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COVID-19
Alba Huertas García
Enfermera especialista en Geriatría
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

PRUEBAS DE DETECCIÓN
DE ANTÍGENOS

Alba Huertas García

Enfermera especialista en Geriatría
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

INTRODUCCIÓN

Son inmunoensayos que detectan la

presencia de un antígeno viral específico,
lo que implica la existencia de infección
actual.

Suelen estar fabricados en materiales

adsorbentes y contienen ya adsorbidos
distintos reactivos (como por ejemplo
anticuerpos) que cuando entran en
contacto con la sustancia diana producen
un cambio generalmente visual y
detectable directamente a simple vista.

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INTRODUCCIÓN

Son inmunoensayos que detectan la

presencia de un antígeno viral específico,
lo que implica la existencia de infección
actual.

Suelen estar fabricados en materiales

adsorbentes y contienen ya adsorbidos
distintos reactivos (como por ejemplo
anticuerpos) que cuando entran en
contacto con la sustancia diana producen
un cambio generalmente visual y
detectable directamente a simple vista.

¿QUÉ DETECTAN?

La prueba de diagnóstico rápido (RDT) detecta la presencia de proteínas virales (antígenos)

expresadas por el virus COVID-19 en una muestra del tracto respiratorio de una persona.

¿QUÉ DETECTAN?

La prueba de diagnóstico rápido (RDT) detecta la presencia de proteínas virales (antígenos)

expresadas por el virus COVID-19 en una muestra del tracto respiratorio de una persona.

Nucleocápside
(N)
S1
Partes de Envoltura
partícula viral proteínas virales
COVID-19 espiga (S)
S2
Membrana (M)

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¿QUÉ DETECTAN?

La prueba de diagnóstico rápido (RDT) detecta la presencia de proteínas virales (antígenos)

expresadas por el virus COVID-19 en una muestra del tracto respiratorio de una persona.

Nucleocápside
(N)
S1 Prueba RDT
Partes de Envoltura
partícula viral proteínas virales
COVID-19 espiga (S)
S2
Membrana (M)

La técnica más utilizada es la Inmunocromatografía Coloidal.

¿CÓMO Y CUÁNDO DEBE REALIZARSE LA PRUEBA?

Los antígenos detectados se expresan solo cuando el virus se replica activamente; por lo tanto,
tales pruebas están diseñadas para identificar infecciones agudas o tempranas.

¿CÓMO Y CUÁNDO DEBE REALIZARSE LA PRUEBA?

Los antígenos detectados se expresan solo cuando el virus se replica activamente; por lo tanto,
tales pruebas están diseñadas para identificar infecciones agudas o tempranas.

¿Cómo?
La m uestra se obtiene del tracto
respiratorio, exudado nasofaríngeo.
¿Cuándo?
Según estudios, se ha visto que es m ás
alta en la fase aguda de la infección (los
prim eros 7 días del inicio de la
sintom atología).

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¿CÓMO Y CUÁNDO DEBE REALIZARSE LA PRUEBA?

Los antígenos detectados se expresan solo cuando el virus se replica activamente; por lo tanto,
tales pruebas están diseñadas para identificar infecciones agudas o tempranas.

¿Cómo?
La m uestra se obtiene del tracto
respiratorio, exudado nasofaríngeo.
¿Cuándo?
Según estudios, se ha visto que es m ás
alta en la fase aguda de la infección (los
prim eros 7 días del inicio de la
sintom atología).

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¿CÓMO Y CUÁNDO DEBE REALIZARSE LA PRUEBA?

Los antígenos detectados se expresan solo cuando el virus se replica activamente; por lo tanto,
tales pruebas están diseñadas para identificar infecciones agudas o tempranas.

¿Cómo?
La m uestra se obtiene del tracto
respiratorio, exudado nasofaríngeo.
¿Cuándo?
Según estudios, se ha visto que es m ás
alta en la fase aguda de la infección (los
prim eros 7 días del inicio de la
sintom atología).

UTILIDAD DE LA PRUEBA

Test Test de
diagnóstico cribado

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SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD

• Los test rápidos que

llegaban a España,
mostraban una baja
sensibilidad (por
debajo del 50-60%).
Poco fiables.

Marzo 2020

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SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD

• Los test rápidos que

llegaban a España,
mostraban una baja
sensibilidad (por
debajo del 50-60%).
Poco fiables.

Marzo 2020

Por ello la OMS no recomendaba el uso de estos test, ya que su estándar marca que
deben utilizarse pruebas que reúnan los criterios de sensibilidad (S) ≥ 80% y especificidad
(E) ≥ 97% y que hayan seguido estudios independientes de validación por laboratorios
clínicos o de referencia a nivel nacional o internacional.

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SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD

• Los test rápidos que
llegaban a España,
mostraban una baja • Nuevos kits de
sensibilidad (por debajo
del 50-60%). Poco
fiables.
Marzo 2020
Inicio
investigación y
desarrollo
detección de
antígenos, sensibilidad
(>90%) especificidad
(>95%) en estudios en
pacientes sintomáticos
con menos de 7 días de
evolución.

Por ello la OMS no recomendaba el uso de estos test, ya que su estándar marca que
deben utilizarse pruebas que reúnan los criterios de sensibilidad (S) ≥ 80% y especificidad
(E) ≥ 97% y que hayan seguido estudios independientes de validación por laboratorios
clínicos o de referencia a nivel nacional o internacional.

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SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD

• Los test rápidos que
llegaban a España,
mostraban una baja • Nuevos kits de
sensibilidad (por debajo
del 50-60%). Poco
fiables.
Marzo 2020
Inicio
investigación y • Alta sensibilidad en pacientes
desarrollo sintomáticos y asintomáticos.
Sensibilidad de 98,2% y
especificidad mayor de 99% en
detección de pacientes sintomáticos con 5 o
antígenos, sensibilidad menos días de evolución, y una
(>90%) especificidad sensibilidad de 93,1% en pacientes
(>95%) en estudios en con 7 días o menos de evolución.
pacientes sintomáticos
con menos de 7 días de
evolución.
Últimos logros

Por ello la OMS no recomendaba el uso de estos test, ya que su estándar marca que
deben utilizarse pruebas que reúnan los criterios de sensibilidad (S) ≥ 80% y especificidad
(E) ≥ 97% y que hayan seguido estudios independientes de validación por laboratorios
clínicos o de referencia a nivel nacional o internacional.

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INDICACIÓN DE LA PRUEBA

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INDICACIÓN DE LA PRUEBA

Indicado en Personas que son contactos

personas con estrechos. En el contexto de un brote
síntom as de COVID- en un centro sanitario o
19 en los prim eros 5 sociosanitario.
días desde el inicio
de los síntom as. • Aunque se recom ienda PCR, se
puede iniciar el estudio con la
realización de test antigénicos.

17

INDICACIÓN DE LA PRUEBA

Si la PDIA resulta
negativa y hay alta
sospecha clínica de
Personas que son contactos COVID-19.
Indicado en
personas con estrechos. En el contexto de un brote
síntom as de COVID- en un centro sanitario o
19 en los prim eros 5 sociosanitario. Si la PDIA continúa
días desde el inicio siendo negativa y han
• Aunque se recom ienda PCR, se trascurrido varios días
de los síntom as.
puede iniciar el estudio con la (al menos 7) desde el
inicio de los síntomas.
realización de test antigénicos.

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INDICACIÓN DE LA PRUEBA

Repetir la prueba.
• Si inicialmente se
realizó una RDT, se
Si la PDIA resulta realizará una PCR.
negativa y hay alta
sospecha clínica de • Si inicialmente se
realizó una PCR, se
Personas que son contactos COVID-19. repetirá la PCR a las 48
Indicado en horas.
personas con estrechos. En el contexto de un brote
síntom as de COVID- en un centro sanitario o
19 en los prim eros 5 sociosanitario. Si la PDIA continúa
días desde el inicio siendo negativa y han Detección de IgM
de los síntom as. • Aunque se recom ienda PCR, se trascurrido varios días mediante una
puede iniciar el estudio con la (al menos 7) desde el prueba serológica
realización de test antigénicos.
inicio de los síntomas. tipo ELISA.

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PROCEDIMIENTO

Según estudios, la carga viral

es más alta en nasofaringe.

Recogida de la muestra del

paciente: Es muy importante
comprobar en las instrucciones de
uso del producto. El test disponible
Procedimiento

en este momento precisa frotis de

exudado nasofaríngeo.

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PROCEDIMIENTO

Según estudios, la carga viral

es más alta en nasofaringe.
Recogida de la muestra del
paciente: Es muy importante
comprobar en las instrucciones de
uso del producto. El test disponible
Procedimiento
Pasar la torunda a través de la
nariz suavemente, hasta llegar a la
nasofaringe. Hay que mantener la
torunda cerca del septum y suelo
de la fosa. Rotar la torunda
durante 5 segundos y extraerla.

en este momento precisa frotis de

exudado nasofaríngeo.

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PROCEDIMIENTO

Según estudios, la carga viral

es más alta en nasofaringe.
Recogida de la muestra del
paciente: Es muy importante
comprobar en las instrucciones de
uso del producto. El test disponible
Procedimiento
Pasar la torunda a través de la
nariz suavemente, hasta llegar a la
nasofaringe. Hay que mantener la
torunda cerca del septum y suelo
de la fosa. Rotar la torunda
durante 5 segundos y extraerla.

en este momento precisa frotis de

exudado nasofaríngeo.

Mezcla con solución reactiva (generalmente

anticuerpos específicos contra algún antígeno
viral).

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PROCEDIMIENTO

Según estudios, la carga viral

es más alta en nasofaringe.
Recogida de la muestra del
paciente: Es muy importante
comprobar en las instrucciones de
uso del producto. El test disponible
Procedimiento
Pasar la torunda a través de la
nariz suavemente, hasta llegar a la
nasofaringe. Hay que mantener la
torunda cerca del septum y suelo
de la fosa. Rotar la torunda
durante 5 segundos y extraerla.

en este momento precisa frotis de

exudado nasofaríngeo.

Mezcla con solución reactiva (generalmente

anticuerpos específicos contra algún antígeno
viral).

Transferencia directa de unas gotas de la mezcla en

la tira reactiva y lectura de la respuesta (visual
generalmente) al cabo de pocos minutos en la zona
de captura o detección.

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ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE

Si las muestras no se analizan de inmediato deben

almacenarse en un tubo seco y desinfectado y
cerrarse herméticamente. Generalmente,
pueden almacenarse hasta 8h en ambiente de 2-
8 ºC, o almacenarse a -70ºC por periodos más
prolongados.

Las muestras clínicas deben ser tratadas como

potencialmente infecciosas y se consideran de
categoría B. Transportadas en triple embalaje por
los procedimientos habituales.

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INTERPRETACIÓN

Resultado positivo

Resultado
negativo

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INTERPRETACIÓN

Resultado positivo Infección activa

Resultado
negativo

26

INTERPRETACIÓN

Resultado positivo Infección activa

Resultado No descarta
negativo infección

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INTERPRETACIÓN

Resultado positivo Infección activa

Realizar PCR
Resultado No descarta
negativo infección en menos de
48h

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VENTAJAS E INCONVENIENTES

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VENTAJAS E INCONVENIENTES

Rapidez y sencillez
del test. Resultados
en 15-20 m inutos.

Cribado en
Valor
pacientes con
predictivo clínica
positivo bueno:
com patible
su positividad
para aislar y
confirm a el tratar de form a
caso.
rápida.

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VENTAJAS E INCONVENIENTES

Exposición del
Rapidez y sencillez
personal sanitario
del test. Resultados para su recogida y
en 15-20 m inutos.
riesgo de contagio.

Cribado en
Valor
pacientes con
predictivo clínica
positivo bueno: Se necesita
com patible Riesgo de falsos
su positividad personal
para aislar y negativos. entrenado.
confirm a el tratar de form a
caso.
rápida.

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PRUEBAS DE DETECCIÓN
DE ANTÍGENOS

Alba Huertas García

Enfermera especialista en Geriatría
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

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COVID-19
Marta Polo Pérez
Enfermera especialista en Enfermería Geriátrica
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

TEST DE LA PCR

Marta Polo Pérez

Enfermera especialista en Enfermería Geriátrica
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

PRUEBA PCR

PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

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PRUEBA PCR

PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

Cadena de reacción de polimerasa

reactiva con transcriptasa reversa [rt-PCR]

PRUEBA PCR

PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

Cadena de reacción de polimerasa

reactiva con transcriptasa reversa [rt-PCR]

Genoma
completo
de SARS-
CoV-2

PRUEBA PCR

PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

Cadena de reacción de polimerasa

reactiva con transcriptasa reversa [rt-PCR]

Genoma
completo
Diagnóstico microbiológico con
de SARS- detección de material genético (ARN)
CoV-2 viral de SARS-CoV-2 a través de muestras
respiratorias

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PRUEBA PCR

Puede detectar cantidades

Sensible
de 20 copias/ml

Diferencia entre dos

PCR Específica microorganismos muy cercanos
evolutivamente

Se detecta virus en las

Precoz primeras fases de la infección
respiratoria

PRUEBA PCR

Puede detectar cantidades

Sensible
de 20 copias/ml

Diferencia entre dos

PCR Específica microorganismos muy cercanos
evolutivamente

Se detecta virus en las

Precoz primeras fases de la infección
respiratoria

PRUEBA PCR

Puede detectar cantidades

Sensible
de 20 copias/ml

Diferencia entre dos

PCR Específica microorganismos muy cercanos
evolutivamente

Se detecta virus en las

Precoz primeras fases de la infección
respiratoria

- La realización de la prueba PCR presenta cierto

grado de complejidad, por lo que necesita
personal entrenado y preparado para su obtención.
- PCR es la técnica diagnóstica de referencia.

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POTENCIALES ERRORES DIAGNÓSTICOS

Falso negativo

Error en el
Toma etiquetado
inadecuada Retraso en de la
de la el transporte muestra a lo
muestra largo del
proceso

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POTENCIALES ERRORES DIAGNÓSTICOS

Falso negativo Falso positivo

Error en el Errores en el
Toma etiquetado etiquetado de Contaminación
inadecuada Retraso en de la
de la el transporte muestra a lo la muestra a lo cruzada entre
muestra largo del largo del muestras
proceso proceso

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TIPOS DE MUESTRAS

Tracto respiratorio inferior:

lavado broncoalveolar, esputo
Tracto respiratorio superior: (si es posible) y/o aspirado
exudado
endotraqueal especialmente en
nasofaríngeo/orofaríngeo
pacientes con enfermedad
respiratoria grave

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TIPOS DE MUESTRAS

Tracto respiratorio inferior:

lavado broncoalveolar, esputo
Tracto respiratorio superior: (si es posible) y/o aspirado
exudado
endotraqueal especialmente en
nasofaríngeo/orofaríngeo
pacientes con enfermedad
respiratoria grave

Pruebas negativas
en pacientes con
alta sospecha clínica

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TIPOS DE MUESTRAS

Tracto respiratorio inferior:

lavado broncoalveolar, esputo
Tracto respiratorio superior: (si es posible) y/o aspirado
exudado
endotraqueal especialmente en
nasofaríngeo/orofaríngeo
pacientes con enfermedad
respiratoria grave

Pruebas negativas ¿Falso

en pacientes con negativo?
alta sospecha clínica

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TIPOS DE MUESTRAS

Tracto respiratorio inferior:

lavado broncoalveolar, esputo
Tracto respiratorio superior: (si es posible) y/o aspirado
exudado
endotraqueal especialmente en
nasofaríngeo/orofaríngeo
pacientes con enfermedad
respiratoria grave

¿Falso Muestras
Pruebas negativas
negativo? adicionales:
en pacientes con
sangre, orina
alta sospecha clínica
o heces

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TIPOS DE MUESTRAS

Tracto respiratorio inferior:

lavado broncoalveolar, esputo
Tracto respiratorio superior: (si es posible) y/o aspirado
exudado
endotraqueal especialmente en
nasofaríngeo/orofaríngeo
pacientes con enfermedad
respiratoria grave

¿Falso Muestras
Pruebas negativas
negativo? adicionales:
en pacientes con
sangre, orina
alta sospecha clínica
o heces

Recomendación Unión Europea (UE): se confirma superada la

enfermedad con 2 resultados negativos de rt-PCR con un intervalo de
mínimo 24 h entre ellos.

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PROCEDIMIENTO Y SISTEMAS DE RECOGIDA

Personal
Recogida de Exposición de entrenado,
muestra PCR riesgo cualificado y
con EPI

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PROCEDIMIENTO Y SISTEMAS DE RECOGIDA

Personal
Recogida de Exposición de entrenado,
muestra PCR riesgo cualificado y
con EPI

Equipo de protección
individual
-Bata desechable
impermeable
-Mascarilla tipo FPP2 o FPP3
-Gafas de protección y/o
pantalla de protección
-Doble guante (un par de
guantes ajustados por
debajo del puño de la bata y
otro par que cubra el puño)

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PROCEDIMIENTO Y SISTEMAS DE RECOGIDA

Personal
Recogida de Exposición de entrenado,
muestra PCR riesgo cualificado y
con EPI

Equipo de protección
• La recogida de muestras: ámbito hospitalario, individual
comunitario o en las instituciones -Bata desechable
impermeable
sociosanitarias -Mascarilla tipo FPP2 o FPP3
-Gafas de protección y/o
• En estas últimas se recomienda que la pantalla de protección
recogida se realice en las propias habitaciones -Doble guante (un par de
de los pacientes con el fin de evitar guantes ajustados por
debajo del puño de la bata y
desplazamientos e infecciones cruzadas otro par que cubra el puño)

19

OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

Insertar el hisopo por ambas

cavidades nasales, paralelamente al
paladar hasta atravesar las coanas y
alcanzar la pared nasofaríngea

20

OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

Insertar el hisopo por ambas

cavidades nasales, paralelamente al
paladar hasta atravesar las coanas y
alcanzar la pared nasofaríngea

Frotar el hisopo con movimientos

giratorios durante unos segundos

21

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OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

Insertar el hisopo por ambas

cavidades nasales, paralelamente al
paladar hasta atravesar las coanas y
alcanzar la pared nasofaríngea

Frotar el hisopo con movimientos

giratorios durante unos segundos

Retirar con cuidado el hisopo

22

OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

Insertar el hisopo por ambas

cavidades nasales, paralelamente al
paladar hasta atravesar las coanas y
alcanzar la pared nasofaríngea

El hisopo se
coloca en un vial
Frotar el hisopo con movimientos que contiene 2-3
giratorios durante unos segundos ml de líquido de
transporte y se
desecha el resto
del aplicador para
cerrar la muestra
correctamente

Retirar con cuidado el hisopo

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OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

El procedimiento más común será la recogida de exudado de

acceso oro/nasofaríngeo

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OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

El procedimiento más común será la recogida de exudado de

acceso oro/nasofaríngeo
Material necesario
•Hisopo seco de algodón o poliéster
•Contenedor con medio líquido para transportar el
hisopo
•Segundo embalaje que debe estar seco en su
interior
•Tercer embalaje que pueda soportar golpes

25

OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

El procedimiento más común será la recogida de exudado de

acceso oro/nasofaríngeo
Material necesario
•Hisopo seco de algodón o poliéster
•Contenedor con medio líquido para transportar el
hisopo
•Segundo embalaje que debe estar seco en su
interior
•Tercer embalaje que pueda soportar golpes

Las muestras serán tratadas como potencialmente infecciosas

y se consideran de categoría B: normativa UN3733 requieren
transporte en triple embalaje robusto y que soporte golpes

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TEST DE LA PCR

Marta Polo Pérez

Enfermera especialista en Enfermería Geriátrica
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

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COVID-19
Cristina Rosa Felipe
Médico residente de Medicina Interna
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

TEST DIAGNÓSTICOS
SEROLOGÍA

Cristina Rosa Felipe

Médico residente de Medicina Interna
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete

SEROLOGÍA

Estudio de anticuerpos en suero sanguíneo:

• Cualitativo: permite determinar la presencia de
anticuerpos, es decir si una persona estuvo
infectada previamente con el SARS-CoV-2.
• Cuantitativo: permite calcular la cantidad de
anticuerpos producidos tras la infección.

NO útil en el diagnóstico de la infección aguda.

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SEROLOGÍA

TIPOS DE TÉCNICAS SEROLÓGICAS

ELISA • Ensayo por inmunoabsorción ligado a

enzimas.

≠ CLIA • Inmunoensayo quimioluminiscente.

SENSIBILIDAD LFIA • Inmunoensayo de flujo lateral.

SEROCONVERSIÓN

FALSOS NEGATIVOS Y FALSOS POSITIVOS

FALSOS NEGATIVOS

Etapa temprana de infección

Inmunosupresión crónica

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FALSOS NEGATIVOS Y FALSOS POSITIVOS

FALSOS POSITIVOS

Reacción cruzada por

infección previa

UTILIDAD CLÍNICA

Com plem entar el diagnóstico en casos sospechosos o diagnosticados de COVID-19.

Realización de estudios de seroprevalencia.

M onitorizar las respuestas inm unitarias.

Tom ar decisiones de aislam iento en pacientes asintom áticos/oligosintom áticos.

Evaluación de la prevalencia de la infección en el personal sanitario.

Ayudar en el proceso de desarrollo de vacunas y la respuesta inm unitaria a las m ism as.

Identificar potenciales donantes de plasm a convaleciente.

TEST DIAGNÓSTICOS
SEROLOGÍA

Cristina Rosa Felipe

Médico residente de Medicina Interna
Complejo Hospitalario Universitario de Albacete