“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

Facultad de ciencias

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA EN ACUICULTURA

ASIGNATURA:

Biología Molecular

DOCENTE:

Oscar García Minalla

Las Distintas Técnicas de Extracción del ADN y su Importancia en la Vida

Monografía

RESPONSABLE

Miranda Tapayuri Robert

Ríos Silva Harumi

García Córdova Leydi

Vásquez Sifuentes José

Hidalgo Valle Mauricio

CICLO III

2023

Nuevo Chimbote – Perú

1
 Tabla de Contenido

Índice de figuras …..…......……………………………...……….…............................ pag. 3

Índice de tablas ……………………………………………...……............................... pag. 4

Resumen ……………………..……………………………...……............................... pag. 5

Introducción …………………...……………………………...……............................. pag. 7

Justificación o Importancia …………………………………..…….............................. pag. 9

Objetivos …………………...…………………………..…………….......................... pag. 9

Metodología ………………...………………………..…………….………………… pag. 9

Capítulo I: Técnicas de Extracción de ADN ………………………………………… pag. 10

1.1 ¿Qué son las técnicas de extracción del ADN? …………………................... pag. 10

1.2 Tipos de técnicas de extracción del ADN ………………………................... pag. 10

1.3 Criterios para elegir la técnica de extracción adecuada …………………….. pag. 17

Capítulo II: Influencia de las Técnicas de Extracción en la vida …………................. pag. 18

2.1 Ventajas de la aplicación de las Técnicas de extracción en la Salud ……… pag. 18

Conclusiones ………………………………......…….……………………………… pag. 19

Recomendaciones ………………………………………………................................ pag. 20

Referencias Bibliográficas …………………………………..………………………. pag. 21

Glosario ……………………………………………………………………………... pag. 23

Anexos ………………………………………………………………………………. pag. 24

2
 Índice de Figuras

Figura 1. Extracción y Purificación de ADN ...................................................................... 25

Figura 2. Experiencia del Formol - Cloroformo .................................................................. 25

3
 Índice de Tablas

Tabla 1. Comparación de métodos de extracción de ADN de Bothriechis schlegelii ......... 24

Tabla 2. Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción de ADN .................... 24

4
 Resumen

La extracción del ADN es un método que revoluciono el conocimiento en los diversos

campos provenientes de la Biología, ayudando a diagnosticar diversas enfermedades

neurodegenerativas, cáncer, infecciones, verificar la paternidad, entre otros beneficios más.

Es un proceso que tiene como objetivo aislar y purificar esta molécula para poder realizar

estudios como la cuantificación y la electroforesis. El ADN se obtiene a partir de materiales

biológicos como nuestra saliva, sangre, cola de pescado y cualquier otro tipo de tejido, ya

que todo ser vivo está formando por células en el cual se encuentran conservadas los genes

que son idénticos. Hoy en día con el avance de la ciencia y la tecnología se fueron

perfeccionando y añadiendo nuevas formas de extraer ADN, la más conocida y usada es la

reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y sus variantes como el punto final, tiempo real,

inversa. Sin embargo, se debe de tener en cuenta que no todas las técnicas de extracción son

óptimas para un mismo organismo o necesidad del investigador, por eso se debe considerar

ciertas pautas como el tipo de ácido nucleico que se desea extraer, tipo de organismo del

cual se obtuvo el ADN, etc. En la historia, Frierich Miescher aisló por primera vez al ADN

en el año 1869 al que nombro Nucleica, siendo este personaje acreedor de uno de los premios

nobel.

Palabras clave: extracción de ADN, material biológico, PCR, ADN

5
 Abstract

DNA extraction is a method that revolutionized knowledge in various fields from Biology,

helping to detect various neurodegenerative diseases, cancer, infections, verify paternity,

among other benefits. It is a process that aims to isolate and purify this molecule in order to

carry out studies such as quantification and electrophoresis. DNA is obtained from biological

materials such as our saliva, blood, fish tail and any other type of tissue, since all living

beings are made up of cells in which identical genes are conserved. Nowadays, with the

advancement of science and technology, new ways of extracting DNA have been perfected

and added, the best known and used is the polymerase chain reaction (PCR) and its variants

such as the end point, real time, reverse. However, it should be taken into account that not

all extraction techniques are optimal for the same organism or researcher's need, so certain

guidelines must be considered, such as the type of nucleic acid to be extracted, type of

organism from which DNA was obtained, etc. In history, Frierich Miescher isolated DNA

for the first time in 1869, which he named Nucleica, this character being a creditor of one of

the Nobel Prizes.

Keywords: DNA extraction, biological material, PCR, DNA

6
 Introducción

La extracción del ADN es un proceso fundamental en la biología molecular, pues permite

obtener el material genético presente en las células del material biológico. Dentro de la

ciencia es conocido como ácido desoxirribonucleico, es la molécula con el papel más pesado

por ser el responsable de contener la información genética de todo ser viviente además es

gracias a ella que tenemos características físicas sobre los demás, sin embargo, se debe de

recalcar que todas las células tienen el mismo material genético, siendo este muy importante

para el funcionamiento y desarrollo del organismo. Aplicar estas técnicas tiene como

objetivo poder brindar la muestra necesaria de ADN para poder estudiarlo en la medicina

forense, biotecnología y principalmente en la genética que hoy en día va creciendo y

generando nuevas ideas científicas.

La extracción no solo se desarrolla en moléculas de ADN, sino que también implica al ARN

en ciertos organismos como son los virus. Este material genético se encuentra en el núcleo

de las células, si hablamos de ADN estamos hablando de una molécula que tiene una

estructura dúplex es decir doble hélice, siendo estas antiparalelas y complementarias, donde

podemos encontrar nucleótidos.

Un trabajo realizado por Muñiz et al. (2009) que tuvo como objetivo optimizar un método

de extracción de ADN a partir de muestras concentradas por el método de floculación para

identificación molecular de protozoarios patógenos, su metodología de trabajo fue en la

recolección de 4 litros de cuatro localidades diferentes: Arroyo el Gallo, Arroyo los

Españoles, Arroyo Aguajiro y la Presa Emilio López Zamora. La optimización del método

de concentración por la floculación, demostró que en 6 horas se puede obtener ADN de

buena calidad para usarlo en PCR. Además de poder buena concentración delo que es el

parasito humano emergente que ha estado asociado con la contaminación de fuentes de agua.

7
Por otro lado, un proyecto de investigación realizada por Maldonado (2021), manifiesta que

el cáncer de mama es la principal causa de muertes entre las mujeres. Es por ello que es

importante enfatizar identificar nuevos factores de riesgo etiológicos que estén asociados

con el desarrollo del cáncer de mama. Se evaluó el ADN extraído donde el 46,6% de las

biopsias mamarias corresponden a neoplasias malignas.

La presente monografía pretende recapitular las distintas técnicas que se usan para extraer

muestras de ADN a partir de materiales biológicos. Siendo esto importante para el desarrollo

de nuevas soluciones a problemas que se puedan identificar a nivel genético en la vida,

además de enriquecer los conocimientos previos. La metodología que se llevó a cabo fue

bajo el enfoque cualitativo, donde se usaran recursos externos como repositorios y paginas

reconocidas ubicados en la red internet. Por otro lado, el objetivo es reconocer la importancia

del uso de las diferentes técnicas de extracción en la vida de los seres vivos.

8
Justificación o Importancia

El trabajo monográfico surge a partir de poder comprender la importancia que tiene el uso

de las técnicas de extracción en la vida de los seres vivos, que beneficios trae consigo. Esto

ayudara además a los jóvenes universitarios a ganar conocimientos nuevos en base al tema

que se desarrolla con el fin de poder ser aplicado en el futuro, pues hoy en día todo lo que se

aprende no es usado.

Objetivos

Objetivo general: Reconocer la importancia que tienen las técnicas de extracción en la vida

Objetivos específicos:

 Conocer las distintas técnicas de extracción del ADN

 Comprender la influencia de las técnicas de extracción en la vida

Metodología

El trabajo tiene un enfoque cualitativo, usando la recolección de información a través de

recursos externos provenientes de la red internet, siendo estos repositorios y otras páginas

fieles a la veracidad de información.

9
Capítulo I: Técnicas de Extracción de ADN

1.1 ¿Qué son las técnicas de extracción del ADN?

La aplicación de las técnicas moleculares inicia con la extracción del ADN o ARN, para

la obtención exitosa de datos confiables y reproducibles. Todo esto depende en gran

medida de la forma de extracción y purificación que estará sometido el ADN puro.

Cuando se habla de extracción siempre habrá de por medio un aislamiento que se basa

en las características fisicoquímicas de la molécula. La selección del método de

extracción es un paso fundamental en las técnicas moleculares y depende del organismo

en el que se realizaba el estudio y su estado de conservación. Cabe recalcar que no todas

las técnicas son efectivas para un organismo, es por ello que es recomendable encontrar

un equilibrio entre pureza y rendimiento de acuerdo a la aplicación posterior (Ramos,

2018).

1.2 Tipos de técnicas de extracción del ADN

1.2.1 Extracción del ADN con Proteinasa K y el Dodecilsulfato de Sodio

La técnica PK-SDS que por sus siglas en inglés significa proteinase K - sodium

dodecyl sulfate, es uno de los más usados para extraer ADN ya que la digestión de

la muestra se puede realizar con proteinasa K que es activada por el dodecil sulfato

de sodio. Siendo esta capaz de inactivar las DNAsas presentes en el lisado celular

usando detergente aniónico el SDS (Fujifilm Wako Chemicals U.S.A., 2014).

Materiales

 Muestra de tejido: Puede ser tejido animal o vegetal, saliva, sangre, etc.

 Buffer de extracción (2,34 g de NaCl + 40 ml de agua): Ayuda a

desnaturalizar las proteínas y liberar el ADN.

10
  Proteinasa K: Es una enzima utilizada para digerir proteínas y eliminar

contaminantes de las preparaciones de ácidos nucleicos.

 Solución de lisis celular (EDTA): Ayuda a romper las membranas celulares

y liberar los componentes celulares, incluido el ADN.

 Reactivos y consumibles: Además de los materiales mencionados

anteriormente, necesitarás tubos de ensayo, pipetas, puntas de pipeta,

centrífuga, baño de agua o termociclador, y otros reactivos comunes de

laboratorio, como etanol, agua estéril, soluciones de lavado e isopropanol.

Procedimientos

1. Obtener el material biológico a usar, usando un raspado.

2. La muestra pasa a ser colocada en un tubo de ensayo junto la solución de lisis,

con el fin de poder romper las membranas de la célula.

3. Se añade después proteinasa K, la cantidad varía de acuerdo al investigador.

4. Después de colocar la enzima se debe de incubar la muestra a un determinado

tiempo y temperatura. Luego se deberá de inactivar la proteinasa K con una

temperatura entre 95ºC – 100ºC.

5. Antes de pasar a la purificación se debe de mezclar con un buffer de carga

como el Tris o el glicerol con el fin d retener el ADN.

6. La muestra debe ser purificada, pasando por las columnas de purificación del

ADN, que consiste en usar un tubo con matriz sólida. De esta manera se

elimina otros componentes a través del lavado y el ADN queda retenido.

Experiencia

Trabajo realizado por Cortes et al. (2019) manifiesta que cuando se trata de

diagnósticos clínicos el mejor material biológico es la orina, por su fácil recolección.

11
 El ADN que surge de las células descamadas del tracto genitourinario puede usarse

para la detección de anomalías genéticas, neoplasias o infecciones asociadas al

sistema urinario y área genital. Los métodos descritos para la obtención de ADN

principalmente se agrupan en 2, la extracción mediante kits comerciales ya que tienen

la ventaja de ser fácil de usar y que ahorran tiempo. Entre los métodos para realizar

la extracción del ADN en otros tipos de muestras, se encuentran aquellos que se

fundamentan en la hidrólisis con proteinasa K. Es por ello que la técnica modificada

de proteinasa K combinada con la técnica de fenol cloroformo podría convertirse en

una alternativa viable para la extracción de ADN.

1.2.2 Extracción de ADN por el método del CTAB

Es un procedimiento básico para extraer ADN de vegetales, donde se hace uso de

un detergente aniónico capaz de romper la pared celular y así se producir la lisis.

El uso de detergentes aniónicos no solo se restringe a la extracción de ADN vegetal,

puede ser usado para ADN genómico de bacterias y otros tipos de organismos. Un

ejemplo de este método, quizás el más conocido, es el uso de CTAB (bromuro de

cetil trimetil amonio) como detergente para lograr la lisis. El CTAB además, en

presencia de EDTA como agente quelatante y TRIS-HCl como tampón, forma

complejos insolubles con el ADN. Luego se extraen los residuos orgánicos con

cloroformo, para separar posteriormente el ADN por precipitación con etanol

(Fujifilm Wako Chemicals U.S.A., 2014).

Procedimiento - “extracción de ADN total con CTAB 2%”

1. Depositar la muestra (tejido vegetal, insecto o cepa bacteriana) en un tubo

estéril de 2 ml, agregado 1.5 ml de buffer CTAB 2% previamente calentando

a 80 ºC. Por último, se agregaría 100 µl de dodecilsulfato sódico al 10%.

2. Después se debe de incubar en baño María a 80 ºC por 30 minutos.

12
 3. Luego se debe de dejar enfriar los tubos a temperatura ambiente.

Posteriormente se lleva a centrifugar por 5 minutos a 16 000 x g.

4. Se transfiere 1 ml de sobrenadante a un tubo de 2 ml, agregando además 1 ml

de cloroformo-alcohol isoamílico con 30 µl de acetado de sodio 3M.

5. Pasa por la centrifuga por unos 10 minutos más.

6. Luego se transfiere 850 µl de sobrenadante con el mismo procedimiento

anterior, pero con 500 µl de cloroformo-alcohol isoamílico. Sin el acetado de

sodio.

7. El sobrenadante de 850 µl pasa a un tubo de 1.5 ml agregando etanol absoluto.

Siendo este incubado toda la noche con una temperatura de 4 ºC.

8. Luego se pasa centrifugar para luego ser descantado (Senasica, 2020).

1.2.3 Extracción de ADN por Salting – Out

También conocida como precipitación salina, es un método por el cual se separa y

aísla el ADN de otros componentes celulares. Todo está basado en la capacidad del

ADN para precipitar en presencia de altas concentraciones de sal y alcohol, además

de ser un proceso más sencillo se evita el uso de químicos que pueden causar alguna

contaminación durante el proceso, sin embargo, no siempre se obtienen los resultados

que se esperan (Benitez et al., 2017).

Procedimiento – “extracción a partir de 5 ml de sangre”

1. Se prepara las células a partir de sangre periférica, siendo está depositada en

un tubo de vacutainer de 5 ml de sangre con EDTA.

2. Luego la combinación de ambos es repartida en otros 10 tubos más, que

posteriormente se añadirá en cada uno una solución de lisis de glóbulos rojos

a 1,5 ml.

13
 3. Las muestras pasan a la centrifuga a 3000 rpm durante 5 minutos, de esta

manera se descarta el sobrenadante.

4. El proceso de lisis con sobrenadante se desarrolla hasta poder lograr que el

pellet tenga un color blancuzco.

1.2.4 Extracción con gradientes de cloruro de cesio – bromuro de etidio

El ADN genómico puede ser purificado por centrifugación selectiva a través de la

generación de gradientes de cloruro de cesio. Primeramente, se lleva a cabo el lisado

celular por métodos mecánicos o químicos y la mezcla es centrifugada durante varias

horas en presencia de bromuro de etidio. Como hay bromuro de etidio en el medio,

se pueden visualizar las diferentes capas en las que se agrupan los ácidos nucleicos

según su densidad con luz ultravioleta. Se obtienen varias capas que pueden separarse

y recuperar el ADN purificado. Este método a pesar de dar como resultado un ADN

de alta calidad tiene una serie de desventajas: es largo, imposible de automatizar,

caro, requiere una ultracentrífuga y usa compuestos químicos tóxicos (Fujifilm Wako

Chemicals U.S.A., 2014).

Como fundamente del método el BrEt ingresa y se intercala en la cadena de ADN

disminuyendo su densidad, pero lo hace en mayor cantidad cuando es ADN plásmido

en estado relajado que en el ADN plasmídico superenrrollado, pudiéndose separar

por centrifugación en el gradiente de densidad de CsCl. De manera experimental el

ADN se sedimenta formando na capa en la posición del tubo en la cual la densidad

de la solución de CsCl es igual a la del ADN (Dina, 2015).

Procedimiento

1. Se extrae el ADN por medio de una lisis y una purificación con el fin de evitar

contaminantes.

14
 2. Se preparan las gradientes que son CsCl – EtBr en tubos de centrifugación.

El bromuro de etidio es quien forma los gradientes de identidad.

3. Las muestras pasan a ser colocadas en la gradiente obtenida, evitando mesclas

entre los reactivos y burbujas.

4. Luego deben de pasar por la centrifuga de esta manera se podrán obtener las

fracciones. Luego los resultados pueden ser pasados por otros procesos de

lecturas.

1.2.5 Uso de resinas de intercambio iónico

Para la extracción del ADN también se han diseñado resinas que son capaces de

formar complejos con el ADN. El uso de resinas hidrocarbonadas con estructuras

rígidas en tres dimensiones permite que la superficie se encuentre cargada con alguna

sustancia como el dietilaminoetilo que puede protonarse en medio ácido y quedar

cargado positivamente por lo que interacciona con los grupos fosfatos del ADN. Esto

es un método directo, que puede realizarse en un solo tubo y relativamente rápido,

pero tiene como inconveniente que se aíslan cadenas sencillas de ADN, y este no

puede ser utilizado por ejemplo para el análisis de la variación de polimorfismos en

fragmentos de restricción (RFLP) (Fujifilm Wako Chemicals U.S.A., 2014).

1.2.6 Formol y Cloroformo

El uso de esta técnica es un procedimiento fundamental en la investigación biológica

y médica, ya que permite obtener el material genético de un organismo para su

posterior análisis, siendo este el más usado por los investigadores debido a sus

buenos resultados que se obtienen cuando se habla de ADN de calidad. Una de las

grandes investigaciones realizas en el cual se aplicó esta técnica fue de la secuencia

del genoma humano, así como también en la identificación de patógenos bacterianos

(Parchure, A & Vaidya, B. 2012).

15
Reactivos

 Fenol: Actúa como agente desnaturalizante, rompiendo las uniones entre las

proteínas y el ADN.

 Cloroformo: Ayuda a separar el ADN de otras moléculas como los lípidos.

Procedimiento

1. Se debe de seleccionar el material biológico del cual se obtendrá nuestro

ADN, como células humanas, animales, bacterias, plantas, entre otros.

También se debe considerar que debe estar fresco.

2. Se añade una solución de lisis celular (como el tampón de lisis) a la muestra

para romper las membranas celulares y liberar el contenido celular, que

incluye el ADN.

3. Luego se agrega una solución de sal (como cloruro de sodio) y alcohol (como

etanol o isopropanol) para que el ADN se precipite. Esto se hace para separar

el ADN de otros componentes celulares.

4. Después se debe de llevar las muestras a la centrifuga con el fin de separar

el contenido en dos fases. El ADN se mostrará en la parte superior.

5. Por último, se retira la capa superior con cuidado y se traslada a un tubo de

ensayo limpio.

16
1.3 Criterios para elegir la técnica de extracción adecuada

Fujifilm Wako Chemicals U.S.A. (2014) indica que la mayor parte de los métodos que

existen para extraer el ADN consisten en lograr primero la lisis o ruptura de la célula,

para luego separar las moléculas de ADN del resto de los constituyentes de la célula. De

esta forma se deben de tener en cuenta algunos factores que intervienen mucho en los

resultados:

1.3.1 La cantidad de muestra de la que se dispone para extraer el ADN

Algunas técnicas reducen la cantidad de muestra que se puede obtener y esto

es debido a los procesos en la que se desarrolla, pero se logra obtener ADN

de buena calidad. Mientras más muestra haya será mucho mejor.

1.3.2 El tipo de muestra o fuente de la que se quiere obtener el ADN

Existen diferentes fuentes de las que pueden venir las muestras, celular

vegetales, animales, hongos, etc. Y esto varía mucho con el tipo de técnica

que se quiere usar.

1.3.3 La pureza con la que se quiere obtener el ADN extraído

No todas las técnicas de brinda una buena pureza, como por ejemplo el fenol-

cloroformo es una de los métodos más usados debido a su resultado de alta

concentración y pureza que tiene el ADN.

1.3.4 El tiempo que consume cada método, su costo y el rendimiento esperado

Depende más del investigador, en referencia si desea el resultado al momento

con el uso de técnicas de corto tiempo o las de mayor tiempo.

1.3.5 Uso que se le va a dar al ADN extraído:

Mientras mal puro sea el ADN obtenido será mejor al momento de realizar

cuantificaciones por PCR o pasarlo también por electroforesis.

17
Capítulo II: Influencia de las Técnicas de Extracción en la vida

2.1 Ventajas de la aplicación de las Técnicas de extracción en la Salud

2.1.1 Diagnóstico preciso de enfermedades

La extracción de cierta manera permite la identificación de mutaciones en los

genes y variantes especificas asociadas a enfermedades hereditarias. De esta

manera da la ventaja de poder realizar tratamientos más efectivos con buenos

resultados a largo plazo.

2.1.2 Medicina personalizada

Al tener conocimientos claros de los perfiles genéticos de un paciente, los

médicos encargados pueden adaptar terapias y medicamente de acuerdo a lo

que demanda o necesita el paciente.

2.1.3 Prevención de enfermedades

Poder detectar enfermedades tempranas, de esta manera tomar tratamientos

que eviten que se desarrolla la enfermedad. Esto se desarrolla al identificar

marcadores genéticos asociados como el cáncer, diabetes, etc.

2.1.4 Farmacogenética

La ventaja de la extracción del ADN en este campo es que brinda los datos

necesarios para poder saber si un medicamento es más eficaz, como también

conocer las reacciones adversas que pueden ocurrir.

2.1.5 Medicina forense

En el campo forense es una buena herramienta, debido a que se pueden

identificar a las personas que fallecieron, o para identificarlo por sus restos a

causa de un desastre, desastres. Estableciendo la identidad de la persona.

18
 Conclusiones

 Las técnicas de extracción son procesos que tienen como objetivo poder brindar en

cierta forma muestras de ADN limpias y de calidad que pueden ser usados en

diversos campos de la ciencia, en especial en la biología molecular.

 Los estudios que presenten realizar análisis de ADN se someten a desarrollar algún

tipo de técnica de extracción, de cierta forma los investigadores debe de usar criterios

que les ayuden a encontrar la técnica más adecuada.

 Existe una gran diversidad de formar de poder obtener ADN, pero son diferentes en

sus resultados, algunos son más económicos que otros, cada uno con sus ventajas y

desventajas; complejidad y sencillez.

 Las técnicas de extracción de ADN son importantes para la vida, mucho más si la

enfocamos en el tema de la salud, pues tiene una gran influencia en poder brindar

ventajas sobre el conocimiento de enfermedades, respuestas a tratamientos del

organismo, entre otros más. Siendo esto un avance para el desarrollo del ser humano

y en cierta forma para la ciencia y tecnología.

19
 Recomendaciones

o Preparación adecuada: Asegurar de contar con todos los materiales y reactivos

necesarios antes de comenzar el proceso de extracción. Además, es importante leer

y comprender los protocolos que se seguirán.

o Selección de la muestra: Elegir una muestra apropiada para la extracción de ADN,

considerando el tipo de células o tejido del que proviene y su estado de conservación.

o Lisis celular efectiva: La lisis celular es un paso crítico para liberar el ADN. Utilizar

un método de lisis ayudaran en cierta forma poder liberar el contenido de la célula,

en el cual incluye al ADN.

o Control de contaminación: La contaminación del ADN puede comprometer los

resultados. Se debe considerar que reactivos usados en algunas técnicas de extracción

pueden causar esto.

o Optimización de los pasos de purificación: Los pasos de purificación son

fundamentales para obtener un ADN de alta pureza.

o Cuantificación y evaluación de la calidad del ADN: Después de la extracción, se

debe de cuantificar la concentración de ADN utilizando métodos como la

espectrofotometría.

o Documentación adecuada: Registrar cuidadosamente los pasos seguidos, los

reactivos utilizados y cualquier observación importante durante el proceso de

extracción. Esto facilitará la reproducción de los resultados y el análisis posterior.

20
 Referencias Bibliográficas

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Salting Out y Electroforesis. Studocu.

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Cortes, J., Bracamontes, C., Torres, F., & Alarcón, L. (2019). Evaluación del método

modificado de Proteinasa K para la extracción de ADN de orina. Tecnicas de la

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https://www.ecorfan.org/republicofperu/research_journals/Revista_de_Tecnicas_de

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Dina, R. (2015). Extracción de ADN. Scribd. [Archivo PDF]

https://es.scribd.com/doc/146939625/extraccion-pdf#

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Maldonado, E. (2021). Ánalisis de secuencias de ADN del Viru del Papiloma Humano en

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Zacatecas].

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0Maldonado%20Rodr%c3%adguez.pdf

21
Muñiz, R., Sánchez, C., Salas, D., & Radilla, P. (2009). Extracción de ADN e

Identificación Molecular de Protozoarios Patógenos en Muestras de Agua.

Bioquimia, 34(1) 63. https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57613001054

Parchure, A., Vaidya, B (2012). Extraction of genomic DNA using organic solvents and

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Ramos, S. (2018). Extracción y Purificación del ADN; Introducción e Importancia de la

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Senasica. (2020). Metodologías para la extracción de DNA total. [Archivo PDF].

https://www.gob.mx/cms/uploads/attachment/file/728770/2._FT._Metodolog_as_p

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22
 Glosario

1) ADN: Ácido desoxirribonucleico, una molécula que contiene la información genética de

los organismos vivos.

2) Extracción de ADN: Proceso mediante el cual se obtiene el ADN de las células o tejidos,

separándolo de otras moléculas y componentes celulares.

3) Lisis celular: Proceso de ruptura de las membranas celulares para liberar el contenido

celular, incluido el ADN.

4) Impurezas: Sustancias no deseadas presentes en la muestra que pueden interferir con la

extracción o análisis del ADN.

5) Purificación del ADN: Proceso mediante el cual se eliminan las impurezas y

contaminantes del ADN extraído, obteniendo un ADN de mayor pureza.

6) Columnas de purificación: Dispositivos que contienen resinas o partículas de sílica que

se utilizan para separar el ADN de otras moléculas y contaminantes.

7) Espectrofotometría: Técnica utilizada para medir la concentración de ADN mediante

la absorción de luz a una longitud de onda específica.

8) Kits comerciales: Conjuntos de reactivos y protocolos preestablecidos que facilitan la

extracción de ADN, proporcionando los componentes necesarios y las instrucciones.

9) Precipitación del ADN: Proceso en el que el ADN se separa de la solución acuosa

mediante la adición de un agente precipitante, generalmente etanol o isopropanol.

10) Centrifugación: Proceso en el que se aplica una fuerza centrífuga a una muestra para

separar los componentes en función de su densidad.

11) PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): Método utilizado para amplificar una

región específica de ADN en grandes cantidades, a través de ciclos de calentamiento y

enfriamiento controlados.

23
 Anexos

Tabla 1. Comparación de métodos de extracción de ADN de Bothriechis schlegelii de tres

colecciones biológicas colombianas a través de amplificación por PCR

Tabla 2. Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción de ADN

24
 Figura 1. Extracción y Purificación de ADN

Figura 2. Experiencia del Formol - Cloroformo

25