UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFECIONAL ING. AGROINDUSTRIAL

TEMA: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR UV

VISIBLE, ESPECTROSCOPIA AAS Y CROMATOGRAFIA HPLC

DOCENTE: QUISPE CHAMBI, WHANY

INTEGRANTES:

• ASCENSIO CHAMBILLA, IVAN NILTON.

• ARAPA QUISPE, LUIS ENRIQUE.

• CCALLO MOROCCO, YACK ARMANDO.

• CHIPANA CAHUNA, LUIS ENRIQUE.

• FLORES FLORES, LUIS FERNANDO.

ASIGNATURA: MÉTODOS DE ANÁLISIS CUANTITATIVO E INSTRUMENTAL

PUNO – PERÚ

2023
 ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR UV VISIBLE

Esta espectrofotometría esta comprendida como una de las técnicas que mide la

cantidad de luz en forma de ondas que puede ser absorbida por una muestra, esta se basada

en la absorción de fotones por las moléculas presentes en ciertas muestras, que pueden

ser gaseosos, líquidos y sólidos.

Así mismo, para hacer este tipo de cuantificación, se tiene que hacer uso del

espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda a la que será

sometida la muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por esta.

APLICACIONES:

1. Control de calidad:
Esta técnica puede ser aplicada para la verificación de la concentración de ciertas
sustancias y también el control de calidad de productos alimenticios.
2. Fotoquímica:
La espectrofotometría de absorción en el rango visible, puede ser aplicada para la
cuantificación y estudio de reacciones fotoquímicas, así determinando la
eficiencia de absorción de la luz en diferentes compuestos.
3. Análisis alimenticios:
Una de las aplicaciones que puede tener, es determinar la presencia y
concentración de compuestos en muestras como los alimentos, como los
contaminantes, aditivos, colorantes y otros compuestos.
4. Análisis de muestras biológicas:
Puede ser utilizado para cuantificar proteínas, ácidos nucleicos y biomoléculas
que pueden ser absorbidas en la región visible del espectro.
5. Determinación de pureza:
La espectrofotometría de absorción dentro del rango visible se utiliza para evaluar
la pureza de compuestos, como colorantes y pigmentos.
 ESPECTROMETRIA DE ABSORCION ATOMICA AAS

Campo de aplicación: Esta técnica analítica puede ser utilizada para analizar

aproximadamente 67 elementos de la tabla periódica y determinar metales, minerales en

varias muestras, como el agua, suelos agrícolas, fluidos como la sangre y alimentos.

Elementos del sistema: El equipo cuenta con 3 partes muy importantes: el atomizador de

llama, el horno de grafito y el generador de hidruro.

• El atomizador de llama utiliza una temperatura en el rango de 22.000 a 6.000

grados Celsius para atomizar la muestra antes del análisis.

• El horno de grafito se utiliza para determinar oligoelementos en varias muestras

secando y calcinando la muestra antes de la atomización. Este proceso ocurre a

unos 2100 grados centígrados durante un minuto y medio.

• En el generador de hidruros, solo se puede cuantificar 3 elementos químicos como

el arsénico, mercurio y selenio.

Reactivos o soluciones: Los reactivos que interactúan en el proceso de análisis, son los

ácidos como el ácido nítrico, porque estos digestiona las muestras que se analizaran para

que no tengan alguna interferencia con el equipo, así también, el agua destilada como

solvente.

Rango de trabajo:

• Espectrofotometría UV-Vis: Este tipo de espectrofotómetros generalmente

trabajan en el rango de longitud de onda entre 190 nm y 1100 nm.

• Espectrometría infrarroja (IR): Los espectrómetros IR pueden trabajar en

diferentes rangos, como la región del infrarrojo cercano (NIR) que abarca desde
 aproximadamente 780 nm hasta unos pocos micrómetros, y la región del

infrarrojo medio (MIR) que va desde alrededor de los 2 a los 25 micrómetros.

• Cromatografía de gases (GC): Los detectores de GC pueden trabajar con

diferentes rangos de longitud de onda en función del tipo de detector utilizado.

Por ejemplo, detectores como el de diodo de flama (FID) pueden trabajar en un

rango específico de longitudes de onda para detectar moléculas orgánicas

volátiles.

• Análisis por fluorescencia: En técnicas como la fluorescencia molecular o la

fluorescencia inducida por láser (LIF), se utilizan diferentes longitudes de onda

para excitar las moléculas fluorescentes y medir su emisión característica dentro

del rango visible e incluso ultravioleta cercano.

• Espectrometría de masa (MS): En la espectrometría de masa, la longitud de onda

de no es relevante, ya que esta técnica se basa en la medición de la masa de los

iones formadas a partir de una muestra.

Numero de muestras: El horno de grafito es capaz de analizar trazas de elementos con

sensibilidad de partes por mil millones sin necesidad de que haya un operador presente.

El analizador es más sensible que un atomizador de llama y puede contener hasta 140

muestras.
 CROMATOGRAFIA HPLC

Campo de aplicación: En el campo de la cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC),

se pueden analizar y separar una amplia gama de componentes, incluyendo compuestos

orgánicos e inorgánicos. Esto puede incluir sustancias como fármacos, metabolitos,

proteínas, ácidos nucleicos, vitaminas y otros compuestos químicos presentes en muestras

biológicas o ambientales.

Elementos del sistema: El sistema de cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC)

consta de varias partes o elementos. Estos incluyen el depósito de fase móvil, dispositivo

de muestreo, generadores de presión, columnas cromatográficas, sistema informático y

detectores.

Reactivos o soluciones: El uso de reactivos o soluciones químicas en la cromatografía

líquida de alta eficiencia (HPLC) puede variar dependiendo del método o técnica

específica utilizada. Algunos ejemplos comunes incluyen el uso de agua, metanol,

acetonitrilo y tetrahidrofurano (THF), entre otros.

Rango de trabajo: El equipo de cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) trabaja

en diferentes rangos dependiendo de los componentes y las técnicas utilizadas. Algunos

ejemplos comunes son, los detectores UV-Vis pueden tener un rango típico entre 190 nm

y 800 nm. Así también trabaja en rangos de presión de 1 bar a más; temperatura ambiente

hasta los 100 °C.

Numero de muestras: La cantidad de muestra y el número de muestras pueden variar

dependiendo del análisis específico que se esté realizando en cromatografía líquida de

alta eficiencia (HPLC).