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Arrieta A. Luis F.1, Gómez V. Brandon2, Ortega C. Angie P.3, Pérez L. Juan F.4
Facultad de Nanotecnología, Escuela de ingenierías, Universidad Pontificia Bolivariana, Cq. 1 No. 70-01, Campus Laureles,
Medellín, Colombia
E-mail: luis.arrieta@upb.edu.co1, brandon.gomezv@upb.edu.co2, angie.ortegac@upb.edu.co3, juan.perezl@upb.edu.co4
Resumen:
Desde comienzos del siglo XVII se utiliza la técnica de la microscopía óptica para poder visualizar aquellos cuerpos diminutos, que no somos
capaces de observar normalmente con nuestra vista. Dicha técnica tuvo su auge a mediados de ese siglo, con los aportes realizados por científicos
de la época como Galileo Galilei, Robert Hooke o Anton van Leeuwenhoek. A partir de allí se inventaron diversas e innovadoras técnicas de
microscopía, con múltiples funciones específicas para cada labor. Para efectos de este estudio, se hizo uso precisamente de un microscopio óptico
compuesto junto con otros instrumentos como cubreobjetos, portaobjetos, pipetas Pasteur y hojas de bisturí, para manipular y observar una serie
de muestras “de uso cotidiano” (algunas de ellas previamente tratadas con reactivos químicos para un óptimo acondicionamiento) que podían ser
de origen biológico, como la mucosa bucal; vegetal, como la pulpa de la papa; u objetos inanimados, como una porción de papel con letras
impresas. Esta observación se hizo con el fin de realizar una caracterización morfológica de las muestras usando el microscopio (desarrollando
habilidades en el uso de este) y apoyándonos en la literatura. Finalmente se pudo observar con éxito todas y cada una de las muestras a disposición
del grupo de trabajo, apreciando y detallando cada una de sus microestructuras características.
Palabras clave:
1. Introducción Drebbel mejoró este prototipo, agregándole una lente adicional. Pero
no es hasta 1665, cuando el científico británico Robert Hooke,
Para inicios del siglo XVII, gracias a los adelantos científicos y
ensambla empíricamente un microscopio óptico compuesto, con el que
tecnológicos de la época, el ser humano ya era capaz de observar las
observó y estudió por primera vez la estructura interna del corcho,
estrellas, la luna y otros cuerpos celestes, utilizando un instrumento
siendo la primera descripción a detalle de una célula, lo cual quedó
óptico, el telescopio, que multiplicaba el tamaño aparente de los
registrado en su obra “Micrographia” [13]. Con el pasar de los años,
objetos observados, permitiendo visualizar más a detalle estos cuerpos
era cada vez mayor el número de científicos e intelectuales que se
que se encontraban a grandes distancias. No obstante, si bien es cierto
interesaron en el campo de la microscopía y de la óptica, realizando
que el observar estos cuerpos macroscópicos era algo factible, el
diversas contribuciones y mejoras a los modelos clásicos, respetando
examinar cuerpos más pequeños todavía era una tarea que no se podía
los principios básicos de su funcionamiento: la magnificación (que es
realizar, dando por sentado que los organismos más diminutos eran los
la capacidad de aumentar el tamaño de una imagen) y la resolución
insectos [12]. Atendiendo esta problemática, en 1609, Galileo Galilei,
(que consiste en la capacidad de producir una imagen bien definida de
el mismo que había hecho múltiples aportaciones para la fabricación
puntos muy próximos el uno del otro).
del telescopio, traslada estos principios para diseñar un instrumento
que, en lugar de enfocar objetos muy grandes, pudiera enfocar objetos De allí en más, se han inventado una gran variedad de microscopios
de tamaño microscópico. Es así como ese mismo año construye el distintos entre sí y aptos para analizar muestras en específico. Abarcan
primer microscopio óptico simple, que constaba de una lente, un desde los tradicionales microscopios ópticos, pasando por los
objetivo convexo y un ocular. Diez años más tarde el físico Cornelius microscopios electrónicos hasta llegar a los microscopios de fuerza
atómica. Pero a la par que se creaban estos nuevos equipos, también se • Agua destilada
desarrollaron nuevas técnicas de microscopía (aplicadas en los nuevos • Azul de metileno al 0.1%
microscopios) que especificaban aún más la actividad de cada • Lugol al 1%
instrumento, facilitando así, no solo la observación de las muestras sino • Verde Jano (0.1g de verde Jano en 100ml de NaCl al 0.9%
también la caracterización de estas [14]. • Aceite de inmersión
Para efectos de este estudio, se empleó un microscopio óptico 2.2. Procedimiento y Métodos
compuesto, con el objetivo de visualizar un puñado de muestras
cotidianas (como el bulbo de una cebolla o la pulpa de una papa) y, en 2.2.1. Preparación de las muestras
el proceso familiarizarse con los componentes del equipo, mientras se
Para garantizar la adecuada preparación o montaje en fresco, se
adquirían destrezas en el uso de este para cumplir de manera adecuada
consideró esencial la limpieza tanto del portaobjetos como del
el fin de observar y analizar las estructuras presentes en estos
cubreobjetos. Inicialmente, se aseguró el portaobjetos sobre una
materiales.
superficie plana y se seleccionó la muestra correspondiente. Por
2. Metodología ejemplo, se escogió una letra no simétrica impresa en un papel delgado.
Luego, se aplicaron una o dos gotas de agua, según fuera necesario,
El presente artículo tiene como objetivo principal explorar las
para cubrir la muestra. Tras asegurar la humedad del papel, el
capacidades y aplicaciones del microscopio óptico compuesto en la
cubreobjetos se colocó con un ángulo de aproximadamente 45° para
observación detallada de estructuras a escala microscópica. Este
evitar la formación de burbujas que podrían obstaculizar la
instrumento juega un papel crucial en el análisis de células, tejidos y
observación. Este procedimiento se repitió para la preparación de las
otros componentes biológicos y materiales, permitiendo una
muestras de cabello o hilo.
comprensión más profunda de su morfología y función. La técnica de
microscopía proporciona una ventana al mundo microscópico, En cuanto a las muestras biológicas, para el bulbo de cebolla, se
desvelando detalles que son imperceptibles a simple vista. seleccionó una capa y se procedió a su sección mediante el uso de un
bisturí. Se observó que esta capa consiste en múltiples capas o escamas,
2.1. Materiales y Equipos cada una recubierta con una membrana transparente. Esta muestra
Los siguientes materiales y equipos fueron usados en el experimento: específica se convirtió en el centro de interés. Una pequeña porción se
• Papel limpia lentes extendió en un nuevo portaobjetos y se repitió el procedimiento de
• Microscopio óptico compuesto montaje en fresco, reemplazando el agua con Lugol para resaltar las
• Papel delgado con letras impresas características de la muestra.
• Fibras de hilo de diferentes colores
Para la muestra de papa, se realizó un corte en una sección de la papa
• Extendidos de sangre humana (placas coloreadas)
con el bisturí y se realizó un raspado, la muestra se colocó en un
• Placas con montajes de corcho
portaobjetos nuevo y se sometió al procedimiento de montaje en fresco
• Frascos de compota con agua del grifo
con lugol para una observación óptima, en donde de manera
• Palillos de dientes o aplicadores sin algodón
consiguiente se analizaría las muestras de las células epiteliales que
• Portaobjetos
surgen en la saliva, que con ayuda del azul de metileno se optimizó su
• Cubreobjetos
observación.
• Pipetas Pasteur plásticas
• Hojas de bisturí Finalmente, las muestras restantes como las de corcho y sangre, ya se
encontraban previamente preparadas y fueron suministradas por el
2.1.1. Muestras de materiales biológicos docente.
• Bulbos de cebolla (Allium cepa) *
2.2.2. Uso y ajuste del microscopio
• Papas (Solanum tuberosum) *
• Muestra creativa: muestra de cúrcuma y semen Habiéndose familiarizado con los componentes y partes del
2.1.2. Reactivos microscopio, se procedió a encenderlo, ajustando la iluminación con
ayuda del tornillo intensificador de luz y el condensador. Se utilizó la
pestaña ubicada en el ocular derecho como referencia moviendo el
tornillo macrométrico y micrométrico, hasta que esta misma esté
enfocada.
Para ciertas muestras fue necesario el uso del objetivo 100x a fin de
obtener una observación más detallada, para poder hacerlo se movió el
Fig. 1. Imágenes de papel delgado con letras impresas. a) Aumento 4x, b)
revolver, que se encontraba en 40x enfocado y posicionado, hacia el
Aumento 10x, c) Aumento 40x, d) Aumento 100x.
objetivo 4x, sin pasar por el objetivo 100x y sin mover la muestra, ya
centrado en este objetivo se hizo uso del aceite de inmersión, colocando
Se observó una pequeña porción de papel de periódico que tenía un
una gota sobre el cubreobjetos de la muestra, y directamente pasando
fragmento de texto impreso.
del objetivo 4x al 100x.
Detalladamente se visualizó empleando los objetivos de 4x, 10x, 40x y
2.2.4. Cuidado y almacenamiento del microscopio 100x. Notando con los dos primeros aumentos una imagen de la letra
virtual, invertida y magnificada. Luego, con los objetivos de mayor
Después de la sesión de experimentación, es necesario limpiar el aumento (40x y 10x) se apreció los parches discontinuos de la tinta
microscopio. Se colocó en posición de enfoque el objetivo 4x y se retiró plasmada sobre el papel, surgiendo la discontinuidad de la materia a
la última muestra de la platina. Proseguimos con la limpieza del una escala más pequeña.
objetivo 100x con el papel limpia lentes, y se limpió el resto del
microscopio con un kleenex a excepción de las lentes de los oculares,
3.2. Muestra de cabello humano
Se alejó al máximo el tubo y la platina, cerramos el diafragma, y se
disminuyó la intensidad de luz. Finalmente se apagó y desconectó el
microscopio, para después asegurar el cordón y dejarlo en el sitio
especificado por el docente, sujetándolo con una mano del brazo y con
la otra en la base como apoyo.
3. Resultados
3.1. Muestra de papel delgado con letras impresas
escamas que evidencian los impactos ambientales en el cuero
cabelludo.
Fig. 2. Hebra capilar de Luis Felipe Arrieta. a) Aumento 4x, b) Aumento 10x,
c) Aumento 40x, d) Aumento 100x.
Fig. 3. Hebra capilar de Brandon Gómez. a) Aumento 4x, b) Aumento 10x, c) una sustancia cerosa que confiere al corcho sus propiedades de
Aumento 40x, d) Aumento 100x. impermeabilidad y resistencia. Estas células, aunque están muertas
aparecen con formas irregulares con paredes distintivas y una
estructura celular característica.
Se dispusieron dos hebras de cabello para analizar y de algún modo
comparar las diferencias entre ambos. Entre las cuales, desde un Se logra apreciar también las lenticelas que son pequeñas áreas de la
sentido general, podemos percibir un grosor determinado, la forma de corteza del alcornoque que permiten el intercambio de gases entre el
la hebra, en el que en la figura 3 es un poco más ondulada a interior de la planta y el ambiente exterior. En el corcho, las lenticelas
comparación de la figura 2 que es un poco más lisa, además de percibir a menudo se observan como pequeñas aberturas o áreas más claras en
la estructura, en las fotos de 100x, se evidencia como ciertas escamas la superficie de las células.
o diferentes estructuras que se superponen, siendo estás la referencia
La observación microscópica también puede revelar la porosidad del
de la cutícula perteneciente al cabello, que se encarga de brindarle la
corcho. Los espacios intercelulares son típicos en el corcho y pueden
protección y resistencia, agregando además de la diferencia de
variar en tamaño y distribución.
pigmentación que depende de la cantidad de melanina, pero realmente
hasta puntos puede ser causante de eso. Una manera eficiente de Los canales intercelulares y los conductos en el corcho pueden ser
cualificar la calidad del cabello, para determinar cuán estable o captados bajo el microscopio. Estas estructuras contribuyen a la
saludable se encuentra una persona, midiéndose a partir de aquellas
capacidad de absorción y retención de líquidos por parte del corcho, lo
que lo hace útil en aplicaciones como tapones de botellas.
Es de esta manera que, cada celda corresponde a una célula vegetal la regulación de las funciones celulares y la transmisión de información
perteneciente a la capa de la cebolla (Allium Cepa), donde podemos hereditaria. Este se alcanza a percibir como un punto en el centro de la
mejor tinción para la óptima observación de la muestra bajo el entre la membrana plasmática y el núcleo. Esta región celular alberga
una serie de orgánulos y estructuras, cada uno de los cuales contribuye
microscopio.
a funciones específicas que abarcan desde la síntesis de proteínas hasta
el procesamiento de nutrientes y la generación de energía.
Es de esta manera, que el cabello de Luis Felipe Arrieta tiene una menor
concentración de eumelanina en comparación del pigmento del cabello
de Brandon. Siendo está información fundamental para aquellas
empresas que quieran destinar a la fabricación de tintes capilares.
(referencia: https://www.elsevier.es/es-revista-offarm-4-articulo-
Fig. 12. Muestra de semen vista en con un aumento de 40x
coloracion-del-cabello-i-conceptos-13034844)
4.2. Muestra de corcho En el que, ya distinguiendo los diferentes grupos de los Leucocitos,
podemos clasificarlos según nuestras micrografías tomadas.
El corcho es parte de la corteza de un árbol (alcornoque) que ha
cumplido su ciclo de vida. Es por esto que las células del corcho al
cumplir su ciclo de vida empiezan a perder sus organelos, entre ellos el
núcleo. Entonces se pudo observar las celdas del corcho, los poros y
las vías o canales intercelulares.
verde. dependerá del proceso de secado, así como de las cargas que se utilicen
en su fabricación, estas cargas son productos de polvo que se
distribuyen sobre el mismo para producir diversos efectos. Además, un
papel tiene diferentes tipos de resistencia, como mecánica, resiliencia,
durabilidad, etc.
• Requisitos estáticos pequeñas gotas de aceite (Fig. 22). Sin embargo, la proporción de otras
características observadas variaba. La presencia de oleorresina se
La composición química de la tinta varía según su formulación y
detectó en un 28,9%, mientras que el corcho apareció en un 64,4% del
procesos de fabricación. Al comparar la composición de la tinta de
total de observaciones. Como resultado, se llevó a cabo un análisis
diferentes documentos, los expertos pueden determinar si la tinta
multivariado en las observaciones. Este análisis indicó la posible
utilizada es consistente con una marca, lote o período de tiempo
existencia de dos conjuntos de muestras que se diferenciaban por la
específico.
presencia o ausencia de tricomas no glandulares. También se notaron
en la cocina como condimento para dar sabor y color a los alimentos. llamado semen, es una mezcla de espermatozoides (5%), combinados
con otras secreciones provenientes de tres tipos de glándulas que se
vacían en el conducto deferente o la uretra, y son: las vesículas Incluso las muestras no biológicas, como el papel periódico,
seminales, la glándula prostática y las glándulas bulbouretrales. contribuyeron al entendimiento de la estructura de materiales
manufacturados. El análisis microscópico del papel mostró la
El líquido producido por las vesículas seminales comprende alrededor
disposición de las fibras celulósicas y la presencia de tinta en sus poros.
de 60% del semen. Este líquido es rico en fructosa, un monosacárido
que proporciona energía para los espermatozoides. El pH ligeramente
Este laboratorio demostró cómo el microscopio es una herramienta
alcalino del líquido protege a los espermatozoides de la acidez de la
esencial para adentrarnos en los detalles microscópicos que a menudo
orina restante en la uretra del hombre y de las secreciones ácidas en la
pasan desapercibidos en nuestro entorno cotidiano. El estudio de estas
vagina de la mujer. Asimismo, contiene prostaglandinas, que estimulan
muestras resaltó la diversidad de las estructuras celulares y tejidos en
las contracciones uterinas que ayudan a transportar los
diferentes contextos biológicos y materiales, enriqueciendo nuestra
espermatozoides hasta el aparato reproductor femenino. La glándula
comprensión de la complejidad del mundo que nos rodea.
prostática (conocida sólo como próstata) produce una secreción
alcalina rica en nutrimentos que comprende aproximadamente 30% del
6. Anexos
volumen del semen. El líquido de la próstata incluye enzimas que
aumentan la fluidez del semen después de que éste es liberado en la Aumento total
vagina, permitiendo que los espermatozoides naden con mayor Objetivo Ocular Amplificación
libertad. Sin embargo, al ser depositado fuera de la vagina, este 4x 10x 40x
comienza a perder las propiedades que mantienen vivos a los 10x 100x
espermatozoides, por factores como la humedad o la temperatura. Así 40x 400x
que el tiempo máximo que pueden sobrevivir será aproximadamente 100x 1000x
30 minutos. Debido que la muestra que analizamos fue tomada con Tabla 3. Magnificación Total del microscopio.
antelación, la mayoría de los espermatozoides yacían inertes en el
líquido seminal restante. [17] 7. Referencias
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5. Conclusiones
Examination of Blood, » ZEISS, pp. 4-7, 2018.
En conclusión, el laboratorio de microscopía proporcionó una
2. B. Roisin, «The examination of potato starch granules under
oportunidad para explorar y comprender la diversidad microscópica de
the microscope, » International Journal of Molecular
una amplia gama de muestras cotidianas. A lo largo del experimento,
Gastronomy, pp. 1-3, 2023.
se observaron y analizaron muestras tanto de origen biológico como
3. C. Ophardt, E. Professor y C. Elmhurst, «LibreTexts
vegetal, revelando una asombrosa variedad de estructuras y
CHEMISTRY,» [En línea]. Available:
características.
https://chem.libretexts.org/Bookshelves/Biological_Chemis
try/Supplemental_Modules_(Biological_Chemistry)/Carboh
Las muestras biológicas, como la sangre, la saliva y el semen, revelaron
ydrates/Case_Studies/Starch_and_Iodine#:~:text=Amylose
detalles cruciales sobre las diferentes células y componentes presentes
%20in%20starch%20is%20responsible,the%20presence%2
en cada uno de estos fluidos. La sangre presentaba glóbulos rojos y
0of%20potassium%20iodide. [Último acceso: 23 08 2023].
blancos, proporcionando información sobre la oxigenación y el sistema
4. M. Yaseen y A. Illimar, «Iodine sequestration by amylose to
inmunológico del organismo. La saliva exhibía células epiteliales,
combat iodine deficiency disorders, » Trends in Food
mientras que el semen revelaba los espermatozoides, esenciales para la
Science & Technology, vol. 22, nº 6, pp. 336-337, 2011.
reproducción humana. Mientras que las muestras vegetales, como el
5. N. Sucher, «RCC Biology I Laboratory Manual,»
corcho, la cebolla, la cúrcuma y la papa, ofrecieron una visión profunda
Community College, [En línea]. Available:
de las estructuras de las plantas. El corcho exhibió sus características
https://nikolaussucher.github.io/bio-one-all-
células en forma de panal, la cebolla mostró sus capas de células
online/acknowledgements.html. [Último acceso: 23 08
dispuestas en forma concéntrica, la cúrcuma presentó sus pigmentos
2023].
distintivos y la papa reveló almidón almacenado en sus células.
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