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MUESTRAS BIOLÓGICAS
U NIDAD D IDÁCTICA 8
M UESTRAS DE E XUDADOS Y L ESIONES C UTÁNEAS
Daniel Brell Martín
Ldo. Biología y Bioquímica
Ciclo Formativo de Grado Superior en Anatomía Patológica y Citodiagnóstico
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Los Hisopos o Torundas
❖ Hisopos o torundas → instrumentos que constan de un soporte longitudinal que tiene en su extremo un
material absorbente (cepillo), con el que se recoge la muestra.
❖ Dado que la mayoría de las muestras solicitadas para exudados se destinan a estudios microbiológicos, es
importante tener en cuenta que:
❖ la muestra podría desecarse fácilmente debido a su pequeño tamaño y las condiciones de obtención.
❖ La muestra podría ser absorbida por el propio hisopo o podría afectar a la supervivencia y estabilidad de las
células recogidas con él, dependiendo del material en que esté fabricado.
◦ Tipos de hisopos → dependiendo del diseño y los materiales empleados distinguimos varios tipos:
◦ En función del material → encontramos hisopos de algodón, alginato cálcico, dacrón y rayón.
◦ Dependiendo del diseño → el soporte de los hisopos suele ser de material plástico y rígido, o flexible de
filamento maleable.
◦ Dependiendo del sistema de transporte → algunos hisopos se introducen en un recipiente estéril, mientras
que otros incorporan bolsas estériles, en ambos casos con conservantes adecuados, e incluso, a menudo,
medios de cultivo estándar que posibiliten la viabilidad de las muestras microbiológicas (agar-gel o en
forma líquida).
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Los Hisopos o Torundas
❖ Hisopos o torundas
o Dependiendo del sistema de transporte:
o Sistemas de hisopos y torundas para el transporte de muestras anaerobias
o Tubo o frasco ampolla → contienen un medio semisólido, una atmósfera al 5% de CO2, un agente
reductor y un indicador que proporcione una señal visual de anaerobiosis.
o Tubo → se utiliza generalmente para la inserción de muestras en hisopos.
o Frasco ampolla → se utiliza para inoculación de muestras líquidas.
o Hisopo con sistema de cubierta plástica → el tubo o cubierta plástica incluye un hisopo y contiene
medio Cary-Blair, Amies de transporte o prerreducido
(PRAS).
o Sistema Culturette® → incluye un frasco ampolla o cámara separada por una membrana que
contiene sustancias químicas que generan catalizadores de CO2 y agentes
desecantes que atrapan el O2 residual que pueda quedar dentro del
sistema.
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ La Aspiración
❖ La aspiración incluye todos los procedimientos diseñados para la obtención de
muestras procedentes de regiones corporales conectadas con el exterior del
organismo (Ej: tráquea, bronquios, etc.)
❖ El procedimiento estándar requiere la introducción de un catéter hasta la zona
de interés, al cual se le acopla una jeringa que posibilita la succión del líquido
a aspirar.
❖ Algunos sistemas de aspiración de las vías respiratorias incluyen:
◦ Lavado broncoalveolar (BAL) → consiste en la inyección de una
cantidad variable de suero salino que “lava” el segmento pulmonar y
que posteriormente se recoge por medio de una aspiración. Este tipo
de muestra se compone de un material mucho menos denso que el
esputo.
◦ Aspirado broncoalveolar (BAS) → la aspiración se lleva a cabo
directamente del árbol bronquial, al mismo tiempo que se procede con
la broncoscopia. El material obtenido es denso y espeso,
RECOGIDA DE MUESTRAS SUPERFICIALES
❖ Otros Métodos de Recogida
❖ Es recomendable usar jeringas especiales o hisopos
conectados a sistemas aislantes de O2 cuando el objeto
del estudio sea determinar la posible presencia de
bacterias anaeróbias.
❖ Las lesiones cutáneas producidas por agentes fúngicos
requieren procedimientos específicos de toma de
muestras, principalmente consistentes en raspados
superficiales que recojan células descamadas Hifas de hongo, anchas y sin septos,
tomadas del tracto traqueal inferior.
Tinción G-G (Gomori-Grocott) 100x.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
❖ Exudado → filtración de líquido procedente de los vasos sanguíneos de un tejido.
❖ Trasudado → filtración de plasma sanguíneo, de bajo contenido en proteínas y fracción forme, que
a diferencia del exudado no se debe a un proceso inflamatorio, y cuyo agravamiento
da lugar a un edema.
❖ Generalmente, la presencia de un exudado constituye un indicativo de la existencia de un proceso
inflamatorio en el interior del organismo.
❖ Existen zonas concretas del organismo de las cuales pueden extraerse muestras de exudados útiles con
fines diagnósticos:
◦ Muestras de exudados de la zona faringoamigdalina: útiles para estudios que conlleven la siembra y
cultivo (y por tanto, la determinación de la presencia) de Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae,
Arcanobacterium heamolyticum, Corynebacterium diphteriae, Haemophilus influenzae, etc.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto respiratorio → generalmente, recogidas de las zonas faringoamigdalina,
nasofaríngica y nasal.
MUESTRAS DE EXUDADOS
❖ Los Exudados
◦ Muestras del tracto respiratorio → generalmente, recogidas de las zonas faringoamigdalina,
nasofaríngica y nasal.
◦ Generalmente, la toma de muestras fistulizadas es doble: por frotis de la zona afectada y drenaje
del exudado existente.
◦ Respecto al drenaje del exudado, se toman 2 muestras repartidas en dos tubos: uno para
microorganismos aeróbios y otro para anaeróbios.
◦ El exudado debe recogerse por aspiración a través de la piel íntegra, nunca a través de la
fístula, evitando recoger aquel visible en las inmediaciones exteriores de la lesión.
◦ La muestra debe conservarse a tª ambiente, debiendo ser entregada para su procesado en el
laboratorio en las 2 h. posteriores a su toma.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de exudados, abscesos y vesículas
◦ Muestras de vesículas → las vesículas contienen poco líquido a muestrear.
◦ La muestra se recoge por punción-aspiración. En caso de obtener muy poca cantidad de muestra, se
enviará directamente la jeringa al laboratorio, evitando el trasvase a un tubo.
◦ Cualquier irrigación del área debe notificarse al laboratorio.
◦ La muestra debe conservarse a tª ambiente, debiendo ser entregada para su procesado en el
laboratorio en las 2 h. posteriores a su toma, sin exceder el tiempo límite máximo de 24 h (15’ si
no se usó medio de transporte en el sistema de recogida).
◦ Muestras de cabello → implica la toma de muestras del cuero cabelludo afectado, siendo
necesarios entre 5 y 8 pelos afectados que se depositarán en una placa de Petri, junto a
cualquier escama desprendida por raspado. La muestra deberá procesarse en las 2 h. siguientes a
su obtención.
◦ Muestras de uñas → requiere la previa retirada tres días antes de cualquier esmalte que
pudiera estar presente en la zona afectada, así como la no administración de antifúngicos en las
dos semanas previas a la obtención de la muestra (en caso de micosis sistémica) o en los 2 a 6
meses previos (en caso de micosis local).
o Las muestras deberán procesarse en las 2 h. siguientes a su toma.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de micosis en mucosas → la toma de muestras de hongos en mucosas sigue el patrón de
procedimientos estándar para otras micosis, con la salvedad de
que no se efectuarán pruebas para hongos dermatófilos
(requieren queratina para su correcto metabolismo y ésta no se
encuentra presente en estas zonas).
◦ Muestras oftalmológicas y óticas → requieren hisopos sin algodón (pueden aportar falsos
positivos en el estudio de hifas fúngicas).
◦ Generalmente, se hacen extensiones sobre portaobjetos que se envían al laboratorio previa fijación
en seco o con alcohol 70º.
◦ Las muestras oftalmológicas se toman de las dos conjuntivas (bulbar y tarsal) y de ambos ojos.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Las Lesiones Cutáneas
◦ Muestras de la mucosa nasal y oral → la toma se realiza por raspado externo de la lesión y
el hisopo se envía al laboratorio sumergido en
solución salina estéril.
◦ Muestras de la mucosa vaginal → se realizan dos tomas por raspado con hisopos, uno de
los cuales se deposita en un tubo con solución salina estéril y el otro hisopo en un tubo con
solución KOH al 10%.
◦ Muestras de la mucosa genital masculina y perianal → la toma se realiza por raspado con
hisopo cuando se aprecian secreciones y por punción-aspiración cuando hay presencia de
vesículas.
◦ Nota: en todos los casos de micosis en mucosas descritos, las muestras se envían y procesan
inmediatamente en el laboratorio.
MUESTRAS DE LESIONES CUTÁNEAS
❖ Estudios Realizados en Muestras de Micosis
◦ La detección, identificación y estudio de los hongos presentes en una muestra se lleva a cabo a través de
alguna de las siguientes pruebas:
◦ Examen microscópico directo → la estructura filamentosa de los hongos, a menudo formando redes de
hifas, es muy característica y relativamente fácil de identificar. En ocasiones, las muestras con altas
concentraciones de queratina se suelen aclarar mediante la adición de una solución tamponada de
KOH entre el 10 – 40%.
◦ Observación por fluorescencia → la iluminación con lámparas de luz negra o de revelado de
fluorescencia puede mostrar la presencia de ciertos hongos dermatófitos productores de un pigmento
fluorescente. Es importante tener en cuenta, sin embargo, que la ausencia de fluorescencia no determina
la ausencia de dermatófitos.
◦ Cultivo → la realización de siembras y cultivos microbiológicos y fúngicos constituye una prueba de
estudio de gran valor diagnóstico para la determinación de la especie tratada, al tiempo que permite la
consecución de otros ensayos experimentales.