Medios de cultivo

El conocimiento de la nutrición microbiana permite el cultivo de los microorganismos en el

laboratorio. Un medio de cultivo es una solución acuosa (bien como tal o, bien incorporada a un
coloide en estado de gel), en las que están presentes todas las sustancias necesarias para el crecimiento
de un(os) determinado(s) microorganismo(s).

Propiedades de los medios de cultivo

- Humedad. Indispensable para el crecimiento de microorganismos, su carencia desecación) puede

llevar a la muerte del microorganismo.
- Fertilidad. Se refieren a los elementos o compuestos básicos que permiten el crecimiento bacteriano.
- pH. Se refiere a los pH óptimos para el desarrollo bacteriano, indispensable para su aislamiento;
variaciones ácidas o alcalinas, pueden inhibir su crecimiento.
- Transparencia. Permite la observación bacteriológica, evidenciar morfológica y físicamente su
crecimiento en medios de cultivo adecuado.

La presentación comercial de los medios sintéticos y deshidratados puede ser en polvo o granulados.
En el mercado se pueden encontrar medios listos para fundir o medios servidos en placas Petri o
tubos.
Los medios de cultivo granulados, son medios de cultivo elaborados a partir de materias primas
sometidas a molienda, mezclado, pulverización y granulación (aglutinación de la mezcla
pulverulenta). Este tipo de medios tienen algunas ventajas frente a los medios tradicionales en polvo,
como lo son:

- Reduce alergización o respiración de sustancias tóxicas por producción de polvo.

- Menor adherencia a las paredes de los recipientes.
- Mayor facilidad en el pesaje.
- Mejor humectabilidad (grumos fácilmente solubles).
- No se produce separación de fases de los componentes del medio de cultivo en almacenamiento
prolongado.
- Mejor conservación.

Clasificación de los medios de cultivo de acuerdo a su estado físico, composición y su propósito

SEGÚN SU ESTADO FÍSICO

-Sólidos: 1.5 a 2.0 % de agar – agar.

-Semisólidos: 0.5 % de agar – agar.
-Líquidos: No contienen agar – agar.
-Bifásico: Contiene fase sólida y fase líquida (listos para utilizar). Utilizados para cultivar
microorganismos tal y como se encuentran.

SEGÚN SU NATURALEZA O COMPOSICIÓN

Proteicos contienen peptonas, hidrolizados o extractos, o sea, productos de la lisis o hidrólisis parcial
de las proteínas, cuya composición no se conoce con exactitud.
Sintéticos: No contienen en su formulación productos de naturaleza proteica.

Intermedios Contienen compuestos nitrogenados de origen proteico, pero de composición o estructura

conocida, como los aminoácidos, conjuntamente con otras sustancias orgánicas e inorgánicas
conocidas.

SEGÚN SU PROPÓSITO

Comunes Favorecen el desarrollo de la mayor parte de los microorganismos sin satisfacer

específicamente algún requerimiento nutricional de carácter poco habitual en la generalidad de los
mismos

Especiales Su composición cumple con los requerimientos nutricionales vitales de un microorganismo

determinado que sólo en ese medio encuentra condiciones óptimas para su desarrollo.

Diferenciales Posibilitan la diferenciación entre microorganismos.

Selectivos Incluyen en su formulación ingredientes que inhiben el desarrollo de determinados

microorganismos y contienen otras sustancias que promueven el crecimiento de otros.

*Existen medios que pueden cumplir funciones mixtas, es decir, permiten aislar microorganismos y
revelan una reacción o cambio químico específico de metabolismo como: coloraciones de colonias o
cambios de color del medio; es decir, selectivos y diferenciales al mismo tiempo.

Agar Mac Conkey

USO
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos a partir de muestras clínicas, aguas y alimentos. Todas las especies de la
familia Enterobacteriaceae se desarrollan en el mismo.

FÓRMULA (en gramos por litro)

PEPTONA DE CARNE ........................................................................................................1.5
PEPTONA DE GELATINA ..............................................................................................17.0
TRIPTEÍNA ...................................................................................................................................1.5
LACTOSA .....................................................................................................................................10.0
MEZCLA DE SALES BILIARES Nº3......................................................................1.5
CLORURO DE SODIO .........................................................................................................5.0
ROJO NEUTRO ......................................................................................................................0.03
CRISTAL VIOLETA ...........................................................................................................0.001
AGAR ...............................................................................................................................................13.5
pH FINAL: 7.1 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadasrojizas. Puede observarse halo de
precipitación biliar.
● Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras.
 Manitol Salado Agar
USO
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de
estafilococos a partir de diversas muestras.

FÓRMULA (en gramos por litro)

EXTRACTO DE CARNE .....................................................................................................1.0
PEPTONA DE CARNE ........................................................................................................5.0
TRIPTEÍNA .....................................................................................................................................5.0
MANITOL ....................................................................................................................................10.0
CLORURO DE SODIO ......................................................................................................75.0
ROJO DE FENOL ...........................................................................................................0.025
AGAR ...............................................................................................................................................15.0
pH FINAL: 7.4 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Microorganismos fermentadores de manitol: colonias de color amarillo rodeadas o no de un
halo amarillo.
● Microorganismos no fermentadores de manitol: colonias del color del medio, rojas rodeadas o
no de halo rojizo-púrpura
 Agar Xilosa - Lisina - Desoxicolato (Agar XLD)

USO
El agar XLD (Xilosa, Lisina, Desoxicolato) es un medio selectivo diferencial, utilizado para el
aislamiento y diferenciación de patógenos entéricos Gram negativos, especialmente del género
Shigella.
Medio de cultivo para el aislamiento selectivo y diferencial de enterobacterias según fermentación de
la xilosa y degradación de la lisina. Recomendado para el aislamiento selectivo de Salmonella y
Shigella.

FÓRMULA (en gramos por litro)

Xilosa 3,75 g
L- Lisina 5,0 g
Lactosa 7,5 g
Sacarosa 7,5 g
Cloruro de Sodio 5,0 g
Extracto de Levadura 3,0 g
Rojo Fenol 0,08 g
Desoxicolato de Sodio 2,5 g
Tiosulfato de Sodio 6,8 g
Citrato Férrico de Amonio 0,8 g
Agar 15,0 g
Agua destilada c.s.p. 1000 mL
pH final 7,4 ± 0,2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Una vez completado el período de incubación, observar el desarrollo bacteriano y verificar las
siguientes respuestas culturales: Las bacterias fermentadoras de xilosa, lactosa y sacarosa producen
acidificación del medio de cultivo, provocando un viraje del color desde el rojo al amarillo. Las
bacterias que decarboxilan la L-lisina generan cadaverina y producen una zona rojo púrpura por efecto
de la elevación del pH. La producción de H2S se observa como colonias de color negro, pero solo
bajo condiciones alcalinas.

Vogel Johnson Agar

USO
Medio utilizado para la rápida detección de estafilococos coagulasa positivo fermentadores de
manitol, a partir de alimentos y otros materiales de importancia sanitaria y clínica.

FÓRMULA
TRIPTEÍNA ............................................................................................................................10.0 g
EXTRACTO DE LEVADURA .....................................................................................5.0 g
MANITOL ................................................................................................................................10.0 g
FOSFATO DIPOTÁSICO................................................................................................5.0 g
CLORURO DE LITIO .......................................................................................................5.0 g
GLICINA ..................................................................................................................................10.0 g
ROJO DE FENOL ........................................................................................................0.025 g
AGAR ..........................................................................................................................................16.0 g
SOLUCION ESTERIL DE TELURITO DE POTASIO 1% ..................20 ml
AGUA PURIFICADA .................................................................................................1000 ml
pH FINAL: 7.2 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Observar las características de las colonias.
● Bacterias fermentadoras de manitol: halo amarillo en el medio de cultivo alrededor de la
colonia.
● Bacterias no fermentadoras de manitol: halo rojizo en el medio de cultivo alrededor de la
colonia.
● Bacterias que reducen el telurito de potasio: colonias de color grisáceo-negro.
● Bacterias que no reducen el telurito de potasio: colonias del color del medio, transparentes.
 Salmonella Shigella Agar

USO
Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas
especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su
presencia.

FÓRMULA
PLURIPEPTONA .................................................................................................................5.0 g
EXTRACTO DE CARNE ................................................................................................5.0 g
LACTOSA ................................................................................................................................10.0 g
MEZCLA DE SALES BILIARES .............................................................................8.5 g
CITRATO DE SODIO .........................................................................................................8.5 g
TIOSULFATO DE SODIO ..............................................................................................8.5 g
CITRATO FÉRRICO ...........................................................................................................1.0 g
VERDE BRILLANTE ......................................................................................... 0.00033 g
ROJO NEUTRO .............................................................................................................0.025 g
AGAR ..........................................................................................................................................13.5 g
AGUA PURIFICADA .................................................................................................1000 ml
pH FINAL: 7.0 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias rosadas o rojizas.
● Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras.
● Microorganismos productores de SH2: colonias con centro negro.
 Chocolate Agar Suplementado
USO
Este medio permite el crecimiento de microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales,
por ejemplo especies de Streptococcus, Haemophilus y Neisserias patógenas.

FÓRMULA
PEPTONA DE CARNE...................................................................................................5.0 g
TRIPTEÍNA.............................................................................................................................12.0 g
EXTRACTO DE LEVADURA......................................................................................5.0 g
EXTRACTO DE CORAZÓN........................................................................................3.0 g
ALMIDÓN SOLUBLE......................................................................................................1.0 g
CLORURO DE SODIO....................................................................................................5.0 g
AGAR..........................................................................................................................................15.0 g
SANGRE OVINA.................................................................................................................50 ml
SUPLEMENTO BRITALEX........................................................................................10 ml
AGUA PURIFICADA.................................................................................................1000 ml
pH FINAL 7.3 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Observar las características de las colonias.
 Levine EMB Agar (con Eosina y Azul de Metileno)

USO
Medio adecuado para la búsqueda y diferenciación de bacilos entéricos, a partir de muestras clínicas,
alimentos y otros materiales de importancia sanitaria.

FÓRMULA
PEPTONA ...............................................................................................................................10.0 g
LACTOSA ................................................................................................................................10.0 g
FOSFATO DIPOTÁSICO ................................................................................................2.0 g
EOSINA ........................................................................................................................................0.4 g
AZUL DE METILENO ..............................................................................................0.065 g
AGAR ..........................................................................................................................................15.0 g
AGUA PURIFICADA .................................................................................................1000 ml
pH FINAL: 7,1 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias de color negro azulado o amarronado.
Pueden tener centro oscuro y brillo metálico.
● Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, incoloras.
 CLDE Medio

USO
Medio indicado para el procesamiento de urocultivos. Es utilizado para el aislamiento, recuento e
identificación presuntiva de microorganismos, pues permite el desarrollo de la mayoría de los
patógenos urinarios y previene el desarrollo invasor de Proteus spp.

FÓRMULA
PEPTONA ..................................................................................................................................4.0 g
EXTRACTO DE CARNE ................................................................................................3.0 g
L-CISTINA ...........................................................................................................................0.128 g
TRIPTEÍNA ................................................................................................................................4.0 g
AZUL DE BROMOTIMOL .........................................................................................0.02 g
LACTOSA ................................................................................................................................10.0 g
AGAR ..........................................................................................................................................15.0 g
AGUA PURIFICADA .................................................................................................1000 ml
pH FINAL: 7.3 ± 0.2

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

● Microorganismos fermentadores de lactosa: colonias amarillas.
● Microorganismos no fermentadores de lactosa: colonias del color del medio, azuladas.
 Thayer Martin Medio Modificado
Papa Glucosado Agar
Sangre Agar (Base Columbia)
Sangre Agar (Base Tripteína)
Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar
Tripteína Soya Agar
Mueller Hinton Sangre Agar
Bibliografía

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