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INTEGRANTES:
Grupo 2
Chacón Aguilar Candy
López Briceño Marcela Sofía
Macharé Coveñas Jesús David
Mora Rodríguez Victoria Sara
Rivera Torres Angie Brenda
Rivera Fernández Edison Alan
2020
2
Tabla de Contenidos
Resumen ………………………………………………………………………………………4
Abstract………………………………………………………………………………………..5
1. Introducción………………………………………………………………………………...6
3. Antecedentes……………………………………………………………………………….8
4. Objetivos…………………………………………………………………………………..10
5. Justificación ….....................................................................................................................10
6. Marco teórico.......................................................................................................................11
7. Método.................................................................................................................................27
7.4. Universo, muestra del estudio y criterios de selección (inclusión y exclusión) …...........27
8. Procedimiento ….................................................................................................................29
9. Resultados............................................................................................................................31
10. Discusión...........................................................................................................................32
11. Conclusiones......................................................................................................................37
12. Recomendación..................................................................................................................38
14.Anexos.................................................................................................................................44
4
Resumen
insecticidas, ha tenido un auge en los últimos años como alternativas sostenibles, como por
hojas de Mentha piperita, y el extracto RM, una combinación proporcionada de hojas de ambas
minutos de aplicados los extractos, fueron porcentajes menores que el 55%. Por otro lado, se
obtuvieron porcentajes de eficacia dentro del 80% y 90% por parte de los 3 extractos mediante
aplicaciones consecutivas y a mayores rangos de tiempo (3, 4 y 5 días), demostrándose así una
acción residual e inhibitoria por parte de los componentes bioactivos de los extractos contra las
Abstract
The use of bioactive components from plants such as (ecto) parasiticides and insecticides, has
boomed in recent years as sustainable alternatives, for example in a problem of flea infestation
in domestic animals, such as cats and dogs. In the present study, the efficacy of the use of
extracts of the components of the leaves of Rosmarinus officinalis and Mentha piperita against
adults of Ctenocephalides felis in canids is evaluated, at the district of Santiago de Surco, Lima,
Peru. Three types of hydroalcoholic extracts were obtained: extract R, only from leaves of
Rosmarinus officinalis, extract M, only from leaves of Mentha piperita, and extract RM, a
proportionate combination of leaves from both plants. With a sample size of 18 canids between
1 and 4 years old, evaluated in domestic conditions, and with flea infestation problems. It was
obtained that the efficacy within 10 minutes of applying the extracts, were percentages less
than 55%. On the other hand, percentages of efficacy within 80% and 90% were obtained by
the 3 extracts through consecutive applications and at longer time ranges (3, 4 and 5 days), thus
demonstrating a residual and inhibitory action by the bioactive compounds of extracts, against
1. Introducción
Los ectoparásitos como las moscas, mosquitos, garrapatas y pulgas pueden ser
pueden ser trasmisibles a las personas (zoonosis). En el caso de las pulgas, estas tienen un
importante lugar como vectores de enfermedades en gran parte del mundo, como la bacteria
Rickettsia typhi, y según estudios este ectoparásito también puede servir de huésped
filarias caninas.
Las pulgas son ectoparásitos que afectan con mayor frecuencia a las mascotas del
hogar ya que presenta un ciclo, hábitos alimenticios y estructuras que han desarrollado para
felis, esta especie en particular se caracteriza por no ser muy específica en la elección de un
como silvestres. Siendo así que, esta especie es una de las principales plagas domésticas en
diversos ectoparasiticidas de composición sintética en las últimas décadas. Sin embargo, n los
últimos años está creciendo un interés en la investigación sobre el uso de plantas como
agentes naturales para la erradicación de ectoparásitos, como las pulgas. Los metabolitos
secundarios que producen las plantas durante sus ciclos metabólicos, parecen demostrar una
acción.
de otras propiedades. Por ello, en el presente estudio se tiene como objetivo evaluar la
que se alojan tanto en animales silvestres como domésticos y algunas veces en el ser humano.
observación. Sumado a esto las condiciones externas al animal, como humedad, temperatura
A pesar de su importancia desde el punto de vista social como sanitarios, existen muy pocos
los hogares a nivel nacional cuentan con los servicios básicos, siendo el 25.7% que no
cuentan con los servicios básicos. Muchas de estas familias que habitan en estas bajas
condiciones de higiene tienen mascotas en casa, en mayor medida el perro con un 74%
ectoparásitos como la pulga, por lo tanto, esto hace que el animal llegue a infectarse con
facilidad.
8
peruanos se encuentra en situación de pobreza, es decir, unos 20.5% de la población del país,
según el último informe del Instituto de Estadística e Informática (INEI). Para las personas
con bajos recursos económicos a veces resulta muy caro y por tanto casi imposible de ir a una
veterinaria por un tratamiento antiparasiticida de pulgas para su mascota y eso conlleva a que
la infestación se agrave y ocasione otras patologías que produce un mayor costo para su
recuperación.
3. Antecedentes
El ciclo de vida de ectoparásitos como las pulgas, hace de un difícil manejo de las
(2014) y Pfister y Armstrong (2016), en los últimos años, especialmente en la última década,
infestaciones de pulgas, que incluyen desde métodos orales hasta tópicos. En paralelo a esta
también debido a sus propiedades no contaminantes y de baja toxicidad para los organismos
no objetivo (Ntalli et al. 2019). Las infestaciones de ectoparásitos, como las pulgas,
especialmente en mamíferos domésticos como perros y gatos, atrae un gran interés por
investigar acerca de estos nuevos métodos naturales, sus modos de aplicación y el mecanismo
Ntalli et al. (2019), describe a especies de plantas como Ziziphora tenuiore, Myrtus
communis y Mentha piperita, de las cuales, sus aceites esenciales actuaron como agentes
repelentes contra pulgas Pulex irritans. Muhammed et al. (2017), demostró la eficacia de
et al. (2016) realizó un estudio en Brasil donde describe extractos de hojas (extractos no
polares: diluidos con n-hexano) de Schinus molle como agentes adulticidas eficaces de pulgas
planta contra las pulgas adultas, ni con las formas inmaduras. Por otro lado, Lambert et al.
realizada in vitro. Sin embargo, aún existen pocos estudios in vivo de la acción parasiticida
de métodos naturales. Fueron Moog et al. (2020), quienes evaluaron la eficacia parasiticida
pulgas de estas diversas especies de plantas: qué componentes actúan y cómo actúan. No
obstante, Ellse y Wall (2014) sugieren la acción de los diversos componentes de los aceites
esenciales presentes en estas plantas como los posibles parasiticidas de diversos artrópodos,
químicos de las hojas de Rosmarinus officinalis. Shaaya (1991), encontró la acción eficaz
como insecticida contra Rhyzopertha dominica, así como Ahmadi et al. (2007), contra
mono terpeno 1,8-cineol y al alcanfor, presente en los aceites esenciales de las hojas de
mentol, l-mentona, pulegona y mentofurano como los principales agentes de toxicidad; tal
como lo comprueban Rakjumar et al. (2019), usando los aceites esenciales de hojas de
10
Mentha piperita como insecticidas eficaces contra plagas de Sitophilus oryzae y Tribolium
castaneum.
Ante ello, este estudio se centrará en comprobar la acción parasiticida de los extractos
confinados en interiores, eliminando los factores y las fuentes externas de las pulgas.
4. Objetivos
domésticos.
- Determinar los porcentajes de eficacia de los extractos aplicados, luego de los días
5. Justificación
animales; ya que existen estudios como los de De Batista et al. (2016) y Lambert et al.
(2020), que han comprobado la acción de otros extractos y aceites esenciales de plantas,
perros, se puede deducir que las prevalencias de infestación por ectoparásitos son también
altas; así por ejemplo, en la ciudad de Lima se han registrado infestaciones por C. felis de
hasta 89%; por C. canis de hasta 11%. En Tumbes, por su lado se han registrado porcentajes
aún mayores: 100% para C. felis, 77.5% y para C.canis, 92% ( Huamán y Jara, 2015).
que estas pulgas Ctenocephalides felis, tienen la capacidad de ser vectores de enfermedades
como Rickettsiosis, Bartenellosis hacia humanos y los propios hospederos, y por tanto las
a los tradicionales para el control de pulgas es uno de los motivos fundamentales en esta
pueden suponer un costo económico alto en ciertos sectores de la población con recursos
6. Marco Teórico
Pulicidae) son insectos sin alas, aplanados lateralmente, que en su fase adulta tienen
infestar animales domésticos como perros y gatos en todo el mundo (Rust, 2017; Zurita et al.,
2016). De este género se han identificado 13 especies y 4 subespecies, de las cuales son las
especies Ctenocephalides felis y Ctenocephalides canis, las más estudiadas por diversos
obligado es la pulga más común que se encuentra en gatos y perros domésticos en todo el
mundo; son una plaga y además son la principal causa de dermatitis en animales domésticos,
12
son conocidos vectores de varios patógenos bacterianos zoonóticos, y pueden actuar como
huéspedes intermedios de céstodos zoonóticos que son parásitos comunes de perros, gatos y
Tabla 1
Reino: Animalia
Filo: Arthropoda
Clase: Insecta
Orden: Siphonaptera
Familia: Pulicidae
Género: Ctenocephalides
Especie: Ctenocephalides felis
Figura 1
Los insectos del orden siphonaptera se caracterizan porque sus patas son largas, y las
traseras están adaptadas para el salto, que puede ser de hasta 18 cm en dirección vertical y 33
13
cm en dirección horizontal (Lyon, 1997), además las coxas de todas sus patas son grandes
a C. canis sin embargo difiere porque su cabeza es casi dos veces más larga que alta a
Carece de ojos compuestos, aunque tienen un grupo de ocelos que les permite detectar
cambios de intensidad de luz (Gunn y Pitt, 2012), la cual tienden a evitar. Su aparato bucal
posee un labio y 5 palpos labiales diseñados para penetrar la piel y alimentarse de sangre del
Krenn y Aspöck, 2012). Presenta ctenidios genales y pronotales, un ctenidio genal compuesto
Ctenocephalides felis, el primer diente genal es casi tan largo o un poco corto en comparación
que este presenta el primer diente genal mucho más corto que el segundo diente genal. La
misma, además de presentar una cabeza más puntiaguda que las otras especies de su mismo
género. También se puede encontrar que esta especie posee 2 cerdas en el área metanotal
El ciclo de vida de Ctenocephalides felis, coincide con el de las pulgas del género
apareamiento y que pueda ocurrir la inseminación, por lo que la cantidad de alimento que
inseminación (Dean y Meola, 2002). Marchiondo et al. (2019) definen que la ovoposición
14
pueden ovopositar desde 11 a 46 huevos por día, siendo 2000 huevos los que pueden poner
en toda su vida. Los huevos de 0,5 mm de longitud son diminutos, blanquecinos, y ovales.
Los huevos caen al suelo, encontrándose preferiblemente en los lugares donde se alimenta y
descansa el hospedador. Para que los huevos puedan eclosionar y convertirse en larvas, se
necesitan temperaturas entre 23°C y 25 °C y pueden eclosionar entre 1 a 10 días. Las larvas
vermiformes, con aparato bucal masticador, blanquecinas y ciegas, llegan a medir entre 2 a 5
mm, y pasan la mayor parte del tiempo en parches junto restos fecales de sangre que eliminan
los adultos y huevos. Rust (2017), describe que dentro de la dieta de las larvas se debe incluir
los restos fecales de sangre y también huevos de las pulgas, para que la larva pueda llegar a
convertirse en adulto. Lawrence y Foil (2000), describen este detalle de alimentación de las
los nutrientes específicos, la humedad relativa alta del medio ambiente es fundamental para el
desarrollo: las larvas absorben agua activamente cuando la humedad relativa es mayor al
experimentan 3 etapas larvarias y pueden pasar a la siguiente fase. Las larvas son muy
sensibles a que temperaturas superiores a 40°C y la exposición a la luz solar pueden impedir
inmediato una reorganización interna comenzando a tejer el capullo viscoso para pasar a
que le confieren una protección adicional. Dryden y Smith (1994), encontraron que las pulgas
hembras pupan dentro de 32 horas, mientras que las pulgas macho pupan dentro de 44 horas,
hembras se logran convertir en adultas en 6 días más rápido que los machos. En general
dentro del capullo, C. felis se desarrolla en adulto desde 7 a 19 días. La pupa resiste periodos
15
de desecación, con hasta un 2% de humedad relativa. Las pulgas adultas emergen del capullo
por estimulaciones físicas como vibraciones, presión física, dióxido de carbono y calor. Las
pulgas de gato adultas comienzan a emerger tan pronto como de 3 a 5 días después de la
relativa; las pulgas hembras adultas generalmente emergen de los capullos 15 días antes que
entre 140 a 190, el tiempo dependerá de las condiciones de temperatura y humedad; además
Figura 2
Nota. En 1, los huevos son ovipositados por la hembra en el ambiente; en 2, los huevos
eclosionan a larvas; en 3, las larvas se transforman en pupas; en 4, los adultos emergen de las
pupas, además de que esta fase es la fase diagnóstica (d). Para 5, es la fase infectiva (i) a un
hospedador de sangre caliente. Tomado de General Flea Life Cycle, por DPDx - Laboratory
Esta especie tiene una baja especificidad de hospedador, por lo que cuenta con una amplia de
hospedadores que incluyen gatos, perros, ratas, ratones, terneros, cabras y corderos. Según
Yiguan et al. (2016), cuando C. felis entra en contacto con un hospedador, es probable que la
relación ectoparasitaria con el hospedador sea persistente, donde un 85% de las hembras y 58%
demostrado que una vez que la especie llega a la fase adulta, desarrolla un mecanismo sensorio-
olfatorio para localizar y escoger un hospedero. Además, también pueden detectar huéspedes
mediante señales visuales y térmicas, por dióxido de carbono exhalado por el huésped y hasta
Ambos sexos de C. felis requieren una dieta de sangre para sobrevivir y completar el
ciclo de vida. Para los machos, esta dieta es también es esencial para iniciar el
sangre y producir 0,77 mg de heces por día, esto se correlaciona con la necesidad de fuentes
suficientes de sangre para la ovoposición, produciendo así hasta 1745 huevos durante 50 días.
Las heces producidas a partir de la sangre ingerida también tienen un rol fundamental en el
desarrollo de las diferentes fases del ciclo biológico, los nutrientes que poseen son suficientes
para que sirvan de alimento a las larvas y más del 79% de ellas puedan llegar a la fase de
adulto. Además, el huésped tiene un gran efecto sobre el volumen de sangre extraído, la tasa
para otros, ya sea por contacto directo o, más frecuentemente, por contaminación del medio
La prevalencia de C. felis es estacional, pero aparece durante todo el año (Rust, 2017).
desarrollo de la pulga son húmedos y no expuestos a la luz solar intensa ni directa. Sin
humedad, como pueden ser el uso de calefacción o se mantiene el nivel de humedad a más
del 50%.
Una vez que la larva ha alcanzado la fase de pupa, la pulga pre-emergente dentro del
pupario está muy bien protegida frente a los cambios ambientales, incluyendo tratamientos
insecticidas de los locales o de la cama del animal; por tanto, puede sobrevivir durante
períodos largos de tiempo (más de seis meses). Esta fase, conocida con el nombre de adulto
Dependiendo de las condiciones ambientales, las pulgas pueden sobrevivir en esta fase
durante meses en ausencia de cualquier hospedador. La salida de la pulga adulta del pupario
o presión (por ejemplo, un hospedador caminando sobre una zona infestada) y calor (como el
que desprende el cuerpo del animal). Al acercarse el hospedador la pulga sale rápidamente
del pupario, saltando sobre él. Las infestaciones por pulgas que no sean C. felis o C. canis
normalmente indican contacto cercano con otro ambiente distinto al del hospedador.
exponerse a la tierra, factores como la temperatura; hacen que estas pulgas puedan
proliferarse de una forma rapida. Si esta infestación no se trata a tiempo puede causar ciertas
presenta síntomas como picazón, inflamación, prurito o acantosis. De acuerdo con Carlotti
18
(2001) y Muller y Kirk (1995) opinan que, debido a la pérdida de sangre a causa de la
alimentación de la pulga, los animales parasitados pueden presentar anemia y en casos muy
Para evitar estas consecuencias se debe realizar una inspección cuidadosa, revisando
la base del pelaje o bien empleando un peine especial para pulgas para su observación o, por
presencia de pulgas o del excremento de esta es mejor llevar al animal al veterinario para que
pulgas. Por un lado se disponen de adulticidas; aquellos que matan las formas adultas que son
seguros para el animal y tienen una duración elevada, mayor de un mes. Por otro, actualmente
se disponen de productos que impiden que las formas inmaduras (huevos, larvas y pupas)
evolucionen al estadio de adulto, siendo además productos muy seguros desde el punto de
vista de su toxicidad. En el control de las pulgas debemos usar tanto un adulticida como un
De acuerdo a expertos veterinarios como Garcia & Fernandez (2010) sólo se requerirá
apropiado para el desarrollo del ciclo evolutivo de las pulgas. Sin embargo, incluso en
de los parásitos. Por ello, siempre es aconsejable realizar los dos tipos de actuación a la vez
(Bayer, 2003). Actualmente se dispone en el mercado de dos productos que aseguran una
larga duración, mayor al mes, sobre el animal; el fipronilo y el imidacloprid. Según Bayer
(2006) menciona que también existen productos comerciales que presentan eficacia contra las
pulgas como el Asuntol Jabón que es un ectoparasiticida uso tópico; Asuntol Perros al 30%
que es tratado como un adulticida y extermina las formas inmaduras como los huevos; y el
19
Bolfo collar que sirve como un collar anti pulgas. Las pipetas antipulgas se aplican
directamente sobre la piel del perro en uno o varios puntos y, con una sola aplicación,
puede administrar al animal mensualmente Lufenurón, que actúa de manera similar a los
con una frecuencia variable según los productos usados y el riesgo de llegada de pulgas desde
el exterior, se combinará la limpieza con los adulticidas y los tratamientos de las formas
inmaduras. Además, el acceso del animal al exterior requerirá la adopción de otras medidas
“Romero”; es una planta mediterránea que se encuentra generalmente en forma silvestre con
crecimiento cercano a las costas (Alonso, 2004) y se caracteriza por presentar poca exigencia
para cultivarse. Pertenece a la familia Lamiaceae, es una planta arbustiva perenne de hojas
estrechas, agudas y pequeñas, y tallos leñosos y ramificados. Begum et al. (2013) mencionan
lineales a lineal-lanceoladas, con bordes curvos, parte superior y granulosa verde oscura y
parte inferior de la página tomentosas, con nervadura central prominente y muy característica
Tabla 2
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Lamiales
Familia: Lamiaceae (Labiatae)
Género: Rosmarinus L.
Especie: officinalis
21
agrupado de manera general por diversos autores en ácidos fenólicos, como el ácido
aceite esencial, ácidos triterpénicos y alcoholes triterpénicos (Caribe & Campos 1991). Sus
aceites esenciales han sido muy estudiados entre los cuales siendo específicos para la hoja
está presente el ácido carnósico que se caracteriza por ser inestable, su degradación se da por
Robledo y L. Muñoz. 2009). Los principales componentes del aceite esencial de romero son
(2,5 –12%), β-pineno (2,0–9,0%) y limoneno (1,5–5,0%) en proporciones que varían según el
Figura 3
Según Martinez, M.S., L.P. Naranjo & N.R. Jose.(2004), ha realizado estudios in vivo
e in vitro para determinar los efectos del aceite esencial de romero con el fin de demostrar sus
principios bioactivos. Los resultados de los estudios muestran que los compuestos activos en
es una de las plantas con propiedades medicinales más utilizadas por el hombre actual.
Pertenece a la familia de las Lamiaceas y se conoce como toronjil de menta, menta inglesa,
entre otros. Es una hierba aromática con el tallo ramoso y flores pequeñas en verticilos
blancos, que puede alcanzar una altura de 80 cm que nace de un rizoma subterráneo del que
Tabla 3
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Lamiales
Familia: Lamiaceae
Género: Mentha L.
Especie: piperita
23
Figura 4
química, son los compuestos poli fenólicos los más abundantes, y según sus subgrupos, esta
especie posee hasta un 53% de flavonoides, 42% de ácidos fenólicos y un 2.5% de lignanos y
los ácidos fenólicos, tenemos que puede poseer hasta un 60 a 80% de ácido cafeico y sus
sesquiterpeno (1,6 a 1,8%) (Mahendran y Rahman, 2020). Los principales usos de esta planta
gracias a asu compuestos fitoquímicos, son como inhalante para la congestión respiratoria;
para la tos bronquios y bronquitis. También es utilizado para tratar las molestias digestivas;
valoró una decocción de hojas de la planta y demostró que presenta un efecto vermífugo en
dependencia de la dosis.
dependerá de los componentes que se requieren extraer. Se debe asegurar que durante el
vegetal. Azmir et al. (2011) y Singh (2008) mencionan que los métodos convencionales como
otros, son eficaces para la extracción de los componentes bioactivos y basan su poder de
extracción según los disolventes que se utilicen, y la aplicación de calor y/o agitación en el
proceso. Asimismo, Azmir et al. (2011) describen los solventes y los metabolitos activos que
Tabla 4
Alcaloides Flavonas
Polifenoles
planta para liberar los fitoquímicos solubles en el disolvente (Azwanida, 2015; Singh, 2008).
tiempo de reposo que es mucho más corto, además de que puede realizarse en frío o caliente.
un corto periodo de tiempo. Azwanida (2015) menciona que, son los disolventes los que
fórmulas de eficacia. Una de ellas es la que Abbot (1925), determinó según la diferencia entre
los organismos a eliminar vivos del grupo no tratado y los organismos a eliminar vivos del
grupo tratado da el porcentaje original de los organismos eliminados por el tratamiento; esta
diferencia se divide por la cantidad de los organismos a eliminar vivos del grupo control
Figura 5
muchos documentos de la literatura que determinan esta fórmula de eficacia para estudios
7. Método
Nuestro estudio se basa en un diseño experimental que cuenta con un grupo control de
prospectivo, puesto que el estudio y análisis de datos inician a la par de las aplicaciones de
los extractos en los grupos de experimentales y de control; un estudio transversal, puesto que
7.3. Variables
familiaris, que viven en hogares del distrito de Santiago de Surco, en Lima, Perú. La muestra
los 5 restantes al extracto RM. Los criterios de inclusión son: a) Canes domésticos que vivan
en hogares del distrito de Santiago de Surco, b) Canes con problemas de ectoparásitos como
Canes con problemas de salud y condiciones especiales, b) Canes que compartieran hogar
Tabla 5
R M RM CTRL
Sexo
Hembra 4 2 2 0
Macho 1 3 3 3
Edad
1-<=2 2 2 0 3
2<-<=4 2 1 3 0
4< 1 2 2 0
Nota. R: Extracto de Romero, M: Extracto de Menta, RM: Extracto de Romero y Menta, CTRL:
Grupo Control.
Ctenocephalides felis obtenidos en 5 zonas del animal (Z01, Zona Dorsal; Z02, Axila
derecha; Z03, Axila Izquierda; Z04, Zona inguinal; Z05, Zona base de la cola), y que será
registrada luego del tiempo establecido (10 minutos, 3 días, 4 días, 5 días) de cada aplicación
7.6. Instrumento
Para realizar el conteo de las pulgas se utilizaron peines, lupas, pinzas, laptops con
acceso a internet; 6 elementos de cada uno, y 3 balanzas óptica. El peine que se utilizó nos
facilitó la extracción de la muestra, la pulga; y separación del pelaje del animal, las pinzas se
utilizaron para la toma de muestra en caso se dificulte con el peine o mano; y las lupas, para
tener una mejor visualización de las pulgas. La balanza óptica se utilizó para el pesado de las
hojas de Menta y Romero en gramos, para evitar variaciones en la preparación del extracto.
8. Procedimiento
compradas en el mercado “Numero 2 Jorge Chavez de Surco”, de las cuales se usaron solo
Se prepararon 3 extractos: el primer extracto solo con hojas de romero (R), el segundo
extracto solo con hojas de menta (M), y el tercer extracto con hojas de Rosmarinus
Para el extracto de romero (R) se pesaron 5 g de hojas. Se toma como referencia que,
Espitia (2011), en 7.8 uL/L de los aceites esenciales del romero, es suficiente para exterminar
procedió a triturar mecánicamente hasta obtener el material vegetal molido, luego se remojó y
mezcló con 100 ml de alcohol al 5%, lo necesario para mantener los metabolitos activos, y
luego se aplicó al animal. Teniendo como una concentración aproximada del extracto R en
% como mentol, mentona; flavonoides, ácidos fenólicos, taninos, lactona triterpénica y otras
Según Espitia (2011), en 25,8 uL de los aceites esenciales de la menta, es suficiente para
luego se remojó y mezcló con 100 ml de alcohol al 5%, lo necesario para mantener los
mecánicamente hasta obtener el material vegetal molido, luego se remojó y mezcló con 100
ml de alcohol al 5%, lo necesario para mantener los metabolitos activos, y luego se aplicó al
animal. Para el tratamiento al grupo control, solo se utilizó la solución de 100 ml de alcohol
secundarios.
Cada animal se encontró aislado en un espacio predeterminado solo para ese animal,
en el cual se encargó a cada dueño que se realice la desinfección inmediata cada día para
evitar una reinfección utilizando los desinfectantes adecuados como el cloro a 50% por sus
efectos ovicidas (Albaine et al, 2002). De los 15 perros del grupo experimental: 5 perros
fueron sometidos al tratamiento del extracto RM, 5 perros fueron sometidos a la aplicación
del extracto R, y 5 perros sometidos a la aplicación del extracto M. Los 3 perros del grupo
Fueron 3 aplicaciones para cada individuo, cada aplicación en los días: día 0, día 3 y día 7.
Para la aplicación de los tratamientos, se abrió el pelaje del animal y se iba aplicando sobre
todo el cuerpo.
Para los conteos se examinaron visualmente 5 zonas del animal: Z01, Zona Dorsal;
Z02, Axila derecha; Z03, Axila Izquierda; Z04, Zona inguinal y Z05, Zona base de la cola. Se
pasó un peine muy fino abriendo el pelaje de animal para contar las pulgas: cada pulga
cada zona por el lapso de 1 minuto y medio. Luego, se sumaron estos ectoparásitos por zona,
y se obtuvo la suma o población total de cada conteo en cada individuo. El primer conteo se
primer conteo se realizó luego de los 3 días de la primera aplicación (Día 3), el segundo
conteo luego de los 4 días de la segunda aplicación (Día 7), y finalmente, el tercer conteo
luego de los 5 días de la tercera y última aplicación (Día 12). Para determinar la eficacia en
Para evaluar la eficacia de los extractos se usó la fórmula propuesta por Abbott, 1987,
donde: Eficacia (%) = 100 x (pC – pE)/pC. Donde pC es el promedio aritmético de las pulgas
encontradas en el conteo de cada individuo del grupo control de determinado día o minutos.
Y pE, es el promedio aritmético de las pulgas encontradas en el conteo de cada individuo del
(diferencias significativas) de los conteos de pulgas vivas entre los grupos de los tratamientos
experimentales y el grupo control. Se utilizó el programa de SPSS V26, los datos fueron
32
9. Resultados
Al inicio del estudio, en el día 0, los cánidos de los grupos experimentales poseían: el
grupo del extracto R, una media de 27.40 ± 14.57 pulgas por perro; el grupo del extracto M,
con una media de 25.40 ± 8.20 pulgas por perro; y el grupo del extracto RM, una media de
22.40 ± 3.71 pulgas por perro. Para el grupo control, 16.67 ± 0.58 pulgas por perro, fue la
significativas (p=0.032, p< 0.05) en el día 0 entre los grupos de los tratamientos y el grupo
control.
poblaciones medias de pulgas a través de los días. Siendo así que para el día 12 se encontró
que la media fue 4.80 ± 4.66 pulgas por perro, 5.40 ± 5.46 pulgas por perro y 2.00 ± 1.58
experimental RM, respectivamente. Todo lo contrario, se observó para los cánidos del grupo
control, donde para el día 12 pasó a tener una media de 31 ± 1.53 pulgas por can. El análisis
p<0.05) entre los grupos experimentales y control, al igual que en el día 7 (p=0.003, p<0.05)
en el conteo de cada individuo del grupo control de determinado día o minutos; y el promedio
día o minutos.
33
Tabla 6
X S
D0 16.66666667 0.58
D3 21 1.00
D7 25 1.73
estándar.
análisis estadístico de los conteos de los grupos experimentales y control a los 10 minutos de
la aplicación dio como resultado diferencias significativas entre los grupos experimentales y
Tabla 7
Medias aritméticas de los conteos de pulgas y los porcentajes de eficacia a los 10 minutos de
la aplicación.
10 min 12.40 7.19 32.77 12.00 4.34 34.94 8.47 2.02 54.10 18.44 1.07
Nota. x,es promedio de los todos los conteos de pulgas en 10 minutos de todos los individuos
cada tratamiento (Extracto R : Romero, Extracto M: Menta, Extracto RM: Romero y menta) y
Los porcentajes de eficacia para los 3 grupos experimentales encontrados en los días 3, 7 y 12,
fueron creciendo conforme el paso de los días. Así tenemos que el grupo R obtuvo un
En el grupo M, en el día 3 se obtuvo 19.05%, y en el día 12, 82.95% de eficacia. Para el grupo
Tabla 8
Medias aritméticas de los conteos de pulgas y los porcentajes de eficacia a los días de la
D3 18.20 9.98 13.33 17.00 4.30 19.05 12.20 3.19 41.90 21 1.00
D7 12.80 7.05 48.80 11.60 4.28 53.60 8.00 3.94 68.00 25 1.73
D12 4.80 4.66 84.84 5.40 5.46 82.95 2.00 1.58 93.68 31.66 1.53
Nota. X, es promedio de los todos los conteos de pulgas en el D0, D3, D7 o D12 de todos los
10. Discusiones
A lo largo del paso de los días de la experimentación, se observó que mientras que en
M y RM. Para los resultados de conteo según los días luego de la aplicación: día 3, día 7 y día
35
12, se tiene un marcado decrecimiento en las poblaciones medias de las pulgas en los canes
de los grupos. Así se puede observar que el grupo experimental RM, es el que experimenta un
mayor decrecimiento en el número promedio de pulgas desde el día 0 hasta el día 12, que se
correlaciona con la tendencia de aumento de sus porcentajes de eficacia en los diferentes días.
Marchiondo et al. (2007) establece 4 niveles de infestación siendo: nivel 0, ninguna pulga
pulgas contabilizadas. De esta manera, en los presentes resultados se tiene de manera inicial
en los grupos tratamiento y control, los canes se encontraban infestados entre un nivel alto y
metabolitos secundarios como los agentes parasiticidas. Olah et al. (2017), describe como los
presentes en las hojas de la planta, y Kumar et al. (2011) describe una serie de compuestos
limoneno, los cuales afectan los procesos bioquímicos, que alteran específicamente el
equilibrio endocrinológico de los insectos. Ghavami et al. (2017), encontró los componentes
terpénicos como 1,8 cineol, alfa pineno, canfor, timol, limoneno y geraniol como los
principales actores en eficacia como repelentes contra Pulex irrtitans, de donde se puede
hipotetizar que estos mismos componentes presentes en las hojas de las plantas del presente
estudio actuaron de manera similar contra las pulgas. Rajkummar et al. (2019), describe la
castaneum, siendo este un posible modo de acción de los componentes terpénicos que se
podrían haber extraído en el medio hidroalcohólico del presente estudio, al entrar en contacto
ovoposición y desarrollo.
porcentaje (32,77%) de eficacia que los extractos M (34,94%), fue el extracto RM el cual
presentó una mayor eficacia con un 54.10%. Sin embargo son porcentajes de eficacia
mayores a los presentados a los 3 días de aplicación de los extractos, demostrando que al
realizar los conteos dentro de un periodo muy corto (10 minutos) luego de la aplicación, la
disminución de las pulgas también se habría podido deber a otros factores distintos a los de la
contra los diferentes estadíos del ácaro Tetranychus urticae en condiciones in vitro, en ese
estudio la eficacia de mortalidad de las ninfas aumentaba con el paso de los días: en el día 6
del estudio se observó hasta un porcentaje de mortalidad de 62,2%, además de que la mayor
concentración poseía una mayor eficacia. Batista et al. (2013), encontró para extractos
(95%) que a las 24 horas (45%) contra C. felis en condiciones in vitro. Estos resultados
obtenidos por estos autores, puede indicar que a mayores concentraciones de los extractos, se
observará una eficacia mayor, y además de que existe una acción residual de los extractos
sobre las pulgas que permite que a mayores rangos de días o tiempo de aplicados los
37
extractos, se observe un mayor porcentaje de eficacia, tal como en este estudio se obtuvo para
todos los extractos que en la tercera aplicación, y luego de 5 días de la misma, se tuviera los
dos plantas.
días luego de la aplicación, en todos los extractos, estaría ligado a un modo persistente
residual de los componentes de los extractos sobre el pelaje y la piel del animal. Tal como lo
señala Osbrink y Rust (1985), y Takken y Knols (2010), existe un mecanismo sensorial
olfatorio que utilizan los insectos hematófagos, como las pulgas, para identificar a su
hospedero e infestarlo, este mecanismo aun no ha sido dilucidado del todo, pero se puede
hipotetizar que mediante la aplicación de los extractos, los componentes activos que contiene
en la piel y el pelaje del animal y actúan como inhibidores del olor propio del animal
hospedero que las pulgas identificaban, y que luego de la aplicación, este reconocimiento
olfatorio disminuye o desaparece. Cruz et al. (2020), formula una hipótesis similar para la
11. Conclusiones
siendo en el día 12 donde se obtuvieron los mayores porcentajes de eficacia entre un 80% y
38
90%, definiendo su eficacia comprobada en estos rangos de tiempo. Este resultado presenta
que existe un modo de acción residual por parte de los componentes terpénicos, flavonoides y
polifenoles, sobre la piel y pelaje del animal que aumenta con el tiempo y con las
aplicaciones consecutivas de los extractos. Dentro de las evaluaciones de los tres extractos,
fue el extracto RM, el que presentó mayores porcentajes de eficacia en comparación a los
disminución de las poblaciones de pulgas en los cánidos. Pese a que habría que realizar más
estudios bioquímicos del mecanismo de acción de los compuestos, y otros que profundicen en
sus efectos y formulación, estos resultados nos indican que dichos extractos podrían incluirse
como una herramienta más para el control de pulgas en las poblaciones de perros, intentando
12. Recomendaciones
Los resultados obtenidos muestran que al emplear este extracto de plantas se demostró
que a mayor rango de días se obtuvo una mejor eficacia, sin embargo, se recomienda realizar
empleando los instrumentos necesarios para que estos metabolitos puedan preservarse y
presenta el animal, ya que cuanto más pelaje presente, tendrá mayor cantidad de pulgas y será
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14. Anexos
Anexo 1
Fichas de conteo de las pulgas vivas encontradas luego del tiempo establecido apara cada
Anexo 2
Anexo 3
Cuadro de resultados de conteo del grupo del tratamiento con extracto R, en días de
aplicación.
ANIMAL 1R ARIA
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 10 6 6 7 8 CD0-1R 37
Conteo D3 8 5 7 6 4 CD3-1R 30
Conteo D7 7 4 6 5 2 CD7-1R 24
CD12-
Conteo D12 (Final) 4 3 2 2 2 1R 13
ANIMAL 2R NOMBRE: Tita
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 4 3 1 2 3 CD0-2R 13
Conteo D3 3 1 1 0 2 CD3-2R 7
Conteo D7 3 2 0 1 0 CD7-2R 6
CD12-
Conteo D12 (Final) 0 1 0 1 0 2R 2
ANIMAL 3R Nombre: Lucky
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 5 3 6 4 2 CD0-3R 20
Conteo D3 4 3 4 3 2 CD3-3R 16
Conteo D7 3 2 2 2 1 CD7-3R 10
CD12-
Conteo D12 (Final) 0 1 0 1 0 3R 2
ANIMAL 4R Frescia
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 10 6 10 12 10 CD0-4R 48
Conteo D3 8 5 3 5 6 CD3-4R 27
Conteo D7 4 3 2 3 3 CD7-4R 15
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 1 1 0 1 4R 4
ANIMAL 5R STAR
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05
Conteo D0 (Inicial) 4 3 3 4 5 CD0-5R 19
Conteo D3 3 2 2 2 2 CD3-5R 11
Conteo D7 2 2 1 2 2 CD7-5R 9
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 1 0 0 1 5R 3
49
Anexo 4
Cuadro de resultados de conteo del grupo del tratamiento con extracto M, en días de
aplicación.
ANIMAL 1M OREO
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 8 6 6 8 9 CD0-1M 37
Conteo D3 4 4 5 6 3 CD3-1M 22
Conteo D7 6 3 2 3 4 CD7-1M 18
CD12-
Conteo D12 (Final) 5 1 3 4 2 1M 15
ANIMAL 2M Nombre: Rufo
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 5 6 5 5 4 CD0-2M 25
Conteo D3 3 5 4 5 3 CD3-2M 20
Conteo D7 3 4 3 3 1 CD7-2M 14
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 2 0 1 0 2M 4
ANIMAL 3M Nombre: Alana
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 2 1 3 5 3 CD0-3M 14
Conteo D3 2 1 3 3 2 CD3-3M 11
Conteo D7 2 1 2 2 1 CD7-3M 8
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 0 0 1 0 3M 2
ANIMAL 4M Federico
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 6 5 7 5 4 CD0-4M 27
Conteo D3 4 4 3 3 3 CD3-4M 17
Conteo D7 2 2 1 3 1 CD7-4M 9
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 1 0 0 0 4M 2
ANIMAL 5M PELUSA
Z01 Z02 Z03 Z04 Z05 TOTAL
Conteo D0 (Inicial) 6 3 5 6 4 CD0-5M 24
Conteo D3 5 1 3 3 3 CD3-5M 15
Conteo D7 2 1 2 2 2 CD7-5M 9
CD12-
Conteo D12 (Final) 1 1 0 1 1 5M 4
50
Anexo 5
Cuadro de resultados de conteo del grupo del tratamiento con extracto RM, en días de
aplicación.
CD3-
Conteo D3 1 3 2 2 2 5RM 10
CD7-
Conteo D7 1 2 2 0 2 5RM 7
Conteo D12 CD12-
(Final) 0 2 1 0 1 5RM 4
52
Anexo 6
Cuadro de resultados de conteo del grupo control CTRL, en días de aplicación.
Anexo 7
Cuadro de datos con medidas estadísticas descriptivas de los conteos de todos los grupos: media aritmética, varianza, y desviación estándar.
D0 D3 D7 D12
R M RM CTRL R M RM CTRL R M RM CTRL R M RM CTRL
37 37 28 17 30 22 13 20 24 18 12 27 13 15 3 33
13 25 23 16 7 20 16 22 6 14 11 24 2 4 2 32
20 14 19 17 16 11 14 21 10 8 8 24 2 2 1 30
48 27 23 27 17 8 15 9 2 4 2 0
19 24 19 11 15 10 9 9 7 3 4 4
Media 27.40 25.40 22.40 16.67 18.20 17.00 12.20 21.00 12.80 11.60 8.00 25.00 4.80 5.40 2.00 31.67
S 14.57 8.20 3.71 0.58 9.98 4.30 3.19 1.00 7.05 4.28 3.94 1.73 4.66 5.46 1.58 1.53
S2 212.30 67.30 13.80 0.33 99.70 18.50 10.20 1.00 49.70 18.30 15.50 3.00 21.70 29.80 2.50 2.33
54