Semana 5. 08-11-2021 AL 13-11-2021 Docente: MSc.

Celia Bertha Vargas de la Cruz Tema: Biotecnología aplicada en

el procesamiento de alimentos funcionales. Práctica № 6. Caracterización del microbioma.

Alimentos funcionales: está basado netamente a metabolitos de ciertas fuentes, de origen animal o vegetal,
metabolitos biológicamente activos. Deben tener una función fisiológica a nivel terapéutico.

Nutraceútico: un suplemento alimenticio, vinculado a una formulación.

Biotecnología tradicional → fermentación, bioproceso que utilizan microorganismos para dar un producto. Hacen
métodos indirectos, y no llega a permitirme una identificación completa.

Combinación de tecnologías y abarca otras ciencias.

Biorreactores

INTRODUCCIÓN

• La biotecnología alimentaria moderna es ahora una industria de miles de millones de dólares, que produce
alimentos funcionales y nutracéuticos que ofrecen una gran cantidad de mayores beneficios para la salud, incluida
la prevención contra enfermedades crónicas y degenerativas.
• Los alimentos funcionales son alimentos que contienen componentes fisiologicamentes activos que proveen
beneficios saludables y nutricionales (Hasler et. al 2019)
• La modificación genética ha sido empleada como una alternativa o complemento para la intervención de
micronutrientes como: suplementación y fortificación (De Steur, et.al 2017)

BIOTECNOLOGÍA Y GENÓMICA NUTRICIONAL

La biotecnología puede promover la calidad nutricional, fiabilidad y productividad de cultivos de plantas, así como los
animales, que brindara beneficios a los agricultores, consumidores, industria de alimentos y el medio ambiente.
(Hasler, 2019).

Los avances en ingeniería genética han promovido métodos que permiten diseñar alimentos funcionales y compuestos
bioactivos producidos por organismos (Reynolds et.al 2018)

APLICACIÓN DE LA BIOTECNOLOGÍA EN LA DISTRIBUCIÓN DE NUTRIENTES

Silenciamiento génico postranscripcional o alteración de la estructura del alergeno que permite la reducción de alergia
en el cambio estructural para reducir los enlaces disulfuros o modificar los genes que codifiquen los alergenos.

Ejm: Reducción de la alergenicidad de maní, soya, langostinos, etc.

• Fermentación.
• Producción de enzimas microbiana
• Metabolitos de microorganismos endófitos e epifitos
• Microbiota de plantas, suelo y microbioma del ser humano
• Metabolitos con actividad biológicas

BIOTECNOLOGÍA PARA LA MEJORA DE ALIMENTOS FUNCIONALES Y NUTRACÉUTICOS

AVANCES EN BIOTECNOLOGÍA PARA LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS FUNCIONALES

El viejo adagio "eres lo que comes" se deriva de la idea de que debes comer buena comida para estar sano. El papel
de la dieta en la promoción de la salud y la prevención de enfermedades ha sido reconocido durante siglos, basándose
en la experiencia y los datos epidemiológicos. Investigaciones recientes han revelado el importante papel que
desempeña la dieta en la prevención y / o la desaceleración de la progresión de las principales enfermedades crónicas
como el cáncer, la diabetes y las enfermedades cardiovasculares . Esto ha aumentado la conciencia popular sobre la
importancia de la dieta para el bienestar (Barnes y Prasain, 2005).

La dieta se ha convertido así en un componente central de los planes de salud pública orientados a prevenir
enfermedades crónicas prematuras, promover un envejecimiento más saludable y mantener una salud óptima
durante toda la vida.
PAPER 1: Producción biotecnológica, caracterización y actividad antitumoral in vitro de polisacáridos de un especie
nativa de Lentinus crinitus.

Este trabajo trata del cultivo sumergido, extracción y actividad antitumoral de polisacáridos de Lentinus crinitus. El
hongo fue aisladode un bosque tropical (Antioquia, Colombia), cultivado en condiciones de laboratorio y clasificado
por taxonomía clásica y molecular.

Luego, se cultivó en un biorreactor de 5 L utilizando un residuo ligninolítico como sustrato. Las condiciones de
fermentación fueron 0 ± ° C, pH 4.5, 00 rpm y .5 vvm durante 4 días. Los rendimientos de fermentación fueron de 0 g
/ L de biomasa. Después de la extracción, se obtuvieron 0,65 g / L de exopolisacárido soluble en agua (LEPS) y , mg /
00 g de intrapolisacárido soluble en agua (LIPS). En cada extracto se determinó el contenido total de carbohidratos,
glucanos y proteínas. Además, análisis de microscopía electrónica de barrido (SEM), infrarrojo por transformada de
Fourier (FTIR), difractometría de rayos X (XRD), cromatografía líquida de alto rendimiento con detección de índice de
refracción (HPLC-RI) y cromatografía de permeación en gel de alto rendimiento (HPGPC) para se realizaron
caracterizaciones. Se evaluó la actividad antitumoral y los polisacáridos no solo mostraron actividad antiproliferativa
en las células de cáncer de mama sino que también activan los macrófagos J774 como lo demuestra el aumento de
óxido nítrico y factor de necrosis tumoral-α (inductores de apoptosis de células tumorales). Nuestros hallazgos
sugieren que los polisacáridos pueden activar a los macrófagos para que liberen óxido nítrico (NO) y factor de necrosis
tumoral alfa (TNF-α), que bloquea directamente el crecimiento de las células cancerosas. Estos hallazgos mejoran
nuestro conocimiento sobre nuevas fuentes de metabolitos fúngicos que sirven como alternativas coadyuvantes,
baratas y menos dañinas al tratamiento del cáncer.

PAPER 2: Efecto de Lactobacillus acidophilus fermentado y enriquecido con Eruca sativa extracto de hojas en

El objetivo de este estudio fue determinar si los caldos de BAL fermentados con extractos de semillas de Eruca sativa
o Barbarea verna previenen la disfunción de la barrera intestinal y la liberación de interleucina- (CXCL ) in vitro en
células Caco-2 intestinales humanas infectadas con Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) O157: H7. Estos
resultados subrayan el efecto beneficioso de los caldos de LAB fermentados con extractos de semillas de E. sativa en
la barrera intestinal y la inflamación después de la infección por EHEC y revelan que estos caldos de LAB pueden usarse
como compuestos bioactivos funcionales para regular la función intestinal.

PAPER 3: Dendrobium officinale polisacáridos aleviates intestinal inflamación por promoting small extracelular
vesícula packaging de MIR-433-3p

El polisacárido de Dendrobium officinale (DOP) atenúa la enfermedad inflamatoria intestinal (EII), pero no está claro
su papel en la regulación del diálogo cruzado entre las células epiteliales intestinales (IEC) y los macrófagos contra la
EII. Este estudio tuvo como objetivo investigar los efectos protectores de la DOP sobre la respuesta inflamatoria
intestinal a través de la regulación por miARN en pequeñas vesículas extracelulares (sEV). Nuestros resultados
muestran que la DOP interfirió con la secreción de pequeñas vesículas extracelulares (DIE) por IEC, lo que redujo los
niveles de mediadores inflamatorios. Un mecanismo protector de la DOP está mediado por el sEV intestinal que
contiene miR-433-3p, que es un agente terapéutico potencial para la prevención de la acumulación de factores
inflamatorios por la actividad excesiva de los macrófagos intestinales y para restaurar la homeostasis en el
microambiente intestinal.

PAPER 4: Highly efficient gluten degradation by Lactobacilli and fungal proteases during food processing: new
perspectives for celiac disease

Enfermedad celíaca → Actualmente el único tratamiento efectivo para la enfermedad es un dieta sin gluten –> Se
utilizo una nueva MEZCLA de lactobacilos de masa madre seleccionados y proteasas fúngicas para ELIMINAR la
toxicidad de la Harina de trigo durante la FERMENTACIÓN prolongada → Análisis de hidrólisis de la proteína del trigo
→ El procesamiento de alimentos mediante lactobacilos de masa madre seleccionados y proteasas fúngicas puede
considerarse un enfoque eficaz para eliminar la toxicidad del gluten.

ESTRATEGIAS FUTURAS PARA EL DESARROLLO DE ALIMENTOS FUNCIONALES MEJORADOS POR BIOTECNOLOGÍA Y SU

CONTRIBUCIÓN A LA NUTRICIÓN HUMANA
Las biotecnologías han evolucionado durante los últimos 30 años desde biociencias intelectualmente intrigantes hasta
industrias diversificadas que producen productos biológicos útiles a partir de reacciones biocatalíticas a bacterias,
hongos, virus y células de plantas, mamíferos e insectos modificados genéticamente. Algunos avances modifican la
composición genética y la expresión de genes; otros aceleran y ajustan los procesos metabólicos. En los sectores de la
bioingeniería en particular, se han logrado avances significativos en la expansión del laboratorio a la escala de fábrica,
y en tecnologías para el aislamiento, purificación y esterilización de productos finales. La creación de sistemas fiables
de control de procesos y calidad del producto ha tenido el mismo éxito.

APLICACIONES

METABOLOMICA

METABOLITOS PRIMARIOS: Son moléculas indispensables para dar vida y mantener los procesos vitales de éstos los
lípidos y un organismo, siendo carbohidratos, proteínas, ácidos nucleicos

METABOLITOS SECUNDARIOS: Son pequeñas moléculas altamente especializadas que se hallan en pequeñas
cantidades, pero presentan potente actividad biológica. Son moléculas de comunicación celular.

Es el estudio integral y a gran escala de moléculas de elevada diversidad estructural, denominados metabolitos, los
cuáles son biosintetizados por los organismos vivos empleando reacciones bioquímicas complejas. La metabolómica
es un área interdisciplinaria entre biociencia, química analítica e informática y emplea técnicas analíticas sofisticadas
que incluyen cromatografía, espectrometría de masas y resonancia magnética nuclear.

IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS QUE LIBERAN METABOLITOS BIOACTIVOS MEDIANTE ANÁLISIS

METABOLÓMICO, EMPLEANDO MONITOREO DE SUSTRATO Y PRODUCTO POR ESPECTROMETRÍA DE MASAS

ESPECTROMETRÍA DE MASAS MALDI TOF TOF

Proceso de ionización asistido por matriz

Analizador de tiempo de vuelo

FLUJO DE TRABAJO PARA LA IDENTIFICACION DE METABOLITOS MEDIANTE ESPECTROMETRIA DE MASAS MALDI TOF
TOF
IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS EMPLEANDO SOFTWARE SIMMET

La identificación de metabolitos mediante el software SIMMET se realiza mediante algoritmos que usan análisis
combinados de identificación por exactitud de masa y patrones de fraccionamiento de la molécula precursora,
mediante la búsqueda en una base de datos que incluye 66 512 metabolitos de diferentes fuentes biológicas. Se
conecta con las bases de datos de perfiles MS/MS del NIST, el que contiene 9390 compuestos con 45298 iones.

ANÁLISIS DE ESPECTROS MS: IDENTIFICACIÓN POR MASA MOLECULAR

ANÁLISIS DE ESPECTROS MS/MS: IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS MEDIANTE SU PERFIL DE FRACCIONAMIENTO AL

INGRESAR A UNA CELDA DE COLISIÓN

SELECCIÓN DE PARÁMETROS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS EMPLEANDO SOFTWARE SIMMET

ANÁLISIS PROTEÓMICO

ANÁLISIS PROTEÓMICO POR ESPECTROMETRÍA DE MASAS EN TANDEM

IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE SOFTWARE PROTEIN PILOT

Metagenómica * Microbioma

METAGENÓMICA: Ciencia que estudia todo el material genético de una comunidad microbiana sin necesidad de aislar
y cultivar los microorganismos en un laboratorio.

Ha habido un boom en los últimos años: Técnicas de secuenciación masiva, desarrollo de herramientas bioinformáticas
para el análisis de grandes cantidades de información.

CONCEPTOS: MICROBIOTA Y MICROBIOMA

Microbiota: Conjunto de todos los microorganismos que constituyen una comunidad.

Microbioma: conjunto de genomas y genes de todos los microbios que constituyen una comunidad
MICROBIOTA INTESTINAL: “EL GRAN ÓRGANO OLVIDADO”

El MICROBIOMA DE CADA INDIVIDUO ES ÚNICO → huella microbiana

FUNCIONES DE LA MICROBIOTA INTESTINAL

1. Síntesis de vitaminas
2. Inhibición de patógenos
3. Desarrollo y modulación del sistema inmune
 4. Detoxificación de sustancias
5. Síntesis de péptidos activos
6. Digestión de compuestos

CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES

1. La microbiota humana esta constituida por bacterias, hongos, archeas y virus.

2. El microbioma humano es equivalente a aproximadamente 150 veces el genoma humano.
3. El establecimiento de la microbiota intestinal comienza al nacer y se consigue alrededor de los 3 primeros
años de vida.
4. La composición de la microbiota es única para cada individuo, aunque puedan desempeñar una función
similar.
5. La composición de la microbiota intestinal puede clasificarse en tres enterotipos en función de la abundancia
de tres géneros bacterianos: Bacteroides, Prevotella y Ruminococcus.
6. La microbiota desempeña un papel fundamental en la fisiología del huésped.
7. La composición de la microbiota puede verse alterada por diversos factores: exposición a antibióticos, la dieta,
la edad o fisiología del hospedador (fondo genético).
8.