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Diferenciando Bacterias Gram

Positivo (+) y Gram Negativo
(-) Mediante Tinción de Gram
Unidad de Apoyo para el Aprendizaje

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Comencemos con...

Pensemos en un día normal de Juan trabajando en

el laboratorio; él se encuentra analizando bacterias
con el fin de diferenciarlas, para ello, realiza la
tinción de Gram. Sin embargo, no es capaz de
identificar cuáles son Gram + y Gram −; no
recuerda que las bacterias que tienen mayor
cantidad de peptidoglicano son Gram + y se tiñen
de violeta, debido a que este colorante queda
inmerso entre el peptidoglicano; al contrario de las
bacterias Gram −, que tienen un menor contenido
de éste (el cristal violeta no es el colorante que
predomina en este tipo de bacterias), por lo tanto,
se tiñen con safranina.

Gram + y Gram −

 Identificar los componentes de la pared

celular de las bacterias para clasificarlas en Gram

positivo y Gram negativo, a partir de la técnica de
tinción de Gram, con el fin de diferenciarlas.

¿Sabes cómo está

constituida la pared
celular de las
bacterias?

La pared celular es una estructura compleja

y semirrígida, responsable de la
configuración de la célula; su principal
función consiste en evitar la ruptura de la
célula bacteriana cuando la presión
hidrostática intracelular es mayor que la
presión hidrostática extracelular. Desde una
perspectiva clínica, la pared celular es
importante porque contribuye a la virulencia
de algunas especies de bacterias; y es el
sitio de acción de algunos antibióticos.

Pared celular

Conociendo la pared
celular de las bacterias
Gram +
La pared celular de las bacterias Gram + está
compuesta por varias capas de peptidoglucano,
que conforman una estructura gruesa y rígida; éste
es un elemento clave para la estructura, la
replicación y la supervivencia de la célula en las
condiciones normalmente hostiles en las que
proliferan las bacterias.

Además, la pared celular de las bacterias Gram +

contiene ácidos teicoicos, que están compuestos,
principalmente, por un alcohol (glicerol o ribitol) y
fosfato. Existen dos clases de ácidos teicoicos en la
pared celular de las bacterias Gram +:

EnvolturadeGramPositivo

Ácido
lipoteicoico Ácido
teicoico

Peptidoglicano

Espacio
periplásmico

Membrana
plasmática

Gram positiva

Y las bacterias Gram −

La estructura de la pared celular de las bacterias

Gram − es más compleja, desde el punto de vista
estructural y químico. Está conformada por la
membrana citoplásmica y por fuera encontramos
una delgada capa de peptidoglucano (que
representa entre un 5 % y un 10 % del peso de la
pared celular).

En la parte externa de la capa de peptidoglucano

se encuentra la membrana externa, la cual sólo se
encuentra en las bacterias Gram −.

(s. f.) (s. a.). Gram negativas [imagen]. Tomado de

https://curiosoando.com/wp-
content/uploads/2015/01/pared_celular_bacteria_gram_negativ
a.png

El espacio periplásmico es la zona comprendida

entre la superficie externa de la membrana
citoplásmica y la superficie interna de la membrana
externa. En este espacio se encuentran diversas
enzimas hidrolíticas, muy importantes para la
degradación y metabolización de las
macromoléculas de gran tamaño.

La membrana externa está compuesta por una

bicapa, cuya hoja interna tiene una composición
similar a la de la membrana celular; la hoja externa
contiene constituyentes diferentes dentro de los
cuales encontramos a los lipopolisacáridos. Posee
conductos especiales formados por proteínas
denominadas porinas , que permiten la difusión
pasiva de compuestos hidrofílicos de bajo peso
molecular, como azúcares, aminoácidos y ciertos
iones.

Comparación entre
bacterias Gram + y Gram
−

BacteriaGram+ BacteriaGram-

•Losácidosteicoicossonsufactorde "Nocontieneácidosteicoicos,nilipoteicoicos.
virulencia.
»Cuentanconunamembranaexterna.
•Contienenmayorcantidadde
petidoglicanoyconstituyeel50%del •LOsLPSsonunfactordevirulencia.
materialdelapared.
"Contienenmenorcantidaddepetidoglicano:
constituyedel5al10%delmaterialdelapared.
Ácido_
lipoteicoico
Proteinas Porinas+-Lipopolisacáridos

Membrana
-Petidoglicano externa

Lipoproteína. IEspacio
Petidoglicano periplasmático

Proteínas,
ronrana Membrana
acoplasmatica
Fosfolipidos.
-citoplasmática
Fosfolipidos

EstructuraGram+ EstructuraGram-

En la siguiente tabla se te muestran las principales

diferencias entre las bacterias Gram + y Gram −:

SI

Morales, N. (2017). Comparación de bacterias Gram + y Gram

−.

Actividad 1.
Identificando
componentes de las
bacterias Gram + y
Gram −

Es importante conocer la morfología y

estructura de las bacterias Gram + y Gram
−, una de las diferencias fundamentales es la
pared celular.

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¿Qué es la tinción de
Gram?

Ahora que ya conoces la estructura de la pared

celular de las bacterias, veamos el proceso que se
utiliza en el laboratorio para identificarlas en
positivas y negativas:

Por medio de la tinción de Gram podemos clasificar

a las bacterias en positivas y negativas; la
identificación se basa en diferencias de la
estructura de la pared celular y en la forma en que
reacciona frente a diversos reactivos que se utilizan
durante la tinción.

 Deslizar hacia la izquierda o

derecha 

 

Paso 1: tinción de Gram

El colorante principal que se emplea en

esta técnica es el v i o l e t a d e g e n c i a n aa,
el cual tiñe de color violeta a las células
Gram +; y a las células Gram − de color
rosado, frente al microscopio, porque
ingresa en el citoplasma de ambos tipos
de células.

Y al finalizar este proceso las bacterias Gram + se

observan de color azul intenso o violeta; mientras
que las bacterias Gram − se observarán de color
rojo o rosado. Cuando realices la tinción de Gram
recuerda:

Actividad 2.
Reconociendo bacterias
Gram + y Gram −

Por medio de la tinción de Gram podemos

clasificar a las bacterias en positivas y
negativas; la identificación se basa en
diferencias de la estructura de la pared
celular; y en la forma en que reacciona
frente a diversos reactivos que se utilizan
durante la tinción.

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Autoevaluación. Y ahora
¿ya sabes realizar una
tinción de Gram?

La tinción de Gram es una técnica de

laboratorio que permite la evaluación rápida
de bacterias, es importante que ubiques
cuales son los pasos que debes seguir para
realizarla correctamente.

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
información
Fuentes de

Básicas

Murray, P., Rosenthal, K., y Pfaller, M. (2015).

Microbiología médica . Brasil: Elsevier.

Tortora, G., Funke, B., y Case, C. (2007).

Introducción a la Microbiología . México: Médica
Panamericana.

Complementarias

Brooks, G. (2011). Jawetz, Melnick y Adelberg:

microbiología médica . México: McGraw-Hill.

MacFaddin, J. (2003). Pruebas bioquímicas para la

identificación de bacterias de importancia clínica .
México: Médica Panamericana.

 Cómo citar
Morales, N. (2018). Diferenciando Bacterias Gram
Positivo (+) y Gram Negativo (-) Mediante Tinción de
Gram. Unidades de Apoyo para el Aprendizaje .
CUAED/FES Iztacala-UNAM. Consultado el (fecha) de
(vínculo)

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