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Práctica # 3
DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS
I. Objetivos
Al final del laboratorio el estudiante debe ser capaz de:
* Calcular la tasa de difusión de un reactivo dado.
* Describir el concepto de membrana permeable selectiva y explicar su papel en la ósmosis
* Entender los conceptos de hipotónico, hipertónico e isotónico.
* Discutir la influencia de la membrana celular sobre el comportamiento osmótico en las células.
* Describir el mecanismo de difusión a nivel molecular.
* Reconocer los procesos de difusión, ósmosis y diálisis en células vivas.
* Explicar como la presión que ejercen las moléculas favorece los procesos de la difusión y ósmosis
* Identificar el efecto del tamaño de la molécula y su polaridad sobre la permeabilidad de la membrana.
II. Introducción
Cualquiera que sea la organización específica de un ser vivo,
unicelular o pluricelular, procariota o eucariota, en sus células no
puede faltar la membrana celular. La membrana celular es la
estructura que separa al líquido intracelular (LIC) del extracelular
(LEC). Está formada por dos compuestos orgánicos: los
fosfolípidos y las proteínas. Su estructura actual fue propuesta en
1972 por S. Singer y G. L. Nicholson. Su modelo se conoce con el
nombre de “mosaico fluido” o mosaico de los líquidos. El modelo
de mosaico fluido explica que la membrana plasmática consiste en
una bicapa líquida de moléculas de fosfolípidos en donde están
incluidas las proteínas.
Las proteínas de la membrana celular permiten el paso del medio intracelular (LIC) al medio extracelular
(LEC) y viceversa, de moléculas pequeñas ya sea en forma activa o pasiva, otras actúan como receptoras de
señales como por ejemplo de hormonas; otras actúan como sitios de fijación para enzimas solubles y para el
citoesqueleto.
Es a través de la membrana celular que se controla el transporte de materiales entre el líquido intracelular
(LIC) y el líquido extracelular (LEC), dado que es selectiva y semipermeable, pues impide que algunas
sustancias grandes como los lípidos y proteínas la atraviesen fácilmente; pero permite el paso de azúcares
simples, oxígeno, dióxido de carbono, agua, glicerol, urea y otras moléculas. Este paso depende del tamaño y
carga de las moléculas y de la composición de la membrana celular. Este transporte celular puede ocurrir por
procesos pasivos y activos.
Los transportes pasivos no requieren el aporte de energía celular (ATP), y las moléculas se desplazan a
favor de una gradiente de concentración: la sustancia se desplaza del sitio de mayor al de menor
concentración. Entre los ejemplos están la difusión, ósmosis, diálisis y difusión facilitada. La difusión es el
movimiento de partículas (átomos, iones y moléculas) de una región de alta concentración a otra de menor
concentración, puede ocurrir en presencia o no de una membrana celular.
La difusión permite los procesos de ósmosis y diálisis. La ósmosis desplaza el agua a través de la membrana
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celular desde un sitio de donde se encuentra ésta en una alta concentración hacia otro de baja. Los procesos
osmóticos se denominan plasmólisis y turgencia en los vegetales y en las células animales se llaman lisis y
crenación. De acuerdo con la presión osmótica, las soluciones extracelulares se dividen en isotónicas,
hipotónicas e hipertónicas.
III. Procedimiento
Durante la sesión de laboratorio se realizarán cinco (5) experimentos donde se estudiaran distintos aspectos
del transporte de solutos y agua a través de membranas. Para lograr éste objetivo, los miembros pares o
impares de cada uno de los subgrupos de laboratorio definidos en la primera sesión de laboratorio, realizarán
y analizarán un experimento, de acuerdo a las indicaciones del instructor.
Al finalizar los experimentos, todos los miembros de cada subgrupo se reúnen para hacer una discusión de
los resultados obtenidos y completar el reporte. Cada subgrupo debe estar preparado para presentar y discutir
sus resultados.
Pasos a seguir:
1. Describa brevemente su hipótesis de trabajo y prediga sus resultados
2. En su mesón de trabajo encontrará una caja de Petri que contiene una capa fina (matriz) de gelatina
clara solidificada o agar (2%).
3. Verifique que su placa cuenta con 3 pozos pequeños, de lo contrario proceda a hacerlos, con un
tubo de ensayo pequeño, haga 3 pozos en la superficie de la matriz.
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4. Agregue una gota de uno de los colorantes disponible a uno de los pozos (evite la formación de
burbujas y el derrame de la sustancia). A partir de este momento (tiempo 0) se iniciará la toma de datos.
5. Repita el procedimiento para cada colorante (una gota de colorante para cada pozo).
6. Transfiera cuidadosamente la caja de Petri sobre una hoja blanca, sin temblar o correr el colorante.
7. Mida cada 2 minutos, durante 30 minutos la distancia que recorre cada colorante, colocando una
regla transparente sobre cada pozo. Luego, cada 10 min, haga medidas de la distancia (diámetro) recorrida
por el colorante hasta completar 40 min
8. Haga una gráfica donde represente la distancia recorrida por cada colorante en función del tiempo
transcurrido.
9. Responda las preguntas especificadas en su reporte.