Yeny Posada. MSc. Esp. Bact.

GENÉTICA
Estudio científico de cómo se transmiten los
caracteres físicos, bioquímicos y de
comportamiento de padres a hijos.
 GENÉTICA FORENSE
Rama de la Genética, aplicada a la
solución de problemas sociales y
legales, cuyos objetivos son:

o Identificación genotípica de los individuos

basada en la estructura genética individual,
única de cada persona. Aplicado al área
criminalística.

o Investigar las relaciones biológicas entre dos o

mas individuos “HEREDOBIOLOGIA”
Gregor Mendel (1.822 – 1.884)

l Monje Agustiniano austriaco.

l Analizando rasgos en plantas
observó evidencia indirecta de
la manera en que los
progenitores transmiten sus
caracteres a sus hijos.

PADRE DE LA GENÉTICA
Conclusión Principios o Leyes de Mendel

La información genética
proviene la mitad del
padre y la otra mitad de
la madre.
 HEMOGENÉTICA FORENSE

GENÉTICA FORENSE

• Karl 1939 •James

1960 • Kary Mullis:
1990-2018
Landsteiner.
Hemogenética •Levine y Watson y • Polimorfimos PCR in vitro. •Marcadores
Stetson. Francis protéicos: en ADN: STRs,
forense. Patrón SNPs, INDELS
Sistema HLA
medeliano de Crick.
herencia. Rh.
1953 1984
1900
MOLÉCULA DE ADN

1953: Watson y Crick

Su modelo adquirió tal

importancia para
comprender la síntesis
proteica, la replicación del
ADN y las mutaciones,
que los científicos
obtuvieron en 1962 el
Premio Nobel de
Medicina.
 HUELLA GENETICA
Análisis de RFLP

El análisis consiste en hacer un Southern

Alec Jeffreys
Universidad de Leicester en 1984
Blotting (o "Southern blot" que es un método
de biología molecular que sirve para verificar
si una determinada secuencia de ADN está o
no presente en una muestra de ADN
analizada) y usar sondas específicas para
detectar los VNTR (repeticiones en tandem
de número variable) y enzimas de
restricción.

CASO: Colin Pitchfork

Violador y asesino de dos adolescentes, Lynda Mann y Dawn Ashworth, del condado de
Leicestershire, en 1983 y 1986 respectivamente. Identificado y condenado por asesinato a
partir de las muestras de semen obtenidas de los cadáveres de las dos chicas.
PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

Dr. Kary Mullis

v Entre 1983-85 desarrolló una

nueva técnica que permitía la
síntesis de grandes cantidades
de un fragmento de ADN.

v Recibió el premio novel 1993.

v Consiste en amplificar
enzimáticamente un fragmento
específico de ADN.
 SECUENCIACIÓN DEL GENOMA HUMANO

• Año 1990. El Proyecto Genoma Humano (PGH - HUGO) fue un

proyecto internacional de investigación científica con el objetivo
fundamental de determinar la secuencia de pares de bases químicas
que componen el ADN e identificar y cartografiar todos los genes de
un genoma humano promedio desde un punto de vista físico y
funcional, incluyendo tanto los genes que codifican proteínas como
los que no.

• En el año 2003, se completó la secuencia del genoma humano.

ESTRUCTURA DEL ADN
 ESTRUCTURA DEL ADN

1. Estas cadenas forman una especie de escalera retorcida

que se llama doble hélice.

1. Cada molécula de ADN está constituida por dos cadenas

o bandas formadas por un elevado número de
compuestos químicos llamados nucleótidos.

2. Cada nucleótido está formado por tres unidades: una

molécula de azúcar llamada desoxirribosa, un grupo
fosfato y uno de cuatro posibles compuestos
nitrogenados llamados bases: adenina (A), guanina (G),
timina (T) y citosina (C).
SECUENCIA ÚNICA
DE ADN
 Gen = Marcador genético
GEN

• Unidades de información
sobre rasgos específicos.
• Se transmiten de los
progenitores a todos los
descendientes.

• Secuencia determinada de
ADN que tiene una
característica determinada:
por ejemplo: color, altura,
formas…
 ALELO

• Distintas formas
moleculares de un
mismo gen.

• Ejemplo:
– gen: color de los ojos
– Alelo: cafe, negro, azul,
verde…
 DOMINANTE / RECESIVO

ALELO DOMINANTE
Su efecto sobre un rasgo enmascara el de
otro alelo apareado con él.

ALELO RECESIVO
Su expresión en individuos heterocigotos
queda enmascarada total o parcialmente
por la expresión de su compañero.
Sólo se expresa en condición homocigota,
ej: Albinismo.

ALELOS CODOMINANTES:
Marcadores Forenses
 HOMOCIGOTO / HETEROCIGOTO

•GENOTIPO HOMOCIGOTO:
tiene el mismo alelo en los dos
cromosomas .

•GENOTIPO HETEROCIGOTO:
tiene diferentes alelos .

10-10 8-10
MARCADORES
GENÉTICOS
MARCADORES UTILIZADOS EN FORENSE

• Grupos sanguíneos
• Proteínas séricas
• ADN
o RFLPs
o VNTRs
o STRs
o SNPs, Indels
 MARCADORES GENÉTICOS (ADN)

1. Por tamaño del segmento como:

• Segmentos Largos Polimórficos de Restricción (RFLPs)
• Minisatélites (VNTRs).

• Microsatélites (STRs).
• Indels (Insercion-delecion)

2. Marcadores sustitucionales: constituidos por secuencias

cortas en las que el polimorfismo radica en la sustitución de
una o más pb.
• Polimorfismo de nucleótido simple (SNPs)
 Marcador Genético

n Lugar en el cromosoma: MARCADOR GENÉTICO: D16S539.

n Todas las variantes que ese marcador genético presenta en la población

se denominan ALELOS.
 n Lugar que ocupa en el
23 pares cromosoma: marcador
genético
n Ejemplo: D16S539.

n Todas las variantes que

ese marcador genético
presenta en la
población se denominan
ALELOS.

MADRE
PADRE
n Dos alelos iguales:
Homocigoto.
Par de cromosomas, dos n Dos alelos diferentes:
alelos por marcador Heterocigoto.
genético, uno heredado
del padre y otro de la
madre.
Alelo 9 Alelo 8
 Secuencia de 4
Nucleótidos

AATCAATCAATC Alelo 3

Marcadores Genéticos tipo STRs

(Short Tandem Repeats)

Apareamiento de Bases A:T G:C

 Short Tandem Repeats
STRs (Microsatélites)
Ø Secuencias cortas repetidas en tándem: 2 a 6 pb.

Ø Repetidas una a continuación de otra.

Ø Son polimórficos: Hay un número diferente de

repeticiones en cada individuo.

Ø Cada STR tiene entre 5 y 25 alelos

 Par de cromosomas homólogos.

Alelo 7 Alelo 5

7 repeticiones

5 repeticiones
HEREDADO HEREDADO DE
DEL PADRE LA MADRE

12 15
12-16 10-15

12-15
Perfil Genético Único para cada individuo

ELECTROFEROGRAMA
 Marcador genético
Alelos
 COTEJO DE ALELOS ENTRE PMh

Presunto Padre

Madre

Hijo
 COTEJO DE ALELOS ENTRE PMh

Presunto Padre

Madre

Hijo
 P. padre M h Interpret EMPyEF
D8S1179 13-15 13-15 13-15 Victima Sospechoso (Mancha de
sangre en prenda
D21S11 27-30,2 29-30 27-29
del Sosp)
D7S820 8-11 11-11 8-11
CSF1PO 9-11 10-15 12-15 D8S1179 13-13 13-13 13-13
D3S1358 15-18 18-19 15-18 D21S11 30-30,2 30-30 30-30,2
TH01 6-7 6-7 6-7 D7S820 11-11 10-11 11-11
D13S317 11-12 9-12 9-11
CSF1PO 11-12 11-11 11-12
D16S539 9-11 9-10 9-11
D2S1338 22-25 22-24 22-22 D3S1358 15-16 15-16 15-16
D19S433 16-18 14-16 14-18 TH01 6-6 6-9 6-6
VWA 16-17 15-18 16-18 D13S317 9-11 9-9 9-11
TPOX 8-9 8-9 8-9
D16S539 9-11 9-11 9-11
D18S51 12-16 21-23 16-21
D5S818 11-12 10-11 10-11 D2S1338 20-23 19-23 20-23
FGA 21-23 23-23 21-23 D19S433 13-13,2 13-16 13-13,2
LPL 10-11 10-10 10-11 VWA 18-18 18-18 18-18
F13B 6-10 9-12 9-10
TPOX 8-8 8-10 8-8
FESFPS 10-11 11-11 11-11
F13A01 3,2-3,2 3,2-7 3,2-7 D18S51 15-16 15-18 15-16
SE33 18-18 18-25 18-18 D5S818 9-12 9-12 9-12
D18S535 13-13 12-12 12-13 FGA 19-20 19-19 19-20
 Alelos posibles en la población

Amelogenina
Alelos posibles en la población
Marcador genético D5S818
 Toma%de%muestras%

Extracción%de%ADN%

Amplificación%de%ADN%–%
PCR%

Electroforesis%capilar%

Análisis%y%cotejo%de%perfiles%
(Electroferogramas)%
Metodología:
OBJETIVO
1. Romper células = Liberar el SEPARAR EL ADN DE LOS
ADN DEMÁS COMPONENTES
CÉLULARES:
2. Separar el ADN de restos
• Membranas célula.
celulares
• Proteínas.
3. Purificar el ADN • Hormonas.
• Minerales
4. Almacenar el ADN
• Otras organelas celulares.
Dientes

El diente está formado por el esmalte,

la dentina, el cemento y la pulpa.

El ADN solamente se encuentra en los

tejidos que contengan células y estos
son la dentina, cemento y sobre todo
la pulpa por ser un tejido blando y
vascularizado.
Dientes
• Recomendaciones de International
Commission on Missing Persons(ICMP)

• Los mejores dientes para trabajar en una

posible identificación son el primer molar,
segundo molar, tercer molar, primer o
segundo premolar, canino e incisivo, en ese
orden.
• En molares superiores se prefiere la raíz
palatina debido a su amplitud, mientras que
en molares inferiores se suele elegir la raíz
distal por la misma raíz.
Dientes
Pulverización completa de
la pieza dental

Acceso directo a la pulpa

dental
 Dientes
MÉTODOS DESTRUCTIVOS VS MÉTODOS NO DESTRUCTIVOS

Ø El método usado influye en la cantidad y la calidad del ADN que se obtiene.

Ø El aplastamiento completo o pulverización del diente es una técnica destructiva

tradicional en la que el diente completo se rompe manual o automáticamente a
través de trituradoras o molinos.

Ø Las principales desventajas de pulverizar el diente es que produce gran cantidad de

desechos pudiendo ser una fuente de contaminación, tiene mayor cantidad de
inhibidores a la hora de amplificar el ADN
Ø Se genera gran cantidad de calor contribuyendo a la degradación del ADN endógeno
y la calidad del material disponible. Para solventar este problema diversos estudios
proponen el uso de nitrógeno líquido mientras se destruye el diente convirtiéndolo en
polvo para posteriormente solubilizarse e incubarse en una solución de proteinasa K,
EDTA o ambas durante diversos intervalos de tiempo con el objetivo de eliminar los
inhibidores de la PCR y poder amplificar el ADN.
 Dientes
MÉTODOS DESTRUCTIVOS VS MÉTODOS NO DESTRUCTIVOS

Ø Corte longitudinal, horizontal o a nivel apical del diente usando un disco o sierra
muy finos para acceder a la cavidad pulpar que da acceso a las células de las
que se va a extraer el ADN.
Ø El objetivo es rascar (scraping) el interior del diente para extraer células que
contengan ADN.

Ø Ventaja de que es más conservador y facilita el acceso directo a las células de la

pulpa, sin embargo, la eficacia en la recuperación del ADN según algunos
autores puede ser menor dependiendo de la pieza, aunque tiene un rendimiento
suficiente.

Ø Las desventajas que puede presentar es el acceso a la cámara pulpar por su

forma (anatómica) y en sujetos ancianos va disminuyendo de tamaño por
aposición de dentina con la edad.
 Métodos de Extracción de ADN

ü Salting out
ü Fenol Cloroformo
ü Chelex
ü FTA
ü Extracción Diferencial
ü Kit comerciales:
ü A través de membranas de sílice
ü A través de perlas magnéticas
PCR – Reacción en Cadena de la
Polimerasa
 Reacción en cadena de la polimerasa
• Simula en un tubo lo que ocurre durante la replicación celular.
Componentes
dNTPs
Conforman la
Muestra nueva cadena

ADN molde

Taq DNA
Polimerasa Cloruro deCofactor de la Taq
Enzima que adiciona Polimerasa
Magnesio
nucleótidos,
generando una nueva
hebra
Buffer
Medio para que
Primers
se de la reacción
Delimitan el área
a amplificar
Componentes de una PCR
 Etapas de PCR
1 Desnaturalización.
93°C-96ºC.

Hibridación.
2 40°C – 60°C

3 Elongación. 72°C
Electroforesis capilar
 Electroforesis capilar
Ø Electroforesis es la migración
de los iones en una
disolución por la acción de
un campo eléctrico.
Ø Carga del compuesto.
Ø Tamaño
Ø Temperatura
Ø Tamaño o porosidad o
consistencia del gel o
polímero

Ø Ácidos nucleicos,
oligosacáridos y proteínas.
Valoración estadística de la prueba de ADN