganism
bacteriológic mediante un o ha utilizado
o indicador redox las sustancias
y pH nitrogenadas
del medio
-Color blanco
en el medio de
cultivo. Se ha
producido una
peptonizacion
de la proteína
de la leche
ACTIVIDADES EXTRA
1. Completar la tabla descrita en el punto 10 con: TCBS, SIM y KIA, tipo de microorganismo o
grupos que se esperan aislar, tipo de medio de cultivo (enriquecido, enriquecimiento,
diferenciales, selcetivos, especiales, etc.
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