Edición Genética: Sistema

CRISPR-Cas

Por Estela Such

¿En qué consiste?
Sistema CRISPR-Cas
- Las siglas inglesas CRISPR significan “Repeticiones Palindrómicas
Cortas Agrupadas Regularmente Interespaciadas”.
- Los locus CRISPR son una serie de regiones altamente repetitivas
presentes en el genoma de diferentes especies de bacterias y
arqueas.
- Estas regiones están formadas por el operón Cas y la región CRISPR.

*Locus → posición física de un gen o secuencia nucleotídica en un cromosoma.

*Arqueas → dominio de organismos unicelulares diferentes a las bacterias.

Estructura
El operón Cas contiene información genética para codificar
endonucleasas Cas y otras proteínas importantes para el funcionamiento
del CRISPR-Cas.

La región CRISPR está formada por secuencias repetidas intercaladas

con pequeñas secuencias espaciadoras (de origen exógeno).
*exógeno → de origen externo.
¿Cómo funciona?
Funcionamiento General

- Capaz de identificar ADN

exógeno e incorporarlo como
uno de sus espaciadores.
- Capaz de identificar ADN vírico
(que ha infectado previamente
al organismo unicelular), y de
cortarlo mediante una
endonucleasa.
Edición genómica por nucleasa estándar
(CRISPR-Cas9)
- Se fundamenta en la acción de Cas9 como nucleasa (degrada ácidos
nucleicos).
- Cas9 es capaz de cortar el ADN en lugares específicos, en base a ARN
guías específicos.

Se puede utilizar para:

● Corregir mutaciones
● Suprimir/insertar secuencias de ADN
● Inactivar genes
Edición genómica por nucleasa estándar (CRISPR-Cas9)
Edición de bases
- Actúan la proteína Cas9,
como nucleasa desactivada;
y un dominio adicional,
capaz de modificar las bases
nitrogenadas.

Permite modificar una única

base nitrogenada del ADN.
Prime editing
- Intervienen la proteína Cas9 (modificada), una transcriptasa inversa y
ARN guía.
- Cas9 es modificada, para que solo pueda cortar una de las 2 cadenas
del ADN.

Con ellas se consigue realizar cambios de una sola base, o

deleciones/inserciones de mayor tamaño mediante la técnica de
búsqueda y reemplazo.
Prime editing
Edición del epigenoma
- Intervene una Cas9 sin
actividad catalítica, a la
cual se le añade un dominio
activador o inhibidor.
Así, es posible activar o
desactivar la expresión de
genes específicos.

*epigenoma → todas las marcas

epigenéticas (modificaciones químicas)
producidas en torno al ADN, y que regulan
la expresión génica.
Aplicaciones
Posibles Aplicaciones
A día de hoy, solo se emplea en el ámbito de la investigación, aunque ya se están
desarrollando plantas transgénicas y células madre reprogramadas.

Entre los posibles usos del CRISPR-Cas se encuentran:

● Creación de cultivos más eficientes.

● Creación de pastos de más fácil digestión por el ganado.

● Realización de órganos, tejidos y células trasplantables a partir de animales.

● Fabricación de nuevas enzimas resistentes a los cambios de temperatura.

● Tratamiento de enfermedades víricas, como el VIH.

● Prevención de la transmisión de enfermedades hereditarias.

● Creación de antibióticos con mayor espectro de acción.

Pros y Contras
 Desventajas
Tecnologías de edición de bases: Sistema CRISPR-Cas en general:
- Las tecnologías de edición de - Existe la posibilidad de que edite
bases están limitadas; solamente en lugares no deseados del ADN
pueden realizar modificaciones (“Off-target effects”).
concretas de nucleótidos:
- Aún hay dudas sobre la
○ Citosina →Timina seguridad a largo plazo del uso
de esta técnica, sobre todo en el
○ Adenina → Guanina
genoma humano.
○ Citosina → Guanina
- Esta tecnología está patentada,
- Las tecnologías de edición de lo cual limita su acceso.
bases solamente pueden actuar
sobre determinadas regiones del
genoma.
Ventajas

+ Es un método relativamente barato.

+ Permite realizar modificaciones precisas en el ADN.
+ Es una técnica eficiente; se pueden obtener resultados rápidamente
→ acelerando el proceso de investigación y desarrollo.
+ Puede utilizarse en una amplia variedad de organismos.
+ Tiene un gran potencial terapéutico.