Práctica 8: Determinación del Potencial hídrico de un tejido vegetal
Palabras clave: molalidad, ósmosis, potencial
hídrico, refractómetro.
Objetivo
● Determinación del Potencial hídrico de
un tejido vegetal
Material de laboratorio
● Balanza de precisión
● Papel aluminio
● Vaso de precipitado
● Pipetas pasteur
● Brixómetro/refractómetro
● 6 vasos de 30 ml
● Cuchillo
● Espátula
● Soluciones de sacarosa de las siguientes
molalidades: 0.15, 0.20, 0.30, 0.35, 0.50
Material biológico
● Papas
Introducción
El potencial hídrico es la energía que posee una
masa de agua, dependiendo de una serie de
factores como la concentración (potencial
osmótico), el agua fluirá desde una solución con
poca concentración de determinada sustancia
hacia una com mayor concentración; presión
(turgencia) el agua fluirá desde un sistema con
presión alta hacia uno con menor presión; altura
(potencial gravitacional) el agua fluirá hacia
abajo; capilaridad (potencial matricial) mezcla el
potencial osmótico y la turgencia, se origina a
partir de las fuerzas de capilaridad y tensión
superficial en espacios pequeños.
Para el desarrollo de esta práctica se llevarán a
cabo diferentes métodos, para ver el potencial
gravimétrico a partir del cambio de peso de la
papa, la turgencia y el punto isotópico, estos
datos se obtendrán con un brixómetro y a través
de una prueba donde se pinta la solución final en
las soluciones originales (donde no entró en
contacto con la papa).
Hipótesis
Se desarrollaron algunas ideas de lo que
sucedería con la papa y la solución de sacarosa.
1. La papa perderá peso en agua, por eso es
importante tomar esta medida al inicio
del experimento y al final.
2. La papa absorberá azúcar del medio
donde se encuentra, por lo que se
deberán tomar medidas con el
brixómetro/refractómetro antes y
después de que la papa absorba el
azúcar.
3. La solución restante cambiará su
densidad en comparación a la original,
para ver esto es necesario pintar la
solución final a manera de que se
observe el desplazamiento que tiene
dentro de la solución original.
4. Si las soluciones están bien preparadas,
habrá un caso en los tres métodos donde
las mediciones del antes y después del
proceso de la papa no se verán
afectadas, es decir, se encontrará el
punto isotónico, no cambiará el peso, los
grados brix, ni la densidad.
Marco Teórico
Para comprender mejor el desarrollo de esta
práctica, se definirán los siguientes conceptos
que resultan fundamentales para llevar a cabo la
misma.
Existe una característica física que permite ver y
explicar la circulación de agua en plantas o es
decir a la libertad que tienen las moléculas de
agua para realizar cierto trabajo, a la que se le
conoce como el potencial hídrico.
La absorción o pérdida de agua se puede
calcular por los siguientes métodos.
Método gravimétrico: Este consiste en los
cambios de peso que presenta el tejido vegetal,
al ser colocados en soluciones de diferente
concentración de sacarosa. La solución que no
cambie de peso se le considera que tiene un
potencial hídrico que corresponde al tejido.
Método refractométrico: Este consiste en
sumergir muestras de tejidos en soluciones de
potencial osmótico variable y determinar
mediante un refractómetro, la solución donde no
hay un cambio de concentración.
Brixómetro (refractómetro): Este instrumento
ayuda al proceso de identificación de sustancias
y comprobar su grado de pureza, ya que cada
sustancia tiene un índice de refracción propio En
este caso se uso para medir la concentración de
sustancia en una solución.
Turgencia: Esta determina el estado de rigidez
de una célula, fenómeno por el cual las células al
absorber agua se hinchan, ejerciendo presión
contra las membranas celulares las cuales se
ponen tensas. En este caso: Si colocamos la
célula en agua pura o en una solución muy
diluida , habrá difusión neta de agua del medio,
que en este caso es hipotónico, hacia la región
de mayor concentración de soluto, es decir el la
célula . De este modo la célula sufrirá un
aumento de volumen, debido a que el agua pasa
en mayor proporción desde el medio
(hipotónico) hacia el interior de la célula. El
proceso continúa hasta que la pared celular
(poco elástica) no cede más, alcanzando la
presión de turgencia un valor máximo. La célula
se encuentra saturada de agua, completamente
turgente.
Ósmosis:Se define como una difusión pasiva,
caracterizada por el paso de agua, disolvente, a
través de la membrana semipermeable, desde la
solución más diluida a la más concentrada.
Ósmosis inversa: Es un proceso mediante el cual
se reduce el caudal mediante una membrana
semipermeable y se ejerce una fuerza de empuje
superior a la de la presión osmótica en dirección
opuesta al proceso de ósmosis. De esta manera
se logra separar las sustancias que se encuentran
en el agua en un lado de la membrana
(concentrado) y del otro se obtiene una solucion
diluida baja en solidos disueltos.
Presión Osmótica: Es la presión que debe
aplicarse a la solución para detener el flujo de
disolvente a través de una membrana
semipermeable
Isotonicidad: Las soluciones a cada lado de la
membrana celular son isotónicas si la
concentración de solutos fuera de la célula es
igual a la concentración de solutos dentro de la
célula. En este caso la célula ni se hincha ni se
encoge porque no hay gradiente de
concentración que induzca la difusión de
grandes cantidades de agua a través de la
membrana celular. Las moléculas de agua se
difunden libremente a través de la membrana
plasmática en ambas direcciones, y como la
velocidad de difusión del agua es la misma en
cada dirección, la célula no ganará ni perderá
agua.
Punto isotonico: El punto isotónico puede
determinarse trazando una gráfica que refleje el
cambio de peso en el eje y en relación con el
porcentaje de soluto disuelto en agua en el eje x.
Desarrollo
Diagrama de flujo
El siguiente diagrama explica el procedimiento
para obtener el porcentaje de cambio de peso y
con él, calcular el porcentaje osmótico.
 Fig. 3 Brixómetro/Refractómetro

El refractómetro debe verse a contraluz, de

manera que se ilumine la solución y pueda
crearse una sombra en la regla que se encuentra
en el interior del dispositivo, donde inicia la
sombra es la lectura que se toma en cuenta.
Estas medidas serán importantes más adelante.

Fig. 1 Diagrama de flujo

Se comenzó preparando las soluciones de

sacarosa a la molalidad de: 0.15 0.20, 0.30, 0.35,
0.50.

Fig. 2 Soluciones con sus respectivas molalidades

Con ayuda de las pipetas pasteur se extrajo una

pequeña cantidad de solución y se colocó en el
cristal del refractómetro, lo suficiente para
cubrirlo por completo y obtener las medidas en Fig. 4 Vista del interior del refractómetro con una
grados brix. lectura
 Fig. 5 Papas cortadas en cilindro

Diferentes trozos de papa se pesan, deben ser

cortadas a manera de que entren en los tubos de
ensaye, los trozos de papa deberán ser cubiertos
por las soluciones de sacarosa por completo.

Fig. 7 Azul de metileno agregándose a las

soluciones

Con ayuda de las pipetas pasteur, serán

agregadas pequeñas gotas de esta solución a la
Fig. 6 Tubos de ensaye con solución de sacarosa solución original.
y papa

Las soluciones con papa serán refrigeradas por

un día completo para que lleven a cabo su
proceso de ósmosis inversa, pues el azúcar será
absorbido por las papas.

Después de haber reposado, las papas son

pesadas nuevamente para ver cómo cambió el
Fig. 8 Tubos de ensaye nuevos frente a tubos de
peso de cada una. Del mismo modo se volverán ensaye con la solución restante pintada con azul de
a tomar lecturas en el refractómetro para ver qué metileno
cambió.
Este método es el más gráfico, pues se puede
Otro método también se llevará a cabo para apreciar a simple vista el comportamiento de las
determinar cómo cambió la densidad de la soluciones debido al cambio de densidad.
solución donde se sumergió la papa, para esto,
en tubos de ensaye nuevos, se agregan las
soluciones originales (donde la papa no fue
sumergida), las soluciones restantes (donde
fueron sumergidos los trozos de papa) se
pintarán con azul de metileno, esto no afectará
su densidad, pero sí el color.
 punto isotónico, esta fue la solución de 0.3m,
pues redujo su peso en 1.62%.
Método de refractómetro
Con los grados brix se hace también una
comparación de las lecturas que se toman antes
y después de sumergirse los trozos de papa.

Concentraci Grados brix Grados brix

ón iniciales finales

Fig. 9 Tubos de ensaye con solución original y 0.15m 4 2

gotas de la solución restante
0.2m 4 2
A continuación se presentarán y analizarán los
resultados obtenidos en este experimento. 0.3m 6 6

0.35m 8 5
Resultados y análisis
0.5m 12 10
Método de potencial gravimétrico
Tabla 2. Mediciones del refractómetro
Con la siguiente fórmula se calcula el porcentaje
Nuevamente se observa que la concentración de
de cambio de peso.
0.3m es la que no presenta cambios en cuanto a
su lectura en grados brix, esto comprueba que la
concentración es la más cercana al punto
isotónico.
Concent Peso Peso ∆Peso %∆Pes
ración inicial final o
Método de densidad
En el tercer método de comparación de
0.15m 5.12g 4.380g 0.74g -14.45
% soluciones no se toman lecturas ni mediciones,
sino que simplemente se observa el
0.20m 4.063g 3.306g 0.757g -18.63 comportamiento de estas cuando la solución que
% fue sometida al proceso de ósmosis de la papa se
agrega a las soluciones originales.
0.30m 3.754g 3.693g 0.061g -1.62%

0.35m 4.305g 3.457g 0.848g -19.69

%
Concentraci Movimiento Interpretaci
0.50m 4.146g 3.379g 0.767g -18.49 ón de la gota ón
%
0.15m Arriba La densidad
Tabla 1. Resultados del método de potencial de la
gravimétrico sustancia
Hasta este punto se comprueba la primera original es
mayor
hipótesis, las papas perdieron peso en agua,
además se encontró una solución cercana al
 introduce en una disolución que tiene su mismo
0.2m Arriba La densidad
de la potencial hídrico, por otro lado, si un tejido se
sustancia introduce en una disolución de menor potencial
original es hídrico, las células perderán agua y
mayor consecuentemente, la disolución se diluirá y se
hará menos densa, pero si por el contrario, el
0.3m Ninguno Este es el tejido se introduce en una disolución de mayor
punto potencial hídrico, sus células ganarán agua y
isotónico, por consecuentemente, la disolución se hará más
lo que la concentrada y por tanto más densa.
densidad no
cambió Se utiliza sacarosa debido a que se diluye en el
agua y puede ser usada para monitorear la
0.35m Arriba La densidad concentración de la disolución.
de la
sustancia 3. ¿Qué otros métodos existen para medir el
original es potencial hídrico?
mayor
a) Método volumétrico: Se basa en la medida de
0.5m Arriba La densidad los cambios de las dimensiones lineales de las
de la células cuando estas se colocan en soluciones de
sustancia diferente potencial osmótico.
original es
mayor b) Método refractométrico: Consiste en sumergir
fragmentos de tejidos en soluciones de potencial
Tabla 3. Observaciones del método por densidad
osmótico variable y determinar mediante un
Nota: las gráficas correspondientes a las refractómetro, la solución en que no hay un
tablas de resultados se encuentran en el anexo cambio de concentración.
1 al final de este documento.
c) Métodos de presión de vapor: (Psicómetros)
Cuestionario Se basan en el hecho de que la presión de vapor
de la atmósfera que circunda a un tejido
1. ¿Qué es el estrés hídrico? colocado en una cámara cerrada se halla en
El estrés hídrico se refiere a las situaciones en equilibrio con el potencial hídrico del tejido. En
las cuales la demanda de agua es superior que la dicha cámara se halla instalada una pequeña
cantidad disponible lapso de tiempo determinado termocupla. Cuando se interrumpe la corriente el
así como también cuando su uso se ve limitado agua condensada se evapora de la termocupla
por su baja calidad. con mayor o menor velocidad, según sea la
presión de vapor de la atmósfera de la cámara.
Cuando se habla de plantas ocurre cuando la Cuando se interrumpe la corriente el agua
transpiración excede el agua absorbida por las condensada se evapora de la termocupla con
raíces. mayor o menor velocidad, según sea la presión
2. ¿Por qué se utiliza sacarosa para medir el de vapor de la atmósfera de la cámara.
potencial hídrico? 4. ¿Qué representa el potencial hídrico?
Se utiliza sacarosa junto con el método de El potencial hídrico representa en pocas palabras
Chardakov para la determinación del potencial la capacidad de hidratación y deshidratación de
hídrico debido a que este se basa en que un células, tejidos y órganos. Este siempre es
tejido vegetal no pierde ni gana agua cuando se
comparado con el de el agua pura el cual se
mide en 0.
El potencial hídrico a su vez representa la suma
de los potenciales: osmótico, mátrico,
gravitatorio, y de presión. Esta es también la
magnitud más empleada para expresar y medir el
estado de energía libre del agua.
5. ¿Por qué se habla de diferencia de
potencial?
El potencial hídrico es una medida de la energía
potencial en el agua, así como la diferencia entre
el potencial en una muestra de agua dada y el
agua pura, por ello se habla de diferencia de
potencial hídrico.
Además de que el potencial hídrico siempre se
compara a el de el agua pura siendo este 0.
6. ¿El potencial hídrico varía con los solutos?
Cuando se habla de el papel de los solutos en el
potencial hídrico se está hablando del potencial
osmótico, el cual sin importar cual sea el soluto,
siempre será cero; y se define por la siguiente
ecuación:
ψ𝑠 = 𝑀𝑖𝑅𝑇
Donde
M: Es la concentración en molaridad del soluto,
i: Es el factor de van't Hof
R: Es la constante de los gases ideales
T: Es la temperatura absoluta.
De entre las partes de la ecuación tenemos el
Factor de Van´t Hoff, el cual es una propiedad
del soluto puesto que consiste en el número de
moles de partículas formadas en solución por
mol de soluto.
Por lo que se puede decir que el potencial
hídrico si varía de acuerdo al soluto.
7. ¿Por qué se dice que el agua tiene energía
libre?
La energía libre se refiere a con cuánta facilidad
se mueven las moléculas de determinada
sustancia, por ello la capacidad de las moléculas
de agua para moverse en un sistema particular
depende de su energía libre.
La magnitud más empleada para expresar y
medir el estado de energía libre del agua es el
potencial hídrico.
El agua pura tiene una energía libre muy alta
debido puesto que todas las moléculas pueden
moverse libremente, este estado fue tomado de
referencia del potencial hídrico; a una masa de
agua pura, libre, sin interacciones con otros
cuerpos, y a presión normal, le corresponde un
Ψ igual a 0.
8. ¿Por qué se menciona la fisiología vegetal al
hablar del potencial hídrico?
Mucha de la fisiología vegetal se asocia con el
estudio del agua, puesto que muchas funciones
de la planta están determinadas por las
propiedades del agua y los solutos disueltos en
ella.
Por ejemplo las plantas utilizan el potencial
hídrico para transportar el agua a las hojas para
que pueda realizarse la fotosíntesis.
En este caso se utilizó la fisiología vegetal de la
papa, para que dependiendo de la concentración
del soluto absorbiera más o menos cantidad de
agua.
Conclusión
Esta práctica representó un reto importante en la
preparación de las soluciones, debido a esto los
conocimientos sobre este tema se vieron
reforzados después de cometer muchos errores.
Por otro lado, fue posible observar el
comportamiento de las soluciones a partir de
analizar diferentes tipos de potencial.
Los tres métodos de análisis de potencial hídrico
revelaron comportamientos similares, por lo que
es posible concluir que todos fueron efectivos,
sin embargo, cabe realizar algunas
observaciones. En todos los métodos se esperaba
que el medio isotónico fuera un punto medio
dentro de las gráficas, es decir, los resultados
que se encontraran antes o después iban a
aumentar o disminuir, sin embargo, esto no
ocurrió, pues todas las lecturas, a excepción del
medio isotónico, tendieron a disminuir, tanto el
peso, la concentración en las soluciones y en
densidad, es muy probable que esto se deba a
que las soluciones fueron preparadas a muy baja
concentración, siendo 0.5 molal la mayor de
estas, por lo que, se concluyó que si se quería
ver un comportamiento diferente en los
resultados y en las gráficas, habría que preparar
soluciones con concentración mayor.
Las hipótesis fueron comprobadas, aún así el
medio isotónico no fue hallado de manera
precisa, pero sí se encontró un punto muy
cercano (0.3 molal), en discusiones con el
docente encargado se determinó que el punto
isotónico se encuentra en una concentración
aproximada de 0.28 molal, a pesar de esto se
decidió continuar con los resultados obtenidos
en la concentración de 0.3 molal, pues el
porcentaje de cambio de peso fue de 1.6%
aproximadamente, por lo que para motivos de
esta práctica fue suficiente.
Referencias
[3]chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglcl
efindmkaj/https://www4.ujaen.es/~amocana/F.V
/metodo%20de%20Chardakov.pdf
[4]Mira, P. J. (2023, 16 enero). Factor de Van’t
Hoff – definición y cómo calcularlo. El Gen
Curioso.
https://www.elgencurioso.com/2021/10/05/facto
r-de-vant-hoff-definicion-y-como-calcularlo/
[5] FISIOVEGETAL Y OTROS VIDEOS
EDUCATIVOS. (2022, 9 enero). Teoría del
potencial hídrico [Vídeo]. YouTube.
https://www.youtube.com/watch?v=xd0KtynH8
3E
[6]Sperelakis, Nicholas (2011). Cell Physiology
Source Book: Essentials of Membrane
Biophysics. Academic Press. p. 288.
[7]oet, Donald; Voet, Judith G.; Pratt, Charlotte
W. (2001). Fundamentals of biochemistry.
Wiley. p. 30

[1] iAgua, R. (2021, 15 febrero). ¿Qué es el

estrés hídrico? iAgua.
https://www.iagua.es/respuestas/que-es-estres-hi
drico

[2] Efecto del estrés hídrico sobre el crecimiento

y eficiencia del uso del agua en plántulas de tres
especies arbóreas caducifolias. (2012,
diciembre). Scielo. Recuperado 14 de noviembre
de 2023, de
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci
_arttext&pid=S0187-57792012000400343#:~:te
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