Universidad de Guanajuato

Biología Experimental

Reporte de practica #5

“PURIFICACIÓN DE PROTEÍNA VERDE

FLUORESCENTE (GFP)”

Laboratorio de Ingeniería Genética

Dr. Guzmán Torres Juan Carlos

Presenta: García Negrete Paola

NUA: 794083

15 de Octubre del 2023

Resultados

Se buscó purificar GFP de una cepa de células de E. Coli transformadas,

para esto primero se aislaron las células que tenían el plasmado presente y
se reprodujeron, posteriormente por medio de centrifugación y lisis celular
se rompe la membrana y se eliminan los restos bacterianos; para entonces
realizar un cromatografía y obtener la proteína purificada, para comprobar
que tenemos GFP se llevan los tubos con proteína a luz UV, ya que, sin la
presencia de Aequorina, GFP necesita una fuente de energía externa que
existe el grupo fluorescente y se produzca el característico brillo. En base a
esta prueba podemos determinar que efectivamente tenemos GFP está
presente en los microtubos.
Sin embargo si buscáramos garantizar la pureza de la muestra podríamos
someter la muestra a una electroforesis en dos dimensiones, lo que nos
permitiría evaluar la carga y el peso molecular de las proteínas y así
caracterizarlas.
La purificación de proteínas tiene múltiples aplicaciones en la ingeniería
genética según la proteína aislada, como la ubicación y redes de interacción con otras proteínas y organelos de la célula.