Bloque nº 1: Realización de técnicas de tinción en extensiones de

sangre periférica y médula ósea.

U.D. 02
EXTENSIONES SANGUÍNEAS: CARÁCTERÍSTICAS, ZONAS Y ARTEFACTOS. MÉTODOS
DE PREPARACIÓN Y EXTENSIONES DEFECTUOSAS.

1. La extensión de sangre periférica.

2. Técnica de los dos portaobjetos.
3. Características y zonas de una extensión
sanguínea.
4. Factores que influyen en el resultado.
5. Principales defectos y artefactos.

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 1. LA EXTENSIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA.
El examen morfológico habitual de las células sanguíneas se realiza mediante la observación microscópica
de una extensión de sangre teñida.

Una extensión o frotis de sangre periférica consiste en obtener a partir de una gota de sangre una fina
película sobre un portaobjetos para que las células sanguíneas queden dispuestas en una sola capa y lo
suficientemente separadas unas de otras para poder ver su morfología.

Puede hacerse de forma manual o automática.

 Modo automátizado: puede realizarse por extensión o con extensores automáticos.

 Modo manual: la más utilizada es la técnica de los dos portaobjetos.

2. TÉCNICA DE LOS DOS PORTAOBJETOS.

- Imprescindible usar portaobjetos limpios, secos y desengrasados, que se manejarán cogiéndolos por los
bordes.

- Necesitaremos uno de bordes lisos y otro de bordes esmerilados (con el que extenderemos la gota).

Técnica:

1. Colocar una gota de sangre de 2 a 3 mm de diámetro a 1 cm del extremo de un porta limpio, colocado
en una mesa sobre un papel de filtro y con la gota a la derecha. Este porta se sujeta por el extremo
opuesto con los dedos pulgar e índice de la mano izquierda.

2. Con la mano derecha cogemos el porta esmerilado y lo situamos delante de la gota de sangre de
forma que los dos portaobjetos formen un ángulo de 35 a 45º.

3. Hacemos retroceder el porta esmerilado en dirección a la gota de sangre, hasta que se establece
contacto. En ese momento la sangre se extiende por el borde del porta esmerilado, llenando el ángulo
formado por los dos portas.

4. A continuación lo deslizamos hacia delante con un movimiento uniforme y velocidad moderada,

manteniendo el contacto entre ambos portas hasta que se consiga extender toda la sangre en una
película moderadamente delgada.

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 Observaciones:

 El porta esmerilado deberá ser algo más estrecho, para que los bordes de la extensión puedan ser
observados y no coincidan con los del portaobjetos.

 Preparar siempre dos extensiones de la misma muestra.

 Realizar la extensión lo antes posible una vez que hayamos colocado la gota en el portaobjetos. Así
evitamos que la sangre se seque o se coagule en caso de emplear sangre capilar. Además se evitará
la formación en pilas de monedas por parte de los hematíes y la agregación de las plaquetas.

3. CARACTERÍSTICAS Y ZONAS DE UNA BUENA EXTENSIÓN

En una extensión sanguínea realizada correctamente se observan las siguientes CARACTERÍSTICAS:

- El inicio y el final de la extensión deben estar separados, al menos, 1 cm de los extremos del porta.

- Los bordes laterales de la extensión deben estar separados de los bordes del porta entre 1 y 2 mm.

- Debe presentar claramente las tres zonas (cabeza, cuerpo, cola).

- El paso de una a otra debe ser progresivo  disminución gradual del grosor.

Las ZONAS que se distinguen son:

 Cabeza:
Es la zona inicial (donde se deposita la gota), y es más gruesa que el resto.
Las células se encuentran formando más de una capa.
No es una buena zona de identificación celular.

 Cuerpo:
Zona intermedia.
Las células poco a poco se van disponiendo en una sola capa.
La zona ideal de identificación celular se encuentra en la zona del cuerpo cercana a la cola.

 Cola:
Zona final de la extensión.
Las células se disponen de forma acordonada, dejando huecos entre ellas.
Suele terminar de forma deshilachada (barbas).

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 En las zonas hay diferente distribución del predominio celular:

- Células grandes (monocitos y neutrófilos) en cola y bordes.

- Células más pequeñas (linfocitos) en zona interior.

4. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL RESULTADO.

 Tamaño de la gota
 Ángulo α entre los dos portas
 Velocidad
 Otros: presión y valor del hematocrito

 Tamaño de la gota:
• Gota grande  extensión gruesa y
larga.
• Gota pequeña  extensión fina y corta.

 Ángulo α entre los dos portas y velocidad:

• Si AUMENTAN el ángulo y la velocidad  extensión gruesa y
corta.
• Si DISMINUYEN el ángulo y la velocidad  extensión fina y larga.

5. PRINCIPALES DEFECTOS Y ARTEFACTOS.

• Gota demasiado GRUESA  se llega al final sin haber terminado de extender la sangre 
muy larga y sin cola.
• El porta se levanta antes de acabar de hacer la extensión  no se forma la cola.
• Presencia de grasa en los portaobjetos  zonas “agujereadas” sin sangre, que le dan aspecto
de frotis “devorados por moscas”.
• Bordes de la extensión que coinciden con los del porta (extensión muy ancha) por haber
esperado demasiado para deslizar un porta sobre otro.
• Estrías longitudinales en la extensión  por utilizar portas esmerilados con bordes irregulares.
• Si velocidad de deslizamiento no es uniforme  Alternancia de zonas gruesas y finas que le
dan aspecto de “persiana” (estrías transversales).

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 ☺

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