FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
CURSO:
BIOQUÍMICA AMBIENTAL
PROFESOR(A):
RODRIGUEZ PORTILLA, LIZ MAYRA ISABEL
PRACTICA N°3
TÍTULO: ESPECTROFOTOMETRÍA
INTEGRANTES:
AMPUERO MENDOZA, KARINA LIZET
CASTILLO MORALES, HILDER TISOC
DIAZ MOYA, RENZO HENRY
PACHECO FAGGIANI, RENZO LEONARDO
RODAS SANCHEZ, MARCELO AIK

LIMA, PERÚ
2023 – I
INTRODUCCIÓN:
La espectrofotometría es un concepto que se forma con dos términos: espectro y
fotometría. En espectroscopía el término luz no sólo se aplica a la forma visible de
radiación electromagnética, sino también a las formas UV e IR, que son invisibles. En
espectrofotometría de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV cercano,
de 195-400 nm) y el visible (400-780 nm).
En el terreno de la física, se llama espectro a la distribución, en virtud de una
determinada magnitud, de la intensidad de una radiación. La noción también puede
aludir al gráfico que representa dicha distribución. La fotometría, en tanto, es el proceso
que permite medir la intensidad lumínica y el nombre de la rama de la óptica centrada
en el estudio de las leyes vinculadas a esa intensidad.
Desde simples técnicas de control de calidad hasta avanzados análisis químicos, la
espectrofotometría es un proceso robusto y ampliamente utilizado en múltiples
disciplinas e industrias. Debido a que existen diferentes tipos de luz y a que las
herramientas y técnicas usadas para medir y cuantificarlas son diferentes, existen
herramientas específicas que deben ser utilizadas según el tipo de espectro de luz que
necesita ser medido.

MATERIALES:
MATERIALES DEL LABORATORIO
• 4 gradillas para tubos
• 4 gradillas para pipetas
• 100 mL de Permanganato de potasio
1%
• 20 tubos de ensayo
• 100 mL de 1 % de almidón
• 4 pipetas de 1mL, 5 mL, 10 mL
• 8 bombillas de succión
• 4 pizzetas de agua destilada
• 8 fiolas de 100 mL
• 4 beakers de 50 y 100 mL
• 4 probetas de 100 mL
• 1 espectrofotómetro
• 30 cubetas de plastico
• 4 goteros con lugol
• Parafilm
MATERIALES DEL ESTUDIANTE:
• 1 rotulador por estudiante
• 1 papel milimetrado por grupo
• 1 cronómetro por grupo
RESULTADOS:
Permanganato de potasio:
● Cálculo de concentraciones finales de disoluciones con Permanganato de
potasio.

● Determinación de longitud de onda necesaria para la absorbancia

A través del sistema de barrido, se encontraron picos de absorbancia 1,117 y 1,135 en

las longitud de onda 525,560 y 545,697, respectivamente. Se tomó entonces como valor
de absorbancia un aproximado del pico de mayor valor, es decir, 530, para realizar la
lectura de absorbancia.
● Determinación a través de curva de calibración
Almidón:
● Cálculo de concentraciones finales de disoluciones de Almidón 1%

● Determinación a través de curva de calibración

La lectura de absorbancia se realizará a 620 nm.
CONCLUSIONES:
● Durante el desarrollo de la práctica realizada se procedió a aplicar los principales
métodos que se usan en el laboratorio para precipitar y separar.
● La espectrofotometría nos hace ver el significado importante del efecto de
absorción, lo cual es de gran utilidad para la determinación de concentraciones
en muestras que tienen un colorido peculiar.De esta manera se ha logrado
determinar concentraciones y el rango de absorbancia respecto a un color
indicado.
● La absorbancia es la capacidad que los compuestos poseen para absorber la
radiación electromagnética: Según esto la longitud y la absorbancia pueden ser
proporcionales hasta alcanzar un punto máximo y de ahí descender.
● Mediante la curva de calibración podemos ver que en el KMnO4 trata de verse
una linealidad pero en el almidón se ve una dispersión que se aleja de la recta
por lo cual se debe a que su absorbancia no llegó a variar ya que se paso mucho
el tiempo de llevarlo al espectrofotómetro.

CUESTIONARIO:
• Realizar las gráficas de curva de calibración y la ecuación de la recta.
• Realizar la gráfica de espectro de absorción en papel milimetrado.

• Hallar la concentración de una muestra de coloración violeta en ppm, si al realizar la

medición en el espectrofotómetro se obtuvo una absorbancia de 0,720. Utilizar la
ecuación de la recta de la curva de calibración elaborada con permanganato de potasio.
Usaremos la ecuación de la recta del permanganato de potasio y=15.9x +0.0077
Donde y= absorbancia, x = concentración, entonces 0.720 de absorbancia reemplazado
en la ecuación.
La concentración será de 0,04489 g/l
• Hallar la concentración de una muestra de coloración violeta en ppm, si al realizar la
medición en el espectrofotómetro se obtuvo una absorbancia de 0,600 y previo a la
medición, se realizó dos diluciones seriadas de 1/4 y 1/25, donde el último tubo fue el
que se midió en el espectrofotómetro. Utilizar la ecuación de la recta de la curva de
calibración elaborada con permanganato de potasio.
Ecuación de la recta del permanganato de potasio y=15.9x +0.0077
Donde y= absorbancia, x = concentración, entonces 0.720 de absorbancia reemplazado
en la ecuación.

Tendrá una concentración de 0.03725 g/l

• La absorbancia de una muestra problema de coloración azul fue de 0,250. Asimismo,
se trabajó con una solución estándar del mismo compuesto cuya concentración es de 10
g/L y la absorbancia arrojada por el equipo fue de 0,420. Halle la concentración de la
muestra problema.

Donde:
● [MP]: Concentración de muestra problema
● [St]:Concentración de estándar
● DO (St): Absorbancia del estándar
● DO(MP): Absorbancia de la muestra problema
Reemplazando:

La concentración de la muestra problema será 16.8 g/l.

BIBLIOGRAFÍA:

UNCUYO (s.f). Trabajo Práctico, espectrofotometría. Recuperado el 22 de abril del

2023. https://fcen.uncuyo.edu.ar/upload/espectrometria-practico-20191.pdf