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Carrera:
Ingeniería Bioquímica
1.INTRODUCCIÓN
La grasa es un componente esencial de los alimentos y los piensos, que influye en su valor
nutricional, su sabor y su conservación. El análisis del contenido de grasa permite determinar
la calidad y el precio de los productos alimenticios y forrajeros, así como el impacto
ambiental de las aguas residuales que contienen grasa. La obtención de contenido de grasas
es una técnica analítica que permite determinar la cantidad de lípidos presentes en una
muestra. Los lípidos son biomoléculas orgánicas que se caracterizan por ser insolubles en
agua y solubles en disolventes orgánicos. Los lípidos cumplen diversas funciones biológicas,
como ser componentes estructurales de las membranas celulares, reservar energía, regular el
metabolismo, transportar vitaminas liposolubles, etc. El contenido de grasas es un parámetro
importante para evaluar la calidad y el valor nutricional de los alimentos, así como para
controlar su procesamiento y conservación.
El análisis de grasas se realiza por el método Soxhlet, una técnica clásica que se utiliza en
los laboratorios de alimentos para determinar el contenido de grasa en una muestra. Se basa
en la propiedad de la grasa de ser soluble en disolventes orgánicos, como el éter o el hexano.
El método consiste en extraer la grasa de la muestra con un disolvente en un aparato de
Soxhlet, que permite la recirculación del disolvente a través de la muestra. Una vez finalizada
la extracción, se evapora el disolvente y se pesa el residuo graso que queda en un matraz. El
porcentaje de grasa se calcula por diferencia entre el peso inicial y el final de la muestra. Este
método se denomina gravimétrico, porque se basa en la medida del peso de la sustancia que
se quiere cuantificar.
2. OBJETIVO
Materiales Reactivos
Tubo refrigerante 1 n-Hexano o Éter de petróleo
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Tubo extractor tipo Soxhlet
1 Agua
(sifón)
Matraz de bola 1 Muestra seca
Algodón 1
Manguera industrial blanca ½
130 cm
pulgada
Dedal 1
Pinzas metálicas 1
Papel filtro 1
Adaptador de expansión de vidrio 2
Perlas de vidrio 5
Cinta de papel 1
Soporte universal 1
Pinzas para soporte universal 2
Kit básico de destilación 1
4. EQUIPOS E INSTRUMENTOS
Equipo de laboratorio Equipo de protección personal
Extractor Soxhlet Bata de laboratorio
Desecador Guantes de látex
Horno de secado Cubrebocas
Balanza analítica Gafas de protección
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• Realizar la extracción en una campana de extracción de humos para garantizar una
ventilación adecuada. Esto ayuda a evitar la inhalación de vapores nocivos y a
mantener el aire del laboratorio limpio.
• Manipular todos los reactivos y disolventes con cuidado. Asegúrese de conocer las
propiedades y riesgos asociados con los productos químicos utilizados en el
procedimiento.
• Controlar y ajustar adecuadamente las temperaturas del sistema Soxhlet para evitar
posibles riesgos de sobrecalentamiento o ignición de los disolventes utilizados.
• Utilizar los disolventes inflamables con precaución.
• Conocer la ubicación y el uso de los equipos de primeros auxilios en el laboratorio.
Sepa cómo manejar situaciones de emergencia, como derrames de productos
químicos o lesiones.
• Etiquetar adecuadamente todas las sustancias utilizadas durante la prueba. Esto
ayudará a evitar la confusión y reduce el riesgo de errores.
6. METODOLOGÍA
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2) En el sifón colocar el dedal con la muestra.
3) Armar el equipo de extracción Soxhlet (NOTA: *no olvidar agregar las perlas de vidrio,
ya que ayudan a mejorar la agitación al moverse dentro del matraz de bola, asegurando un
contacto más efectivo entre el solvente y la muestra).
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4) Desde la parte de arriba, agregar suficiente cantidad de n- Hexano para llenar dos veces y
media la cámara de extracción (el n-hexano cae a través del tubo de sifón hasta llegar al
matraz de bola). Luego tapar la parte de arriba del refrigerante con algodón para evitar que
el n-hexano escape.
5) Dejar correr la muestra durante 3 horas con un reflujo de 5 o 6 gotas por segundo (aprox.
16-20) para luego apagar el equipo. NOTA: *es importante regular y vigilar la temperatura
para que el n-Hexano no se evapore, ya que podría ocasionar accidentes.
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Figura 5 a) Corrida de la muestra a goteo constante por aprox. 3 horas y b) regulación de la temperatura para evitar la
evaporacion del n-hexano.
7) Luego, secar el residuo del matraz en una estufa a 100° C durante 30 minutos.
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9) Finalmente, pesar el matraz y con los resultados obtenidos, calcular el porcentaje de grasa.
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7. INTEGRACIÓN DE RESULTADOS
(𝑃1 − 𝑃2 )
% 𝑑𝑒 𝑔𝑟𝑎𝑠𝑎𝑠 = ∗ 100
𝑃
Donde P1 es el peso del matraz con el extracto etéreo o residuo de grasa de la muestra, P2 el
peso constante del matraz vacío y P el peso (en gr) de la muestra empleada. El valor de grasa
obtenida corresponde al % G en el 100% de la materia seca, por lo que en aquellos alimentos
que se consumen en fresco los valores deben ser expresados en peso fresco realizando la
corrección correspondiente con él % de humedad.
• El n-hexano usado emite vapores que pueden ser inhalados durante la prueba de
grasas por Soxhlet. La inhalación prolongada o en concentraciones elevadas puede
causar mareos, dolor de cabeza, náuseas, y en casos más graves, daño neurológico.
Es conocido por su capacidad para causar daño al sistema nervioso. La exposición
crónica puede resultar en neuropatía periférica, caracterizada por entumecimiento,
debilidad y dolor en las extremidades.
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• El éter de petróleo es altamente inflamable. Las mezclas de vapores de éter de
petróleo y aire pueden ser explosivas. Se deben tomar precauciones para evitar la
ignición, como trabajar en áreas bien ventiladas y lejos de fuentes de ignición.
10. CONCLUSIÓN
La determinación de grasas por el método Soxhlet es una técnica de extracción que permite
separar los componentes lipídicos de una muestra sólida. El principio de este método se basa
en el uso de un disolvente orgánico, generalmente éter de petróleo o éter etílico, que disuelve
las grasas presentes en la muestra y las arrastra hacia un recipiente colector. El disolvente se
recicla mediante un proceso de destilación y condensación, lo que permite una extracción
continua y eficiente.
El método Soxhlet tiene varias ventajas, como la simplicidad del montaje, la rapidez del
proceso y la posibilidad de analizar varias muestras simultáneamente. Sin embargo, también
presenta algunas limitaciones, como el riesgo de inflamabilidad y toxicidad de los
disolventes, la pérdida de compuestos volátiles y la alteración de algunos componentes
lipídicos por efecto del calor. Por lo tanto, es importante seleccionar el disolvente adecuado
para cada tipo de muestra y controlar las condiciones de temperatura y tiempo de extracción
para minimizar las limitaciones del método. A pesar de sus limitaciones, el método Soxhlet
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es un método útil para la determinación de grasas en una amplia variedad de muestras, como
alimentos, piensos, productos farmacéuticos y productos químicos. Es importante que como
estudiante de ingeniería bioquímica se logre dominar este método debido a su aplicabilidad
en la industria.
11. REFERENCIAS
Condori, A. I., Inés, F., Giacomino, M. S., Pellegrino, N., Slobodianik, N., y Feliu, M. S.
(2022). Utilidad de la determinación del perfil de ácidos grasos. Acta Bioquimica
Clinica Latinoamericana, 56(4), 514–520.
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?pid=S032529572022000400514&script=sci_ab
stract&tlng=en
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