Actinomicetos

De toda esta familia, veremos solamente las mycobacterias y nocardia.

Características:

• Los actinomicetos son bacterias Gram-

positivas filamentosas y ramificadas, producen un
micelio similar a un hongo que se fragmenta o divide
en formas de bacilos o cocoides cortos.
• Crecen más lentamente que otras bacterias
aerobias y anaerobias facultativas (nocardia demora
por lo menos 48 hrs y micobacterias de 10 días hacia
arriba).
• No poseen núcleo rodeado por membrana, no
poseen mitocondrias,
• Crecen bien en medios especiales para el
desarrollo de Hongos y Micobacterias (lowenstein-
jensen).
• Ampliamente distribuidos en la naturaleza, suelo, sedimentos marinos, heces.
• Proporcionan importantes antibióticos (Vancomicina, Macrólidos, Etc.) Se clasifican como patógenos
oportunistas.
• No se suele utilizar tinción de gram para estos microrganismos, pero si es posible visualizarlos con ella.
La tinción que se usa es acido-alcohol-resistente.
• Existen 2 tipos de tinción acido-alcohol-resistente: Ziehl-neelsen (para mycobacterias), Kinyoun (para
nocardia). La diferencia entre estas es que en ziehl-neelsen se calienta la lámina y en kinyoun no, y que
el ácido usado para la decoloración es más concentrado en ziehl-neelsen que en kinyoun.

Nocardia:

• existen artas especies (87) y en general todas son oportunistas, gran parte de ellas producen
infecciones pulmonales ya sea, por ejemplo pulmonares crónicas (farcinica), sin embargo otras
producen infecciones subcutáneas y micetomas (pequeño tumor en piel que causa enfermedad
infecciosa crónica y progresivamente destructiva que afecta a la piel, el tejido subcutáneo y el hueso)
• La Nocardiosis afecta a pacientes inmunodeprimidos, particularmente a pcte. con tto. Corticosteroide
prolongado (ej: pacientes trasplantados)
• Patógeno intracelular facultativo, inmóviles, no capsulados, no producen esporas, producen catalasa,
superóxido dismutasa.

Las especies más importantes son:

- Nocardia farcinica (es la más importante)

- Nocardia abscessus
- Nocardia nova
- Nocardia brasiliensis
- Nocardia pseubrasiliensis
- Nocardia asteroides

• La Nocardiosis suele comenzar en las vías respiratorias de estos pctes. inmunocomprometidos, debido a la
inhalación del MO, produce un cuadro que inicialmente puede ser respiratorio (fiebre, tos, esputo
mucopurulento, infiltración pulmonar), como una neumonía, pero mientras más inmunocomprometido el
paciente más expuesto está a que el MO se disemine en su cuerpo.
• La infección diseminada se origina por lo general en un foco pulmonar más que en
un foco cutáneo, con tasa de mortalidad global entre 7 - 44%.
• Las infecciones cutáneas (micetoma) se contagian por inoculación, pueden
asemejarse a una celulitis, queratitis, etc. No siempre son diagnosticadas ya que a
menudo son autolimitadas y no estudiadas microbiológicamente.
• La mortalidad es relativa 7-44% según la inmunosupresión del pcte.

Diagnostico: GRAM

• Bacilos gram positivos ramificados.

• Crecen bien en ASC, A.Sabouraud (sin los atb CAF), Middlebrook, BHI (cerebro
corazón), en temperaturas de 25 a 45º C, con CO2 al 10%. El crecimiento puede ir
de 3-4 días a 14 días.
• Colonias olor humedad, parcialmente acido alcohol resistente, Kinyoun (+), crecen
en presencia de lisozima (se ven de color rosado).
• Tienen en su pared ácidos micólicos en baja cantidad.
• Se utilizan pruebas bioquímicas, Microscopia, Cromatografía, Maldi Tof, Técnicas
Nocardia en BHI

moleculares. Kinyoun

• Identificación definitiva: Análisis de la secuencia del gen RNAr 16S:

• permitió la identificación de muchas de las nuevas especies Gold Standard (Laurent
et al, 1999)
• Otras pruebas: PCR-RFLP , secuenciación de otros genes.

Tratamiento esta dado en base a SXT, Cefalosporina + inhi.

 Micobacterias:

• Su incidencia es zig-zag, aumenta y baja contantemente. Sin embargo, se viene trasmitiendo desde la
antigüedad.

Mycobacterium tuberculosis:

• Plaga o peste blanca Epidemia de TBC en Europa siglos XVII – XIX.

• Incidencia TBC desplaza a la lepra, debido a las condiciones de hacinamiento, pobreza, jornadas de trabajo
interminables, humedad de viviendas, pobre ventilación.
• La principal vía de transmisión es la respiratoria.
Acontecimientos:
• 1865: Jean Antoine Villemin: Médico y profesor francés TB – enfermedad infecciosa
• 1882: Robert Koch: Médico y microbiólogo alemán: Aislamiento, Cultivo y reproducción de la enfermedad.
• 1884: Edward Trudeau: Médico estadounidense. Sanatorio y laboratorio, USA.

Tuberculosis en el mundo: 1/4 población mundial está infectada actualmente por M.TBC, Cada segundo se
produce una nueva infección por TBC. Y es la primera causa de muerte por infección en adultos. (solo detrás del
Covid)
• Cada paciente con TBC activa (paciente que tose) infecta a 10 - 15 individuos en un año.
• Afecta más a hombres que a mujeres.
• En 2017, el 87% de los nuevos casos de tuberculosis se registraron en los 30 países con alta carga de la
enfermedad. Ocho de ellos acaparan dos tercios de los nuevos casos de tuberculosis: la India, China,
Indonesia, Filipinas, Pakistán, Nigeria, Bangladesh y Sudáfrica.
• Tuberculosis en chile: “La tasa de incidencia de tuberculosis en Chile ha permitido al país estar considerado
entre los países en etapa de eliminación de la enfermedad según la clasificación de la OMS. Cifra bastante
baja comparada con la situación de Argentina, que prácticamente la triplica; Bolivia, que la multiplica por 11;
y Perú, que lo multiplica por 9. En el año 2021, la tasa de incidencia de tuberculosis en Chile fue de 13,3
casos por 100.000 habitantes. 77,5% de los casos corresponden a formas pulmonares, y 22,5% a
extrapulmonares.
• En 2020-2021 la tasa de incidencia disminuyo debido a las cuarentenas, covid, no notificación, etc.
• En Arica, Tarapacá, Antofagasta (norte) hay más casos de tuberculosis, debido a que está en contacto con la
frontera de Bolivia y Perú, países que tienen 10 veces más tuberculosis que chile.
• Prevalencia de tuberculosis:
Clasificación de Mycobacterias:
Se agrupan en tres grandes grupos:
• Mycobcyerium tuberculosis complex: corresponde al
complejo tuberculosis, que está compuesto por todos los
microrganismos que causan enfermedades, como la
tuberculosis. Solamente el M. tuberculosis causa la tuberculosis
clásica.
• Mycobacterium no tuberculosas (MOTT):
mycobacterias que no forman parte del grupo complex, no
causan tuberculosis, sino que causan un micobacteriosis (la
más importante es M. avium-intracelullare)
• Mycobacterium leprae complex: causa lepra.

Sin embargo, hoy día se están reclasificando las mycobacterias y

se están clasificando en cinco grupos.

Mycobacterium tuberculosis complex→ mycobacterium tuberculosis

✓ Bacilos acido alcohol resistentes (Porque tiene muchos ácidos micólicos en su pared, lo que lo hace resistente
al alcohol acido, por eso se tiñe con ziehl neelsen que es acido fuerte.)
✓ Multiplicación lenta (tg 20 horas)
✓ 60% peso seco: Lípidos (por la cantidad de lípidos es impenetrable al teñir, para lograrlo se debe calentar,
para “diluir” la “grasa” y que entre el colorante)
✓ Intracelular facultativo, Aeróbico
✓ Inmóvil
✓ Medios especiales para su desarrollo (lowenstein-jensen).
✓ No produce toxinas
✓ Resiste frío y desecación
✓ Trasmisión por vía aérea (partículas de Wells) es la principal vía de transmisión, Cutáneo-mucosa, vía
transplacentaria.

• Es sensible a la luz solar y la luz difusa, luz uv, etc. sensible a

medios de esterilización como el cloro. La gracias que tiene la
estructura de pared de la micobacteria es que son
mayoritariamente lípidos del tipo acido micólico, que le da la
característica de ser acido alcohol resistente, que nos permite
teñirlos con la tinción de zhiel neelsen.
Factores de virulencia:

• Pared celular gruesa rica en lípidos. (es resistente)

• Estado de latencia de días o años (bacilos durmientes (bacteriostasis → se pudo haber infectado y no tener
idea, y generarse la enfermedad en años posteriores; recordar que infección es distinto que enfermedad.)).
• Multiplicación intracelular.
• Producción de ureasa y Glutamino sintetasa, alcalinizan el medio y evitan acción de lisosomas que requiere
Ph ácido para actuar (4,5), así se evita la unión fagosoma - lisosoma. Si el lisosoma no actúa la micobacteria
no se rompe.
• Trehalosa 2 sulfato (glicoproteína de pared), que evita la maduración del lisosoma.
• Los ácidos micólicos pueden formar en su parte más externa el factor cordonal.

Factor cordonal: se conforma de sulfato y Trehalosa 6,6 dimicolato.

• Es el factor de virulencia más importante.

• Genera que haya un crecimiento serpenteante en los medios líquidos.
• Inhibidor de la migración de PMN en el sitio de colonización.
• Toxicidad para los leucocitos.
• Rol en el desarrollo de lesiones granulomatosas.
• Interferencia en la función mitocondrial.

Proceso de infección

Hay un individuo infectado que habla, tose y tira las

mycobacterias que son inhaladas por un individuo que era no
infectado y se transforma en infectado.

Esta persona infectada puede desarrollar la enfermedad, o

puede que se infecte, pero no se enferme (estado de latencia).

La puerta de entrada generalmente es la vía aérea por las gotitas

de un tamaño inferior a 5 micras, una vez que entra la
micobacteria al organismo por la vía respiratoria se ubica a nivel
de los alveolos pulmonares y los ganglios linfáticos regionales y
de ahí pasa la parte respiratoria, si pasa la parte respiratoria es
contenida o no contenida, si no es contenida, se cursa con un proceso de tuberculosis pulmonar y después
podría pasar al torrente sanguíneo, generándose una bacilemia, y una
diseminación a cualquier órgano, por eso hay pacientes con tuberculosis
en cualquier parte del cuerpo (Pleura, bazo, hígado, riñones, meninges,
hueso, articulaciones ,etc.) Y por último una vez que uno está con una
bacilemia, también podría a través de la misma vía respiratoria seguir
tosiendo e infectar a otros individuos. **(bacilemia: bacilos en sangre)
En los primeros 14 días de infectado, hay una respuesta inmune celular inespecífica, donde se ataca a todo, por
lo tanto, el mycobacterium ingresa y es capaz de llegar a la vía respiratoria a nivel de los alveolos pulmonares,
acá empieza a ser atacado, y al
ser atacado por la célula
aparecen distintos tipos de
células, como dendríticas, de
tipo T, etc., y se empieza a
enquistar esta estructura por
acción del mismo organismo, lo
que se va formando es lo que se
llama granuloma.

Entonces, tenemos 2 posibilidades al inhalar mycobacterium tuberculosis:

• Inhalar y que nuestras células lo ataquen y eliminen completamente, por lo tanto, el individuo queda
sano. (me expongo y me sano completamente)
• pero, por otro lado, puede ocurrir que se inhale y se forme el complejo primario que es cuando llega a
los alveolos pulmonares y a los ganglios linfático regionales y se forma el granuloma, y ahí viene todo el
cuadro respiratorio que no es tan diferencial, debido a que no es un cuadro grave, sino un cuadro de
tuberculosis inicial, en donde puede ocurrir que; los bacilos sean contenidos y se queden en estado de
latencia, o que el paciente curse con el cuadro pulmonar, que siga desarrollándose hasta cursar con una
tuberculosis pulmonar, o incluso podría diseminarse. Una vez que se disemina el paciente puede ser
contenido en un estado de latencia o puede generar una tuberculosis hiperdiseminada que se llama
tuberculosis miliar (tipo de tuberculosis potencialmente letal que tiene lugar cuando una gran cantidad
de bacterias se desplazan por el torrente sanguíneo y se diseminan por todo el organismo) y lo más
probable es que el paciente va a fallecer. En Chile un 1,2% de pacientes mueren.

Una vez que se cursa con el cuadro, este

podría quedar en latencia por muchos años y
después reactivarse o nunca más volver a
hacerlo, por eso cuando los pacientes 65
años aparece con tuberculosis, nosotros en
la clínica no sabemos si el paciente tiene una
tuberculosis porque se infectó ahora o tiene
una tuberculosis porque se reactivó de hace
20-30 años atrás.
Cuadros clínicos:

• PULMONAR
• GANGLIONAR
• RENAL
• DISEMINADA (MILIAR)
• MENINGOENCEFALITIS
• OSTEOARTICULAR
• PIEL
• OTROS (ENDOMETRIAL, INTESTINAL, OCULAR)

MOTT (mycobacterias no tuberculosas o MNT)

De las mycobacterias no tuberculosas la más

importante es el mycobacterium avium complex,
porque es la que afecta principalmente a pacientes
inmunocomprometidos (los pacientes con VIH más
que morirse por tuberculosis se mueren por
micobacteriosis).

• Paciente bacilifero (bacilos en sangre; bacteriemia) en promedio infecta a 10-15 personas anualmente, de
los cuales el 5 -15% desarrolla la enfermedad en algún momento de su vida. NO TODOS LOS QUE TIENEN
EXPOSICION A LA TUBERCULOSIS, DESARROLLAN LA ENFERMEDAD, ES UN % MENOR.
• Cursar con VIH a la vez, aumenta (10% anual) el riesgo de desarrollar enfermedad tuberculosis.
• 50% de los pacientes no tratados fallecen.
• 25% se hace crónico
• 25% desarrolla cura espontánea (puede deberse a un componente genético, cursan con la enfermedad, pero
mejoran)

SINTOMAS DIAGNOSTICOS (SOSPECHA) de tuberculosis

• Tos y expectoración con más de 2 semanas de evolución. (podría ser tuberculosis o micoplasma
pneumoniae)
• Cuadros febriles prolongados.
• Baja de peso sin razón.
• Compromiso del estado general, debilitamiento físico.
• Lesiones óseas, Hematuria, Derrame pleural.
• Imagen radiológica pulmonar patológicas.
MUESTRAS para el diagnóstico:

• Expectoración (tuberculosis respiratoria)

• L.B.A. (tuberculosis respiratoria)
• Líquidos: LCR, Pleural, Pericárdico, Articular.
• Contenido gástrico
• Orina (6 muestras para Baciloscopia y cultivo de koch)
• Sangre (Hemocultivo) (bacilemia por tuberculosis)
• Tejidos, biopsias
• Deposición, Secreciones
• Piel

La muestra más mala para el diagnóstico es el LCR (poca estabilidad y cantidad) y orina.

Generalmente se toma solo 1 muestra o 2, pero en el caso de la tuberculosis renal, se toman 6 muestras de
orina en días consecutivos, porque los MO de la tuberculosis renal no se liberan en forma permanente, se libera
alternadamente, y además se encuentra en baja cantidad a nivel renal, y muchas veces se muere por el Ph de la
orina, por lo que debe procesarse inmediatamente (máx. 2-4 hrs)

METODOS DE DIAGNOSTICO

• Estudio Histológico (estudio de tejidos)

• Estudio Radiológico (Las imágenes en tuberculosis pulmonares no siempre demuestran patología y puede
aparecer estudio radiológico normal.
• Otras: PPD, ADA, Detección de anticuerpos (no se suele usar)
• Tinción ziehl neelsen
• Cultivos identificación sensibilidad
• Detección de antígenos
• Técnicas moleculares (pcr rt, probe, etc.)
• Test id rápidos (a partir de cultivos)

ESTUDIO HISTOPATOLOGICO

Es de gran utilidad en infecciones invasoras en muestras de tejidos.

✓ Reacción granulomatosa crónica

✓ Necrosis central caseosa
✓ Presencia de células gigantes multinucleadas
✓ Periferia linfocítica
✓ BAAR
PPD (prueba de la tuberculina):

La prueba de la tuberculina es un test cutáneo que se hace inyectando 0.1 ml de un derivado proteico purificado
de tuberculina en la cara anterior del antebrazo con lectura a las 24-48-72 Hrs. (+), se mide la induración
(levantamiento de piel), si mide >10mm sería un pcte con una probable. Esta técnica tiene muchas limitaciones
(operador, antígeno, reacciones cruzadas, lectura, interpretación, disponibilidad del test) por lo cual es muy
cuestionable.

• PPD cruza con la vacuna BCG (bacilo de mycobacterium bovis atenuado) solo
hasta 15 años después de la inoculación (por respuesta antigeno), por eso es
muy raro encontrar un niño menor de 15 años con tuberculosis.

TINCIONES

• Zhiel neelsen (baciloscopia)

• Auramina rodamina
• Microscopia Led

BACILOSCOPIA→ ZIEHL-NEELSEN

• Se debe solicitar en TODO paciente con síntomas respiratorios.

• De bajo costo y gran utilidad: Rápida, Fácil disponibilidad, Índice de infectividad
• Sensibilidad analítica: 5.000 a 10.00 bacilos / ml muestra. (requiere artos bacilos para verse +)
• Sensibilidad del test: 22-81%→depende de: Tipo de muestra, Población estudiada
• Un estudio en 2002-2008 indica que de 100 pcte que tenían baciloscopia +, solo el 31% tenían tuberculosis.
(por lo cual no basta con tener la baciloscopia + para diagnosticar a un paciente, se le debe sumar el cultivo)
• La muestra utilizada debe ser muy
mucopurulenta o mucosanguineolenta, no
sirve la saliva.
• Con esta muestra se coloca en un portaobjeto y
con un palito se distribuye, se observa con
aumento 100x.
• La sensibilidad de la baciloscopia comparada
con el cultivo es de 30%

Pasos:

• Fijar extendido
• Carbol fucsina 5’
• Aplicar calor, pero solo hasta emitir vapores
• Lavar con abundante agua
• Decolorar con alcohol ácido 2-3’ (grosor)
• Lavar con abundante agua
• Azul de metileno 1-2’
• Lavar y secar

(En el caso de Tinción de Kinyoun no se debe calentar, Ac. Débil, además en el caso de mycobacterium no se
tiñe.)

Lectura de Baciloscopia

➢ (-) : No se observan BAAR en 100 campos observados.

➢ + : <1 BAAR x campo en 100 campos observados (si en 100 campos veo 99 bacilos, significa que vi menos de
1 x campo)
➢ ++ : 1–10 BAAR x campo en 50 campos observados.
➢ +++: >10 BAAR x campo en 20 campos observados.
➢ Lo anterior es un informe semicuantitativo (aplica solo para muestras de expectoración directa).
➢ En baciloscopias cualitativas (para cualquier otro tipo de muestra que no sea expectoración, por ej. LCR,
lavado broncoalveolar, sangre, etc.) el informe es Positivo o Negativo.
➢ En caso de encontrar 1 - 3 BAAR, se debe rechequear (porque es dudoso), ya sea aumentando a 200
campos, tiñendo otra lámina, etc.
➢ Si veo 4 bacilos o más, ya se considera positiva.

AURAMINA-RODAMINA

Los ácidos micólicos poseen afinidad por fluorocromos (Auramina y rodamina). La gran
ventaja de esta tinción es que los frotis teñidos pueden ser reteñidos con tinción de ZN
o Kinyoun directamente sobre la tinción con el fluorocromo. Esto permite confirmar los
positivos y diferenciar las morfologías. Los bacilos se observan amarillo anaranjados
fluorescentes, con aumento 40x, lo que permite observar una mayor superficie del
frotis y en menor tiempo. Fluorescente → (Bacterias ácido-alcohol resistentes).
Comparación zhiel neelsen y auramina-rodamina:

• La recomendación actual de OMS es la utilización de microscopia fluorescente utilizando microscopia LED (

light-emitting diode), que se describe con una sensibilidad 10% > que el ZN.
• Ziehl neelsen se ve con aumento 100x, y auramina-rodamina se ve con 40x, por lo tanto, es más rápido
hacer la lectura.
• Ziehl neelsen es más confirmatorio y auramina-rodamina no, incluso, si la auramina-rodamina da positivo,
se debe confirmar haciendo un ziehl neelsen, la ventaja es que se puede usar la misma lamina.
• Si en un laboratorio llegan pocas muestras, conviene hacer ziehl neelsen primero, en cambio en un
laboratorio que lleguen muchas muestras, conviene hacer auramina-rodamina primero para hacer un
filtrado rápido primero (los 3 minutos que demora la tinción), informar los auramina-rodamina negativos, y
los que hayan dado positivos se les realiza la tinción de ziehl neelsen.
• Sin embargo, salió este año una normativa ministerial que dice que para realizar un diagnóstico de
tuberculosis se debe realizar un pcr, porque es más rápido y sensible.

CULTIVO (Método gold standard, porque permite trabajar con la cepa, realizar susceptibilidad, etc)

• Se considera el método de referencia porque permite la confirmación de género/especie y estudio

susceptibilidad a drogas.
• Se pueden cultivar las bacterias tuberculosas y las no tuberculosas (MOTT)
• Cultivos en medios sólidos y medios líquidos. Medio sólido permite la visualización de la morfología y
pigmentación de la colonia (MTB vs MOTT).
• El cultivo más utilizado es en medio sólido (Löwenstein Jensen, MIDDLEBROOK 7H10, MIDDLEBROOK
7H11) demora entre 30-60 días hasta positividad (crecimiento lento, por eso se han creado medios líquidos
q son más rápido). 35 – 37 °C.
• Los cultivos en medio líquido (MIDDLEBROOK 7H9) permiten un crecimiento más rápido, con un promedio
de 14 y 21 días, y van a métodos automatizados.
• Los medios MIDDLEBROOK líquidos tienen mejor sensibilidad y demora menos tiempo en crecer que el
Lowenstein Jensen
• La recomendación actual: dos medios, uno de ellos líquido.
• Ventaja→ Sensibilidad:
Medio sólido: 500 -1.000 bacilos/ml muestra (S 85%, E 98% ).
Medio líquido: 10 – 100 bacilos (S 90%)
• Es más sensible el cultivo solido (requiere de 500 a 1.000 bacilos para dar positivo) que la baciloscopia
(requiere de 5.000-10.000 bacilos x ml).
• Muestras sitios estériles → siembra directa (porque no hay nada que contamine la muestra)
• Muestras no estériles (ej.: expectoración viene acompañada de
microbiota) → descontaminar y sembrar (la más utilizada es de tipo
alcalino, al exponer la muestra a un Ph alcalino por un tiempo
establecido, se mata la microbiota, y los mycobacterium resisten

Métodos descontaminantes →

Medio Löwenstein Jensen: es verde porque

tiene verde de malaquita para inhibir al resto de
bacterias.

La colonia de mycobacterium tuberculosis es

como una miga de pan, amarilla marfil, seca y
rugosa.

*Mycobacterium abcessus y fortuitum son de

crecimiento rápido*

Revisión de los cultivos sólidos:

• La primera observación se hace a las 48 – 72 horas. Esto permite detectar contaminación por flora
asociada. Si esta alteración se presenta en todos los tubos sembrados se solicita nueva muestra.
• Las siguientes revisiones se hacen una /dos veces por semana.
• En caso de mantenerse negativo, a los 60 días se hace la última revisión y el informe definitivo.

Informe semi-cuantitativo en cultivos positivos (Medio solido)

El informe se hace basándose en la suma de los recuentos de las colonias desarrolladas en todos los tubos
sembrados. Las colonias típicas de M. tuberculosis son secas, rugosas y con una leve coloración marfil

• De 1 a 50 colonias: Se informa el número exacto de colonias desarrolladas (se cuentan).

• Colonias no confluentes: Más de 50 colonias (no se cuentan más de 50 colonias).
• Colonias confluentes: Incontables colonias.
• Ausencia de colonias: Se informa negativo.
• Contaminados todos los tubos: Se informa muestra contaminada, enviar nueva muestra.
• Colonias anormales en morfología o pigmentación: Se efectúa frotis de una colonia para confirmar la
presencia de BAAR y si es positivo se informa: “Cultivo positivo para micobacterias", el número de colonias y
se agrega "por morfología o pigmentación anormal (según corresponda) se confirmará identificación".

Identificación en líquidos por sistemas automatizados:

Son utilizados en el mundo para el cultivo de

mycobacterias en medio líquido.

MB/BACT (bioMérieux): se inocula la

muestra liquida y esta desarrolla CO2, que
acidifica el medio (cambio de pH) y el HCO3
se disocia completamente y libera protones,
cambiado el color de la membrana, al cual se
le atraviesa una luz que reflecta, según el
color se considera positivo o negativo. De
igual manera se debe hacer un gram a la
muestra.

MGIT 960 (Becton Dickinson): es el mismo

procedimiento, la única diferencia es que no
mide reflectancia de la luz, sino que mide
fluorescencia, pero también es por aumento
de C02.

Se puede informar negativo si a los 42 días no ha crecido nada.

Identificación de especie:

• Existen diferentes métodos, basados en cultivo, espectrometría de masas, PCR en tiempo real,
inmunocromatográfica, etc. La elección depende del tiempo, laboriosidad y costo.

Maldi tof (espectrometría de masa)

• Maldi ToF MS (Bruker daltonics, Inc., Germany)

• Vitek MS (Biomerieux, France)

Se basa en la separación de proteínas según relación

masa/carga, mediante un láser. Se puede hacer a partir de
medios sólidos y líquidos. Método rápido y de bajo costo.

Métodos moleculares: permite hacer un buen diagnóstico de mycobacterias. Por una directriz establecida por la
organización mundial de la salud, los métodos moleculares son los que deberían mandar en la identificación de
mycobacterium. En esta técnica se obtiene un gel que si da positivo indica que es mycobcterium, pero luego se
puede hacer un pcr que va dirigido sobre la girasa D, que indica que es mycobacterium y además el complejo al
que pertenece.

• Estudio de Mycobacterias por detección de ácidos nucleicos (PCR): para saber en detalle que
mycobacterias es se debe hacer una secuenciación (amplificación de todas las estructuras del genoma) del
fragmento que dio positivo para mycobacterium.

• Sondas en linea (LPA): Son las usadas en chile, están

diseñadas para detectar las mutaciones más frecuentes
asociadas con la resistencia a los fármacos de primera y
segunda línea contra la TB, y las secuencias específicas de
ADN del complejo M. tuberculosis de tipo natural

• Genotype: Se realiza a partir de cultivos sólidos y líquidos.

1. GenoType Mycobacterium CM: Identifica M.tuberculosis y 24 especies de MNT (MOTT)

2. GenoType Mycobacterium AS: Identifica 19 especies adicionales de MNT (MOTT)
3. El GenoType MTBC: Identificacion de miembros del complejo M. tuberculosis, diferencia M.tuberculosis,
M.africanum, M.microti, M.caprae, M. bovis y BCG.

• Test inmunocromatografico: existen 3 metodos aprobados por la FDA para diferenciar si tiene o no
tuberculosis, y si corresponde a Complex o MOTT. (detecta antigenos presentes), es mas eficiente en costo y
tiempo que el pcr, es rapida (15 minutos). Se hace a partir de un cultivo liquido o solido ya desarrollado.
1. BD’s MGIT TBc ID
2. SD Bioline TB Ag MPT64 Rapid Test (Korea)
3. Tauns’ Capilia TB (Japan)

• IGRA (interferon-gamma release assay): Existe el paciente que pudo haberse infectado y enfermado con el
complejo primerario de mycobacterium tuberculosis, pero luego se sano, y el mycobacterium quedo latente
en el tiempo. Para poder discriminar si alguien estuvo expuesto al mycobacterium tuberculosis se usa el test
IGRA que miden el IFN-ɣ liberado, debido a que, si el paciente tiene infección por M. tuberculosis, sus
linfocitos CD4+ y CD8+ reconocerán la tuberculina y
liberarán Interferón gamma. Es ideal para los pacientes
que alguna vez estuvieron expuestos, pero que en ese
momento presentan una tuberculosis latente.
1. Quantiferon
2. T-SPOT

Susceptibilidad a drogas antituberculosas: Usado para determinar la suscesptibilidad al tto.Existen distintas

plataformas, pero las mas utilizadasson el E-test, y las moleculares.
 Si en un laboratorio, se obtiene una cepa de mycobacterium, pero no
hay como continuar con la identificacion, debe ser derivada al ISP.

Si ya esta confirmado el tipo, y resulta ser el mycobacterium

tuberculosis, debe ser notificada obligatoriamente al ISP.

TRATAMIENTO Esta orientado a

• Prevenir diseminación de la infección.

• Prevenir las complicaciones.
• Romper la cadena de transmisión.
• Evitar la resistencia.
• Permitir la recuperación total del paciente.

Para el éxito del tratamiento de la TBC en todas sus formas, se debe cumplir 3 condiciones básicas:

• Tratamiento prolongado (dura 6 meses).

• Tratamiento asociado.
• Tratamiento supervisado (deben ir a tomarse al sapu las pastillas todos los dias).

✓ La rifampicina es por lejos el medicamento mas

importante para tratar la tuberculosis.
✓ Isoniazida
✓ Estreptomicina
✓ Pirazinamida
✓ Etambutol

Se toman varias drogas porque el mycobacterium

tuberculosis se puede “esconder” en cualquier organo o
tejido, por lo cual se debe atacar por todos lados, estas
drogas van a actuar a distintos lugares y a distintos ph.

el mecanismo de acción de la de las drogas tuberculosas varia,

algunas a nivel de la síntesis de la pared celular, a nivel de la
transcripcion del material genético y algunas actuan inhibiendo la
sintesis de la energía (atp)
Protocolo Standard de tratamiento antiTBC.

➢ Primera fase: Fase intensiva, diaria (2 meses, 50 Dosis), se usan cuatro medicamentos: Isoniacida,
rifampicina, pirazinamida, etambutol.

*estas drogas, en particular la rifampicina genera complicaciones hepaticas.

➢ Segunda fase: consolidación (4 meses, 32 Dosis) se usa Isoniacida y rifampicina 3 veces a la semana

QUIMIOPROFILAXIS: consiste en la administración de Isoniacida a personas con riesgo de desarrollar una

tuberculosis.

TUBERCULOSIS RESISTENTE A LOS MEDICAMENTOS

• Década 80s: La Tuberculosis Multidrogoresistente (MDR-TB) corresponde a aquella que presenta

resistencia simultánea a ISONIACIDA y a RIFAMPICINA, los dos medicamentos más poderosos contra la
tuberculosis.
• Década 90s: Se denomina tuberculosis extensamente resistente (XDR-TB) a la TB-MDR que además
presenta resistencia a quinolonas (moxifloxaxino, ciprofloxacino) y a algún agente inyectable de segunda
línea (amikacina) (ademas de la resistencia a isoniacida y rifampicina).
• También se menciona TB-XXDR o TB Totalmente Resistente a Drogas (TDR-TB).

¿Cuando realizar estudio de susceptibilidad ?

Desde el punto de vista terapéutico individual no tiene indicación en el momento de diagnóstico, por lo que no
se realiza rutinariamente. Sólo debe efectuarse en:

• Casos con antecedentes de uno o más tratamientos: recaídas y abandonos recuperados.

• Casos de tuberculosis asociada a VIH (+) o SIDA.
• En contactos de pacientes con Multirresistencia (MR) demostrada.
• En enfermos procedentes de países con alta prevalencia de TBC.
• En personal de salud con TBC confirmada bacteriológicamente.

PROFILAXIS

• La vacunación BCG (Bacilo de Calmette-Guérin, Bacilos de M. bovis vivos avirulentos (atenuados), la única
licenciada contra la TB en el mundo.
• Los estudios de estos dos científicos franceses en el Instituto Pasteur se iniciaron en 1908, subcultivando la
cepa cada 3 semanas por 13 años, totalizando 231 ciclos, hasta obtener el producto final. Posteriormente
transfirieron alguna de ellas a docenas de laboratorios a nivel mundial, cada uno de los cuales realizó
procesos propios de subcultivos en diferentes condiciones, siendo las cepas originales eliminadas.
• 1927 se introduce en Chile ( primeras vacunaciones orales), estuvo suspendida entre 1930 y 1947, sin
embargo, hoy en dia se aplica la vacuna en los primeros días del nacimiento (2 ó 3 días después de su
nacimiento), y protege hasta los 15 años, orientado a que en caso de darse la enfermedad, no sea tan grave
o mortal.
Lepra.

• Llamada tambien como enfermedad de Hansen (también conocida

como lepra) es una infección causada por Mycobacterium leprae.
• La lepra es una enfermedad descrita en la antigüedad.
• La enfermedad puede afectar los nervios, la piel, los ojos y el
revestimiento de la nariz (mucosa nasal). Las bacterias atacan los
nervios, que pueden hincharse debajo de la piel. Esto puede hacer que
las áreas afectadas pierdan la capacidad de sentir el tacto y el dolor,
lo que puede provocar lesiones, como cortes y quemaduras. Por lo
general, la piel afectada cambia de color y se vuelve: más claro o más oscuro, a menudo seco o escamoso,
con pérdida de sensibilidad, o rojizo debido a la inflamación de la piel.
• La lepra tiene dos formas comunes: la tuberculoide y la lepromatosa. Ambas formas ocasionan úlceras en la
piel. Sin embargo, la forma lepromatosa es más grave. Esta produce grandes protuberancias e hinchazones
(nódulos).

Si no se trata, los signos de lepra avanzada pueden incluir:

• Parálisis y mutilación de manos y pies.

• Acortamiento de los dedos de los pies y las manos debido a
la reabsorción.
• Úlceras crónicas que no cicatrizan en la planta de los pies.
• Ceguera (ulcera corneal)
• Pérdida de cejas.
• Desfiguración de la nariz.

Otras complicaciones que a veces pueden ocurrir son:

• Nervios dolorosos o sensibles.

• Enrojecimiento y dolor alrededor del área afectada.
• Sensación de ardor en la piel.

Situación en Chile

En Chile, no se han reportado casos de autóctonos de lepra en el continente. En el pasado hubo transmisión de
lepra en Isla de Pascua.

Actualmente sólo hay casos recuperados (no contagiosos), algunos de ellos con secuelas en tratamiento de
rehabilitación, sin riesgo de transmisión, pero son casos importados.

Diagnostico

• El diagnóstico de la lepra se hace por medio del examen clínico, apoyado por la presencia de M. leprae en
las baciloscopías practicadas en mucosa nasal, lóbulo de la oreja y lesión cutánea en el estudio
histopatológico de las lesiones.
• Detección molecular (PCR) para gen pra de M.leprae.
Tratamiento

• El tratamiento del paciente (caso índice), que dependerá de si se ha catalogado como paucibacilar o
multibacilar.
• El estudio de los convivientes, para determinar si alguien mas se encuentra infectado con el mycobacterium
leprae.

Se utiliza en paucibacilar: rifampicina + dapsona.

Multibacilar: rifampizina + dapsona + clofazimina.