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GESTIÓN DE

MUESTRAS BIOLÓGICAS
U NIDAD D IDÁCTICA 8
M UESTRAS DE E XUDADOS Y L ESIONES C UTÁNEAS
Daniel Brell Martín
Ldo. Biología y Bioquímica
Ciclo Formativo de Grado Superior en Anatomía Patológica y Citodiagnóstico
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Los Hisopos o Torundas
❖ Hisopos o torundas → instrumentos que constan de un soporte longitudinal que tiene en su extremo un
material absorbente (cepillo), con el que se recoge la muestra.
❖ Dado que la mayoría de las muestras solicitadas para exudados se destinan a estudios microbiológicos, es
importante tener en cuenta que:
❖ la muestra podría desecarse fácilmente debido a su pequeño tamaño y las condiciones de obtención.
❖ La muestra podría ser absorbida por el propio hisopo o podría afectar a la supervivencia y estabilidad de las
células recogidas con él, dependiendo del material en que esté fabricado.
◦ Tipos de hisopos → dependiendo del diseño y los materiales empleados distinguimos varios tipos:
◦ En función del material → encontramos hisopos de algodón, alginato cálcico, dacrón y rayón.
◦ Dependiendo del diseño → el soporte de los hisopos suele ser de material plástico y rígido, o flexible de
filamento maleable.
◦ Dependiendo del sistema de transporte → algunos hisopos se introducen en un recipiente estéril, mientras
que otros incorporan bolsas estériles, en ambos casos con conservantes adecuados, e incluso, a menudo,
medios de cultivo estándar que posibiliten la viabilidad de las muestras microbiológicas (agar-gel o en
forma líquida).
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Los Hisopos o Torundas
❖ Hisopos o torundas
o Dependiendo del sistema de transporte:
o Sistemas de hisopos y torundas para el transporte de muestras anaerobias
o Tubo o frasco ampolla → contienen un medio semisólido, una atmósfera al 5% de CO2, un agente
reductor y un indicador que proporcione una señal visual de anaerobiosis.
o Tubo → se utiliza generalmente para la inserción de muestras en hisopos.
o Frasco ampolla → se utiliza para inoculación de muestras líquidas.
o Hisopo con sistema de cubierta plástica → el tubo o cubierta plástica incluye un hisopo y contiene
medio Cary-Blair, Amies de transporte o prerreducido
(PRAS).
o Sistema Culturette® → incluye un frasco ampolla o cámara separada por una membrana que
contiene sustancias químicas que generan catalizadores de CO2 y agentes
desecantes que atrapan el O2 residual que pueda quedar dentro del
sistema.
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ La Aspiración
❖ La aspiración incluye todos los procedimientos diseñados para la obtención de
muestras procedentes de regiones corporales conectadas con el exterior del
organismo (Ej: tráquea, bronquios, etc.)
❖ El procedimiento estándar requiere la introducción de un catéter hasta la zona
de interés, al cual se le acopla una jeringa que posibilita la succión del líquido
a aspirar.
❖ Algunos sistemas de aspiración de las vías respiratorias incluyen:
◦ Lavado broncoalveolar (BAL) → consiste en la inyección de una
cantidad variable de suero salino que “lava” el segmento pulmonar y
que posteriormente se recoge por medio de una aspiración. Este tipo
de muestra se compone de un material mucho menos denso que el
esputo.
◦ Aspirado broncoalveolar (BAS) → la aspiración se lleva a cabo
directamente del árbol bronquial, al mismo tiempo que se procede con
la broncoscopia. El material obtenido es denso y espeso,
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Otros Métodos de Recogida
❖ Es recomendable usar jeringas especiales o hisopos
conectados a sistemas aislantes de O2 cuando el objeto
del estudio sea determinar la posible presencia de
bacterias anaeróbias.
❖ Las lesiones cutáneas producidas por agentes fúngicos
requieren procedimientos específicos de toma de
muestras, principalmente consistentes en raspados
superficiales que recojan células descamadas Hifas de hongo, anchas y sin septos,
tomadas del tracto traqueal inferior.
Tinción G-G (Gomori-Grocott) 100x.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
❖ Exudado → filtración de líquido procedente de los vasos sanguíneos de un tejido.
❖ Trasudado → filtración de plasma sanguíneo, de bajo contenido en proteínas y fracción forme, que
a diferencia del exudado no se debe a un proceso inflamatorio, y cuyo agravamiento
da lugar a un edema.
❖ Generalmente, la presencia de un exudado constituye un indicativo de la existencia de un proceso
inflamatorio en el interior del organismo.
❖ Existen zonas concretas del organismo de las cuales pueden extraerse muestras de exudados útiles con
fines diagnósticos:

◦ Muestras del tracto respiratorio → generalmente, recogidas de las zonas faringoamigdalina,


nasofaríngica y nasal.

◦ Muestras de exudados de la zona faringoamigdalina: útiles para estudios que conlleven la siembra y
cultivo (y por tanto, la determinación de la presencia) de Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae,
Arcanobacterium heamolyticum, Corynebacterium diphteriae, Haemophilus influenzae, etc.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto respiratorio → generalmente, recogidas de las zonas faringoamigdalina,
nasofaríngica y nasal.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto respiratorio → generalmente, recogidas de las zonas faringoamigdalina,
nasofaríngica y nasal.

◦ Muestras de exudados de la zona nasofaríngica: útiles en estudios microbiológicos. Según el


método de obtención, distinguimos dos tipos de muestras:
◦ Frotis de exudados de la nasofaringe → indicados para el estudio de Neisseria meningitidis y
Nordetella pertussis.
◦ Las muestras deben enviarse al laboratorio y procesarse antes de 2 horas tras la toma.
◦ Aspirado de exudados de la nasofaringe → indicados para la investigación de N. meningitidis,
B. pertussis, Corynebacterium diphteriae, S. pyogenes y
virus respiratorio sinticial (VRS).
◦ Las muestras deben enviarse al laboratorio y procesarse antes de 2 horas tras la toma.

◦ Muestras de exudados nasales: específicamente indicadas para el estudio de la presencia de


Staphylococcus aureus. La muestra puede conservarse hasta 24 h. a tª ambiente.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tubo digestivo → generalmente, implican la recogida de muestras de las regiones oral,
estomacal / duodenal y rectal, sin utilizar procedimientos invasivos.
◦ Muestras de la cavidad oral: indicadas para el estudio de ciertas cepas bacterianas causantes de la
enfermedad periodontal (gingivitis agravada), así como determinar la presencia de candidiasis.
◦ La muestra puede conservarse hasta 24 h. a tª ambiente
◦ Muestras de la zona rectal: útiles para determinar la presencia de N. gonorrhoeae (causa gonococia
rectal; recogida con hisopo de algodón), y Chlamydia (no debe recogerse con hisopo de algodón, sino de
alginato cálcico o dacrón). La muestra puede conservarse hasta 24 h. a tª ambiente
◦ Muestras del tracto genitourinario → con frecuencia, tomadas de las regiones uretral, vaginal
o endocervical y balanoprepucial.
◦ Muestras uretrales: habitualmente utilizadas para determinar la presencia de Chlamydia trachomatis.
◦ El paciente no debe orinar, ni lavarse ni aplicar pomadas cremas o soluciones antisépticas en la
zona a tratar, durante la hora previa a la obtención de la muestra.
◦ Es recomendable tomar la muestra antes de la primera micción de la mañana, o una hora después.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto genitourinario → con frecuencia, tomadas de las regiones uretral, vaginal
o endocervical y balanoprepucial.
◦ Muestras vaginales: indicadas para evaluar la presencia de Candida sp., Trichomonas vaginalis,
Gardnerella vaginalis y otras infecciones causadas por agentes oportunistas o microorganismos
infecciosos asociados a ETS.
◦ No deben usarse soluciones ni pomadas antisépticas vaginales en los días previos a la toma de
muestras.
◦ La recogida de la muestra no es posible durante el periodo menstrual.
◦ Es recomendable enviar al laboratorio y procesar la muestra en los 15 minutos posteriores a su toma.
Ante la imposibilidad, se mantiene a tª ambiente en medio Stuart-Amies o similar (máximo 3 horas).
◦ Prueba del exudado vaginorrectal durante el embarazo → realizada durante la semana 35 o 36 de
gestación. Tiene como fin determinar la presencia de Streptococcus agalactiae (puede provocar
daños graves en el feto: parálisis cerebral, sordera, ceguera, meningitis, retraso en el lenguaje, etc):
◦ Prueba + → se prescribe tratamiento antibiótico a la madre.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto genitourinario → con frecuencia, tomadas de las regiones uretral, vaginal
o endocervical y balanoprepucial.
◦ Muestras endocervicales: indicadas para evaluar la presencia de C. trachomatis., Mycoplasma hominis,
Ureaplasma urealtycum, así como otras infecciones del tracto cervicouterino.
◦ La muestra se mantendrá a tª ambiente o en estufa, siendo el tiempo máximo de procesamiento 3 h.
(15 minutos en caso de no haber usado medio de transporte).
◦ La determinación de la presencia de microorganismos requiere tres muestras:
◦ 1) Estudio al microscopio
◦ 2) Cultivo microbiológico
◦ 3) Determinación de la presencia de Mycoplasma y Chlamydia (requiere medios de transporte y
cultivo específicos).
◦ Las muestras susceptibles de contener N. gonorrhoeae no deben tomarse con hisopos de algodón.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto genitourinario → con frecuencia, tomadas de las regiones uretral, vaginal
o endocervical y balanoprepucial.
◦ Muestras balanoprepuciales
◦ No se debe orinar ni lavar el área genital en las 2 h. previas a la toma de las muestras.
◦ El paciente debe abstenerse de mantener relaciones sexuales al menos 24 h. antes de la toma de
muestras.
◦ Se recomienda entregar y procesar las muestras en el laboratorio en las 2 h. tras la toma de éstas, no
debiendo superar en ningún caso las 24 h.

◦ Muestras de secreciones patológicas de las mamas → generalmente, se solicitan cuando existen


secreciones anómalas en periodos fuera de lactancia, siendo algunas del tipo:
◦ Secreciones lechosas (galactorrea).
◦ Secreciones patológicas → incluye cualquier tipo de secreción no lechsa, pudiendo contener sangre,
suero, células, pus, etc.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras de secreciones patológicas de las mamas → generalmente, se solicitan cuando existen
secreciones anómalas en periodos fuera de lactancia, siendo algunas del tipo:
◦ La mayoría de las infecciones bacterianas en tejido mamario se deben a S. aureus.
◦ El estudio de las secreciones mamarias incluye cultivos celulares y citología, debiendo ser éstas
últimas fijadas en alcohol etílico al 95% o con citospray.

◦ Muestras de exudados en ojos y oídos → principalmente se


indica la toma de exudados conjuntivales para determinar la existencia
de alguno de los agentes causantes de las tres enfermedades más
importantes de esta región: 1) Cándida tracomatisae; 2) N.
gonorrhoeae (gonococia en neonatos); 3) Moraxella lacunata
(conjuntivitis).
◦ La toma se debe realizar en ambos ojos.
◦ La muestra ha de procesarse antes de las 2 h. tras la toma. Conjuntivas bulbar (a) y tarsal (b).
◦ Chlamydia trachomatis requiere medio de transporte específico
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras de exudados del oído
◦ Estructura del oído:
◦ Oído externo → pabellón auricular + conducto
auditivo externo.
◦ Oído medio → membrana timpánica + huesecillos
◦ Oído interno → cóclea o caracol + aparato vestibular
+ endolinfa (valor diagnóstico).

◦ La toma de muestras de oído interno se realiza por


aspiración y requiere 2 tubos: 1 para cultivo de
microorganismos aeróbios y otro para cultivo de
anaerobios, ambas con medios de transporte apropiados,
siendo conservadas a tª ambiente.
◦ Las muestras deben procesarse inmediatamente.
Principales estructuras anatómicas del oído.
◦ Timpanocentesis: toma de muestras a través del oído
interno.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS

Tipos de lesiones cutáneas


▪ Lesiones 1as: aparecen sin que se
hayan observado lesiones previas.

▪ Lesiones 2as: aparecen a partir de


alguna patología previa de la piel.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
❖ Toma de muestras de lesiones cutáneas → dependiendo del tipo de lesión y de sus características, la
toma de muestras se llevará a cabo por alguno de los siguientes procedimientos:
❖ Muestras de exudados → úlceraciones, erosiones y excoriaciones [mediante hisopo o por punción-
aspirado (recomendable)].
❖ Muestras de líquidos contenidos en algún tipo de vejiga → vesículas / ampollas / pústulas (mediante
punción-aspirado).
❖ Muestras de lesiones secas → descamaciones y otras lesiones secas (mediante raspado).

◦ Muestras de exudados, abscesos y vesículas


◦ Muestras de exudados cutáneos
◦ El paciente no debe aplicar cremas, pomadas ni polvos antisépticos o calmantes en la zona afectada
en un intervalo de 48 h. previas a la toma del exudado.
◦ La muestra debe conservarse a tª ambiente, debiendo ser entregada para su procesado en el
laboratorio en las 2 h. posteriores a su toma, no excediendo el límite máximo de 24 h.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de exudados, abscesos y vesículas
◦ Muestras de abscesos
◦ Absceso: acumulación de pus en una cavidad previamente inexistente. Se distinguen varios tipos:
◦ Abscesos cerrados → sin conexión con el exterior. Tienden a enquistarse (agravamiento).
◦ Abscesos fistulizados → evolución del anterior, caracterizado por la aparición de una fístula.

◦ Generalmente, la toma de muestras fistulizadas es doble: por frotis de la zona afectada y drenaje
del exudado existente.
◦ Respecto al drenaje del exudado, se toman 2 muestras repartidas en dos tubos: uno para
microorganismos aeróbios y otro para anaeróbios.
◦ El exudado debe recogerse por aspiración a través de la piel íntegra, nunca a través de la
fístula, evitando recoger aquel visible en las inmediaciones exteriores de la lesión.
◦ La muestra debe conservarse a tª ambiente, debiendo ser entregada para su procesado en el
laboratorio en las 2 h. posteriores a su toma.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de exudados, abscesos y vesículas
◦ Muestras de vesículas → las vesículas contienen poco líquido a muestrear.
◦ La muestra se recoge por punción-aspiración. En caso de obtener muy poca cantidad de muestra, se
enviará directamente la jeringa al laboratorio, evitando el trasvase a un tubo.
◦ Cualquier irrigación del área debe notificarse al laboratorio.
◦ La muestra debe conservarse a tª ambiente, debiendo ser entregada para su procesado en el
laboratorio en las 2 h. posteriores a su toma, sin exceder el tiempo límite máximo de 24 h (15’ si
no se usó medio de transporte en el sistema de recogida).

◦ Muestras de micosis superficiales → micosis = enfermedad / inflamación producida por hongos.


◦ Sistémicas → afectan a tejidos internos del organismo.
◦ Superficiales → pueden ser de dos tipos:
Tipos de
micosis

Cutáneas: micosis en piel, pelo y uñas (son las más frecuentes).


Mucosas: cualquier mucosa del organismo es susceptible de padecer una micosis.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de micosis superficiales

◦ Muestras de micosis cutáneas → generalmente causadas por C. albicans y algunas especies de


hongos filamentosos.
◦ Muestras de la piel
◦ El paciente no debe aplicar cremas, polvos o pomadas antifúngicas en la zona afectada con una
previsión de 1 semana a la toma de muestras.
◦ Las muestras han de tomarse de la periferia de la micosis, evitando el centro de la lesión.
◦ La toma de las muestras dependerá de la zona:
En lesiones secas → raspado o frotis y recolección de células descamadas en placa de Petri.
Zona pilosa afectada → recogida de pelos en placa de Petri.
Lesiones húmedas → toma de muestra mediante hisopo estéril.
Vesículas → muestra de líquido por punción-aspiración.

o Las muestras deberán procesarse en las 2 h. siguientes a su toma.


MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de micosis superficiales

◦ Muestras de cabello → implica la toma de muestras del cuero cabelludo afectado, siendo
necesarios entre 5 y 8 pelos afectados que se depositarán en una placa de Petri, junto a
cualquier escama desprendida por raspado. La muestra deberá procesarse en las 2 h. siguientes a
su obtención.

◦ Muestras de uñas → requiere la previa retirada tres días antes de cualquier esmalte que
pudiera estar presente en la zona afectada, así como la no administración de antifúngicos en las
dos semanas previas a la obtención de la muestra (en caso de micosis sistémica) o en los 2 a 6
meses previos (en caso de micosis local).
o Las muestras deberán procesarse en las 2 h. siguientes a su toma.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de micosis en mucosas → la toma de muestras de hongos en mucosas sigue el patrón de
procedimientos estándar para otras micosis, con la salvedad de
que no se efectuarán pruebas para hongos dermatófilos
(requieren queratina para su correcto metabolismo y ésta no se
encuentra presente en estas zonas).

Micosis en la mucosa del paladar superior.

◦ Muestras oftalmológicas y óticas → requieren hisopos sin algodón (pueden aportar falsos
positivos en el estudio de hifas fúngicas).
◦ Generalmente, se hacen extensiones sobre portaobjetos que se envían al laboratorio previa fijación
en seco o con alcohol 70º.
◦ Las muestras oftalmológicas se toman de las dos conjuntivas (bulbar y tarsal) y de ambos ojos.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de la mucosa nasal y oral → la toma se realiza por raspado externo de la lesión y
el hisopo se envía al laboratorio sumergido en
solución salina estéril.

◦ Muestras de la mucosa vaginal → se realizan dos tomas por raspado con hisopos, uno de
los cuales se deposita en un tubo con solución salina estéril y el otro hisopo en un tubo con
solución KOH al 10%.
◦ Muestras de la mucosa genital masculina y perianal → la toma se realiza por raspado con
hisopo cuando se aprecian secreciones y por punción-aspiración cuando hay presencia de
vesículas.

◦ Nota: en todos los casos de micosis en mucosas descritos, las muestras se envían y procesan
inmediatamente en el laboratorio.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Estudios Realizados en Muestras de Micosis
◦ La detección, identificación y estudio de los hongos presentes en una muestra se lleva a cabo a través de
alguna de las siguientes pruebas:

◦ Examen microscópico directo → la estructura filamentosa de los hongos, a menudo formando redes de
hifas, es muy característica y relativamente fácil de identificar. En ocasiones, las muestras con altas
concentraciones de queratina se suelen aclarar mediante la adición de una solución tamponada de
KOH entre el 10 – 40%.
◦ Observación por fluorescencia → la iluminación con lámparas de luz negra o de revelado de
fluorescencia puede mostrar la presencia de ciertos hongos dermatófitos productores de un pigmento
fluorescente. Es importante tener en cuenta, sin embargo, que la ausencia de fluorescencia no determina
la ausencia de dermatófitos.
◦ Cultivo → la realización de siembras y cultivos microbiológicos y fúngicos constituye una prueba de
estudio de gran valor diagnóstico para la determinación de la especie tratada, al tiempo que permite la
consecución de otros ensayos experimentales.

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