Universidad Peruana Cayetano Heredia

Escuela Profesional de Tecnología

Medica Laboratorio Clínico Curso:
Virología Semestre Académico 2021 – I

Importancia del diagnostico

virológico, obtención de muestra,
transporte y bioseguridad

CAROLINA GUEVARA J.
6 de Setiembre 2021
 Importancia del diagnostico
virológico
• Los estudios de laboratorio pueden
confirmar el diagnostico e identificar el
agente etiológico viral causante de la
infección.
• La identificación permite dirigir la terapia
adecuada y tomar medidas epidemiológicas
en salud publica.
• La decisión del tipo de prueba
diagnóstica que debe realizarse
primero estará relacionada con el
cuadro clínico en investigación.
– Colecta de muestras
– Aplicación de pruebas de laboratorio
apropiadas
– Practicas de medidas de bioseguridad
 Plan de estudio
• ¿Cuáles son los procedimientos disponibles?
• ¿Cuáles son las muestras adecuadas?
• ¿Cuándo y cómo colectarlos?
• ¿Qué información necesita el laboratorio?
 SINDROME RESPIRATORIO AGUDO

Tos aguda o Insuficiencia Respiratoria +

Manifestaciones severas +
Ausencia de factores predisponentes

Influenza Hantavirus B.pertussis S.pneumoniae

Difteria VSR H.influenzae
S. pyogenes Mycoplasma pneum.
Legionella spp.
B. anthracis

Hisopado Hisopado
Suero Faríngeo
Faríngeo
Sangre, Suero,
Bacteria o Virus: Esputo, Orina
Cultivo: ID, P.sens.
Detección Ag.
Detección AC.
Serotipificación
Det.Toxina
PCR
 Síndrome Febril Inespecífico
Caso que cumple con la definición
PERIODO DE LA ENFERMEDAD

Gota gruesa y CONVALESCENCIA MUERTE

AGUDO
frotis
Paludismo

mayor de 15 días

SUERO COAGULO
Hantavirus
PCR
SUERO TEJIDOS
menor de 5 días:
mayor de 5 días: (seroconversión)
Hantavirus
Hantavirus Hantavirus
Dengue
Dengue (serología) Dengue
(aislamiento-PCR)
Leptospirosis Leptospirosis
FHV
FHV FHV
VER INDICACIONES
ESPECIFICAS
 Flujograma para síndrome icterohemorrágico

Cuadro con fiebre, ictericia y/o Gota Gruesa y

hemorragia frotis: para Malaria
Bartonella

Aislamiento viral
Suero  5 dias
Negativo Positivo
IgM para FIEBRE
AMARILLA y DENGUE

Positivo Notificación
inmediata, inicio
Notificación de acciones de
inmediata, inicio de Negativo control
acciones de control

Estudio:
Hepatitis viral

Positivo

Negativo

IgM Hepatitis
Delta IgM Leptospira

Positivo Negativo Positivo Negativo

Notificación Notificación
Dependiendo de cuadro clínico y área geográfica
inmediata, inicio inmediata, inicio se investigaran otras etiologías ( fiebre
de acciones de de acciones de hemorrágicas: HANTA VIRUS, )
control control
 Colecta, transporte y
mantenimiento de muestras
biológicas
 Síndrome Febril Indiferenciado

PERIODO DE
AGENTE PRUEBA MUESTRA TOMA DE CANTIDAD TRANSPORTE CONSERVACION
MUESTRA

P. vivax, Gota gruesa Sangre Etapa febril 1 lámina Caja porta Temperatura
falciparum, y frotis láminas ambiente
Bartonella
Leptospira, Serología Suero agudo 5 – 10 días inicio 2 ml Hielo seco -20 ° C
F.A. Dengue (ELISA, IFI, de sintomas
Hep B, Aglutinación
Influenza, Rosa de
Rickettsia, bengala
Ehrlichia,
Suero convaleciente 15 – 30 días 2 ml Cadena de frio -20 ° C
Coxiella,
inicio 4ºC
Brucella y
de síntomas
Salmonella
Dengue, Aislamiento Suero 1 – 5 días 2 ml Hielo seco -70 °C
F. Amarilla PCR (perido viremico)

Leptospira Aislamiento Sangre total 1 - 7 días 3 ml Tº ambiente Tºambiente x 7 días

PCR
Liquido 5 a 10 días inicio 2 ml Tº ambiente Tºambiente x 3 días
Cefalorraquídeo de síntomas
Orina 10 – 28 día inicio 50 ml Tº ambiente Tº Amb. Máx. 2 horas
de enf.
Tejido (riñón, hígado) Necropsia 2 cm3 4°C 4 °C máximo 6 horas

Bartonella Aislamiento Sangre / EDTA 1 – 5 días inicio 5 ml Inocular al medio Temperatura

de enfermedad ambiente

Rickettsia, Aislamiento Sangre / EDTA 1 – 5 días de 5 ml 4°C G.rojos a 4 °C x 24 hr.

Ehrlichia y inicio G.blancos en hielo
Coxiella de la seco
enfermedad
 Síndrome Febril Indiferenciado

PERIODO DE
AGENTE PRUEBA MUESTRA TOMA DE CANTIDAD TRANSPORTE CONSERVACION
MUESTRA

Aislamiento 1 – 5 días de Inocular en

Sangre Temperatura
Brucella (hemocultiv la 5 ml medio de
total ambiente
o) enfermedad cultivo

Inocular en
Salmonell Sangre
Aislamiento 1 – 15 días 5 ml medio de Conservar a 37 °C
a total
cultivo

Virus 2 hisopos
Hisopado
Respirator en medio
Aislamiento nasal 1 – 3 días Hielo seco - 70 °C
io y Virus de
faríngeo
influenza transporte

Virus F.A.,
Dengue,
Tejido
Hepatitis
(hígado
B, Histopatolo Enviar en Temperatura
y/o Necropsia 2 cm3
Influenza, gía formol al 10% ambiente
cerebro,
Rickettsia,
pulmón)
Erhichia,
Coxiella
 Síndrome icterohemorrágico
PERIODO DE
AGENTE PRUEBA MUESTRA TOMA DE CANTIDAD TRANSPORTE CONSERVACION
MUESTRA

Temperatura
Temperatura
Sangre total 1 - 7 días 3 ml ambiente por 7
ambiente
días

Liquido 5 – 10 días Temperatura

Temperatura
Cefalorraquíd inicio de 2 ml ambiente por 3
ambiente
eo síntomas días
Aislamiento y
Leptospira
PCR 10 – 28
Temperatura
días inicio Temperatura
Orina 50 ml ambiente
de ambiente
máximo 2 horas
síntomas

Tejido (riñón,
Cadena de 4°C máximo 6
hígado y Necropsia 2 cm3
frío 4°C horas
medula)

Tejido
Virus F.A. Formol al
Histopalogía (hígado,
Dengue; 10% Temperatura
Inmunohisto- pulmón, Necropsia 2 cm3
Hepatitis y Temperatura ambiente
química riñón, cerebro
Hanta ambiente
y otros
 ¿Qué utilizar…?
• Tubos de extracción al • Capuchones para extracción
vacío sin aditivos al vacío
• Tubos de extracción al • Crioviales de polipropileno
vacío con citrato de sodio estéril de 2ml
• Tubos de extracción al • Algodón hidrófilo
vacío con EDTA • Hisopos de algodón
• Agujas para extracción • Hisopos de alginato de calcio
de sangre al vacío
• Lancetas estériles
• Jeringas descartables
con aguja de: 10, 5, 1cc • Contenedores para
materiales punzocortantes
 RETAPAR
CONTAMINAR LA ZONA
AGUJAS

INSERTAR LA AGUJA SOPLAR O

A LA VENA CON EL AVENTAR CON
TUBO AL VACÍO LA MANO

PRINCIPALES PROBLEMAS
DETECTADOS EN PUNCIÓN VENOSA

PRESIONAR MUCHO TIEMPO

PINCHAR ENCIMA DE LA VENA
CON EL TORNIQUETE

DECIR AL PACIENTE QUE DOBLE

EL BRAZO DESPUÉS DE LA TOMA
 Transporte y conservación de
muestras

• Termos KST para traslado de muestras

• Caja de tecnopor 5cm de espesor

 PROTEGER LA MUESTRA

Colocar la muestra
en el cooler y
transportar al
laboratorio
Sangrado retro-orbital
Obtención de órganos
Separación de muestra
 Conservación de
muestras

Registro de datos
 MUESTRAS EN ANIMALES DOMESTICOS

Para la manipulación
de perros es bueno
usar bozales que
cubran el hocico para
evitar que muerdan a
las personas
 Envío correcto,
el feto está envuelto en una bolsa de plástico hermética y
refrigerado.
Dry Shipper
Envio de Material Biológico
(Temperatura ambiente)
 BIOPSIAS
• Tejidos: biopsia de órganos; las muestras se
fraccionarán en dos :

a) Tejido congelado: Para pruebas moleculares y

cultivos (aislamiento). Las muestras deberán
remitirse de inmediato al laboratorio de referencia
a temperatura adecuada.

b) Tejido fijado en formol bufferado o incluído en

parafina: Para tinción inmunohistoquímica
Enviar las muestras al laboratorio a temperatura
ambiente
Bolsas con cierre
Que aspectos pueden afectar
la toma de muestras ?
 RESUMEN

Para mantener la integridad de las

muestras se deberán diseñar desde el
principio los procedimientos de
obtención, transporte, subproductos
que se obtendrán, condiciones de
conservación, destino final y
bioseguridad.
BIOSEGURIDAD
 PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD
• UNIVERSALIDAD
Se debe involucrar a todo el personal que
participa en el cuidado y procesamiento de
muestras de laboratorio debiendo seguir todas
las recomendaciones estándares para prevenir
exposición a riesgos.
• USO DE BARRERAS
Comprende el concepto de evitar la
exposición directa a sangre u otros fluidos
en potencia contaminantes u otras
substancias nocivas, mediante la utilización
de medidas o materiales que se interpongan
al contacto de los mismos
 Por que las prácticas de
bioseguridad?

Para proteger a:

• Los trabajadores
• Los productos
• Compañeros de trabajo
• Entorno medioambiental
MODOS DE INFECCION MAS FRECUENTES

a. Auto inoculación accidental debida a

pinchazos o cortes con agujas, u otros
elementos punzocortantes
b. Exposición de la piel o mucosas a sangre,
hemoderivados u otros fluidos biológicos.
c. Inhalación de aerosoles.
d. Salpicaduras en los ojos o aspiración
bucal.
 VÍAS DE ENTRADA
• Vía Parenteral, a través de cortes, pinchazos o heridas sin protección.

• Vía aérea, por inhalación, a través de las vías respiratorias. Las fuentes de
contaminación son las operaciones capaces de generar aerosoles
(centrifugación, agitado de fluidos, uso de sierras mecánicas

• Vía dérmica, por contacto directo o indirecto con la piel o a través del
contacto con gotas

• Vía Digestiva, por ingestión. Asociada a malos hábitos higiénicos (comer en

el puesto, morder las uñas, no lavarse las manos…)
No esta permitido:
Comer
Beber
Fumar
Almacenar comida
Pipetear con la boca
– Desarrollar
procedimientos
para minimizar la
formación de
aerosoles.
– Minimizar el uso
de agujas

BSL - 1 Practicas Estandar

Lavado de
las manos
 Diferencias en los Niveles de
Bioseguridad
Diseño del
Nivel Descripción del Agente Laboratorio
BSL-1 No se conoce qué microorganismos causen Básica
enfermedad en adultos saludables (Bacillus
subtilis, hepatitis infecciosa canina)
BSL-2 Originario, agentes de riesgo moderado asociados Básica
con enfemedades en humanos de diversa gravedad
(Virus de hepatitis B, Salmonella spp.)
BSL-3 Agentes originarios o exóticos, donde existe
potencial de infección por aerosol y la Contención
enfermedad puede tener consecuencias de serias a
letales (Virus de Fiebre Amarilla, Virus Hanta, Encefalitis
Equina Venezolana)
BSL-4 Agentes peligrosos y exóticos con alto riesgo de Máxima
enfermedad con compromiso de vida (Virus de Contención
fiebre Lassa, virus de Ébola, virus de Marburg)
 Categorias de las Medidas
Preventivas
• Confinar el agente
• Protección física del trabajador
• Barreras intangibles
• Destrucción del agente
• Medidas inmunológicas y
relacionadas
• Técnicas de cuidado
Vórtex
Aerosol Generado por Frasco-Aguja
Generación de Aerosol por Dispersión de Fluído
 Desinfectantes
Alcoholes

Compuesto cuaternario de amonio

 ASPECTOS ADICIONALES

 Seguridad en el uso de “objetos cortantes”

 Mandiles de laboratorio fuera del laboratorio
 Manejo del laboratorio
 Importancia de informar sobre la ocurrencia
de incidentes
 Hojas de Datos sobre la Seguridad de
Materiales
 Registro de entrenamiento esencial mínimo