Emiliano Romero Cano

Sección 12L Laboratorio de microbiología

Horario: jueves de 5:00 p.m.-7:00 p.m. y viernes de 5:00 p.m.-6:00 p.m.
Practica #9
Empleo de tinciones en el laboratorio de microbiología
Tinción de Gram

Tinción Gram positiva: se observa una cepa de la bacteria Streptococcus aureus la cual es una bacteria
Gram positiva ya que presenta una coloración morada rosácea están dispuestos en forma de estafilococos ya
que parecen racimos de uvas, probablemente se pudo obtener una coloración un poco más morada, pero, así
como están; perfectamente se puede clasificar correctamente.
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Tinción de Gram negativa: se observa una cepa de la bacteria Klebsiella pneumoniae la cual es una bacteria
Gram negativa en forma de bacilo, se observa una deficiencia en el esparcimiento del inóculo y la tinción
probablemente no está muy bien realizada, pero de igual forma se alcanza a apreciar la coloración distintiva
de las bacterias Gram negativas (rosáceo-rojizo).
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Tinción en fresco

Tinción en fresco con azul de metileno: podemos observar un hongo filamentoso del cual observamos sus
hifas teñidas de un azul más intenso a comparación del fondo. En los restos de color amarillo verdoso y
adheridas a las hifas podemos notar, si nos acercamos y prestamos atención, unas formas circulares de
contorno azul obscuro, las cuales son las esporas de este hongo.
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Tinción negativa

Tinción negativa (tinta china): podemos observar una cepa de la levadura Cryptococcus teñida con tinta
china la cual hace que las capsulas que están alrededor de la levadura se iluminen con un halo brillante, como
podemos observar se notan perfectamente el halo y la capsula, la tinta china genera un excelente contraste a
la hora de visualizar.
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Discusión
En cuanto a la tinción positiva, se pudo haber mejorado tal vez, que el tinte no se adhirió de la mejor manera,
debió de ser un poco más morado.
En cuanto a la tinción negativa, se debió de haber tomado un poco más de inóculo ya que se ven muy pocas
bacterias y eso dificulta la identificación.
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En cuanto a la tinción en fresco, se tuvo que repetir dos veces, ya que la primera vez no se veía nada en el
campo y la segunda vez no se observaron tantas hifas la mayoría de las cosas que se veían eran cúmulos
enormes de esporas.
Tinción negativa: esta tinción salió muy bien y no hubo nada que mejorar.
Para poder mejorar estas técnicas necesitamos más práctica e investigación en las tinciones para poder lograr
tinciones muy buenas cada vez que lo intentemos.

Cuestionario
1. Escriba las definiciones de mordente, cromóforo y auxocromo
Mordente: Sustancia que se utiliza en técnicas de tinción para fijar o intensificar el colorante en una
muestra biológica. Ayuda a que el colorante se adhiera mejor al tejido o células, mejorando así la
visualización de estructuras específicas.
Cromóforo: Grupo químico responsable de la coloración en un compuesto. Los cromóforos son
generalmente grupos insaturados o heterocíclicos que absorben selectivamente ciertas longitudes de
onda de la luz visible, lo que les confiere color.
Auxocromo: Grupo químico que, aunque no contribuye directamente al color de un compuesto, puede
modificar las propiedades del cromóforo y aumentar su afinidad por el sustrato.
2. ¿Cómo se clasifican los colorantes?
Colorantes ácidos: Se disocian en agua para producir iones positivos que tiñen estructuras celulares
con carga negativa, como las paredes celulares bacterianas.
Colorantes básicos: Contienen grupos con carga positiva que tiñen estructuras con carga negativa,
como el ADN y ciertas proteínas.
Colorantes neutros: No tienen carga eléctrica y tiñen componentes celulares específicos.
Colorantes naturales: Son aquellos que son extraídos de plantas o animales.
Colorantes artificiales: Son aquellos que se provienen de minerales y son procesados en un
laboratorio.
3. ¿Cuál es el fundamento de las siguientes tinciones: negativa, Gram, Ziehl-Neelsen,
Sheaffer-Fulton, utilizadas de rutina en el laboratorio de microbiología
Tinción negativa: Consiste en teñir el fondo alrededor de la muestra, dejando la muestra sin teñir. Se
utiliza para observar bacterias u hongos con capsula.
Tinción de Gram: Basada en la diferencia de la composición de la pared celular bacteriana. Las
bacterias se dividen en Gram positivas (retienen el colorante violeta) y Gram negativas (se decoloran y
se tiñen de rojo con el contraste).
Tinción de Ziehl-Neelsen: Utilizada para detectar bacterias ácido-alcohol resistentes, como
Mycobacterium tuberculosis, que contienen ceras en su pared celular. La tinción utiliza un colorante
rojo carbolfucsina que resiste la decoloración con ácido-alcohol.
Tinción de Sheaffer-Fulton: Se emplea para la identificación de cuerpos granulares (endosporas) en
bacterias. Las endosporas se tiñen de color verde, mientras que el resto de la célula se tiñe de color
rojo.
4. ¿Cómo se llama la tinción para visualizar los flagelos?
La tinción utilizada para visualizar los flagelos se llama tinción de flagelos o tinción de Leifson. Esta
técnica implica la utilización de colorantes especiales para resaltar los flagelos, que son estructuras
filamentosas que permiten la movilidad de ciertos microorganismos.
5. ¿Qué tinciones se pueden ocupar para teñir el material de reserva en las bacterias?
Las tinciones utilizadas para teñir el material de reserva en las bacterias incluyen la tinción de esporas,
que destaca las endosporas, y la tinción de gránulos metacromáticos, que resalta los cuerpos de
inclusiones que almacenan compuestos como polifosfatos o polisacáridos.
Emiliano Romero Cano
Sección 12L Laboratorio de microbiología
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6. ¿Cuál es la utilidad de las tinciones en el laboratorio clínico?
Las tinciones son herramientas fundamentales en el laboratorio clínico por varias razones:

Permiten la visualización de microorganismos en muestras biológicas, lo que facilita el diagnóstico de

enfermedades infecciosas.
Ayudan a diferenciar entre diferentes tipos de microorganismos, como bacterias Gram positivas y
Gram negativas.
Proporcionan información sobre la morfología celular y la presencia de estructuras específicas, como
endosporas o flagelos, que pueden ser importantes para el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades.
7. Investiga 5 nombres de géneros de bacterias cocos grampositivos y negativos.
Gram positivos.
• Sthaphylococcus
• Streptococcus
• Enterococcus
• Micrococcus
• Lactococcus
Gram negativos
• Neisseria
• Morexella
• Veillonella
• Acinetobacter
• Meningococcus
8. Investiga 5 nombres de géneros de bacterias bacilos grampositivos y negativos.
Gram positivos
• Bacillus
• Clostridium
• Lactobacillus
• Saccharopolyspora
• Streptomyces
Gram negativos
• Escherichia
• Pseudomonas
• Salmonella
• Klebsiella
• Haemophilus
9. Investiga 3 nombres de BAAR positivos.
• M. tuberculosis
• M. leprae
• M. kansasii
10. Investiga 5 nombres de bacterias capsuladas.
• Bacillus anthracis
• Bordetella pertussis.
• Haemophilus influenzae
• Neisseria meningitidis
• Streptococcus pneumoniae