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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
Escuela académico profesional de ingeniería forestal

TEMA
“FACTORES FÍSICOS Y QUÍMICOS QUE MODIFICAN LA VELOCIDAD DE UNA
REACCIÓN ENZIMÁTICA”

ALUMNOS

Livaque Cabrera Joselito

Herrera Alberca Clinton Valentín

TUTOR

Lic. Urcia Yengle Nelson Hermogenes.

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JAEN – PERU

2024

I. INTRODUCCIÓN

Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas. Su actividad catalítica

depende de su estructura tridimensional, la cual está determinada por la secuencia de

aminoácidos que la componen.

los cambios de conformación implican cambios en su actividad catalítica. Todas las

enzimas poseen grupos químicos ionizables (- COOH), amina (– NH2), hidroxilo (-OH), tiol

(-SH), imidazol (- NH) en las cadenas laterales de los aminoácidos que lo componen. Las

enzimas son afectadas por las condiciones en las que se encuentran tal como pH, temperatura,

concentración de sustrato, muchos otros factores.

Según el pH, del medio los grupos químicos pueden tener cargas eléctricas positivas,

negativas o neutras. Como a su vez la conformación de las proteínas depende de sus cargas

eléctricas habrá un pH, en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad

catalítica (pH óptimo).

Los cambios extremos de pH afectan la actividad enzimática reversiblemente

(temporalmente). Nosotros generalmente medimos la actividad enzimática, en un buffer, el

cual tiene un pH igual al pH óptimo para el enzima.

La temperatura puede causar un incremento de la velocidad de la reacción o el efecto

contrario.

En general, la velocidad de la reacción se incrementa con la temperatura hasta que un

punto máximo es alcanzado. Este incremento se debe a que aumenta el número de moléculas
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ricas en energía que pueden pasar la barrera energética de estado de transición, para formar a

los productos

La elevación excesiva de la temperatura del medio que contiene a las enzimas, resulta

en un decremento de la velocidad como resultado de la desnaturalización, es decir, la pérdida

de la estructura tridimensional de las enzimas. En este momento se rompen enlaces de tipo no

covalente como los puentes de hidrógeno que estabilizan las estructuras secundarias e incluso

terciarias. La mayor parte de las enzimas presentan su actividad máxima en el intervalo de 30

a 40 °C y por encima de 45°C comienzan a desnaturalizarse. La desnaturalización de una

proteína se ha definido como: “Un cambio de importancia en la estructura original, sin rotura

de ninguno de los enlaces químicos primarios que unen entre sí a los aminoácidos.

II. OBJETIVOS

- Reconocer que las reacciones enzimáticas dependen de factores como: temperatura,

pH y la presencia de sales.

- Comprobar que el pH es un factor que altera o modifica la actividad enzimática. de

la alfa – amilasa del trigo.

- Reconocer que las enzimas son catalizadores orgánicos que sólo se encuentran en

los seres vivos.

III. MARCO TEÓRICO

3.1. Las enzimas

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(Nelson, D. L., & Cox, M. M., 2021) son proteínas que catalizan reacciones químicas.

Su actividad catalítica depende de su estructura tridimensional, la cual está determinada por la

secuencia de aminoácidos que la componen.

La estructura de las enzimas puede verse afectada por factores ambientales, como el pH

y la temperatura.

3.2. Factores físicos que modifican la actividad enzimática

3.2.1. Los factores físicos que modifican la actividad enzimática son los siguientes:
- Temperatura: (Nelson, D. L., & Cox, M. M., 2021)La temperatura afecta la

velocidad de todas las reacciones químicas, incluidas las reacciones enzimáticas.

En general, la actividad enzimática aumenta con la temperatura hasta que se alcanza

un punto máximo.

El aumento de la temperatura hace que las moléculas de sustrato se muevan más rápido,

lo que aumenta la probabilidad de que se encuentren con la enzima. Sin embargo, si la

temperatura es demasiado alta, la enzima puede desnaturalizarse. La desnaturalización es un

proceso irreversible que altera la estructura tridimensional de la enzima, lo que hace que pierda

su actividad catalítica.

- Presión: (Nelson, D. L., & Cox, M. M., 2021)La presión tiene un efecto menor

que la temperatura en la actividad enzimática. En general, el aumento de la presión

aumenta ligeramente la actividad enzimática.

- Radiación: (Nelson, D. L., & Cox, M. M., 2021)La radiación, como la radiación

ultravioleta o la radiación ionizante, puede dañar las enzimas y disminuir su

actividad.

Factores químicos que modifican la actividad enzimática

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3.2.2. Los factores químicos que modifican la actividad enzimática son los siguientes:
- pH: (Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Stryer, L., 2022) El pH es un indicador de la

concentración de iones hidrógeno en una solución. Las enzimas contienen grupos

químicos ionizables que pueden cambiar su carga eléctrica en función del pH.

La carga eléctrica de los grupos químicos de una enzima afecta su conformación. En

general, las enzimas tienen una conformación óptima a un pH específico, llamado pH óptimo.

Si el pH del medio es demasiado bajo o demasiado alto, la enzima puede perder su

conformación óptima y, por lo tanto, su actividad catalítica.

- Concentración de sustrato: (Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M.,

Roberts, K., & Walter, P., 2023)La concentración de sustrato es el factor que tiene

el efecto más pronunciado en la velocidad de una reacción enzimática. En general,

la velocidad de una reacción enzimática aumenta linealmente con la concentración

de sustrato hasta que se alcanza la concentración saturante.

A la concentración saturante, todas las moléculas de enzima están ocupadas por

moléculas de sustrato, por lo que no se puede aumentar la velocidad de la reacción.

- Concentración de enzima: (Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M.,

Roberts, K., & Walter, P., 2023)La concentración de enzima también afecta la

velocidad de una reacción enzimática. En general, la velocidad de una reacción

enzimática aumenta proporcionalmente a la concentración de enzima.

- Inhibidores: (Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter,

P., 2023)Los inhibidores son sustancias que disminuyen la actividad enzimática.

Los inhibidores pueden ser competitivos, no competitivos o acompetitivos.

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Los inhibidores competitivos compiten con el sustrato por el centro activo de la enzima.

Los inhibidores no competitivos se unen a la enzima en un lugar diferente al centro activo y

alteran su conformación. Los inhibidores acompetitivos se unen a la enzima-sustrato complejo

y evitan que se forme el producto.

IV. METODOLOGÍA

4.1. Localización

El trabajo se llevo a cabo en el laboratorio de las aulas de la Universidad Nacional de

Cajamarca sede Jaen

Figura 1. Mapa en ArcGIS de la localización de la Universidad Nacional de Cajamarca.

4.2. Materiales

- Buffer fosfato pH 6,6

- Buffer fosfato pH 8,0
- Solución salival
- Solución de almidón 1%
- Solución. Ácido clorhídrico 0,05 N
- Solución yodurada (Lugol)

4.3. Procedimiento
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COMPONENTES
I II III IV V
SISTEMAS
Buffer fosfato pH 6,6 3 mL 3 mL 3mL ------ ------
Buffer fosfato pH 8,0 ----- ----- ----- 3 mL 3 mL
Almidón de papa al 1% 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL
Alfa amilasa salival 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL 2 mL
Dejar en reposo por 30 Hielo Medio En baño Medio En baño
min ambiente maría a ambiente maría a
37°C 37°C

Control
COMPONENTES
I II III IV V
SISTEMAS
Incubado anterior 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL
Solución de Ácido. 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL 0.5 mL
Clorhídrico
Solución yodurada 0.2 mL 0.2 mL 0.2 mL 0.2 mL 0.2 mL
Observar y anotar la actividad catalítica en cada uno de los tubos

V. RESULTADOS

Tubo de ensayo 1:

En el tubo de ensayo podemos decir que se a desnaturalizado la encima o almidón y

hemos obtenido una coloración azul, por qué el hielo que está a 0 temperatura hace que las

moléculas no reaccionen y estos no son efectivos.

Tubo de ensayo 2:

logramos notar que existe actividad de la enzima por el color amarillo que obtuvimos,

está a degradado al almidón y emos obtenido el producto de glucosa, fructosa. Existiendo la

cinética molecular.

Tubo de ensayo 3:

Por errores de practica en laboratorio y mantener el tubo de ensayo en la temperatura

no acorde a la guía. La temperatura a degradado a la enzima.

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Tubo de ensayo 4:

Por el pH se hubiese desnaturalizado a la encima y la coloración fuese azul.

Desnaturalización de la proteína. Eso quiere decir que hemos tenido un error en la práctica y

se obtuvo un color contrario.

Tubo de ensayo 5:

Se trabajo con pH normal y el cual fue llevado a baño maría. La temperatura optima era

de 38grados sin embrago por estar a temperaturas más altas, ocurrió la desnaturalización de

amilasa.

VI. CONCLUSIONES Y RECOMENCACIONES

6.1. Conclusiones.

Los resultados del experimento demuestran que el pH es un factor que altera la actividad

enzimática de la alfa-amilasa salival. La actividad enzimática es máxima a un pH de 6,6, que

es el pH óptimo de la enzima. A pHs más bajos o más altos, la actividad enzimática disminuye.

Los resultados también demuestran que la temperatura afecta la actividad enzimática

de la alfa-amilasa del trigo. En general, la actividad enzimática aumenta con la temperatura

hasta que se alcanza un punto máximo. En el caso de la alfa-amilasa del trigo, la actividad

enzimática máxima se alcanza a una temperatura de 37 °C.

En el tubo de ensayo 1, la actividad enzimática fue nula. Esto se debe a que la enzima

se desnaturalizó por la baja temperatura. La temperatura de 0 °C es demasiado baja para que la

enzima funcione correctamente.

En el tubo de ensayo 2, la actividad enzimática fue máxima. Esto se debe a que la

enzima se encontraba en las condiciones óptimas para su funcionamiento. El pH de 6,6 es el

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pH óptimo para la alfa-amilasa del trigo y la temperatura de 25 °C es una temperatura

moderada.

En el tubo de ensayo 3, la actividad enzimática fue nula. Esto se debe a que la enzima

se desnaturalizó por la alta temperatura. La temperatura de 45 °C es demasiado alta para que

la enzima funcione correctamente.

En el tubo de ensayo 4, la actividad enzimática fue nula. Esto se debe a que la enzima

se desnaturalizó por el pH ácido. El pH de 4,0 es demasiado ácido para que la alfa-amilasa del

trigo funcione correctamente.

En el tubo de ensayo 5, la actividad enzimática fue nula. Esto se debe a que la enzima

se desnaturalizó por la alta temperatura. La temperatura de 45 °C es demasiado alta para que

la alfa-amilasa del trigo funcione correctamente.

6.2. Recomendaciones

Para obtener resultados más precisos, se recomienda utilizar un pHímetro para medir el

pH de las soluciones. También se recomienda utilizar un baño maría con temperatura

controlada para mantener la temperatura constante durante el experimento.

En el caso del tubo de ensayo 4, se recomienda utilizar una temperatura de 37 °C para

evitar la desnaturalización de la enzima

Para realizar este experimento correctamente, se deben seguir las siguientes

recomendaciones:

- Utilizar materiales y reactivos de calidad.

- Leer cuidadosamente las instrucciones del experimento.

- Seguir las instrucciones del experimento paso a paso.

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- Utilizar el equipo de laboratorio adecuado.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2023). Molecular
biology of the cell (7th ed.). Garland Science.
Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Stryer, L. (2022). Biochemistry (8th ed.). W. H. Freeman and
Company.
Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2021). Lehninger principles of biochemistry (7th ed.). Worth
Publishers.

7.1. CUESTIONARIO

¿Cómo la temperatura el pH y las sales afectan la estructura química de las

enzimas?

La temperatura, el pH y las sales pueden afectar la estructura química de las enzimas

de diversas maneras. Las enzimas son proteínas, y su estructura tridimensional es crucial para

su actividad catalítica. Cambios en la temperatura pueden afectar la flexibilidad y estabilidad

de la estructura proteica, mientras que variaciones en el pH pueden alterar las cargas eléctricas

en los aminoácidos que componen las enzimas. Las sales pueden interactuar con las cargas

eléctricas y afectar las interacciones entre las moléculas de agua y la proteína.

¿Cómo se verán afectados los parámetros cinéticos de las enzimas?

Los parámetros cinéticos de las enzimas, como la velocidad máxima (Vmax) y la

constante de Michaelis-Menten (Km), pueden verse afectados por estos factores. Cambios en

la temperatura y el pH pueden modificar la afinidad de la enzima por su sustrato y la velocidad

a la que se lleva a cabo la reacción enzimática.

¿Podrían esos factores ser inhibidores enzimáticos?

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Sí, la temperatura, el pH y las sales pueden actuar como inhibidores enzimáticos. Estos

factores pueden alterar la conformación de la enzima y afectar negativamente su actividad

catalítica.

¿Cuál de los materiales de la práctica se clasifican como vivos y no vivos?

Los materiales vivos en la práctica pueden incluir tejidos biológicos como células,

mientras que los materiales no vivos pueden ser sustancias químicas o soluciones utilizadas en

el experimento que no poseen vida por sí mismas.

Identifique la o las enzimas con las cuales usted evidenció la reacción en cada tejido

vivo. ¿En cuál material de la práctica se encuentran estas enzimas?

La identificación de enzimas específicas en tejidos vivos dependerá del contexto de la

práctica. Puede implicar la observación de reacciones bioquímicas específicas en tejidos y la

identificación de las enzimas responsables de esas reacciones.

Cuál es la reacción que efectúa cada enzima.

La reacción catalizada por cada enzima dependerá de la enzima específica y del sustrato

involucrado en la práctica.

En la reacción bioquímica que describe cada proceso. Identifique sustrato, enzima

producto coenzima.

Identificar los sustratos, enzimas, productos y coenzimas específicos en una reacción

bioquímica dependerá del contexto de la práctica o experimento en cuestión. Sin información

específica sobre las reacciones observadas, puedo proporcionar un ejemplo generalizado:

una reacción en la que se observa la descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2)

catalizada por la enzima catalasa, que se encuentra en tejidos vivos:

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Sustrato: H2O2 (peróxido de hidrógeno)

Enzima: Catalasa

Producto: H2O (agua) y O2 (oxígeno)

Coenzima: La catalasa no requiere una coenzima adicional para catalizar la

descomposición del peróxido de hidrógeno.

¿Cuáles factores afectaron el metabolismo de las células de cada tejido? ¿Dé una

explicación química?

Los factores que pueden afectar el metabolismo de las células en un tejido son diversos

y pueden incluir condiciones como la temperatura, el pH, la disponibilidad de sustratos, la

presencia de inhibidores enzimáticos y otros factores ambientales. A continuación, proporciono

una explicación química de cómo algunos de estos factores podrían influir en el metabolismo

celular:

Temperatura:

Explicación Química: La temperatura afecta la velocidad de las reacciones químicas,

incluidas las reacciones metabólicas. Aumentar la temperatura suele aumentar la velocidad de

las reacciones, ya que las moléculas tienen más energía cinética. Sin embargo, temperaturas

extremadamente altas pueden desnaturalizar las proteínas enzimáticas, afectando

negativamente su actividad.

pH:

Explicación Química: El pH influye en la carga eléctrica de las moléculas, incluidas las

enzimas y los sustratos. Cambios en el pH pueden afectar la estructura de las proteínas

enzimáticas y, por lo tanto, su actividad catalítica. Cada enzima tiene un rango de pH óptimo

en el cual funciona de manera más eficiente.

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Disponibilidad de Sustratos:

Explicación Química: El metabolismo celular implica la utilización de sustratos para

generar productos. La disponibilidad de estos sustratos puede ser crucial para el

funcionamiento eficiente de las rutas metabólicas. La falta de sustratos necesarios puede limitar

la velocidad de las reacciones.

Inhibidores Enzimáticos:

Explicación Química: Algunos compuestos actúan como inhibidores enzimáticos,

interfiriendo con la actividad de las enzimas. Pueden ser competitivos (compiten con el

sustrato), no competitivos (se unen a sitios diferentes) o mixtos. Estos inhibidores pueden

afectar negativamente la velocidad de las reacciones metabólicas.

Factores Ambientales:

Explicación Química: Otros factores, como la presencia de sales u otros compuestos

químicos en el ambiente celular, pueden afectar la actividad enzimática y, por lo tanto, el

metabolismo. Las interacciones iónicas pueden influir en la estructura proteica y en la

eficiencia de las reacciones.

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7.2. ANEXOS:

Figura1. Figura 2.

Figura 3. Figura 4.

Figura 5.