Micropropagación de especies vegetales

a escala industrial

BIOTECNOLOGIA VEGETAL
Lic. Valeria Ines Rudoy
 CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

• Crecimiento diferenciado
Organogénesis o Morfogénesis
Cultivo de órganos

• Crecimiento desdiferenciado
Diferenciación
• ‘totipotencialidad celular’, enunciada por Haberlandt a principios del siglo XX,
postula que toda célula vegetal individual es capaz de regenerar una planta entera
a partir de un cultivo in vitro, sin importar el grado de diferenciación alcanzado.
Para ello se requieren condiciones específicas del medio del cultivo, temperatura,
fotoperíodo, etc.
 CRECIMIENTO DIFERENCIADO

• Cultivo de meristemas
• Cultivo de yemas
apicales o axilares
• Cultivo de segmentos
internodales
• Cultivo de embriones
• Cultivo de raíces aisladas
 La micropropagación masiva en la práctica
comercial

Montaje del laboratorio y costos de producción

Control fitosanitario y varietal

Gestión productiva

Automatización para propagación a gran escala

Agrobiotecnología
Referencias
Micropropagación
masiva
Clonación de plantas seleccionadas por
técnica de cultivo de tejido in vitro.
Factores
a considerar
antes de
emprender
una clonación
masiva

Agrobiotecnología

Micropropagación
masiva
 Componentes del medio de cultivo
• elementos inorgánicos:
sales de nitrógeno (N), potasio (K), calcio (C), fósforo
(P), magnesio (Mg), y azufre (S).

traza de elementos:

hierro (Fe), sodio (Na), Cloro (Cl), manganeso (Mn),

zinc (Zn), boro (B), cobre (Cu), molybdeno (Mo).

fuente de hidrato de carbono – vitaminas - agar

 Fitoreguladores

• auxinas
• citoquininas
• giberelinas
• etileno
• ácido abscísico
 Etapas del cultivo in vitro

Etapa I: establecimiento de un cultivo aséptico

Etapa II: producción de nuevos propágulos,

que separados de su macollo inicial puedan
dar origen a nuevas plantas

Etapa III: preparación para el crecimiento en su

ambiente natural

Etapa IV: transferencia al ambiente natural

 Explanto inicial: 1° etapa in vitro

• Orígen - planta
madre
• Variedad
• Estado fitosanitario
de planta madre
• Objetivo del cultivo in
vitro de esta planta
Citoquininas vs. auxinas

Proliferación vs. Elongación

 proliferación

enraizamiento
• Begonia Rex:
Regeneración por
organogénesis
directa a partir de
nervaduras de las
hojas
Plantines de Aloe listos para rusticar
Plants ready to go to greenhouse

Fotografia de V.Rudoy –
TECNOPLANT S.A.
Plantines in vitro de caña de azúcar
La inmersión
temporaria sirve
Biorreactores RITA de inmersión temporaria
como alternativa
durante la
Etapa II para
incrementar
la calidad y
bajar los costos

Plantines de caña de azúcar creciendo en biorreactores

 CRECIMIENTO DESDIFERENCIADO

Fotografia de V.Rudoy –
TECNOPANT S.A.

objetivo: obtención de variantes-obtención

de haploides – obtención de embriones
Somatic embryogenesis and regeneration

Fotografia de V.Rudoy –
TECNOPLANT S.A.
El callo
embriogénico
suele
distinguirse
visuamente
del callo en
crecimiento

Inicio de la
Fotografia de V.Rudoy – regeneración
TECNOPLANT S.A.
Contar con
una logística
que coordine • Coordinación de la producción
cada paso del
proceso es - Conocimiento de tasas proliferativas
clave para - Calendario de producción
desarrollar una
gestión exitosa - Programación horas/operario

- Observaciones periódicas

- Programación de elaboración de medios

- Ciclos de enraizamiento
Agrobiotecnología
- Ciclos de aclimatación
Micropropagación
masiva
 Genetically modified Potato
resistant to PVY virus
RB pNOS nptII tNOS p35S CP PVY tNOS LB