INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA

Laboratorio de Métodos Cuantitativos
Práctica 17. Determinación cuantitativa de
cafeína por espectroscopia
ultravioleta-visible
Grupo 3BM1
EQUIPO:2

INTEGRANTES:

CASTRO ALVARADO JORGE ALBERTO

CIPRIANO SANTIAGO OSVALDO TANKANXOAN

GARCIA RESENDIZ MARIANNA EDITH

LÓPEZ BADILLO YANET ITZEL

LÓPEZ GUADARRAMA IZAMAR SANDRA

PROFESORES:
RAMIREZ BALDERAS JUAN
HERNANDEZ MUÑOZ ALFONSO

FECHA DE ENTREGA: 13 de diciembre 2021

1
2
ÍNDICE:
OBJETIVOS: 4
INTRODUCCIÓN: 4
DESARROLLO EXPERIMENTAL: 4
MATERIALES Y REACTIVOS 4
DISOLUCIONES 4
SECUENCIA EXPERIMENTAL 4
RESULTADOS 5
ANÁLISIS DE DATOS 7
MEMORIA DE CÁLCULO: 7
DISCUSIÓN 8
CONCLUSIONES 9
BIBLIOGRAFÍAS: 9

3
OBJETIVOS:
a) El alumno identificará la longitud de máxima absorción de la cafeína.
b) El alumno cuantificará el contenido de cafeína en muestras comerciales

INTRODUCCIÓN:
La cafeína es una molécula de alta importancia en la industria alimentaria, biotecnológica y
farmacológica. El uso comercial de la cafeína en bebidas energéticas está regulado por la norma
mexicana.
La determinación de concentración de compuestos orgánicos es una habilidad sumamente
importante para la formación profesional, debido a que éstos son ampliamente utilizados en
distintas industrias. Por esto en esta práctica determinaremos la concentración de cafeína en dos
muestras de bebidas energéticas comerciales de libre venta.

DESARROLLO EXPERIMENTAL:
MATERIALES Y REACTIVOS
● 5 matraces aforados de 10 mL
● 1 micropipeta
● 1 piseta
● Celdas de cuarzo
● 5 vasos de precipitados de 10 mL
● 1 pipeta graduada de 1.00 mL
● 1 matraz volumétrico de 100 mL

DISOLUCIONES
a) Disolución de HCl 0.01M.
b) Solvente alternativo: mezcla etanol-agua al 90 %
c) Disolución Stock de cafeína de 115 ppm en agua destilada.

4
SECUENCIA EXPERIMENTAL

RESULTADOS

Tabla 1. Longitud máxima de

absorción de la cafeína

λmax 272 nm

5
 Tabla 2. Absorbancias de las soluciones para curva tipo

matraz V de solución Concentración de Absorbancia

madre (ml) cafeína aforado 10 ml
(ppm)

1 0 0 0.000

2 0.2 2.3 0.072

3 0.4 4.6 0.191

4 0.6 6.9 0.301

5 0.8 9.2 0.416

6 1.0 11.5 0.534

7 1.2 13.8 0.645

8 1.4 16.1 0.760

Gráfica 1. Absorbancia en función de la concentración de cafeína

Tabla 3. Concentración de reactivos

Solución madre de cafeína 115 ppm

6
HCl 0.01 M

Tabla 4. Absorbancia de las muestras

Muestras Volumen Absorbancia

utilizado (ml)

Pepsi 0.30 0.230

RedBull 0.20 0.468

Tabla 5. Concentraciones obtenidas

Muestras Concentración Concentración de Dosis de cafeína

aforada a 10 ml cafeína en la en una porción de
(ppm) bebida (ppm) 250 ml (mg)

Pepsi 5.25 175 43.75

RedBull 10.18 339 127.28

ANÁLISIS DE DATOS
MEMORIA DE CÁLCULO:
● Concentraciones para la curva de calibración

𝐶2 =
(
0.2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 2. 3
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶3 =
(
0.4 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 4. 6
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶4 =
(
0.6 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 6. 9
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶5 =
(
0.8 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 9. 2
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶6 =
(
1.0 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 11. 5
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

7
 𝐶7 =
(
1.2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 13. 8
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝐶8 =
(
1.4 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 115
𝑚𝑔
𝐿 𝑑𝑒 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑎𝑑𝑟𝑒 ) = 16. 10
𝑚𝑔
10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

● Determinación de las concentraciones de cafeína las muestras

(
𝐴 = 0. 0483
𝐿
𝑚𝑔 )𝑥 − 0. 0238
𝐴𝑃𝑒𝑝𝑠𝑖 = 0. 230

0.230+0.0238 𝑚𝑔
𝐿 = 5. 2547 𝐿
0.0483 𝑚𝑔

5. 25
𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 ( 10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
0.3 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑝𝑠𝑖 ) = 175 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐿 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑝𝑠𝑖

𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐶𝑃𝑒𝑝𝑠𝑖 = 175 𝐿 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑝𝑠𝑖

𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑢𝑛𝑎 𝑝𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛 = 175 𝐿 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑝𝑠𝑖
(0. 250 𝐿 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑝𝑠𝑖) = 43. 75 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎

𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑢𝑛𝑎 𝑝𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛 = 43. 75 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎

𝐴𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙 = 0. 468

0.468+0.0238 𝑚𝑔
𝐿 = 10. 1822 𝐿
0.0483 𝑚𝑔

10. 18
𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 ( 10 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
0.2 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙 ) = 509 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐿 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙

𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐶𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙 = 509 𝐿 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙

𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎
𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑢𝑛𝑎 𝑝𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛 = 509 𝐿 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙
(0. 250 𝐿 𝑑𝑒 𝑅𝑒𝑑𝐵𝑢𝑙𝑙) = 127. 25 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎

𝐶𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎 𝑒𝑛 𝑢𝑛𝑎 𝑝𝑜𝑟𝑐𝑖ó𝑛 = 127. 25 𝑚𝑔 𝑐𝑎𝑓𝑒í𝑛𝑎

DISCUSIÓN
Según lo reportado el refresco comúnmente conocido como Pepsi llega a contener alrededor de
35 mg de cafeína por porción de 355 mL en presentación de lata, siendo esta una diferencia

8
considerable comparada con los resultados obtenidos experimentalmente en esta práctica, pues
se obtiene una cantidad de 43.75 mg en 250 mL, ajustandolo a lo indicado en la etiqueta,
deberían ser 24.65 mg. Según el etiquetado de Red Bull, una lata de 250 ml contiene 80 mg de
cafeína, que es mucho más acercado a la cantidad obtenida experimentalmente de 127. 25 𝑚𝑔 de
cafeína en 250 mL, que es inmensamente diferente a lo reportado en el etiquetado.

CONCLUSIONES.
El resultado en ambas pruebas se alejó de lo esperado, arrojando resultados que no son realistas.
La diferencia en ambos casos podría deberse a un inadecuado manejo de los reactivos de
laboratorio, a la diferencia en las condiciones en las que se realiza el análisis o a que algún otro
compuesto o ingrediente presente en la muestra haya causado una lectura errónea, incluso pudo
haberse realizado el análisis a una longitud de onda diferente pero no muy alejada del valor
obtenido.
Se deben cuidar más las condiciones en las que se trabajan las muestras, y verificar antes que las
muestras no contengan componentes que puedan provocar que el equipo arroje datos falsos.

BIBLIOGRAFÍAS:
● Ingredientes de Red Bull energy drink. Obtenido de RedBull:
https://www.redbull.com/mx-es/energydrink/red-bull-energy-drink-ingredientes
● NORMA Oficial Mexicana NOM-218-SSA1-2011, Productos y servicios. Bebidas
saborizadas no alcohólicas, sus congelados, productos concentrados para prepararlas y
bebidas adicionadas con cafeína. Especificaciones y disposiciones sanitarias. Métodos de
prueba. Obtenido de Diario Oficial de la Nación:
http://dof.gob.mx/normasOficiales/4643/salud/salud.htm
●