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FACULTAD DE DE ZOOTECNISTA,
INGINIERIA INGENIERIA ZOOTECNISTA, AGRONEGOCIOS Y
AGRONEGOCIOS
BIOTECNOLOGIA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA EN AGRONEGOCIOS
Y BIOTECNOLOGIA
AGRONEGOCIOS
TEMA:
ASIGNATURA:
“BIOQUIMICA”
ESTUDIANTES:
DOCENTE:
CICLO: 2023 – II
I. GENERALIDADES
El glucógeno está presente en el citosol en forma de gránulos con un diámetro variable
entre100 y 400 angstroms. Estos gránulos contienen firmemente enlazadas las enzimas
glucógeno fosforilasa, glucógeno sintetasa y algunas otras que regulan la síntesis y
degradación. La mayoría de los residuos de glucosa en el glucógeno están ligados por
enlaces glucosídicos alfa 1,4 y las ramificaciones se forman por enlaces glucosídicos alfa
1,6 los cuales se presentan con una frecuencia aproximada de uno por cada 10 residuos.
El mayor uso de recambio de residuos ocurre en las ramas externas, mientras que la
estructura interna o núcleo del glucógeno es metabólicamente más estable con un índice
de recambio mucho menor. (Chavez, 2019)
II. OBJETIVO
Determinar la cantidad de glucógeno en estado posprandial y ayunas en un hígado
de pollo fresco
III. MATERIALES Y REACTIVOS
IV. PROCEDIMIENTO
SISTEMA A:
SISTEMA B:
1. Se inicia con lavando el hígado (de pollo en este caso) con agua corriente
para eliminar la sangre que presente.
2. Para eliminar los coágulos de sangre que se encuentren en el interior del hígado
se da la perfusión de KCl (0.154 M) con la jeringa, hacia el centro.
3. Se va a pesar el hígado (50gr.) para saber la cantidad con la que se trabaja.
4. Se homogeniza el hígado al inicio, luego se va a utilizar el pilón para la
homogenización completa, añadiendo un poco de KCl. Retirando los restos
de los cuerpos grasos.
5. Se va a pesar el hígado (50 gr.) para saber la cantidad con la que se trabaja.
6. Se homogeniza el hígado utilizando el mortero de porcelana para la
homogenización completa, añadiendo un poco de KCl. Retirando los restos
de los cuerpos grasos.
7. El hígado homogeneizado se coloca sobre la capa doble de gasa que está en un
vaso de precipitado, así pasa la esencia con el glucógeno al balón. Aquí se va
a tomar un vaso de precipitado y un tubo de centrifuga.
a. Se toma un vaso de precipitado, este se utiliza como muestra posprandial.
b. En tubo de centrifuga se agrega 3 ml de muestra posprandial y liquido concentrado
agregando9 ml de KCL, este se utiliza como muestra en ayuno.
8. De ambas muestras se tomarán 0.5mL (Como se ve en el sistema A) y se
colocarán en un tubo de ensayo respectivo T1, T2.
9. A cada tubo se le colocará 0.5 mL de KOH (60%).
10. Se colocan en un vaso de precipitado con agua para calentar los tubos a100°C
(aprox.) por 10 minutos. Luego de esto se verá la diferencia de color del líquido
en los tubos.
11. Se agregará 5 mL de alcohol (de 98%) a cada tubo y en conjunto Na2SO4(0.2
mL a cada tubo).
12. Una vez tomado un cierto tiempo en la congeladora se retirará para llevar a la
centrífuga (3 500 rpm).
13. Se equilibra en la balanza de dos plantos y se lleva a centrifugar (3 500 rpm). una
vez retirado de la centrifugadora.
14. Se le agrega 5 mL de agua destilada a cada tubo.
15. Se toma 3 tubos nuevos
a. De estos 5 mL se retira 1 mL de cada tubo, poniendo esto en tubos nuevos (se
pasa al sistema B).
b. En el tubo blanco se le agrega 1 ml de la muestra T1, mas 1 ml de agua destilada
y 0.1 ml de fenol 80%
c. En el tubo I se le agrega 1 ml de la muestra T2, mas 1 ml de agua destilada y 0.1
ml de fenol80%
d. En el tubo II se le agrega 1 ml de agua destilada y 0.1 ml de fenol80%
16. Se coloca en agua helada, agregando H2SO4, mezclando cada tubo, y se dejara
reposar por unos minutos.
V. RESULTADOS
Tabla1: Determinación del nivel de glucógeno
RESULTADOS
TUBO 1 TUBO 2
Se observa un color amarillo fuerte, lo cual Se observa un color amarillo pálido, lo cual
significa que el nivel de glucógeno significa que el nivel de glucógeno
aumenta en alto grado (hiperglucemia) en disminuye gradualmente en etapa de ayuno;
etapa postprandial (después de comer) por debido a que durante el ayuno no hay picos
lo que los niveles de glucosa en la sangre de glucosa en la sangre, porque el hígado
aumentan de manera rápida, esto explica el provee la cantidad de glucosa que necesita,
color obtenido. esto explica el color obtenido.
VI. DISCUSIÓN:
Como se mostró en los resultados de la prueba, lo teórico cumple con lo práctico, por
ende, nos da a entender la importancia de las vías del gluconeogénesis que se produce en
el hígado en un estado post pandrial y en ayuno.
En el tubo N°1 en el cual se trabajó en estado ayuno, en este caso se dijo que la dieta del
pollo era baja en carbohidratos (ayuno) entonces había una disminución en la formación
de glucógeno hepático, en la práctica se obtuvo un color medio amarillo pálido. (Florero,
2016) Menciona que esto se debe a que los carbohidratos son necesarios para
proporcionar la glucosa requerida para la síntesis de glucógeno. La falta de carbohidratos
en la dieta hace que el hígado de pollo tenga una disponibilidad limitada de glucosa, lo
que a su vez limita la capacidad de formación de glucógeno.
En el tubo N°2 en el cual se trabajó en el estado posprandial, hubo una dieta rica en
carbohidratos mostró una mayor formación de glucógeno en el hígado. Por lo tanto, se
obtuvo un color amarillo. Se puede corroborar con (Florero, 2016) menciona que esto se
debe a que los carbohidratos son la principal fuente de glucosa, que es necesaria para la
síntesis de glucógeno. Al proporcionar una cantidad adecuada de carbohidratos en la
dieta, se garantiza un suministro suficiente de glucosa para la formación de glucógeno en
el hígado de pollo.
VII. CONCLUSIÓN
Se concluye que el nivel de glucógeno aumenta en alto grado (hiperglucemia) en
etapa postprandial y disminuye y disminuye gradualmente en etapa de ayuno
(hipoglucemia), dando a entender la importancia de este compuesto como un
medio de energía inmediata, por ello el nivel de glúcidos disminuye en horas.
En lo cual hemos podido observar que el glucógeno disminuye durante el ayuno
y aumenta después de la ingesta de alimentos.
Todos los carbohidratos tanto oligosacáridos como polisacáridos pueden ser
determinados, pues bajo hidrolisis acida (H2SO4), lo que además provoca la
deshidratación de los carbohidratos con la eliminación de tres moles de agua, con
esta reacción se forma derivados del furfural y el hidroximetilfurtural (HMF). La
presencia del fenol y su interacción con el HMF facilita la formación de complejos
que permiten la coloración de la solución y en consecuencia facilitan la
cuantificación de los carbohidratos a través de la espectrometría.
IX. ANEXOS