Embriología Dra.

morulaa
Desarrollo de los miembros
Objetivo: Aprender su origen embriologico, los mecanismos mediante los cuales se forma, y las
malformaciones (fracasos en los mecanismos normales).
La formación comienza al final de la cuarta semana o podemos decirle al incicio del a 5SD, en
la parte lateral del embrion, los miembros superiores a la altura del somita 8 a 12 y el esbozo
del miembro inferior aparece más tardiamente (6SD) a la altura de los somitas 24 a 29.

Estas crestas comienzan a crecer en ciertas

zonas donde se desencadena una expresión
diferencial de genes particulares. A nivel
del miembro superior podemos observar
una expresión fuerte del gen tbx5 y a nivel
del miembro inferior una expresión fuerte
tanto del tbx4 tanto como el gen pitx1, esta
expresión diferencial genera la aparición a
la altura correspondiente de ambas yemas
de miembros superiores y miembros
inferiores.
Miembro superior

El inicio de la formacion de esta yema de los miebros

se basa en la interacción entre el ectodermo general y
el mesenquima del mesodermo lateral hoja parietal
(también llamada somatica), es decir que el miembro
tiene origen somatopleural.

El ectodermo general dará origen a la epidermis.

El mesenquima del mesodermo lateral hoja parietal
dará origen al tejido oseo y cartilaginoso (esqueleto),
tejido conectivo (dermis e hipodermis), tendones,
ligamentos y vasculatura del miembro.
Más tarde a esta yema se le agregan varias
poblaciones celulares que aportarán las celulas para
los tejidos que faltan, estas son:
Mioblastos que migran desde la region del miotomo
del somita, estos formarán celulas musculares
estriadas esqueleticas.
Prolongaciones de celulas del tubo neural, axones
motores, que darán la inervación motora, seguidos de
axones sensitivos que provienen de las neuronas
ubicadas en el GARD derivadas de la cresta neural
(estas prolongaciones vienen acompañadas de celulas
de schwann también derivadas de la cresta neural).
Quedan así establecidas todas la poblaciones celulares que tiene el esbozo del miembro y los
derivados que dará cada una.

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¿Cómo se establece en las células la identidad de posición? ¿De donde reciben estas
celulas que forman el esbozo de miembro las señales que les indican si organizarse
para formar una estructura proximal como el humero o distal como las falanges?
Para comprenderlo primero explicaremos cuales son los ejes del miembro y luego las
poblaciones celulares que los organizan.
Vemos en el extremo
distal del mimbro una

al
zona del ectodermo

rs
do
general engrosada, la
Anterior

o
CAE (cresta apical

rm
ectodermica) que se

de

E
forma en el limite

to

CA
Proximal
entre el ectodermo

ec
dorsal y el ectodermo
ventral
ventral

ra o
En esta imagen se

nt rm
Dorsal observa la zona de la

ve de

l
CAE con mayor

to
ec
aumento
distal
Posterior

Anterior
(sinonimo de cefalico)

Próximal Distal

Posterior
(sinonimo de caudal)

Si tomamos como ejemplo le miembro superior vamos a observar que el crecimiento de

la yema alejándolo del tronco (eje próximo-distal)
El crecimiento dorso-ventral es aquel que permite la diferenciación de lo que es dorsal
de aquello de lo que va a ser ventral que en este caso lo dorsal coincide con el dorso de
la mano en la línea que lo acerca hacia el tronco.
Por otra parte, el eje antero-posterior si tomamos como ejemplo a la mano lo anterior va
a ser el lado correspondiente al pulgar y lo posterior el lado correspondiente al
meñique.

Estos tres ejes se desarrollan de manera simultánea y el fracaso de cualquiera de ellos

puede modificar el crecimiento o la disposición espacial de los otros ejes.

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Instalación de los ejes del miembro
Eje proximo distal:
Lo instala la CAE (cresta apical ectodérmica) una zona del ectodermo
engrosada que se encuentra en el limite entre el ectodermo dorsal y el
ectodermo ventral, esta expresa los genes FGF 2, FGF 4 y FGF 8, que
codifican para las proteínas del mismo nombre, las cuales son liberadas y le
llegan a las células del mesénquima subyacente, se creara un gradiente
(diferencia) de concentración de esta sustancia a lo largo del espacio, las
células del mesénquima lejano a la cae recibirán bajas concentraciones de
FGF, mientras que las células cercanas a ella recibirán altas
concentraciones de FGF, el cual estimula a este mesénquima a
mantenerse indiferenciado y proliferando, se forma así por estimulo de
la CAE, la "zona de progreso"

Para entender los conocimientos se describirá a continuación experimentos de extirpación de distintas zonas
correspondientes a las yemas de los miembros superiores e inferiores.
Cuando se extirpaba una zona muy cercana a la CAE que se la conoce con el nombre de ZP (zona de progreso) y se la
alejaba de esa cresta apical ectodérmica, toda la yema detenía su crecimiento. Sin embargo, si a esa misma zona se la
colocaba luego nuevamente sobre la influencia de la cresta pical ectodérmica esa yema en su conjunto seguía
creciendo alejándose desde el tronco de manera tal que se diferenciaba en un crecimiento próximo distal. Hoy en día
se sabe que esa zona de progreso expresa un factor de transcripción que es el msx.
Por lo tanto el eje próximo-distal necesita una interacción entre la CAE y el mesodermo inmediatamente subyacente a
ella que genera una inducción del mismo para la expresión del gen msx1 de manera tal que mantenga a esta zona de
progreso y para mantenerla así tiene que mantenerla indiferenciada y con una alta tasa de proliferación.
Resumiendo, el eje próximo-distal presenta un centro de transmisión el cual se da por una interacción entre la cresta
apical ectodérmica y la zona de progreso y que la señal molecular son los factores de crecimiento fibroblastos a la
altura de la cresta apical ectodérmica y el factor de transcripción msx-1 en la zona de progreso
Por otra parte, el crecimiento en el eje próximo-distal también requiere la expresión diferencial de los genes HOXs,
cabe aclarar, que estos genes actúan de manera secuencial su expresión tanto en la diferenciación de diversas
estructuras. Ejemplo: la expresión diferencial del gen hox 9 genera no solo la diferenciación de la escapula si no que
actúa como un factor de transcripción que induce la expresión del hox 10 el cual se encarga de la diferenciación del
húmero, pero a su vez actúa como un factor de transcripción que induce la expresión del hox11 y así sucesivamente de
manera secuencial. Por otra parte, estos genes también intervienen en desencadenar la diferenciación pre y post axial.

Patologias
Alteraciones en el crecimiento de este gen próximo-distal darán distintos crecimientos anómalos en este eje, por
ejemplo la focomelia, donde hay un crecimiento focalizado tanto de los miembros superiores como de los
miembros inferiores o dando otro caso como la micromelia en
donde el miembro inferior se encuentra de manera correcta
formada pero esa acortado en su longitud.
Otro casos son los pacientes que tienen una hemimelia radial
(hemimelia:Ausencia de partes preaxiales o postaxiales
de un miembro) en donde tienen alterado ciertos genes hox que
participan en la región pre axial una radiografía se vería de la
siguiente manera en donde observamos que está ausente tanto el
radio como las falanges correspondientes al pulgar.
Focomelia Micromelia hemimelia

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En cuanto al desarrollo de los dedos, hoy sabemos que la expresión
diferencial de las proteínas morfogenéticas del hueso (BMP) 2, 4 y 7 se
encargan de inducir la expresión de factores de transcripción msx-1 y 2
las cuales participan en la muerte por apoptosis de las membranas
interdigitales y darles la diferenciación de identidad del dedo
correspondiente en cada miembro.
El fracaso de la apoptosis de esas membranas interdigitales se conoce
como sindáctila, en donde podemos observar en estas fotografías, la
presencia de la unión entre los dedos por la persistencia de la membrana
interdigital, en los 2 casos hay sindáctila.
Sindactilia

Eje Antero- posterior:

Existe un conjunto de celulas mesenquimaticas en la zona más posterior del miembro que actuan como
centro señalizador ya que es una entidad informativa que mediante la liberacion de moleculas señal
organiza el comportamiento de las celulas cercanas, a este conjunto de celulas liberadoras de la señal se la
llamo "Zona de actividad polarizante" (ZAP), esta para su exitosa formación depende de la interaccion
con los otros centros señalizadores, esta especialmente relacionada con las señales emitidas por la
CAE.
La ZAP libera Shh (sonic hedgehod), que funciona como señal paracrina, tiene efecto sobre las celulas
cercanas a las que les llegue esta molecula, pero darán distintas respuestas celulares en funcion de la
cantidad de esta sustancia que les llegue, es decir la respuesta es "dosis-dependiente".

Las celulas cercanas a la ZAP, es decir las ubicadas en la parte más posterior (caudal) del miembro son las
que estarán expuestas a mayores concentraciones de SHH secretada por la ZAP y esto desencadenará que se
determinen en el dedo más caudal, el dedo 5, el meñique.
Si nos vamos al otro extremo, cuanto más lejos de la ZAP esten las celulas, menores concentraciones
recibiran, las que menos concentracion reciben son las que estan ubicadas en la zona más anterior (cefalica)
del miembro, en concecuencia se organizarán para formar el dedo 1, el dedo pulgar.

En este esquema vemos representado como:

❶ una celula sintetiza y libera al medio externo una señal paracrina
❷❸❹ la molecula señal liberada difunde en el medio, creando un gradiente de concentracion, encontramos más
cantidad de la molecula liberada cerca de la fuente que la libero y cuanto más lejos de esta fuente menos cantidad
de esa molecula señal hay en el medio
❺ Esta molecula señal actua sobre poblaciones celulares competentes, que sensarán la señal, la procesaran
(desencadenan vias de señalizacion intracelular) y darán una respuesta celular en consecuencia, que como vemos
la respuesta que den (rojo, violeta, amarillo o blanco) será distinta, dependerá de la cantidad de esa molecula
señal que recibieron.

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¿Cómo se llego al conocimiento en la diferenciación
del eje anteroposterior?
Desarrollo normal del miembro

Plantearemos un experimento en el cual pueden observar en la imagen.

En esta imagen se ilustra el desarrollo normal del ala de un pollo, normalmente el esbozo de miembro (o yema)
tiene una sola ZAP (celulas marcadas en rojo en el cuadro 1), el cuadro 2 nos muestra un grafico que ilustra la
concentracion de shh en funcion de la distancia, en la zona cercana a la zap, la zona más posterior la
concentración es máxima, en la zona contraria, la zona más anterior la concentración es minima a nula. Vemos el
resultado del desarrollo en el cuadro 3, donde las celulas que reciben concentraciones maximas de shh se
organizan para formar el dedo 4, el más posterior, las que reciben rangos intermedios de esta sustancia forman
el dedo 3 y las que reciben bajas cantidades a nulas forman el dedo 2

Experimento de transplaante de una ZAP adicional

En el experimento vemos en el cuadro 1 que la yema tiene 2 ZAP (zonas indicadas en rojo), una en la zona
posterior que es la original, normalmente producida en este miembro y otra más colocada experimentalmente
en la zona anterior, esto provoca que haya ahora dos zonas de maxima concentracion de shh, dos zonas
intermedias y dos zonas de minima cantidad, el resultado es que entonces se forma un miembro duplicado, se
forman 2 dedos 4, 2 dedos 3, 2 dedos 2.

A partir de ahora, entonces, identificaban que esta zona trasplantada tenía la influencia necesaria
para inducir la diferenciación de lo posterior en este miembro.

Patologias
En estas imágenes podemos observar cómo fue alterado el eje anteroposterior.
Observamos una imagen especular en la diferenciación de los dedos no pudiendo
decirse de qué lado estaría colocado el pulgar y de qué lado el meñique. En este
caso hubo un fracaso en la diferenciación del eje antero-posterior.

En el otro también ocurre lo mismo y además se suma un mayor número

de dedos y es conocido con el nombre de polidactilia (dedos
supernumerarios, puede darse por duplicacion anomala de la zap)

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Eje dorso-ventral:
En cuanto al eje dorso-ventral también es muy importante la cresta apical ectodérmica (CAE) sintetizando los
factores de crecimiento fibroblastos 2, 4 y , 8 y en esta intervienen la expresión diferencialdel gen wnt 7a.
En la región que va a ser dorsal la expresión de este gen, genera la inducción de la expresión del gen en lmx-
1b en el mesodermo lateral hoja parietal.
Por el contrario, en la región ventral se expresa el gen en En 1 el cual inhibe la expresión del wn7 a al inhibir la
expresión del wn7a, impide que esta región sea dorsal.
Resumiendo, la expresión del gen wn7a induce este factor de transcripción y genera entre la interacción entre
el ectodermo de la cresta apical ectodérmica y el mesodermo lateral hoja parietal que toda esta zona sea dorsal,
por el contrario la inhibición del gen wn7a genera que la región contralateral sea ventral.
Esquema donde se integran todos los ejes vistos con sus
principales centros organizadores de cada uno.
Es importante recordar que todos estos ejes está interrelacionados
entre sí, la alteración de uno conlleva a la alteración de otro eje.

Patologias
Para poner un ejemplo hablaremos del síndrome uña-rotula en el cual fracasa en la diferenciación del eje dorso
ventral. En estos pacientes hay mutaciones en el factor de transcripción lmx 1b (en el gen de el factor de
transcripción existen estas mutaciones). En este sindrome como podemos observar en la fotografía, se forman
uñas hipoplasias que corresponden a la región dorsal de este miembro superior. Por otro lado podemos observar
la ausencia de la rótula que corresponde también a la región dorsal del miembro inferior.

Diferenciación de las poblaciones celulares esqueleto

El esqueleto, si nos ponemos a focalizar solo en las extremidades, en ellas el hueso se origina a partir del
mesodermo lateral que permite la formación en un principio de un molde cartilaginoso que será remplazado
por un molde óseo, este proceso es conocido como osificación edocondral.
Por el contrario, tanto en las vértebras, costillas y esternón participa el esclerotomo (cierta región del somita)
quien en estas áreas se encarga de la formación del hueso.
En cráneo tanto el neurocraneo como el viscerocraneo participa el mesodermo paraxial y las crestas neurales.

Mesodermo paraxil troncal

(somitas) region del esclerotomo:
forman parte del occipital, todas
las vertebras, costillas y esternon.

Mesenquima de mesodermo
lateral: Todos los huesos de la
cintura pelvica y miembros

Crestas neurales craneales y

mesodermo paraxil craneal:
Craneo (viserocraneo y
neurocraneo)

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Diferenciación de mioblastos: miogenesis
En cuanto a la miogénesis, hay que tener en cuenta, que los
músculos de estos miembros provienen de los miotomos del
mesodermo paraxial.
Distintas inducciones estimulan la migración de celular
particulares a las yemas de las crestas, tanto superiores
como inferior.
Estas migraciones de las células que ya están determinadas
a generar cierto grupo de expresión de genes que va a
permitir la diferenciación de las células mioblastos que se
van a ir multiplicando y alineando de manera tal de formar
un miotubo ya en la cresta correspondiente.
Varios miotubos van a formar lo que conforma la fibra
muscular. Una vez conformada la fibra muscular y su
maduración puede permitir entonces a comenzar las
contracciones.

Como ven en la imagen de la izquierda podemos observar la

migración de estas células del miotoma a las crestas, en este
caso del miembro superior de pollo, para formar tanto los
músculos flexores como extensores.
Inervación sensitiva y motora
Axones motores de la medula espinal invaden el esbozo en 5ta SD
y se introducen en las masas musculares ventrales y dorsales

Axones sensitivos provenientes de neuronas sensitivas derivadas

de la cresta neural llegan posteriormente usando a los motores
como guias.

Celulas de las crestas neurales rodean fibras motoras y sensitivas,

forman células de schawnn que envuelve a los axones.

Vasculogénesis
Las ramas segmentarias de la aorta, las venas cardinales y los angioblastos endógenos son
los que generan las ramas fundamentales vasculares de estas yemas. La arteria central
que irriga a la extremidad forma una red capilar que luego va a drenar en capilares
venosos más periféricos. En toda esta vasculogénesis es importante la expresión del factor
de crecimiento endotelial vascular (VEGF).

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Patologías y teratogenos
En década del 60 y 70 se utilizaba la talidomida como un antiemético que se
suministraba a las embarazadas. Hoy en día sabemos que la talidomida inhibe la
vasculogénesis, pero en ese momento no se supo y nacieron un montón de
pacientes con distintas alteraciones en los ejes de diferenciación de los miembros.
Ya que de no existir la formación de vasos es imposible que se formen los
miembros correspondientes, por eso hubo una gran cantidad de pacientes que
nacieron con Amelia (ausencia total de miembros) meromelia y otras alteraciones
más como las que ya mencionamos.

Además de las causas teratogénicas como la mencionada en la

talidomida otra causa que puede alterar el desarrollo de los
miembros es por ejemplo un oligoamnios, un defecto en la
cantidad de líquido amniótico impidió en este caso una
correcta rotación de los miembros inferiores que persisten en
posición de aplaudir.
pie zambo
(con aducción y flexión plantar)

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