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UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


LABORATORIO DE BIOLOGA
PRACTICA No. 3

MECANISMO DE TRANSPORTE CELULAR


CARRERA: ENFERMERIA

PROPOSITOS

Estudiar los fenmenos de difusin (dilisis y osmosis) que ocurren en membranas


citoplasmticas.
Analizar y describir el fenmeno de soluciones hipotnicas, isotnicas e
hipertnicas sobre eritrocitos humanos.

INTRODUCCIN
En todos los sistemas vivos, desde los procariotas a los eucariotas multicelulares ms
complejos, la regulacin de los intercambios de sustancias entre el sistema vivo y el mundo
inanimado ocurre en el mbito de la clula individual y es realizada por la membrana
celular. En los organismos multicelulares, la membrana celular tiene la tarea adicional de
regular los intercambios de sustancias entre las distintas clulas especializadas que los
constituyen. El control de estos intercambios es esencial para proteger la integridad de cada
clula, para mantener estrictas condiciones de pH y concentraciones inicas que permiten el
desenvolvimiento de sus actividades metablicas, y para coordinar las actividades de las
diferentes clulas.
El mantenimiento del ambiente interno de la clula y sus partes constitutivas requiere que la
membrana celular desempee una doble funcin compleja: debe evitar la entrada de ciertas
sustancias y permitir el ingreso de otras, e inversamente, debe retener a ciertas sustancias en
el interior y permitir la salida de otras. La capacidad de una membrana para desempear
esta funcin depende no solamente de las propiedades fsicas y qumicas que resultan de su
estructura lipdica y protenica, sino tambin de las propiedades fsicas y qumicas de las
sustancias (iones, molculas y agregados de molculas) que entran en interaccin con la
membrana. De los muchos tipos de molculas que se encuentran rodeando a la clula o en
su inferior, la ms comn es, sin duda, el agua. Ms aun, las mltiples molculas e iones
importantes en la vida de la clula son transportados en solucin acuosa.
El agua se mueve de una regin de potencial hdrico mayor a una regin de potencial
hdrico menor, independientemente de la causa de este potencial.
En las soluciones, el potencial de agua est afectado por la concentracin de las partculas
disueltas (solutos). A medida que aumenta la concentracin de partculas de soluto ( o sea,
el nmero de partculas de soluto por unidad de volumen de solucin), debe necesariamente
disminuir la concentracin de molculas de agua ( o sea, el nmero de molculas de agua
por unidad de volumen de solucin), y viceversa.
Las molculas de agua se mueven de regiones de mayor potencial hdrico a regiones de
menor potencial hdrico, hecho de gran importancia para los sistemas vivos.
Hay dos mecanismos implicados en el movimiento del agua y de los solutos: flujo global y
la difusin.
FLUJO GLOBAL

El flujo global es el movimiento total de un lquido. Las molculas se mueven todas juntas
y en la misma direccin.
DIFUSIN
Es el trmino general para definir el movimiento aleatorio de molculas individuales que
producen un movimiento neto desde un rea ms concentrada hacia otra menos
concentrada.
Las caractersticas esenciales de la difusin son : 1. Que cada ion o molcula se mueve
independientemente de los otros y 2. Que estos movimientos son al azar. El resultado neto
de la difusin es que las sustancias que se difunden resultan distribuidas uniformemente.
El movimiento de molculas de agua a travs de una membrana selectivamente permeable
es un caso especial de difusin, que se conoce como osmosis. La smosis da como
resultado la transferencia neta de agua de una solucin que tiene un potencial hdrico mayor
a una solucin que tiene un potencial hdrico menor.
La difusin del agua no se ve afectada por qu cosa esta disuelta en ella sino solamente por
cuanto se encuentra disuelto, o sea, por la concentracin de partculas de soluto (molculas
o iones) en el agua. La palabra isotnica fue acuada para describir dos o ms soluciones
que tienen el mismo nmero de partculas disueltas por unidad de volumen y, por tanto el
mismo potencial hdrico. Comparando soluciones de distinta concentracin, la
concentracin que tiene menos soluto (y, por tanto, un potencial hdrico mayor) se conoce
como hipotnica, y la que tiene ms soluto (menor potencial hdrico) se conoce como
hipertnica.

MATERIALES
Biolgicos:
Sangre humana
Intestino de res
Vidriera y otros:
Tubos de ensayo
Pipetas
Goteros
Pantalla de hemolisis
Estuche de diseccin
Pitillos
Reactivos:

Agua destilada
Solucin de almidn al 10
Cloruro de sodio (0,4%, 0,9%, 2%, 10%)
Lugol
Glicerol 0.6 molar
Etanol 0.6 molar
Material que trae el estudiante

PROCEDIMIENTO
1. ERITROCITOS HUMANOS
En soluciones hipertnicas de glicerol y etanol los eritrocitos pueden ser hemolizados, lo
que se traduce como la salida de hemoglobina a travs de la membrana celular de los
eritrocitos, cuando las propiedades de esta se modifican.
La hemolisis se puede reconocer por la aparicin de una solucin roja transparente en lugar
de la suspensin turbia caracterstica de los glbulos rojos.

Para el siguiente experimento disponga de una pantalla de hemolisis de 20 x 20 cm,


que posee una perforacin central atravesada por un hilo negro. Toda la pantalla est
cubierta por papel blanco transparente.
Tome tres tubos de ensayo, numrelos y agregue a cada uno de ellos lo siguiente:
Tubo N 1 : 2 mililitros de agua
Tubo N 2: 2 mililitros de glicerol 0.6 molar
Tubo N 3: 2 mililitros de etanol 0.6 molar
Usando sangre y una fuente luminosa realice estos experimentos haciendo un
montaje como se indica a continuacin.

TUBO N1

Agregue cuidadosamente dos gotas de sangre, evitando hacer contacto con las
paredes del tubo.
Mezcle suavemente y anote el tiempo que marca su reloj a partir de este momento.
Inmediatamente coloque el tubo frente al hilo de la pantalla de hemlisis y mire a
travs de la solucin.
Cuando aparezca el libro a travs de la solucin, registre nuevamente el tiempo
indicado en su reloj.
El intervalo entre los dos tiempos, es el tiempo de hemolisis producida por el agua.

TUBO N 2 Y 3

Para calcular el tiempo de hemolisis producido por el glicerol y etanol, repita en


cada uno de los tubos y respectivamente los pasos descritos para el tubo N 1.
Sin embargo el tiempo de hemolisis corregido para las dos sustancias ser en cada
caso el tiempo calculado para la solucin menos el tiempo de hemolisis producido
por el agua.

2. INTESTINOS

Amarre con un hilo un extremo de 10 cm. De intestino delgado previamente lavados


con agua destilada por dentro y por fuera.
Deposite en su interior volmenes iguales de solucin de almidn y cloruro de sodio
10%. Cierre el extremo libre
Lave cuidadosamente en una solucin de agua destilada con dos gotas de solucin
de lugol
Tenga presente que los extremos del intestino estn cerrados hermticamente.
Observe los cambios que se suceden en la solucin.
Si hay salida de almidn, tanto el intestino como el agua tomaran un color azul
violeta.
Si no hay salida de almidn, habr salida de cloruro de sodio. Para comprobar la
presencia de cloruro de sodio en la solucin, con un pitillo sople sobre la solucin
sacando antes el intestino.
Si hay presencia de cloruro de sodio, la solucin toma un color lechoso. Porque
ocurre esto.
Comprelo con un blanco. Anote el resultado.

3. OSMOSIS EN CLULAS ANIMALES


ERITROCITOS HUMANOS
Limpie con algodn empapado de alcohol la yema de un dedo. Pinche usando lanceta
estril.
Coloque una gota de sangre sobre una lmina porta-objetos a lo que previamente ha
colocado una gota de NaCl 0,9% (solucin isotnica para eritrocitos).
Observe con menor y mayor aumento. Realice esquemas de los eritrocitos y note la forma
caracterstica de ellos.
Coloque una nueva gota de sangre de NaCl 0.4% (solucin hipotnica para eritrocitos).
Realice un esquema de los eritrocitos en esta situacin.

Coloque una nueva gota de sangre de NaCl 2% (solucin hipertnica para eritrocitos)
realice un esquema de los eritrocitos en esta nueva situacin.

BIBLIOGRAFIA
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BIOLOGIA CELULAR (Segunda ed.). Espaa: Medica PanamericanaS.A.
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Karp, G. (2009). BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR (Quinta edicin ed.).
Mexico: The McGraw Hill Companies.
Welsch, U. (2008). SOBOTTA WELSCH HISTOLOGIA (Segunda ed.). Alemania:
Medica Panamericana.