Tinción de esporas

Las esporas son estructuras que contiene el material genético de la bacteria y que resisten largos periodos
sin agua ni nutrimentos, en condiciones de calor o frío extremo. Algunas esporas siguen siendo viables
después de miles de años e incluso después de hervirlas, estas germinan rápidamente cuando absorben agua,
se disuelve su cubierta y se forma una nueva pared celular (la envoltura de las bacterias). Debido a que las
endosporas no se colorean a causa de la resistencia que ofrece su gruesa cubierta a la impregnación por los
colorantes habituales utilizados se emplean métodos especiales como la tinción selectiva en los que se emplea
el calor como mordiente. Lo anteriormente dicho lo podemos comprobar con el trabajo realizado el en
laboratorio donde se tomo una muestra de un cultivo de Bacillus subtilis y se realizó la frotis con ayuda de
una gota de agua en el portaobjetos, luego de esto la muestra se sometió a un proceso de tinción con verde
malaquita, debido a que las esporas no pueden ser coloreadas por medio de una simple tinción ya que su
gruesa capa contiene ácido Dipicolinico, esto le permite tener resistencia térmica y adicionalmente el calcio
puede ayudar a la resistencia al calor y a los agentes que oxidan, todo esto impide que el colorante se
impregne, en vista de esto la muestra se sometió a calor ya que el calor sirve como mordiente para fijar el
colorante (verde malaquita) a la espora, por consiguiente se aplica un lavado el cual sirve para remover el
acceso de colorante de las formas vegetativas y general a la muestra, teniendo en cuenta que el colorante
está fijado en las esporas y por lo tanto estas no van a ser decoloradas, posteriormente la placa de dejar
enfriar y se ejecuta un proceso de tinción adicional con rojo safranina para colorear las bacterias y así se
puedan diferenciar de las esporas, por último la muestra se lleva al microscopio y con la ayuda de aceite de
inmersión se hace la respectiva observación donde se pudo diferenciar en muy pequeñas unidades (alrededor
de 2) las esporas de color verde en forma de gránulos