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MICOBACTERIAS

ELOISA DAVILA ANDRADE R1 NEUMOLOGIA

MICOBACTERIAS
Familia Mycobacteriaceae Orden Actynomicetales. Las especies de este gnero presentan un elevado contenido de G+C (61-71%) en su ADN No forman esporas y no poseen flagelos ni cpsula. En cambio, poseen una pared celular gruesa y con un elevado contenido lipdico que supone el 60% del peso seco de la misma.

Mycobacterium
Bacilos aerobios ESTRICTOS Inmviles
No esporulados.
0,2-0,6 m ancho x 1,0-10 m de largo.

Pared celular rica en lpidos Hidrofobica


Resistente a desinfectantes y tinciones

Acido Alcohol Resistentes

Micobacterias
Crecimiento muy lento con un tiempo de multiplicacin de 15 a 18 horas en condiciones favorables. 4-8 hasta 2 aos de incubacin. Temperatura ptima de crecimiento general 3537C, Resistentes a la desecacin o congelacin, Rayos UV, pasteurizacin, y determinados productos xido de etileno, formaldehdo, etanol (70%), glutaraldehdo
(2%), cido peractico o perxido de hidrgeno estabilizado, entre otros, son eficaces contra estas bacterias.

Estructura
Pared cel compleja: Rica en lpidos. Responsable de muchas de las caractersticas de las bacterias: - Acido alcohol resistencia , crecimiento lento , resistencia a detergentes , ATBs comunes, antigenicidad , formacion de agregados o cordones

Factores de virulencia
Sobrevida a los fagocitos (acidificacion de fagosoma, produccion de amoniaco ) Glucolipidos abundantes (proteccion de formas toxicas de O2 ) Interferencia en la Activacion de MQ Lipoarabinomanano Antigeno 85 que se une a fibronectina Destruccion tisular ( acidos micolicos, muramil dipeptido)

CLASIFICACIN Y CONSIDERACIONES CLNICAS


Dentro del gnero se han descrito ms de 100 especies. Segn velocidad de crecimiento Morfologa y capacidad de pigmentacin de las colonias en medios slidos. As, se establecieron dos grupos clsicos: 1. micobacterias de crecimiento lento 2. Micobaterias de crecimiento rpido

Micobacterias
Crecimiento lento
Divisin cada 12-24 hrs 3y 8 semanas incubacin
M. Tuberculosis, M. Aviumintracellulare

Crecimiento rpido
3 dias
M. fortuitum, chenolae , abscessus

Sin crecimiento
M. Leprae

CLASIFICACION
Runyon Clasifico a las bacterias tuberculosas en 4 grupos :
segn su velocidad de crecimiento y su capacidad de producir pigmentos en presencia o ausencia de luz

CLASIFICACION DE RUNYON
Grupo I Fotocromogenicos producen pigmentos con la exposicin a la luz Grupo II Estocromogenicos producen pigmentos en luz y oscuridad Grupo III no pigmentadas y de crecimiento lento Grupo IV Crecimiento rapido

Micobacterias de crecimiento lento


Grupo I. Fotocromgenas Grupo II. Escotocromgenas Grupo III. No cromgenas

MNT de crecimiento rapido Grupo IV. No cromgenas

M. asiaticum M. kansasii M. marinum


M. simiae

M. flavescens M. gordonae M. scrofulaceum M. szulgai M.Xenopi

M. africanum M. avium M. bovis


M. gastri

M. abscessus M. chelonae M. fortuitum


M. mucogenicum

M. genavense M.Peregrinum M. intracellulare M.porcinum M. Malmoense M. Hemophilum M. nonchromogenicum M. shimoidei

Micobacterias.
Actualmente 115 especies
M. tuberculosis M.leprae Complejo M avium M Kansaii M fortuitum M chelonae M. Abbcessus

Con fines prcticos se establecen tres grupos en funcin de la entidad(es) nosolgica(s) producida(s):
a) Complejo M. tuberculosis
M. tuberculosis, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum y Mycobacterium microti

b) Lepra :
M. leprae

c) Micobacteriosis: producidas por el resto de micobacterias

distintas de las anteriores. micobacterias atpicas, ambientales, oportunistas o no tuberculosas

Poder patgeno diferente oportunistas o simplemente saprofitas. Reservorio ambiental Mayor resistencia

COMPLEJO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS


La identificacin de complejo M. tuberculosis es relativamente sencilla. La caracterizacin de especie mayor complejidad tcnica.
Ante la sospecha clnica y/o microbiolgica de M. bovis, se realiza una identificacin ms detallada para conocer la especie aislada. Diferencias basicas : Epidemiolgicamente el reservorio M. tuberculosis. M. bovis.
Presenta resistencia natural a la pirazinamida,

COMPLEJO MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS


MT :
ms importante es la va area, gotas aerosolizadas cargadas de bacilos, 1-5 m

Otros mecanismos de transmisin : a) va digestiva


b) va urogenital
c) va cutneo-mucosa d) inoculacin
e) va transplacentaria.

contagio inmunidad celular limita la infeccin.

5% evolucionara a una tuberculosis primaria


95% estado latente. 5% presentar la enfermedad aos despus como un proceso de reactivacin.

M. leprae :
Bacilo intracelular obligado, Indistinguible microscpicamente de otras micobacterias Cpsula externa gran cantidad de un glucolpido fenlico (PGL-1) especfico. Diagnstico : hallazgos clnicos, deteccin de bacilos cidoalcohol resistentes en tej de lesiones cutneas o del lbulo de la oreja No Crece en cultivos Deteccin de Abs IgM frente a : 95% de los casos con LL . 60% de los pacientes con LT lepromina no es de utilidad diagnstica. PCR til en formas lepromatosas, S 50 % en LT.

MYCOBACTERIUM LEPRAE
Agente causal de la lepra (enfermedad de Hansen)
Enfermedad crnica, granulomatosa que afecta piel y el SNP. Lepra tuberculoide (LT) Lesiones localizadas y escasos bacilos
demostrables.

Lepra lepromatosa (LL) forma avanzada y progresiva con

manifestaciones ms generalizadas, abundantes bacilos y ausencia de inmunidad celular que controle la infeccin.

Transmisin desconocida?????
50% contacto ntimo y prolongado Otras vas contacto con el suelo infectado y la intervencin de insectos vectores.

Las micobacterias no tuberculosas (MNT)


Incluyen a un importante grupo de agentes etiologicos de diversos padecimientos en humanos, dentro del cual destacan por su

frecuencia y virulencia:
- El complejo MAC (Mycobactyerium avium complex), - M. kansasii, M. ulcerans, M. abscessus, M. - chelonae y M. fortuitum.

MNT
(MNT) representan entre el 0.5 y el 30% del total de las enfermedades en humanos Afectan principalmente

inmunocomprometidos
Involucrando a distintos organos y tejidos, Neumonia, Linfadenitis cervical, Infecciones diseminadas asociadas a deficiencia inmunitaria de tipo celular

MNT
Enfermedad de Crohn con menor frecuencia, las infecciones de la piel, osteomielitis, otitis media e infecciones en heridas y en las incisiones por donde se insertaron cateteres.

MNT DE CRECIMIENTO LENTO: Complejo Mycobacterium avium


M. avium-intracellulare (CMA) Cocobacilos A-A-R no tuberculosos, crecimiento lento a 37C (10-21 das en medios de rutina). Colonias pequeas, lisas translcidas u opacas no cromgenas, Oportunistas aves , cerdos y al hombre. M. avium, M. intracellulare , Mycobacterium chimaera, (Mycobacterium especie X). Ante la imposibilidad de distinguir las especies con las pruebas bioqumicas habituales se recurri a la agrupacin y denominacin de complejo M. avium-M. intracellulare

MNT de crecimiento lentas no cromgenas


M. branderi (1995) Muestras respiratorias

Enfermedad pulmonar, tenosinovitis ulcerativa M. heidelbergense (1997) Ganglios linfticos Linfadenitis cervical en nios M. lacus (2002) Agua, tejido sinovial Bursitis postraumtica M. triplex (1996) Esputo, LCR, ganglios linfticos Enfermedad pulmonar crnica, infeccin diseminada en SIDA, linfadenitis cervical en nios

MNT de crecimiento lento escotocromgenas


M. bohemicum (1998) : Esputo, ganglios linfticos, agua
Linfadenopata en nios

M. celatum (1993) :

Muestras respiratorias, ganglios linfticos Enfermedad pulmonar, enfermedad diseminada en SIDA, linfadenopata en nios

M. conspicuum (1995) : Esputo, lquido pleural, piel, heces, sangre


Enfermedad diseminada en inmunodeprimidos

M. heckeshornense (2000) :

Esputo, biopsia de pulmn Enfermedad pulmonar (cavitacin e infiltrado)

MNT de crecimiento lento escotocromgenas


M. interjectum (1993)
: Ganglios linfticos Linfadenitis cervical crnica en nios

M. lentiflavum (1996) : Ganglios linfticos, esputo, aspirado

gstrico, biopsia disco vertebral, orina, sangre Linfadenitis cervical en nios, enfermedad pulmonar cavitada, espondilodiscitis, infeccin diseminada (SIDA)

M. palustre (2002)
Linfadenopata en nios

Esputo, ganglios linfticos, agua

M. tusciae (1999)

Ganglios linfticos, agua cervical en nios inmunodeprimidos

Linfadenitis

MNT de crecimiento lento fotocromgenas


M. intermedium (1993) Esputo Bronquitis crnica en inmunodeprimidos

MNT de crecimiento rpido no pigmentadas


M. bonickei (2004) Exudados, biopsias de hueso o de partes blandas Infecciones de herida quirrgica, osteomielitis, infecciones de heridas postraumticas M. brisbanense (2004) Exudados, biopsias de hueso o de partes blandas Infecciones de herida quirrgica, osteomielitis, infecciones de heridas postraumticas

MNT de crecimiento rpido no pigmentadas


M. goodii (1999) Exudados, biopsias, muestras
respiratorias . Celulitis, bursitis, osteomielitis, infecciones de heridas postraumticas, infeccin quirrgica, infeccin pulmonar crnica M. houstonense (2004) Exudados, biopsias de hueso o de partes blandas Infecciones de herida quirrgica, osteomielitis, infecciones de herida postraumticas

MNT de crecimiento rpido no pigmentadas


M. immunogenum (2001) Sangre,
exudados, muestras respiratorias, raspado corneal, lquido sinovial, Infecciones relacionadas con catter, infeccin diseminada, queratitis, infeccin respiratoria, artritis M. mageritense (1997) Esputo, sangre, exudados Infecciones quirrgicas y de catter, sinusitis grave

MNT de crecimiento rpido no pigmentadas


M. neworleansense (2004) Exudados,
biopsias de hueso o de partes blandas Infecciones de herida quirrgica, osteomielitis, infecciones de herida postraumticas M. septicum (2000) Sangre Bacteriemia relacionada con catter M. wolinskyi (1999) Exudados, biopsias Celulitis, osteomielitis, infecciones de heridas quirrgicas

MNT de crecimiento rpido fotocromgenas


M. novocastrense (1997) Biopsia cutnea Lesin granulomatosa cutnea en nio

Tincin Ziehl- Neelsen para teraputica temprana.


Los mtodos ms utilizados para determinar la AAR de las micobacterias son:

Ziehl-Neelsen
a) Colorante primario : fucsina fenicada (carbolfucsina) como colorante primario. Ocular objetivo de inmersion (x1000)

Auramina Rodamina
b) Colorante primario : fluorocromos LUV . ( x250)
Aumento microscpico requerido y por tanto el nmero de campos a visualizar. Mayor rapidez de lectura y un menor cansancio del microscopista, Recomendado en los laboratorios con un gran nmero de muestras.

Microscopia
Deben existir entre cinco mil a diez mil bacilos por ml. de expectoracin para que tengan un 50% de posibilidades de ser detectados al microscopio; slo cuando el numero de bacilos alcanza a ms de 100.000 por ml. de expectoracin, podemos esperar que las baciloscopias sean consistentemente positivas . Utilizando la tincin fluorescente, este nmero puede ser tan bajo como 1.000 bacilos por mL . La presencia de bacilos AAR en el examen directo, no siempre garantiza que se trate de un bacilo tuberculoso, pues puede tratarse de una micobacteria atpica o de otro microorganismo que comparta la caracterstica de cido alcohol resistencia (M. leprae, Actinomyces, Nocardia).

Sensibilidad 50 80% y la especificidad es virtualmente del 100% .

CULTIVO
Contina siendo fundamental para el diagnstico especfico ha demostrado ser ms sensible (10-10 bacterias viables/ml) El aislamiento Identificacin de la especie Sensibilidad frente a los A Monitorizacin del tratamiento y curacin Existen medios selectivos Y no selectivos

No selectivos, lquidos y, a ser posible, la combinacin de uno lquido y uno slido.

CULTIVOS
MEDIOS SLIDOS.
Medios slidos con huevo. Lwenstein-Jensen, Petragnani e Coletsos Medios slidos con agar. Sintticos, tipo 7H10 y 7H11 de Middlebrook, transparentes , permiten deteccin rpida del crecimiento micobacteriano (10-12 das) se pueden utilizar para las pruebas de sensibilidad a los ATBs Medios selectivos. No rutinarios con o sin huevo con agentes ATBs . Debe usarse con un nos selectivo Medios especiales. M. haemophilum, donde un suplemento de hemina, hemoglobina o citrato amnico frrico es necesario.

CULTIVOS
medio lquido (7H9 de Middlebrook) y suplementos antibiticos y de enriquecimiento, al que se le aade en la parte superior de la botella diversos medios slidos (agar chocolate, Lwenstein-Jensen, 7H10 7H11 de Middlebrook). MEDIOS LQUIDOS: Medios muy enriquecidos Mayor y mas rapido crecimiento. No se puede visualizar la morfologa de la colonia ni valorar los posibles cultivos mixtos. 7H9 de Middlebrook, Dubos, Youmans, Proskauer-Beck.

MEDIOS BIFSICOS. Septi-Chek botella con un

Cultivo
El cultivo. Tcnica que tiene mayor sensibilidad (7090%), ya que basta que existan ms de 10 bacilos/ ml., en muestras digeridas y concentradas, para que sea positivo. Entorpecido por su lento crecimiento. Un promedio de incubacin de 4 semanas en medios convencionales se requiere antes que pueda ser detectado crecimiento.

Sistemas de deteccin automtica o semiautomtica.


Detecta automticamente el crecimiento midiendo la cantidad CO 2 producido por el metabolismo de los substratos (Ac. grasos) marcados con C.

BACTEC 460 TB (80s) istopos radioactivos, ESP II System MB/BacT ALERT 3D MGIT 960. Sistema BACTEC serie 9000. La automatizacin, la sencillez y la desaparicin de la posible contaminacin cruzada al tener mtodos de deteccin que no implican una manipulacin del contenido de los tubos.

la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (RCP)


Amplificacin de cidos nucleicos Tcnica muy til para el diagnstico bacteriolgico de la
tuberculosis Permite un diagnstico rpido, sensible y especfico, a travs de la identificacin del ADN o ARN presente en las muestras clnicas Resultados a las 24 horas La E y S excede a la de la microscopa.

S 74-91% y E entre 95-100% .


MTD (Amplified Mycobacterium tuberculosis Direct Test) de Gen-Probe AMPLICOR de Roche Diagnostic Systems, Inc Sy E 76.4% y 99.8%
No solo a partir de muestras respiratorias sino tambin a partir de muestras de fluidos y tejidos corporales .

ELISA
El enzimo inmunonalisis tcnica rpida, automatizable til en tuberculosis extrapulmonar Reduce a 12 das el tiempo necesario para detectar el M tuberculosis. Sensibilidad de 50% y una especificidad de 88% ambas inferiores a la basiloscopa.

American Thoracic Society (ATS): pacientes sintomticos con infiltrados, enfermedad nodular o cavitaria, o presencia de bronquiectasias o pequeos ndulos puestos en evidencia mediante tomografa computarizada de alta resolucin, que presentan tres cultivos positivos de esputo o lavado bronquial con baciloscopias negativas o dos cultivos positivos y una baciloscopia positiva en el perodo de 1 ao6. British Thoracic Society (BTS): cuando se obtienen cultivos positivos en muestras de esputo obtenidas con una diferencia al menos de 7 das12.