Universidad Autónoma de San

Luis Potosí

Facultad de Ciencias Químicas

Laboratorio de Biología Molecular

Aplicada

Aislamiento y purificación de
ADN genómico

Nombre: Castillo Esquivel Arian Dalai

Grupo: Lunes 10:00-12:00

Docente: Dra. Elizabeth Reynaga Hernández

1. La elección del método de extracción de ADN suele realizarse en
función de ciertos criterios. Mencione cuatro de ellos.
• La identificación de individuos.
• El monitoreo de tratamientos.
• El establecimiento de diagnósticos.
• Determinación de la carga viral.

2. Indique cuáles son las etapas que involucra un proceso de

extracción de ADN genómico con el fundamento de cada una de
ellas.
• 1. HOMOGENIZACIÓN DE LA MUESTRA Y LISIS CELULAR: Se
adiciona un detergente iónico (dodecil sulfato de sodio, SDS).
Este detergente dispersa los componentes de las membranas y
desnaturaliza las proteínas. La solución de LISIS contiene
además el agente quelante de cationes divalentes EDTA. Esto
impide la acción de las ADNasas (dependientes de Mg++).

• 2. EXTRACCIÓN DE PROTEÍNAS Y LÍPIDOS

Después se agrega una mezcla de solventes no miscibles el cual
es uno acuoso y otro orgánico no polar, los ácidos nucleicos
permanecerán en la fase acuosa, en tanto que los lípidos y gran
parte de las proteínas desnaturalizadas estarán en la fase
orgánica.

• 3. PRECIPITACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS

Se adiciona sales las cuales neutralizan las cargas negativas de
los grupos fosfato y la deshidratación de la molécula de DNA
que conduce a su precipitación añadiendo alcoholes como
etanol o isopropanol.

3. ¿Qué son las DNAsas?

Enzima que cataliza la rotura de los enlaces fosfodiéster en el DNA. Si
la enzima cataliza la rotura del enlace fosfodiéster terminal se la
denomina exodesoxirribonucleasa, mientras que si es un enlace
interno se la denomina endodesoxirribonucleasa.