SUSPENSION DE ERITROCITOS

El objetivo del trabajo fue estudiar la desialización de eritrocitos que desenmascaran el antígeno T y de los
glóbulos que no lo exponen, por contacto con larvas recién nacidas (LRN) de T. spiralis. Se trabajó con 15
suspensiones eritrocitarias en medio enzimático, incubadas con LRN. Los GR control se incubaron con
solución salina. Para analizar el efecto del parásito sobre la exposición del antígeno T, se aplicó el Método de
Aglutinación anti-T con antígeno T y se estudió la agregación por los métodos de Polibrene y de Análisis
Digital de Imágenes, determinando CexpST, CCA y Distribución de los agregados eritrocitarios (DAE). La
media de los coeficientes en los eritrocitos que expusieron el antígeno T fueron CexpST=0,22±0,179 y coe-
ficiente de células aisladas (CCA)=0,73±0,108 y en los que no 0,86±0,125 y 0,205±0,163 respectivamente.
La DAE mostró que los GR que lo expusieron, presentaron marcada disminución de células aisladas y
pronunciado aumento de grandes agregados en relación a los controles, mientras que los GR en los que no
hubo exposición, la disminución de células aisladas con respecto a los controles fue menor y el aumento de
agregados estuvo homogéneamente distribuido entre todas las categorías. La experiencia realizada concluye
que los valores obtenidos de los coeficientes difieren significativamente en los GR que exponen el antígeno
T y en los que no, por lo que estas técnicas podrían ser predictivas para detectar desenmascaramiento T.
La trichinellosis es una enfermedad parasitaria causada por un nematodo filiforme perteneciente al géne-
ro Trichinella que abarca varias especies con diferente distribución geográfica. T. spiraliscausa la mayoría de
los casos humanos en todo el mundo. Su patogenicidad es mayor que la del resto de las especies del género
debido a que las hembras producen el número más alto de larvas recién nacidas, las cuales infectan el tejido
muscular. Durante el ciclo biológico, las larvas recién nacidas de Trichinella (LRN) tienen contacto directo
con los glóbulos rojos del hospedador debido a que circulan por el torrente sanguíneo hasta arribar a las
células musculares donde se enquistan.
En experiencias previas se demostró que las LRN producen el aumento de la agregación eritrocitaria, in-
dicando que capturan el ácido siálico globular, así como también que la desialización que provocan puede
exponer al antígeno críptico T del glóbulo rojo.
El antígeno T (Thomsen-Friedenreich) es una glicoproteína asociada a cáncer o tumor, que se encuentra au-
sente o enmascarada en los tejidos normales. Algunas sustancias presentes en ciertos microorganismos o sus
lipopolisacáridos son responsables de la aparición de anticuerpos naturales anti-T, principalmente IgA e IgM,
que se encuentran presentes en el suero humano normal de adultos, pero no en neonatos ni infantes
tempranos.
El fenómeno Thomsen-Friedenreich, (poliaglutinabilidad de los hematíes humanos) se debe al desenmas-
caramiento del antígeno T por enzimas microbianas que eliminan residuos terminales de ácido siálico en la
membrana del hematíe causando cambios en la estructura de la glicoproteína de membrana de los glóbulos
rojos (GR). La activación T desencadena en el hombre adulto poliaglutinación y una posible hemólisis, trom-
bocitopenia y trombosis in vivo y de ahí la importancia clínica de su investigación.
El objetivo del trabajo fue estudiar la desialización de eritrocitos que exponen antígeno T y de los glóbulos
que no lo desenmascaran, por contacto con LRN de T. spiralis.
 Avid

Mezcl
El diámetro
Eritrocitos 1 gota de la mezcla
eritrocitos no debe ex-
Al 10%
Se toma el tiempo .medig a Lee
Rotar la
desde el momento r
de mezclar hasta el placa

Y el resultado debe anotarse en cruces.

Técnica en gel, fase sólida o perlas de vidrio: Deben revisarse las instrucciones del proveedor.
Prueba de antiglobulina humana (suero de Coombs)
Preparar una suspensión de eritrocitos lavados (sensibilizados y no sensibilizados) al 2-4% en solución salina
isotónica (técnica en tubo) y/o a la concentración que indique la técnica en gel o perlas de vidrio. Realizar la
prueba de especi- ficidad enfrentando el suero de Coombs contra eritrocitos sensibilizados y no
sensibilizados (si se cuenta con ellos), centrifugar, leer y registrar resultados. Interpretación: aglutinación
consti- tuye una prueba positiva.
Para técnica en tubo se realiza una titulación mediante diluciones doble seriadas (Figura 2). Cada dilución se
enfrenta contra eritrocitos sensibilizados y no sensibilizados al 2-4%. Se centrifuga, se lee y se registra.
Resultado: re- gistrar la última dilución en donde todavía se observa aglutinación y se reporta en título, que
es el recíproco de la dilución, por ejemplo, si la dilución es 1/64, el título es 64.

d. Potencia:4 Se refiere a la intensidad de aglu- tinación que presenta el antisuero al reac- cionar con su
antígeno específico. Permite la comparación de antisueros por lotes o marcas con mismo título y diferentes
grados de aglutinación. En el cuadro II se muestra la correspondencia entre los grados de agluti- nación y el
puntaje. Para el ejemplo mostrado en la figura 2 el puntaje es de 60.

LOS MÉTODOS ANALÍTICOS

Los diferentes métodos analíticos que se rea- lizan en el laboratorio incluyen aquéllos para determinar grupo
ABO y Rh, antígenos eritroci- tarios (fenotipo) de los diferentes sistemas (Rh/ Hr, Diego, Duffy, Kidd etc.),
la investigación de anticuerpos regulares e irregulares libres en suero o plasma así como los unidos al
eritrocito mediante diferentes técnicas.
Todas las metodologías6 empleadas se ba- san en la reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) que depende de
varios factores: concentra- ciones de células, reactivos, pH, temperatura y tiempo de incubación,
centrifugación (ve- locidad y tiempo) y lectura, por lo que todos estos factores deben controlarse para todas
las técnicas.
La concentración de los reactivos y células es importante, por tanto debe revisarse el inserto, utilizar las
células y reactivos a la concentración recomendada para evitar fenómenos de zona. La solución salina
isotónica debe tener un pH de 7 + 0.2, conservarse en condiciones adecuadas para evitar modificación de
osmolaridad y es ne- cesario cambiarla cada día de uso. Debe respe- tarse el tiempo de incubación para cada
técnica, ya que puede haber disociación de la reacción Ag-Ac, pudiendo encontrar resultados falsos
negativos. Una fuerza excesiva de centrifugación puede ocasionar un sobrempaquetamiento de las células,
dificultando la lectura, ocasionando resultados falsos positivos o el caso contrario, una deficiente
centrifugación podría dar un resultado falso negativo. En todas las técnicas de tubo para la lectura de la
aglutinación debe agitarse suavemente el tubo.
https://www.redalyc.org/journal/535/53568572009/html/