UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

ANÁLISIS CLÍNICO – BI-445

PRÁCTICA N° 10:
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: REACCIONES DE AGLUTINACIÓN

DOCENTE:
Blgo-Mcblgo. Lusber Oscco Ccorahua

ESTUDIANTE:
• HUAMÁN BELLIDO, Flor de María

GRUPO DE PRÁCTICA:
Lunes: 10:00 – 1:00 pm

AYACUCHO – PERÚ
2023
 CORPORACIÓN CIENTÍFICA DE
LABORATORISTAS
CÓDIGO: BI-CL-17
CLINICAL BIOS BIOSECURITY

PLAN
PLAN ESTRATEGICO VERSIÓN: 1.
SISTEMA DE GESTION DE LA CALIDAD PÁGINA: 1 de 10

I. OBJETIVOS

- Conocer el fundamento y los conceptos generales sobre la toma de muestras sanguíneas.

- Conocer el fundamento y las técnicas de recuento de glóbulos rojos y glóbulos blancos.

- Conocer el fundamento y las técnicas de determinación de hematocrito y velocidad de

sedimentación globular.

II. INTRODUCCIÓN

En el laboratorio clínico existe un gran número de pruebas serológicas que sirven para

diagnosticar las enfermedades. Generalmente estos principios se basan en la reacción

antígeno anticuerpo. Si estamos empleando una prueba que detecta antígenos esta se

clasificará como una prueba directa. Al decir que buscamos el antígeno nos referimos a

proteínas de membrana, cápside, envoltura u otros. Por otro lado, al buscar anticuerpos
necesitamos emplear una prueba indirecta. Las pruebas indirectas buscan anticuerpos que se
generaron luego de la exposición a un agente patógeno, dentro de ellas podemos detectar las
inmunoglobulinas M (infección más próxima, generalmente antes de los 15 días), y las
inmunoglobulinas G (infecciones pasadas).

ERITROCITOS

Los eritrocitos son células maduras que carecen de núcleo. El recuento se realiza para
determinar el número de eritrocitos por mm3 de sangre, utilizando para ello sangre con
anticoagulante o sangre obtenida por función cutánea. Se pueden emplear métodos
autonómicos o hemocitométricos.

Valores referencia:

Unidades SI (célx 1012/l) Unid. Tradicionales (millones de células/mm3)

Varones 4.5 a 5.5 4.5 a 5.5

Mujeres 4.0 a 5.0 4.0 a 5.0

Niños 4.2 a 5.2 4.2 a 5.2

Lactantes 3.8 a 5.2 3.8 a 5.2

Recién nacidos 5.0 a 6.0 5.0 a 6.0

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Nota: Las unidades tradicionales se escriben con ceros completos

LEUCOCITOS

El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm 3 de sangre. La

sangre se deposita en un líquido para diluir leucocitos, dejándolos intactos. En cambio, los
eritrocitos son destruidos por este líquido. Luego se cuentan los leucocitos en una cámara de
recuento, por medio del microscopio, y se calcula el número que existe por mm 3 de sangre.
Es importante conocer el número de leucocitos, pues este se altera en casos de enfermedades
infecciosas. Existen técnicas autonómicas y hemocitométricas para elrecuento de estos y son
similares al recuento de G.R.

Valores referencia

Grupos de edad Leucocitos / mm3

Hombres y mujeres 5,000 - 10,000

Niños de 1 año 8,000 - 15,000

Recién nacidos 10,000 - 12,000

Niños de 3 a 9 meses 4,000 - 15,000

Determinación de hematocrito

Definida como el volumen ocupado por los eritrocitos en una determinada cantidad de sangre.
Generalmente se expresa como volumen de eritrocitos por 100 ml. de sangre (%). Es útil para
el diagnóstico de anemia. Representa la proporción de glóbulos rojos en la sangre circulante y
se expresa en volúmenes por ciento.
Técnicas de determinación

Técnica del Microhematocrito

Determinación de la velocidad de sedimentación globular (Ertitrosedimentación)

Viene a ser la velocidad de caída de los eritrocitos en sangre con anticoagulante. La VSG
depende de la velocidad de concentración del fibrinógeno, en menor grado de la globulina y
de la diferencia existente entre la densidad del plasma y la masa globular.

Este examen mide la tendencia de los eritrocitos a sedimentar, a colocar sangre anticoagulada
en un tubo en posición vertical. Se lee macroscópicamente a cabo de 1 hora la columna de
plasma.
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Técnicas de determinación

Técnica de Microsedimentación
I. PROCESOS PREANALÍTICOS: TOMA DE MUESTRA
1. Toma de muestra de sangre venosa.
La sangre venosa es necesaria para la mayoría de las pruebas que requieran
anticoagulación o cantidades mayores de sangre, plasma o suero de lo que podría
proporcionar la sangre capilar.
Materiales
- Aguja No 21 de 1 1⁄2”
- Aguja de vacutainer
- Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo
- Alcohol 70o - Algodón
- Jeringas de 5 mL.
- Tubos de prueba con EDTA-sequestrene
- Tubos al vacío con anticoagulante EDTA (K3), EDTA (Na2) u otro anticoagulante.
- Agujas con dispositivo para extracción de sangre al vacío:
- No 21 para adultos.
- No 22 para niños y neonatos.
De preferencia, ambas de bisel corto para evitar la coagulación
- Gradilla
- Guantes
- Mascarillas
- Marcador de vidrio - Lapiceros.

PROCEDIMIENTO
OBTENCIÓN DE SANGRE CON JERINGA O EN TUBO DE PRUEBA
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Una vez obtenida la muestra se procede a colocarla en una gradilla, para su respectivo
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Prohibido la reproducción parcial o total sin la autorización de CLINICAL BIOS

BIOSECURITY. Se considera copia no controlada a toda copia impresa que no lleve el sello

de COPIA CONTROLODA. para uso exclusivo de CLINICAL BIOS BIOSECURITY

Preparación para el recuento

1. Mezclar la sangre obtenida con el anticoagulante o tomar sangre capilar.
2. Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca de 0,5 para realizar una
dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilución será 1/100. Limpiar la punta con gasa
o papel absorbente.
3. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito conteniendo diluyente (Hayem) y llenar de
líquido de dilución hasta la marca de 101.
4. Se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de2 a 3 minutos.
5. Agitar bien la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña
cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.
6. Hacer el recuento con objetivo de 40x
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7. Se puede realizar con la pipeta automática, se toma 20 μL (0,02mL) de sangre total con
anticoagulante, o sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que contenga 4 ml
de solución de Hayem (aquí se tiene una dilución de 1:200). Se deja reposar
aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cámara con la misma pipeta usando un
nuevo tip. El inconveniente aquí es el gasto de reactivo (4 ml) pero las medidas son más
exactas.
Recuento
- Cuéntese los eritrocitos situados en 5 pequeños cuadraditos del gran retículo central (cada
cuadradito pequeño a su vez está subdividido en 16 pequeños cuadraditos, además se debe
considerar los 4 pequeños cuadraditos ubicados en los extremos y 1
central).
- Se incluyen al recuento las células que toquen los límites izquierdo y superior de los
cuadrados, pero no aquellos que toquen los límites derecho e inferior.
- Anótese la cantidad hallada en cada uno de los cuadrados.
- Las diferencias entre las cifras mayor y menor no deberán exceder de 20.
- Multiplíquese el total de G.R. contados por 10,000 con el objeto de obtener el número de
eritrocitos por mm3 de sangre.
Glóbulos blancos
RESULTADOS 21= 6.5 cm y 5.3 cm
22= 5.8 cm y 5.7 cm
El conteo de los glóbulos rojos=419 23= 5.5 cm y 4.5 cm
Y de los glóbulos blancos = 160