19/06/2022

tr í
Analizadoresa
o e
masas
de m
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
1

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
2
de
 19/06/2022

Analizador
de MASAS
t r í
y sistemas a
de detección
o e
m Separa los iones
u r s t r o
C pec aGenera
Los clasifica según su valor m/z
s y procesa lasIAseñales
Mide las corrientes iónicas
s
E ma ST s I C
de INJU
3

k o
M e n
s h
SeparaciónSde iones t a
a deidmasas a d
e n
Analizadores
l r s
E ive al r
n
UCampos uestáticos t r i d e
s y dinámicos:
t a n
I n d a n
S
eléctrico y magnético

4
de
 19/06/2022

1 2 3 4
5 6
tr í a 7

o m e
s
Bloques principales 1 - Sistema de introducción de la muestra

u r r o
de un espectrómetro 2 - Cámara de ionización

t
c
3 - Analizador(es) de masas

C pe as
de masas

A
4 - Detector

s s
5 -

I C I
Presión atmosférica/bajo vacío

E ma ST
6 - Alto vacío
7 - Sistema de datos

de INJU
5

k o
M e n
s h
Analizadores de S t a
a id a d
l e n r s
Cinco tiposE de e
principales v analizadores de lmasas: r
n i r i a e
U us tand t
Analizadores sectoriales (B, E)
Analizadores cuadrupolares (Q)

n d n
Trampas iónicas (IT, QIT) - Orbitrap

I a
S
Analizadores de tiempo de vuelo (TOF, ToF)
Analizadores de resonancia ion-ciclotrónica con transformada

de
de Fourier (FTICR)

6
 19/06/2022

Tipos de analizadores de masas

• Sectoriales (B, BE, EB)
• Tiempo de vuelo (ToF)
tr í a
o
• Cuadrupolos
m e
u r s • Trampa de iones (IT)

t r o
Quadrupole Ion Trap (QIT)
Resonanciacion-ciclotrónica
C depFourier
e (FT-ICR-MS)as CIA con transformada

s
E ma STI s
de INJU
7

k o
M e n
s h
t a
8

a id S a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i
Tomado de:
e
The basics of mass

d
spectrometry in the

I n n
twenty-first century

S a
Gary L. Glish & Richard W.
Vachet, Nature Reviews

de
Drug Discovery 2, 140-150
(February 2003)

8
 19/06/2022

Analizadores de masas

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c
Arthur Jeffrey Dempster

I A
(August 14, 1886 - March 11, 1950) was a Canadian-
American physicist best known for his work in mass spectrometry and his discovery of the

s s I C
uranium isotope 235U. In 1918, Dempster developed the first modern mass spectrometer, a

E ma ST
scientific apparatus allowing physicists to identify compounds by the mass of elements in a
sample, and determine the isotopic composition of elements in a sample.

de INJU
9

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
10
de
 19/06/2022

Analizador
magnético Analizador
Entrada
electrostático
de la muestra

tr í a
o m e
u r s t r o
Medidor de la
corriente iónica

C pe as c
Bloque

I A
s s C
de control

E ma ST I
Bomba
de alto vacío

de INJU
11

k o
M e n
Wolfgang Paul as
h
S t d
a id a
1989 Nobel Prize for Physics

l e n r s
"for the development of the ion trap technique"

E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
12
de
 19/06/2022

Trampa de iones
tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
13

k o
M e n
s h
S t a Analizadores de masas

a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
14
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
15

k o
M e n
s h
S t a
.
Analizador de masas
a id a d
Cuadrupolo o FILTRO de masas

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
16
de
 19/06/2022

Bloques fundamentales del equipo

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
Cámara de ionización Analizador de masas Detector

de INJU
17

k o
M e n
s h
Fuente de iones Cuadrupolota Detector
S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
Ionización y Separación Medición de las

de
fragmentación de iones m/z corrientes iónicas

18
 19/06/2022

tr í a
o
Q
m e
u r s t r o q
C pec as I A
s
E ma ST s I C
de INJU
19

k o
M e n
s h
S t a
Analizador de masas:
a d
ade masas m/zidVs I (%)
l n
Resultado: Espectro
r s
m/z
Pesa los iones y los clasifica según su relación
e
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
de
m/z
20
 19/06/2022

ANALIZADORES DE MASAS
Analizadores de barrido (scan)

í a
Sector magnético

tr
Cuadrupolos

e
Analizadores de transmisión simultánea de iones

s o m
Trampas de iones (lineales, cuadrupolares)

r o
Orbitrap

u
C pe as c t r Tiempo de vuelo (TOF)
FT-ICR-MS

C I A
s
E ma ST s I
de INJU
21

k o
M e n
s h
AnalizadoresSdeta d
n a i d a
l e
E iver al s
n r i e r
Características
U t
principales:
de iones s n d
Transmisión
d u n t a
Resolución
n
Exactitud deImedición de masas
S a
de
Masa máxima medible - rango de masas
22
 19/06/2022

Transmisión de iones
No N

tr í a
o m e
u r s t r o
ecyenellanúmero
C elpdetector
La relación entre el número de iones N que alcanzan

a sde ionización IA
de iones No que se forman
s
E ma ST s
cámara
I C
de INJU
23

k o
M e n
s h
Analizador de S t a
masasd
n a i d a
l
Upper e mass
Em/z (z =1),
limit:
e s
r masa dell ion
El valor
n i v
más alto de
r i a e r
U deumasas
que el
t
s puedetmedir n d
espectrómetro
d n a
I n S a
24
de
 19/06/2022

Analizador de masas
Resolving power :
a
La habilidad del sistema de medición

tr í
para generar señales definidas y distinguibles de

o e
dos iones con diferencia de masa muy pequeña
m
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
25

k o
M e n
s h
Analizadores de S ta d
masas
n a
de baja resolución
i d a
l e
E iver al
de alta resolución
s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
26
de
 19/06/2022

Analizadores demasas

Masas nominales
tr í
•Números másicos (enteros) a
o m e
u r s
Masas exactas
t r o
C •Unidad
e cde masa atómica
s I A
s p s a I C
E ma ST
de INJU
27

k o
M e n
s h
S t a
Masas nominalesa id a d
l e n r s
E ive al
Números másicos
r
n
U us tand t r i e
I n d
Iones isobáricos a n
S
28
de
 19/06/2022

Espectros de masas de baja resolución

14 28
N2

tr í a
e
12 16 28
CO

r s o o m
u
C Iones c t r 13 28
CH
2 4

p e a s I A
s
E ma ST
isobáricos
s
( m/z 28)
I C
de INJU
29

k o
M e n
s h
¿Por qué
S t a
a id a d
se necesita
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
n d alta n
I RESOLUCIÓN? a
S
30
de
 19/06/2022

Medir masas exactas

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
31

k o
M e n
B ta E
s h
S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
de
Espectrómetro de masas de deflexión magnética, de doble enfoque,
con geometría inversa BE.
32
 19/06/2022

Espectrómetro de masas
Se buscan:
cualidades
tr í a
o m e
s
Resolución
u r t
Exactitudr o
C pe as c
Rango de masas
I A
s
E ma ST Sensibilidads I C
de INJU
33

k o
M e n
s h
S t a
d
1H 12C 14N 16O 19F 28Si 31P 32S 35Cl 79Br 81Br 127I

n a id a
l e
E ive al r s
r
37Cl

n
U us tand t r i e 34S

F dSi P S Cln Br I
13C 30Si

H C N O n
I S a
de
Compuestos orgánicos: isótopos estables [A, A+1, A+2]

34
 19/06/2022

Número de átomos de carbono Vs abundancias isotópicas

iones C C10 C25 C50 C90
M 100 100 100

tr í a 100 99

e
M+1 1 11 27 55 100

r s o M+2
o m 3 15 49

u
C pe as
M+3
c t r 2 16
M+4
C I A 3
s
E ma ST s I
de INJU
35

k o
M e n
s h
S t a
d
Problemas de la interpretación de patrones isotópicos

n a id a
e
Relación señal/ruido muy baja
l
Edeficiente ive al
Resolución muy baja
r s
Calibración
n r i e r
e.g. [M U
t
+ H + H O] y [Ms+ NH ]
Superposición de iones de diferente origen,
n d
d u +

n t a +

n
2 4

I M y [2M]Sa
Superposición de iones de diferentes compuestos

de
Superposición de iones + 2+

36
 19/06/2022

Resolución

tr í a
o m e
u r s t r o
c
C pBajae as Alta IA
s
E ma ST s I C
de INJU
37

k o
M e n
s h
Resolución Sta d
n a i d a
l e
E iver al s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
de
Baja Alta
38
 19/06/2022

Resolución de picos (corrientes iónicas parciales)

CO+ C2H4+
[CO+ + N2+ + C2H4+]
Alta

tr í a N2+

o m e
u r s t r o
C pe as
Baja c I A
s s C
m/z

E ma ST I
19.60 19.80 20.00 20.20
28 27.9949 28.0061 28.0313

de INJU
39

k o
M e n
s h
que puede “pesar” iones conS
t a
Analizador de masas: figuralmente, es una balanza,

a id a d
diferente precisión

Equiposle
n r s
E ive al
de alta resolución
r
n
U us tand
•Masas exactas t r i e
Equipos de baja
I n d resolución
a n
S
de
•Masas nominales
40
 19/06/2022

Masas exactas
Unidad de masa atómica

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
41

k o
M e n
s h
Analizador de S ta d
masas
Resolving power:a
n si d a
La habilidadle
del sistema de rmedición
E señalesivdefinidas
e y distinguibles
a l r
para generar
n
U ust tan
dos iones con diferencia i de
de masarmuy pequeña d e
I n d a n
S
42
de
 19/06/2022

∆m

tr í a
o m e
s
10%
r 5%ro
u
C pe as c t
C I A
s
E ma ST s I
de INJU
43

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l n
Resolving power:
e r s
E ive al
Two peaks are considered to be resolved if the valley

r
i e
between the two peaks is equal to 10% of the weaker

n t r d
peak intensity when using magnetic or ion cyclotron

U s n
u a
resonance instruments and 50% when using
.
d
quadrupoles

n n t
I S a
44
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
c
C pe asR = m/ I A m
s
E ma ST s I C
de INJU
45

k o
M e n
s h
S t a
d
Masas exactas Resolución

a id a
Iones isobáricos
requerida (R = M/∆M)

n
(u.m.a.)

Ar
l e
E ive al r s
C3H4 39,96239
40,03130
580

N2

n
C2H4

r i e
28,00615
r 1110

U us tand t
28,03130

CO N2 27,99491
28,00615 2490

d n
C5H5N 13CC H

n
79,04220 9750

I a
5 6 79,05030

S
13CC
6H7 C7H8 92,05813
92,06260 20 600

46
de
 19/06/2022

Resolución R = M /∆M
Iones Masa nominal Masa exacta
C20 H9+ 249
tr í a 249,0704

o
C19 H7 N+
e
249

m
249,0580

u r s C19 H21+

t r o
C13 H19 N3 O2+
249
249
249,1643
249,1479
La c
C C pH Ne C H aparasseparar el doblete:IA
resolución requerida
s
E ma ST 19 7
+
s
19 21
+
I C R = 249/(249.1643 - 249.0580)

de INJU
47

k o
M e n
s h
S t a High resolution data provide the elemental

d
compositions.

n a id a High mass resolution is required for two reasons: to

e
separate the signal due to analyte ions from

l r s
interferences and to provide narrow error limits for

E ive al
exact mass determinations. Shown in Figure are

r
calculated mass peak profiles at 1.000 and 20.000

i e
resolution for ions produced from the calibrant, from

n
U us tand t r
column bleed, and from an analyte, all with a
nominal mass of 281 amu.
The overlap of the profiles at the lower resolution

d n
indicates all three ions would contribute to the

I n a
signal observed at m/z 281, distorting the mass

S
spectrum and the exact mass obtained for the
analyte ion. At the higher resolution, the profiles are

de
baseline resolved and the analyte ion can be
monitored without interferences form the other two
ions.

48
 19/06/2022

Composición: C, H, O, N
Exactitud de medición: 5 ppm

tr í a
Número de compuestos con la misma fórmula

o m e
(composición) elemental:

u r s t
101.1
r o– 1 200.2 – 1 300.3 –2

C pe as c
400.4
700.7
–
–
2 500.5
4 800.8
I A
– 2 600.6
– 10 900.9
–3
– 50
s
E ma ST
1000.1
s– 139
I C
de INJU
49

k o
M e n
s
Masas exactas y números ta C H
h
a id S
másicos de hidrocarburos
a d n 2n+2

C
l e n r s
E ive al
n Masas exactas Números másicos M

n r i e r
U us tand
10 142,172 142 0,17
20
30
282,329
422,485 t 282
422
0,33
0,48
40

I n d
562,642

a n
562 0,64

S
50 702,798 702 0,80
100 1403,581 1402 1,58

de
150 2104,363 2102 2,36

50
 19/06/2022

Resolución
R = m/∆m

tr í a
Exactitud
e
u r so= mcalculadam
∆m
t r o - mobservada
C < p5 ppmec– equipos aquesmiden masas exactas
Exactitud (ppm) = 10 x ∆m/m
A
6

I
calculada

s
E ma ST s I C
de INJU
51

k o
M e n
s h
S t a
d
Resolución típica en espectrometría de masas

n a id a
l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
52
de
 19/06/2022

Exactitud típica en la medición de masas

Cuadrupolo 0,1 u
tr í a
Masas nominales Baja

o m e
r s o
Trampa iónica 0,1 u Masas nominales Baja

u
C pe as cTOF
t r Fórmula empírica,
Alta

A
0,0001 u

I
composición elemental

s s C
Fórmula empírica,

I
Sectorial 0,0001 u Alta

E ma ST
composición elemental

de INJU
53

k o
M e n
s h
Analizadores deSmasas ta dedalta
n a i d a
resolución:
l e
E conde masas dee
s
r ion-ciclotrónica
Espectrómetro
i v resonancia
i a l e r
ntransformada
U de tiempo s t r
de Fourier (FT-ICR/MS)
n d
Analizador
d u t a
de vuelo (R-TOF-MS)
Trampa de n
I n
Espectrómetro de masas de doble S
a iones-Orbitrap

de
enfoque (BE, EB, EBE )

54
 19/06/2022

FT-ICR/MS Analizadores de masas de alta

resolución
tr í a
o m e
u r s t r o TOF-MS

C pe as c I
BEA
s
E m Orbitrapas
T I C
S
de INJU
55

k o
M e n
s h
S t a
d
107

a
100

a id
79
H O

n
41

l e s
91

r
50 39 77
27

E ive al
53 66
29 94 135
150

r
43 51 55
59
63
69 117 121

i
103

e
74 131

n
0

r
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160

U us tand t
(mainlib) cis-Ocimene, 8-oxo-

I n d a n
S
56
de
 19/06/2022

Primeros espectrómetros de masas (MS) 1897

Cámara de ionización EI 1918 1912
>100 de camino Medición de pesos atómicos 1919
sin tregua
años Primer espectrómetro de masas comercial
Analizador de tiempo de vuelo TOF 1943
1946
Analizador de tiempo de doble enfoque 1952

a
Resonancia ion-ciclotrónica ICR 1953

í
GC-MS 1956

tr
1966
1968 1965 Cuadrupolo
LC-MS

e
1981 1973 1967 Ionización química Trampa de iones
1969 Espectrometría de masas tándem, MS/MS

o
1984 1974

m
Cámara de colisiones activadas, CAD, CID
MALDI 1987-88 FAB

s
Desorción/ionización por campo, FI, FD

r o
Desorción/ionización por plasma, PD

r
Termospray FT-ICR-MS

u
1989

t
1991 ESI-ICR-MS

c
Microelectrospray

C pe as
1993

A
Análisis de proteínas, oligonucleótidos

I
Conformaciones e interacciones no-covalentes
2000 Orbitrap

s s C
2002

I
IT cuadripolar lineal, LQIT

E ma ST
2004 Mejoramiento de R-TOF-MS, FT-ICR-MS.
ESI/APCI/APPI-MS y MALDI de macromoléculas
2012 Análisis de rutina de polímeros, biomoléculas

de INJU
57

k o
M e n
s h
Analizadores S detamasasd
n a i d a
E l e
I. Analizadores de barrido
s
(scanning analyzers)

e r l
Equipos de sector magnético

i v
Cuadrupolos (Q)
n a
de iones isimultánea
r e r
U us tand t
II. Analizadores de transmisión
Analizadores magnéticos de dispersión

n d n
Analizadores de tiempo de vuelo (ToF, Time-of-Flight)
I a
S
Trampas de iones (IT)

de
Analizadores de resonancia ion-ciclotrónica (ICR)

58
 19/06/2022

Cuadrupolos y trampas de iones

QqQ
tr í
Cuadrupoloa
o m e filtro de masas, QMF

u r s t r o
C pe as c Q-TOF

I A
Trampas de iones, IT
Orbitrap
s s C
IT-TOF

E ma ST I
de INJU
59

k o
M e n
s h
Quadrupole Ion Trap St
a
a id a d
l e n r s
Electric/magnetic fields trap, store,

E ive al
eject ions

i e
Varying RF frequency will vary the

n r r
U us tand t
m/z ratios that are trapped
Ions may be stored either

d
destructively or non-destructively

I n a n
Additional fragmentation can be

S
performed on ions stored in the

de
ion trap

60
 19/06/2022

tr í a
o m e TRAMPA de iones

u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
61

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us FT-ICR-MSt r i d e
t a n
I n d a n
S
62
de
 19/06/2022

FT-ICR-MS
tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
FT-ICR-MS
de INJU
63

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
U n t r i d e
s
Analizadorude masas ta
n
I n d a n
cuadrupolar S
64
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C Cuadrupolo.
e c s I A
s p cuadrupolar.
s a I C
E m
Analizador a T
Filtro
S
de masas.

de INJU
65

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I
Volumen iónico
n d
Cámara de ionización:

a n
Cuadrupolo:
Filtro de masas
Detector:
Electromultiplicador

S
66
de
 19/06/2022

Analizador de masas cuadrupolar

Los iones se mueven a lo largo

í a
del cuadrupolo, entre las cuatro

tr
barras metálicas

e
El campo eléctrico separa los

r s o o m
iones

r
Los iones están sometidos al

u c t
efecto complejo de varias fuerzas

C pe as A
Solamente los iones de deter-

s s I I
minada relación m/z alcanzan el

C
E ma ST
detector

de INJU
67

k o
M e n
s h
+ V only ta
a id m
dc
S a d
l e n r s
m 1

E ive mal m r
4

n
U+ V onlyust tand r i 3
e2

thed
dc

Characteristics ofn x-axis quadrupolenrod pair.

I S a
de
Ion trajectories with no rf voltage.
68
 19/06/2022

m1
+ (Vdc + V rf cos wt)
m4

tr í a
e
m2

r s o + (V + Vmcos wt)
o
u t r dc

c of the x-axis
C pCharacteristics
rf m 3

e a s I A
quadrupole rod pair.
s
E ma ST s I C
Ion trajectories with dc and rf voltage.

de INJU
69

k o
M e n
s h
a
Cuadrupolo: Diagrama de testabilidad
S
r a a d
a
a = 4z U/m n
e i d
2z U/m r w ers
w U ± Vcos(wt)
l
2 2
0
q =E
a = (2U/V)qn i v 0
2 2

i a l e r
U us tand t r
0.2
0.4
0.6

I n d0.4

a n
0.6

S
0.2 0.8

de
q
70
 19/06/2022

Analizadores cuadrupolares. Corriente directa y alterna

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
71

k o
M e n
s h
S t a
Tiempo t
a id
1
a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e Corriente iónica

I n d a n
parcial del ion

S
72
de
Barrido completo: Full scan
 19/06/2022

Tiempo t2

tr í a
o m e
u r s t r o Corriente iónica

C pe as c
parcial del ion

C I A
s
E ma ST s I
Barrido completo: Full scan

de INJU
73

k o
M e n
s h
S t a
Tiempo t
a id
3
a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e Corriente iónica

I n d a n
parcial del ion

S
74
de
Barrido completo: Full scan
 19/06/2022

Barrido completo (Full scan)

m2 m1
T1 (Rf1/dc1): m1

í a
m3

e tr m2
o
m1

r s
T2 (Rf2/dc2):

r o m m2

u t
m3

C T p(Rfe/dcc): as
m
I A
3
m1

s
E ma ST
3 3
s 3
I C m2
m3

de INJU
75

k o
M e n
s h
t t
S t a t
d
1 2 3

n a id a
l e
E ive al
Corriente iónica
r s
Corriente iónica Corriente iónica

r
parcial del ion parcial del ion parcial del ion

n
U us tan
1 Barrido (full scan) t r i
= 1 Espectro de masas d e
I n d a n
S
76
de
 19/06/2022

Scan Corriente iónica total

í a
Corriente iónica parcial 1 Scan

e tr
o
Espectro de masas (1 scan)

s m
8 Scans

r r o
I,%

u
C pe as c t
C I A
s
E ma ST s I m/z Time, min

de INJU
77

k o
M e n
s h
S t a
d
+ + +

n a id a
l e
E ive al
Scan 1
r sScan 2 Scan 3
+

n r i
+

e r
U us tand t
Scan 4
n d n
Scan “n”

Corriente iónicaIreconstruidaSa
4
3 n
2

de
1

78
 19/06/2022

tr í a
El o
sistema de datosm
tiempo
e tiempo tiempo

u s o
r por lo menostr10 puntos (scans) para defenir
(computador) debe tomar

e c la formasdel pico cromatográfico

C adecuadamente I A
s p s a I C
E ma ST
de INJU
79

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n r i e
tiempo

U us tand
Análisis cualitativo
t
: para obtención de datos confiables,

Análisis cuantitativod
se requerirían 10 SCANS a lo largo del pico cromatográfico.

I n a n
: Para obtener datos confiables

S
y reproducibles, 15-20 SCANS a lo largo del pico,

de
se necesitarán adquirir durante la corrida cromatográfica.

80
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
e c
C Analizadores s I A
s p s a C
cuadrupolares
I
E ma ST
de INJU
81

k o
M e n
s h
S t a
d
Typical performance data for quadrupole, ion-trap

a id a
and magnetic-sector mass-spectrometers

n
l e
E ive al r s
r
Properties Quadrupole Ion-trap Magnetic

n
U us tand
Mass range, a.m.u.

t r i
Mass resolution, a.m.u.
2 - 800
(3000)
0.1 - 1
e 10 - 600
(2000)
0.1 - 1
1 - 50.000
(200.000)
0.001 (m/z 1000)

LDL, g

I n d a n 10-13-10-12 10-13-10-12 10-15-10-14

S
Linearity 4-5 3-4 3-4

82
de
 19/06/2022

Modos de operación del analizador

cuadrupolar

tr í a
o m e
u r s t r o
e c
C SIMpMonitoreo
Full scan (barrido
s
completo)
I A
s scan + SIMs
a
de ion(es)
C
seleccionado(s)
I
E ma ST
Full

de INJU
83

k o
M e n
s h
S t a
Monitoreo de ion(es)
a id d
selectivo(s)
a
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
84
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s C
El filtro de masas (cuadrupolo) deja pasar solo un ion

s
E ma ST I
o iones («diagnósticos»), seleccionados previamente a
partir de un espectro de masas obtenido en modo full scan

de INJU
85

k o
M e n
s h
t a
Analizadores deSmasas d
n a i d a
e s
Modosl de adquisición
E iver al
n r i e r
U us tand t
Barrido completo (SCAN, full scan)

d
Monitoreo de ion(es) seleccionado(s) (SIM)

I n
SCAN + SIM
a n
S
86
de
 19/06/2022

SIM
SIM
í a
e t r SIM
r s o o m
u
C pec as t r
Monitoreo de ion(es) seleccionado(s)

SIM C I A
s
E ma ST s I
de INJU
87

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
88
de
 19/06/2022

SCAN
Cuando la adquisición se hace en el modo
SCAN, la masa de cada ion se mide

tr
durante aproximadamente 100 micro-
í a
e
segundos (100 µs)

r s o
SIM
o m
u
C pe as c t r
Cuando la adquisición se hace en el modo

I A
SIM, la masa de cada ion típicamente se

C
s s I
monitorea durante 100 milisegundos

E ma ST(100 ms)

de INJU
89

k o
M e n
s h
Relación S/N S t a
a id a d
l e n r s
La relación S/N es proporcional a la raíz

E ive al r
cuadrada del tiempo que dura una medición.

n
U us tand r i e
El modo de adquisición SIM, grosso modo, es

t
ca. 30 veces más sensible que el de FULL
SCAN.

I n d n
Dependiendo del background del instrumento

a
S
y la matriz de la muestra, el modo SIM puede

de
alcanzar la sensibilidad 20-100 veces más alta
que la del modo FULL SCAN.

90
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
c
C SIM:pselectividad
e asy sensibilidad I A
s
E ma ST s I C
de INJU
91

k o
M e n
s h
S t a
La principal área de aplicación del modo de adquisición

a id a d
de datos SIM es la detección y la cuantificación de

n
compuesto(s) de interés (compuestos-target) en una

l e s
muestra

E ive al r
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
92
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
93

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
94
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
95

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
96
de
 19/06/2022

SCAN
Cuando la adquisición se hace en el modo SCAN,

í a
la masa de cada ion se mide durante

tr
aproximadamente 100 microsegundos (100 µs)

oSIM
m e
u r s t r o
c
Cuando la adquisición se hace en el modo SIM,

C pe as I A
la masa de cada ion típicamente se monitorea
durante 100 milisegundos (100 ms)

s
E ma ST s I C
de INJU
97

k o
M e n
s h
S t a
d
Durante un barrido full scan, cada masa se mide por

a id a
aproximadamente 100 μs. En contraste, en el modo

n
SIM este tiempo es de 100 ms. Puesto que la relación

l e
E ive al r s
señal/ruido es proporcional a la raíz cuadrada del
tiempo de medición, se tiene que el modo SIM es unas

n r e r
30 veces más sensible que el modo de barrido

i
U us tand t
normal. En la práctica, se pueden lograr mejoras con
factores de 20-100, dependiendo del instrumento,
el fondo, la matriz de la muestra, etc.

I n d a n
S
98
de
 19/06/2022

SCAN I%

tr í a
e
m/z

r s o
SIM
o m
I%

u
C pe as c t r
C I A
s
E ma ST s I m/z

de INJU
99

k o
M e n
s h
S t a
d
Barrido completo (Full scan)

n
m
a id a
e
1

l
E ive al r s
Corriente iónica total (TIC)

Monitoreo delnion seleccionador i e r

U m us tand t (SIM)

I n d 1

a n
S
de
Fragmentograma de masas

100
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
c
C pe as Otro ejemplo I A
s
E ma ST s I C 101

de INJU
101

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
U n t r i d e
u s t a n
SFE, CO2
I n d a n
S
102
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
s
94

r r o
138

u
C pe as c t
C I A
s
E ma ST s I
303

de INJU
103

k o
M e n
s h
S t a NIST MS Database

a id a d
l e n r s
E ive al Escopolamina

r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
104
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
Adquisición de datos en modo SIM: m/z 94, 138, 303

de INJU
105

k o
M e n
s h
S t a
a d
94

n a id 138

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
d n
303

I n S a
106
de
 19/06/2022

Full scan

tr í a
e
22.0024.0026.0028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.00 42.0044.00 46.00

s o o m
TIC: MUEST41R.D

r
SIM
33.70

u
C pe as c t r
C I A
s
E ma ST s I 30.37 35.43
37.74

36.54

20.0022.0024.0026.0028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.0042.0044.0046.00

de INJU
107

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
Corriente iónica total (TIC) de un extracto aislado con fluido supercrítico (SFE,

de
CO2) de frutos de Datura sp. (Familia Solanácea) y fragmentograma de masas
del mismo extracto, obtenido con base en iones diagnóstico de la escopolamina,
i.e., m/z 94, 138 y 303.

108
 19/06/2022

Aroma de ícafé
a
tr e
r s o o m
u
C pe as c t r
C I A
s
E ma ST s I
de INJU
109

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
de
Umano, K.; Shibamoto, T. J. Agric. Food Chem. 1987, 35, 14.
Stashenko E., et al. J. Agric. Food Chem. 1992, 40, 2257.
110
 19/06/2022

Comónentes químicos del aroma de café

Compuestos alifáticos
• Hidrocarburos
• Aldehídos

tr í a
e
• Éteres, ésteres

o m
• Cetonas, alcoholes

u r s t r o
• Ácidos volátiles

C pe as c
Compuestos aromáticos
• Hidrocarburos

C I A
s • Fenoles

E ma ST s I
Compuestos heterocíclicos

de INJU
111

k o
M e n
s h
S t a
d
HS 100°C (2 h)

a id a
Cafeína

l e n r s
Ácidos grasos

E ive al r
n
U us tand
HS 70°C (2 h)
t r i
10.00 20.00
e 30.00 40.00 50.00 60.00

I n d a n Cafeína

S
de
10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00

112
 19/06/2022

2-Metil-butanal

a
Benceno
3-Metil-2-butanona
tr í
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60

de INJU
113

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
Tolueno y pirrol

n
U us tand t r i e
I n d a n
S
2.80 3.20 3.60 4.00 4.40 4.80 5.20 5.60 6.00 min

114
de
 19/06/2022

tr í a
o m e 91

s
100

u r t r o
c
106

C pe as I A
50

s
E ma ST s I C
39
51 77
27 65
15 41 103
74
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120

de INJU
(ma inlib ) Benzene, 1,3-d imethyl-

115

k o
M e n
s h
S t a
a id
Full scan

a d
Alquilbencenos

l e n r s 1 - Tolueno

E ive al r
2 - Etilbenceno

i e
3 - Xileno

1n
U us tand t r
SIM: m/z 91
4
5
-
-
Xileno
C3-Benceno

d n
2 6 - C4-Benceno

n
6

I a
5 8 7 - iso-C4-Benceno
3 4

S
7
8 - C5-Benceno

de
4.00 8.00 12.00 16.00 20.00

116
 19/06/2022

La principal área de aplicación del modo de adquisición

de datos SIM es la detección y la cuantificación de
compuesto(s) de interés (compuestos-target) en una
muestra

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
117

k o
M e n
s h
S t a
d
Los iones, estructuralmente significativos, deben ser

a id a
seleccionados a partir del espectro de masas de una

n
sustancia de interés, obtenido en el modo de barrido

l e r s
completo (full scan) de acuerdo con los siguientes criterios:

E ive al r
Si es posible, sus intensidades deben ser mayores del 30%.

n
U us tand t r i e
Los iones moleculares o fragmentos estructuralmente relacionados con
ellos, i.e., productos de su descomposición, figuran entre los más

d
opcionados para ser elegidos.

I n a n
Los iones a seleccionar deben ser los de masas más altas, hay que

S
evitar los fragmentos de la región de masas pequeñas, así como los

de
iones correspondientes a las señales del fondo, sangrado de la
columna u otras señales de background.

118
 19/06/2022

Criterios para la identificación confiable,

inequívoca, de un compuesto químico:

a
1. Tiempo de retención correcto, dentro del
intervalo de error de medición, con
tr í
o
respecto al compuesto patrón (estándar) o

m e
s
al estándar interno.

u r t r o
2. Relación correcta de intensidades (%) de

C pe as c A
iones seleccionados en el espectro de
I
s s C
masas (± 10 -15%).

E ma ST I
3. Relación señal/ruido mínimo de 3:1 a 10:1.

de INJU
119

k o
M e n
s h
S t a
d
Análisis de plaguicidas organofosforados mediante GC/MS

a id a
(modo full Scan)

l e n r s
16
18

E ive al
350

r
300

i e
5 20

n r
8

U us tand
Abundancia (*104)

t
250
7
200
23 9
13 15
6 12 19
150 22

d
1011 21

n
100

n
4 14 17

I a
50
1

S
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 Tiempo, min

de
Corriente iónica total (TIC) obtenida mediante GC/MS (EI, 70 eV) de plaguicidas organofosforados (10 µg mL -1),
columna DB-5MS (60 m, L x 0.25 mm, d.i. x 0.25 µm, df).

120
 19/06/2022

Listado de plaguicidas organofosforados para análisis mediante

GC/MS (modo SIM)
tR, Tiempo de inicio, Iones característicos,
No pico Compuesto Grupo
min min m/z

a
1 Diclorvos 13.04 1 10.00 145, 185, 187, 220

í
2 Vernolato 18.45 2 15.74 128, 146, 161, 203

tr
3 Pebulato 18.82 128, 132, 161, 203
4 Tebutiurón 20.40 3 19.61 129, 156, 157, 171

e
5 Cicloato 23.15 4 21.77 154, 155, 186, 215
6 Prometón 25.64 5 24.39 168, 183, 210, 225

o
7 Terbufos 26.74 6 26.19 153, 186, 231, 288

m
8 Diazinón 27.02 137, 179, 199, 304

s
9 Disulfotón 27.79 7 27.40 142, 153, 186, 274

r o
10 Metribuzin 30.37 8 29.08 144, 171, 198, 214

r
11 Simetrin 31.21 155, 170, 198, 213

u t
12 Ametrin 31.53 170, 185, 212, 227

c
13 Metolaclor 34.10 9 32.82 146, 162, 211, 238

C pe as
14 MGK-264 35.82 10 34.96 164, 177, 210, 275

A
MGK-264 (isómero) 36.53 164, 177, 210, 275

I
15
16 Butaclor 38.27 11 37.40 160, 176, 188, 311
17 Fenaminfos 38.76 154, 217, 288, 303

s s C
18 Napropamida 38.84 128, 144, 171, 271

I
19 Merfos-Oxon 39.49 12 39.16 113, 147, 169, 202

E ma ST
20 Carboxin 39.75 115, 132, 143, 235
21 Norflurazón 41.73 13 40.74 102, 145, 173, 303
22 Fenarimol 46.22 15 44.49 139, 219, 251, 330

de INJU
121

k o
M e n
s h
S t a
d
Corriente iónica total (TIC) de la mezcla de plaguicidas y espectro

a id a
de masas del compuesto diazinón (modo Full Scan)

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
Diazinón
C12H21N2O3PS

S
m/z 304

122
de
 19/06/2022

Método para el análisis mediante GC/MS (modo SIM) de plaguicidas

organofosforados

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
123

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
124
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
125

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
126
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
127

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
128
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
129

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
130
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
131

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
132
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
133

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
134
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
135

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
136
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
137

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
138
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
139

k o
M e n
s h
S t a
d
Análisis de plaguicidas organofosforados mediante GC/MS (modo

a id a
SIM)

l e n r s
28
16

E ive al
26

r
24 20
22 8

n i e
20

r
Abundancia (*104)

13

U us tand t
18
18
16 6
5
14 7 12 19
2
12 11
3
22
10

d
8 4 21
10 15

n
9
17

n
6
14

I a
4
2 1
0

S
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00
Tiempo, min

de
Fragmentograma de masas obtenido mediante GC/MS (EI, 70 eV) de plaguicidas organofosforados (5 µg mL -1),
columna DB-5MS (60 m, L x 0.25 mm, d.i. x 0.25 µm, df).

140
 19/06/2022

Análisis de plaguicidas organofosforados mediante GC/MS (modo

SIM) en muestra real

a
Abundance 137 Scan 2251 (27.098 min): 992621-01-AT.D\data.ms
Abundance TIC: 992621-01-AT.D\data.ms 90000

í
85000
1200000
Muestra positiva 80000

tr
75000
1000000
para diazinon 70000
65000
179
60000
800000 55000

e
50000
600000 45000
40000 199
35000
400000

o
30000

* 25000 304

m
20000
200000
15000

s
10000
0 5000

r o
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 Time--> 0 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310
m/z-->

r
Abundance
137

u
Scan 2254 (27.049 min): OPP7.D\data.ms

t
Abundance 65000

TIC: OPP6.D\data.ms (*) 60000

1200000
MRC de OPP, 5 mg/L 55000

c
179
1000000 50000

C pe as
45000

A
800000 40000

I
35000
199
600000 30000
25000
400000 304
20000

s s C
15000
200000

I
10000
0

E ma ST
5000
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 0
Time--> 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310
m/z-->

de INJU
141

k o
M e n
s h
S t a
d
TIC: 1PPM.D
23000

a id a
22000

21000

n
20000

19000

l e s
18000

r
17000

16000

E ive al
15000

r
14000

13000

i e
12000

n r
11000

U us tand t
10000

9000

8000

7000

6000

d
5000

n
4000

n
3000

I a
2000

1000

S
25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00

Cromatograma típico de la solución estándar

de
(1 ppm) de pesticidas organofosforados.
GC-MSD. Modo SIM (EI, 70 eV).
142
 19/06/2022

Abundance

TIC: BOCA1.D
15000

14000

13000

12000

11000

í a
10000

tr
9000

8000

e
7000

6000

o m
5000

s
4000

r r o
3000

u t
2000

c
1000

C pe as A
25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00

I
Time-->

s C
Cromatograma típico de un extracto obtenido

s
E ma ST I
de aguas marinas (SIM, EI, 70 eV)

de INJU
143

k o
M e n
s h
S t a A

a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
B

S
de
Comparación de los cromatogramas obtenidos de: A. Solución
estándar de pesticidas organofosforados (1 ppm). B. Extracto (LLE)
de aguas marinas. Columna HP-5MS (60 m). EI (70 eV). Modo SIM.

144
 19/06/2022

El camino al resultado inequívoco

NO es siempre DIRECTO

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
145

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
U n t r i d e
u s
Falsos positivos t a n
n d
I negativosa n
Falsos S
146
de
 19/06/2022

un ejemplo
tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
147

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
148
de
 19/06/2022

H3C CH2
CH2
Cl

a
O
O

tr í
o
N

m e
r s o
N CH2

u
C pe as c t r N

A
Cl

s s I C I
E ma ST Propiconazole

de INJU
149

k o
M e n
s h
S t a
d
Mezcla de patrones de TRIAZINAS, MSD, EI, 70

a id a
eV, full scan

l e n r s
TIC: T100PPM.D

E ive al
30.32 45.34
34.58

r
1800000 45.82

i e
1600000

n
U us tand t r
1400000

1200000 Propiconazole
29.19
1000000

d
29.95
35.70

n
800000 28.05

n
34.07 49.16

I a
600000

S
400000 27.53

48.88

de
200000
31.13
24.73 28.3931.74
0
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 60.00
Time-->

150
 19/06/2022

Espectro de masas (EI, 70 eV) de Propiconazole

Scan 10212 (49.154 min): T100PPM.D
173
95

90 259

85

a
80

tr í
75

70 69

e
65

60

o m
55

r s o
50

r
45

u t
40

C pe as c
35

A
30 191

I
25

s s C
20 128 145

I
15

E ma ST
10 55 CROM-MASS-UIS
82 109 159
5 206
96 220 234 298
0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300

de INJU
151

k o
M e n
s h
t a
Solución-patrón. Mezcla de triazinas (5 ppm). MSD (EI, 70 eV). SIM.

S
a id a d
27.18
27.67
28.79 33.61
34.07
35.19
8500

n
8000
29.67

l e s
7500

Propiconazole

r
7000

E ive al
6500

r
6000 49.02

n i e
5500

U us tand t r
5000

4500

4000

d
3500

n n
3000

I a
2500

S
2000 48.73

1500

de
1000
CROM-MASS-UIS
500

26.0028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.0042.0044.0046.0048.0050.0052.00
Time-->

152
 19/06/2022

Propiconazole: iones característicos m/z 259, 191, 173, 145

Scan 2539 (49.127 min): T10PPM.D
750 173

700

650

a
259

í
600

tr
550

e
500

o
450

s m
400 191

r o
350

u t r
300

C pe as c
250

A
200

I
145
150

s s C
100

E ma ST I
50
CROM-MASS-UIS
0
140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260

de INJU
153

k o
M e n
s h
t a
TIC: P13IR.D

S
27.92
28.88 33.80
34.29
35.29

d
140000

a id a
130000

n
Muestra de sedimento.
120000

l e r s
110000

Extracción Soxhlet. MSD.

E ive al
100000

EI (70 eV). Modo SIM.

r
90000

n
U us tand t r i e
80000

70000

60000

d n
50000

I n a
40000

S
51.21
30000 49.00

de
20000

10000 29.69
28.16 49.55
27.26 50.91
50.04

26.0028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.0042.0044.0046.0048.0050.0052.00
Time-->

154
 19/06/2022

TIC: T10PPM.D
TIC: P11B.D (*)
60000

55000

50000

a
45000

tr í
40000

e
35000

o m
30000

r s o
25000

u t r
20000

C pe as c
15000

I A
10000 Patrones

s s C
5000
Muestra

E ma ST I
0
48.00 48.50 49.00 49.50 50.00 50.50 51.00 51.50 52.00 52.50
Time-->

de INJU
155

k o
M e n
s h
t a
Scan 2489 (48.742 min): T10PPM.D

S
173

d
550 259

500

a id a
450

n
400

350 Patrón de

e s
191

PROPICONAZOLE.

l
300

r
250

Iones

E ive al
200

«diagnóstico»:

r
150
145

m/z 259, 191, 173,

100

n r i e
50

145

U us tand t
0
140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260
m/z-->

Scan 2522 (48.996 min): P13IR.D

Compuesto
145

24000

d
en el extracto
22000

n
20000

n
de sedimento,

I a
18000

16000

con el mismo

S
14000

tiempo de retención
12000

10000

de
8000

6000
del
4000 PROPICONAZOLE
2000
173 191 259
0
140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260
m/z-->

156
 19/06/2022

En el caso de duda, hay que usar por lo menos

dos técnicas de extracción o detección
(e.g., ECD y MSD, o inmunoensayo y MSD).

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
157

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U positivos t r i d e
Falsos u s t a n
Falsos n d
I negativosa n
S
158
de
 19/06/2022

Mango
a
Mangifera indica

tr í
¿Tendrá pesticidas?

o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
159

k o
M e n
s h
S t a
Pulpa de mango

a de pesticidas
Extracción Soxhlet
a d
l e n Análisis de
s i d
residuos

porrHRGC/ECD
organoclorados
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
160
de
 19/06/2022

Patrones OCP
OCP – Pesticidas organoclorados

tr í a
o m e
u r s t r o
Extracto Soxhlet

c
de pulpa de mango

C pe as I A
s
E ma ST s I C
de INJU
161

k o
M e n
s h
S t a
a id a dLindano en la pulpa

n
de mango? Grave!

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
B

d
A

I n a n
S
Superposición de dos cromatogramas:

de
A. Mezcla de patrones de pesticidas organoclorados;
B. B. Extracto Soxhlet de pulpa de mango. Agilent 6890 Plus.
Splitless (2µL). ECD. Columna HP-5 (30 m).

162
 19/06/2022

Abundance

TIC: OCP.D
50.58
1400000

1300000 52.33

1200000 48.79

1100000 50.09
44.74

a
1000000

í
42.82 48.15

tr
900000
43.37 48.08 61.55
47.54
49.24
800000 46.56
44.96

e
40.76
39.48
700000 33.36 39.62
38.5441.28
40.08

o
50.17 55.10

m
600000 51.24

r s o
39.31
500000

u t r
400000

c
31.89
300000

C pe as A
200000

I
62.15

100000

s s I C
30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 60.00 65.00

E ma ST
Time-->

TIC de los patrones de pesticidas organoclorados. Full scan. EI.

70 eV. Agilent 5973N. Columna DB-5MS (50 m). Splitless (2µL)

de INJU
163

k o
M e n
s h
t a
Abundance

S d
TIC: MANGOSI2.D
TIC: OCPSIM.D (*)

a
2800

a id
-Lindano

2600

n
2400

l e r s
2200

E ive al
2000

r
1800

i e
1600

n
U us tand t r
1400

1200

1000

d
800

n n
600

I a
400

S
200

de
37.50 38.00 38.50 39.00 39.50 40.00 40.50 41.00 41.50
Time-->

Efectivamente: Se confirma por GC/MS, que en el extracto de pulpa

de mango se encuentra un pico con tR igual al del α-lindano

164
 19/06/2022

Abundance Abundance

TIC: OCPSIM.D

Patrón Extracto
10000 TIC: MANGOSI2.D
9500

9000
2200

8500
2000

A
8000

7500

X
1800 37.65
7000 38.55

6500 1600
6000

5500 39.63 40.09 1400

5000 41.30

4500
1200

4000
1000
3500

3000

a
800
38.25
2500

í
2000 600
1500

tr
1000 400 39.79
40.77 38.56
500

38.00 38.50 39.00 39.50 40.00 40.50 41.00 41.50 42.00 37.4037.6037.8038.0038.2038.4038.6038.8039.0039.2039.4039.6039.80
Time--> Time-->

e
Abundance Abundance

Scan 257 (38.543 min): OCPSIM.D Scan 259 (38.555 min): MANGOSI2.D
181 109
2800

o
180

α-Lindano Compuesto X
219
170

m
2600
160

s
2400
150
2200

o
140

r
2000 130

r
120
1800

u t
110
1600
100

1400 109 90

c
80
1200

C pe as
70
1000 181
60 219

A
800 50

I
600 40

30
400
20
200

C
10

s s
0 0

I
100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220
m/z-->

E ma ST
Aunque los tiempos de retención de los picos “A” y “X” coinciden, sus
espectros de masas, adquiridos en modo SIM (iones típicos de α-lindano),
no son idénticos.

de INJU
165

k o
M e n
s h
t a
Abundance

S
Scan 257 (38.543 min): OCPSIM.D

d
181

α-Lindano
2800
219
2600

a id a
2400

2200

n
2000

e
1800

l s
1600

r
1400 109

E iveNo es loamismo
1200

l
1000

r
800

600

n i e
400

U us tand r
200

t
0
100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220
m/z-->

Scan 259 (38.555 min): MANGOSI2.D

109
180

Compuesto X
170

d
160

n
150

n
140

I a
130

120

110

S
100

90

80

Falso positivo e
70
181
60 219

d
50

40

30

20

10

0
100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220

166
 19/06/2022

¿Qué opinan de este pico,

TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms
compañeros?
Abundance
17.610 19.416
700000

650000

í a
16.880
600000

tr
550000
19.082

e
500000
18.944
450000

o m
400000

r s o
350000

u t r
300000
16.352

c
250000

C pe as
200000 18.045 18.740

A
20.896

I
16.961
150000
18.626 19.972
100000 21.475

s s C
21.199

I
50000 18.493

E ma ST
16.425
0
16.50 17.00 17.50 18.00 18.50 19.00 19.50 20.00 20.50 21.00 21.50
Time-->

de INJU
167

k o
M e n
s h
S t a ¿Qué opinan de este pico,

d
compañeros?

a id a
TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms

n
Abundance

Nice peak

e
17.610 19.416

l s
700000

Bonito

r
650000

E ive al
Grande
16.880
600000

r
550000
Simétrico

i e
19.082
Sin deformaciones

n
500000

U us tand r
18.944

t
450000

400000 Homogéneo
350000

d
300000
16.352

n
250000

I n a
200000 18.045 18.740 20.896
16.961

S
150000
18.626 19.972
100000 21.475
21.199

de
50000 18.493
16.425
0
16.50 17.00 17.50 18.00 18.50 19.00 19.50 20.00 20.50 21.00 21.50
Time-->

168
 19/06/2022

Abundance TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms

1500000

1400000 17.610
1300000

a
1200000

í
1100000

tr
1000000

900000

e
800000

o m
700000

s
600000

r r o
500000

u t
400000

c
300000 18.045

C pe as A
200000

I
100000

C
17.30 17.40 17.50 17.60 17.70 17.80 17.90 18.00 18.10 18.20 Time-->

s
E ma ST s I
de INJU
169

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al 6.2%
r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
170
de
 19/06/2022

TIC: FMSINPATRÓN60P.D\data.ms 17.610

Abundance

900000
19.416
800000

700000 16.880

600000 19.082
18.944
500000

í a
400000 15.823

tr
16.352
300000
18.739
18.045
200000 16.961

e
100000 18.493
15.73215.999 16.425
17.108 18.148 19.011 19.582

o m
16.00 16.50 17.00 17.50 18.00 18.50 19.00 19.50 Time-->

s
TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms 17.610

r o
Abundance

r
900000

u t
800000 19.416

C pe as c
700000
16.880

A
600000

I
19.082
18.944
500000

s s C
400000

I
15.823
300000 16.352

E ma ST
18.740
200000 18.045
16.961
18.626 19.972
100000
15.73315.999 16.425 18.493
0
16.00 16.50 17.00 17.50 18.00 18.50 19.00 19.50 20.00 20.50 Time-->

de INJU
171

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
172
de
 19/06/2022

¡Fácil! ¡Un click y ya! Yo sé identificar.

¡Es un acetato de hexilo!

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
173

k o
M e n
s h
S t a
¡Fácil! ¡Un click y ya! Yo sé identificar.

a id
¡Es un acetato de hexilo!
a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
174
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
175

k o
M e n
s h
S t a
1a a d
l e n s i d
1 E e r l
n i v r i a e r
U us tand t
I n d a n
S
de
Ion molecular con masa impar
Tiene nitrógeno
Compuesto aromático

176
 19/06/2022

2
tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c ¡Cáspita!
I A
s s C
Algo alifático…

E ma ST I
m/z 43: C3H7+ o CH3CO+

de INJU
177

k o
M e n
s h
S t a 3 d
n a i d a
E l e e r s
i v i a l e r
3
n
U us tand t r
I n d a n
S
¡ Recáspita!

de
¿Otro compuesto?
Sustancia aromática…
178
 19/06/2022

Abundance TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms

1500000

1400000 17.610
1300000

1200000 2
í a
1100000

tr
1000000

900000

e
800000

o m
700000

r s o
600000

u t r
500000

1
c
400000

C pe as 3
A
300000 18.045

I
200000

s s C
100000

E ma ST I
0
17.30 17.40 17.50 17.60 17.70 17.80 17.90 18.00 18.10 18.20 Time-->

de INJU
179

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
Abundance 115.0
38000 1- Isotiocianato de 2-butilo Abundance
TIC: [BSB5]FMSINPATRÓN60P.D\data.ms

n
36000 1500000

34000 1400000 17.610

32000

e
1300000

s
30000

l
1200000
28000

r
1100000
26000
24000 41.1 1000000
22000 56.1 86.0

E ive al
900000
20000 800000
18000
700000
16000

r
14000 600000

12000 500000
10000

i e
400000
8000 18.045
300000

n
6000

r
4000
72.0
200000
1 3

U us tand
100.0

t
2000 100000
0 32.0
25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 120 m/z--> 0 17.30 17.40 17.50 17.60 17.70 17.80 17.90 18.00 18.10 18.20 Time-->

2- Acetato de hexilo 3- p-Cimeno

Abundance 43.1 Abundance 119.1
240000 10000

d
9500
220000

n
9000
8500

n
200000
8000

I a
180000 7500
7000
160000 6500
140000
56.1 6000

S
5500
120000 5000
4500
100000 4000

de
80000 3500
3000 56.1 134.1
60000 69.1 84.1
2500
2000
40000
1500 84.1
69.1
20000 119.1 1000
101.0 111.0 134. 500
0 1 0
30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 m/z--> 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100 105 110 115 120 125 130 135 140 m/z-->

180
 19/06/2022

Extract Ion Chromatograms…

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
181

k o
M e n
s h
t a
HS-SPME (PDMS/DVB). Moringa oleifera flowers.

S
a id a d
ISOTHIOCYANATES. EIC (m/z 101, 115)

n
a c

e
Abundance

l r s a – Isopropyl isothiocyanate
130000

E ive al
120000

r
110000 b – Butyl isothiocyanate

n r i e
100000
c – Isobutyl isothiocyanate

U us tand t
90000
80000
70000
b

d n
60000

I n
50000

a
40000

S
30000

de
20000
10000
0
15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 Time-->

182
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
183

k o
M e n
s h
S t a tR, min m/z A, cuentas

d
Abundance
250000
Ion 115.00
17.58 115 385171

a id a
200000
17.61 43 6406907

n
150000

17.586 17.64 119 1515782

e s
100000

l r
50000

E ive al
0
17.50 17.52 17.54 17.56 17.58 17.60 17.62 17.64 17.66 17.68 17.70 17.72 17.74 Time-->

r
Abundance 17.611
Ion 43.00

i e
250000

n r
200000

U us tand t
150000

100000

50000

d
0

n
17.50 17.52 17.54 17.56 17.58 17.60 17.62 17.64 17.66 17.68 17.70 17.72 17.74
Time-->

n
Abundance
Ion 119.00

I a
250000

S
200000

150000

de
100000

50000
17.640
0
17.50 17.52 17.54 17.56 17.58 17.60 17.62 17.64 17.66 17.68 17.70 17.72 17.74 Time-->

184
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
185

k o
M e n
s h
Analizadores S t ade
a id a d
l e n r s
E ive al r
U n t r i d e
Campo eléctrico
u s t a n
I n d
Campo magnético
a n
Radio-frecuenciaS
186
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s
E c = ro
mv2/2
t
C Energía
e c s I A
s p s acinética
I C
E ma ST
de INJU
187

k o
M e n
s h
S t a
Energía cinética
a id
de
d
iones
a
l e n r s
E ive E a= mvl /2 r
n
U ust tand r
k
i 2
e
I n d a n
S
188
de
 19/06/2022

Magneto

í a
Iones Analizador

tr
Filamento

e
+
+

o m
+

s
+

u r t r o
C pe as c I A
Región de aceleración

s
E ma ST s I C
Región de aceleración de iones.

de INJU
189

k o
M e n
s h
S t a
d
Potencial de aceleración, Va

n a id a
l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
d
+

n n
+

I a
+
+

S
190
de
 19/06/2022

E = eVa
Energía potencial p

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
191

k o
M e n
s h
S t a
a extractora
Lente a d
l e n s i d
r
E ivemv 2/2a=l eV r
n
U ust tand r i e
I n d a n
S
192
de
 19/06/2022

Un ion monocargado, con masa de 100 u.,

acelerado por un potencial Va de 1000 V,
adquirirá una velocidad de 1.58x105 km/h

í a
m = 100 x 1.66 x 10-27 kg = 1.66 x 10-25 kg

tr
o
Ec = mv
e
2/2
= Ep = eVa

r s r o m
=(1000 V) x (1.6 x 10-19 C) = 1.6 x 10-16 J

u
C vp= 4.39
V2
c t = (2 x 1.6 x 10-16J)/(1.66 x 10-25kg)

e x 10 m/sas= 1,58 x 10CIkm/h

= 1.93 x 109 J kg-1
A
s
E ma STI s 4 5

de INJU
193

k o
M e n
s h
S t a
d
La velocidad de la luz en el vacío es

a id a
por definición una constante universal

n
de valor 299.792.458 m/s, que suele

l e r s
aproximarse a 3 x 108 m/s

E ive al r
i e
En la atmósfera terrestre la velocidad del sonido

n
U us tand t r
es de 343,2 m/s (a 20 °C). La velocidad del sonido
varía en función del medio en el que se transmite.

I n
v = 4.39 x 10 m/sd a n
= 1,58 x 10 km/h
4 5

S
194
de
 19/06/2022

Analizadores de MASAS
sectoriales
tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
195

k o
M e n
s h
S t a Analizadores de masas

a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U Alta resolución t r i d e
Curriculum
u s vitae
t a n
n d n
I Inercia del Scampoamagnético
Masas exactas

196
d e
Elevado costo
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
197

k o
M e n
B ta E
s h
S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
de
Espectrómetro de masas de deflexión magnética, de doble enfoque,
con geometría inversa BE.

198
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
199

k o
M e n
s h
t a
200
1 - Introducción de la muestra; 2 - Calentador para evaporar

S d
la muestra; 3 - Corriente de electrones ioniza la muestra;

a id a
4 - Aceleración de iones;

n
5 - Campo magnético separa los iones de acuerdo con sus m/z .

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
200
de
 19/06/2022

Potencial de aceleración, Va

tr í a
o m e
u r s t r o +

c
+

C pe as
+

A
+

s s I C I
E ma ST
de INJU
201

k o
M e n
s h
a
Energía tcinética:
S
a id a d
n
E = mv /2 2

e
k

l s
Energíarpotencial:
E E iv= eVe al
n r i e r
U E = Eus tand t
p a

I n d
k p
a n
(1) mv
S
/2 = eV2
a

202
de
 19/06/2022

Al entrar en dirección perpendicular al campo magnético,

el ion experimenta deflexión, cuyo radio depende
de su momento (mv, cantidad de movimiento)

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
203

k o
M e n
s h
t a
Analizadores de masas

S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S Flight tube passing through the gap

de
of the magnetic sector
of an instrument seen from the ESA side.

204
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
c
C pe deflexión s I A
a
Al entrar -en la dirección perpendicular al campo magnético-,

s s I C
el ion experimenta . El radio de deflexión, r,

E ma ST depende del momento del ion (mv, cantidad de movimiento)

de INJU
205

k o
M e n
s h
S t a
d
Dos fuerzas que se balancean, según la

a id a
terceraley de Newton, la fuerza centrífuga y

n
e
la fuerza centrípeta

l
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
206
de
 19/06/2022

Fuerza centrífuga:
FC = mv2/r í a
e tr
r s o
Fuerza
o m
magnética:
u t
C pFMec= evB r
a s I A
s
E ma ST s I C
de INJU
207

k o
M e n
s h
t
S ada
mv2/r = aevB
l e n s i d
E ive al r
r
Al entrar perpendicularmente al campo

n r i e
magnético, el ion sigue la trayectoria

U us tand t
circular, describiendo el radio r,

d
de tal manera, que la fuerza centrífuga,

I n a n
FC = mv2/r, es equilibrada por la fuerza

S
magnética, FM = evB

208
de
 19/06/2022

mv2/r = evB
mv = erB t r í a
o m e
u r s t r o
El analizador magnético separa

C pec as los iones según su MOMENTUM

I A
s s C
(cantidad de movimiento, mv)

E ma ST I
de INJU
209

k o
M e n
s h
S t a
mv /r = evB
2
a id a d
l e n v r=se r B /m
E ive al
v = erB/m 2 22 2 2

mv /2 = n r i e r
U
2 eV
s t n d
u nta
a

me r B /m =d2eV
n
22 2 2

I
r = m/z (2V /B )S
a a

de
2 2
a
210
 19/06/2022

r= √m/z (2Va/B2)
ra
í
e t r = A √m/z

r s o o m
u
C pe as c t r
C I A
s
E ma ST s I
de INJU
211

k o
M e n
s h
t a
r =S√m/z a (2Vda/B2)
n a id
l e
E ive al
R
r s
- Radio de deflexión del ion

r
Va - Potencial de aceleración

n i e
B - Intensidad del campo magnético

Posibilidades: tr d
U u s a n
B =tVariable
d
V = Const VIn= Variable Van
B = Const B = Const

= Const Sr
a a = Const
a

de
r = Varible r = Const

212
 19/06/2022

Radio de deflexión r = 24 cm
Voltaje de aceleración Va = 2 kV
tr í a
o m e
Para que el ion CH2+ con m/z 14 atraviesa el analizador

u r s t r o
magnético, B debe tener el valor de 0.100 Tesla.
El ion C18H12S+ con m/z 260 se detectará al pasar el

C pe as c campo magnético de intensidad B = 0.431 Tesla

I A
s
E ma ST s I C
de INJU
213

k o
M e n
s h
t a
r a S r ad
l e n r
s i d 1 2 3

r
E m /z ivme/z m a/z l
n r i
1
e r 2 3

U us tand t
Deflexión de iones en el campo magnético: dispersión por energía

I n d a n ideal

m ±∆m m ±∆mS m ±∆m

real

de
1 2 3
Pérdida de la resolución

214
 19/06/2022

C21H25F3N2O4 í426,17664
a
e t r Da

rCs o H No m
O 426,28421 Da
r
u 21 38t 4 5
C pec as
C I A
s
E ma ST s I
de INJU
215

k o
M e n
s h
a
Resolución R= tM/∆M
S
a id a d
Exactitud
l e n(ppm):
r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
Masa experimental - Masa calculada (teórica)

Masa calculada (teórica)

X 106 = ppm

I n d a n
Aunque dos picos con masas diferentes (m/z) están resueltos,

S
el espectrómetro de masas debe ser capaz de medir las masas

de
conexactitud necesaria, para determinar la composición elemental
única de cada ion. 216

216
 19/06/2022

¿Cómo alcanzar alta

resolución?

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s s C
…primero, hay que saber

E ma ST I
qué afecta la resolución?

de INJU
217

k o
M e n
s h
= E ta
E
a idS
cinética
a d
potencial

l e n
pero, en realidad,
r s
mv E ive a ± a∆lE
2 /2 = eV
r
n r i e
r ±∆U r r ±∆r s r ±∆r nd
t
1
d u 2
n t a 3

n
m ±∆mI m ±∆m m
S a ±∆m

de
1 2 3

218
 19/06/2022

tr í a
oLECHO m e
u r s
El
t r o de PROCRUSTES
C pe as c I A
Homogeneización de energía:
s
E ma ST s I C
cinética de iones

de INJU
219

k o
M e n
s h
S t a
d
¿Cómo homogeneizar la energía de los iones?

n a id a
l e
E ive al r s
r
mv2/2 = eVa ± ∆E

n
U us tand t r i e
d
Campo eléctrico homogéneo

I n a n
S
mv2/2 = eVa

220
de
 19/06/2022

Ecinética =mv2/2 Epotencial= eVa

mv2/2 = eVa
tr í a
2/r = eE eE- campo eléctrico
r s o
mv
o m
u c t r
C pr e= 2Va/E s I A
Solo iones con la misma energía

a
cinética = eVa, describirán este radio

s s I C
y entrarán al campo magnético

E ma ST
de INJU
221

k o
M e n
s h
S t a
am* id a d
Región en donde se forman iones metaestables que se registran

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
Cámara

I n d
de ionización

a n
Analizador
electrostático
Analizador
magnético
Sistema
de detección

S
222
de
 19/06/2022

Espectrómetro de masas de doble enfoque.

Analizadores electrostático y magnético

í
tr Ba
o m e
u r s t r o
C pe as
E
c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
223

k o
M e n
Espectrómetro de masas de doblea s h
S t enfoque.
d
a id a
Analizadores magnético y electrostático. Geometría inversa (B, E)

n
Sector
l e
EB ive E al r s Sector
magnético

n r i e r electrostático

U us tand t
I n d a n
S
224
de
 19/06/2022

Primeros espectrómetros de masas (MS) 1897

Cámara de ionización EI 1918 1912
>100 de camino Medición de pesos atómicos 1919
sin tregua
años Primer espectrómetro de masas comercial
Analizador de tiempo de vuelo TOF 1943
1946
Analizador de tiempo de doble enfoque 1952

a
Resonancia ion-ciclotrónica ICR 1953

í
GC-MS 1956

tr
1966
1968 1965 Cuadrupolo
LC-MS

e
1981 1973 1967 Ionización química Trampa de iones
1969 Espectrometría de masas tándem, MS/MS

o
1984 1974

m
Cámara de colisiones activadas, CAD, CID
MALDI 1987-88 FAB

s
Desorción/ionización por campo, FI, FD

r o
Desorción/ionización por plasma, PD

r
Termospray FT-ICR-MS

u
1989

t
1991 ESI-ICR-MS

c
Microelectrospray

C pe as
1993

A
Análisis de proteínas, oligonucleótidos

I
Conformaciones e interacciones no-covalentes
2000 Orbitrap

s s C
2002

I
IT cuadripolar lineal, LQIT

E ma ST
2004 Mejoramiento de R-TOF-MS, FT-ICR-MS.
ESI/APCI/APPI-MS de macromoléculas
2012 Análisis de rutina de polímeros, biomoléculas

de INJU
225

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
n d
I Tiempo a n
S de vuelo
226
de Time-of-Flight (ToF)
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
227

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
Analizador de tiempo de vuelo

n
(Time-of-Flight, TOF or ToF)

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
228
de
 19/06/2022

ANALIZADOR DE TIEMPO DE VUELO (Time-of-flight, TOF)

Ionización

a
Retardo

í
--------

e tr Extracción

r s o o
V

m Aceleración

u
C pe as c t r
A
Análisis

I
Colección

s s C
Amplificación

E ma ST I Registro

de INJU
229

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
230
de
 19/06/2022

Analizador de tiempo de vuelo (TOF)

con reflectrón

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
231

k o
M e n
s h
S t a
International Journal of Mass Spectrometry

d
Volume 206, Issue 3, 22 March 2001, Pages 251-266

n a id a
Time-of-flight mass spectrometry (concepts, achievements, and prospects)

l e r s
B.A. Mamyrin

E ive al
A.F. Ioffe Physico-Technical Institute, Russian Academy of Sciences, Polytechnicheskaya 26, 194021, St. Petersburg, Russia

r
Received 3 July 2000; Accepted 4 October 2000. Available online 27 March 2001.

n r i e
Abstract

U us tand t
A brief account is given of the history of dynamic mass spectrometers from the time of their advent. The reasons for their relatively
slow development in the 1930s–1940s of the last century are discussed. The general principle underlying the operation of all dynamic
mass spectrometers, the difference between the velocities of motion of ions differing in mass but having the same energy, is pointed
out. In accordance with its title, the review considers in more detail the history of development of time-of-flight (TOF) mass

d
spectrometers and stresses their two major advantages over the static (magnetic) instruments, namely, the unlimited mass range

n
and the possibility of obtaining extremely rapidly mass spectra over a broad ion mass range. This accounts for the fast progress in

n
their performance and broad application in the period of 1960s–1980s, when investigation of heavy, thermally unstable organic

I a
molecules was started and efficient methods of producing their ions were developed. A serious limitation on the resolution of TOF
instruments was largely removed after the formulation of the reflectron principle of TOF mass-spectrometer design. The problem of

S
a further increase of the resolution of TOF systems is discussed. The illustrations of TOF reflectron applications are presented, and a
possibility of analyzing molecules and clusters with masses of up to millions of daltons is pointed out. These merits have resulted in a

de
sharp increase of production and a broadening of application potential of TOF mass spectrometers compared to the magnetic setups,
particularly in the field of biophysics, biochemistry, and organic chemistry. In conclusion the broad horizons opened by the TOF
magnetic-resonance mass spectrometers (MRMS) in the area of high-precision mass spectrometric measurements are pointed out.
rences

232
 19/06/2022

1
2
3

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c
1

C I A
2

s s
1 3 2

I
3

E ma ST
de INJU
233

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
234
de
 19/06/2022

Tubo de vuelo Tiempo de vuelo ≈ masa del ion

+
a
+ +

í
+ + +

e tr
r s o o m
u
C pe as t r
Ecinética = Epotencial mv2/2 = eVa
c
tvuelo = L/v

C I A
s
tvuelo = L/√2Va x √m/z √m/z
s
tvuelo ~ A x

E ma ST I
de INJU
235

k o
M e n
s h
S t a Linear-TOF/MS OATOF/MS

a id
Fuente de iones

a d Fuente de iones

e n
Pusher Pusher

l
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
Tubo de vuelo Tubo de vuelo

I n d a n
S
Detector Detector

de
MCP-TDC MCP-TDC
MCP - Micro-channel-plate detector. OA-TOF lineal, con aceleración
TDC - Time-to-digital converter. ortogonal (OA) de iones

236
 19/06/2022

+ + +
+
+ + + +
+ +
a
+ +
+ +
tr í+

o m e
r s o
Resolución

u t r
C pec m am s? m IA
m? 1
baja

s s C
1 2

E ma ST I 2

de INJU
237

k o
M e n
s h
t a
Analizador de tiempo devuelo

S a
(TOF) con reflectrón

a id d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
238
de
 19/06/2022

Reflectron-TOF (ReTOF/MS, V-mode)

Fuente de iones
Detector
MCP-TDC Pusher

tr í a
o
Tubo de vuelo

m e
u r s t r o
C pe as c I A Reflectrón

s
E ma ST s I C
MCP - Micro-channel-plate detector. TDC - Time-to-digital converter.

de INJU
239

k o
M e n
s h
S t a
d
Monoenergetización de iones

n a
a id Reflectrón
Detector MCP-TDC

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
Pusher

d
mi mi* mi**

I n a n
S
de
Iones con la misma masa,
pero con diferente velocidad

240
 19/06/2022

LC-MS-TOF

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
241

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
Las señales de iones moleculares de: (a) C60, m/z 720 y de (b) insulina bovina (ion

de
cuasi-molecular, MH+), m/z 5734.6, obtenidos en espectrómetros de masas con
analizadores TOF operados en modos lineal (izquierda) y con reflectrón (derecha),
bajo el resto de los demás parámetros operacionales empleados.

242
 19/06/2022

Reflectron-TOF (W-mode) Fuente de iones

Detector MCP- Pusher

a
TDC

tr í
o m e
u r s t r o
c
Tubo de vuelo

C pe as I A
s
E ma ST s I C
MCP - Micro-channel-plate detector. TDC - Time-to-digital converter.

de INJU
243

k o
M e n
s h
LC-MS-TOF Sta
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
244
de
 19/06/2022

Ions pulsed every 100 – 160 µsec Ion

Detector measurement every nsec Mirror

a
(1 GHz sampling)

tr í
o m e Flight Tube

u r s t r o
Ion Source Beam cooling and transport
Pulser

C pe as c I A
Ion

C
Detector

s
E ma ST s I
de INJU
245

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
246
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C Detector
e c s I A
s p iónicas s a
: amplifica y procesa
I C
E ma ST corrientes

de INJU
247

k o
M e n
s h
DETECTORS ta
S
a id a d
n
The detector records the charge induced when an ion passes by

l e r s
or hits a surface

E ive al
Most common detector

n r i e r
Can detect positive and negative ions

U us tand t
Faraday Cup
Least expensive detector
Captured ions transfer charge to cup

n d n
Used to calibrate other MS detectors

I a
Electron Multipliers (EM)*

S
Micro-Channel Plate (Array Detector)

de
Spatially resolved array of EM channels
Not used as frequently, yet
Allows ‘3-D’ analysis of data

248
 19/06/2022

Electron Multiplier
Electron multipliers
use a process known
as secondary
tr í a
e
electron emission

r s o
Ions hit a surface

o m
u t r
Causes the electrons in

C pe as c
the outermost area of
the atom to be released

C I A
s
E ma ST s
Secondary electrons
I
de INJU
249

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
de
Discrete dynode electron multiplier.
Photograph of an old-fashioned 16-stage Venetian blind-type SEM. It clearly shows
the resistors and ceramics insulators between the stacking dynodes at its side.

250
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
Medición de corrientes iónicas: electromultiplicador

de INJU
251

k o
M e n
s h
S t a
Detector focus lens

a id
High energy dynode
a d
l n
Electron multiplier horn
e r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
252
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
253

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n r i e
s tand
U uChanneltront
I n d a n
multiplier
S
254
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
255

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
U n t r i d e
u s t a n
n d
EL Sistema Nervioso
I sinapsis a n
Central
y sus
S
256
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
257

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n r i e
SISTEMA U DE uDATOSs tand
t
I n d a n
Controla parámetros operacionales
S
de
Adquiere la información análoga y la digitaliza
Procesa la información adquirida
258
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
259

k o
M e n
s h
S t a
TUNING a id a d
l e n r s
E and i v e a l r
n
U us tand t r i e
CALIBRATIONI n d a n
S
260
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
261

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
Todo espectrómetro
e Sde masas
y tuning
d
requiere CALIBRACIÓN
262
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
263

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
264
de
 19/06/2022

PFTBA

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
265

k o
M e n
s h
S t a
a a d
l e n s i d
Calibration
E e r
Compounds
l
n i v r i a e r
U us tand t
PFTBA (Perfluorotributylamine)
PFK (Perfluoronated Kerosene)

I n d
Triazines
a n
S
266
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
267

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
i e
PFTBA
n
U us tand t r
I n d a n
S
268
de
 19/06/2022

EI calibration valve

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s s C
Vent valve knob Calibration vial

E ma ST I
de INJU
269

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al
EI calibration valve

n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
de
Vent valve knob Calibration vial
270

270
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
271

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
272
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
273

k o
M e n
s h
S t a
d
100
69
• Escala másica

a
• Masas de iones

a id
F F F F
F F
F F de referencia

n
F FF F
219
F
F
F N F
F
F
• Intensidad de corrientes

e s
iónicas parciales

l
F F

r
50
131 F F

E ive al
F F
F F

r
100 264 F
414 502

i
31 50 169 201

e
246 464

n
0

r
30 80 130 180 230 280 330 380 430 480 530 580 630 680

U us tand t
(ma inlib ) Perfluorotrib utyla mine

I n d a n
S
274
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
275

k o
M e n
s h
CF CF
S t a
d
2 2

n a id a
e
CF CF N CF
l r s
3 2 2

ECF CFive CFalCF r

CF CF U
n str CFnd
2 2
i 2 2
e
3 2
du n t a 3

I n
PFTBA S a
276
de
 19/06/2022

m/z 502
CF2 CF2

CF3 CF2 N CF2

tr í a
e
CF2 CF2 CF2 CF2

r s o o
CF3 CF2
m CF3

u c t
C pe PFTBAas r m/z 219

C I A
m/z 69 – 100%

s s
m/z 69
I
m/z 219 – 40-60%

E ma ST
m/z 502 -- >3%

de INJU
277

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
278
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
279

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al
70 eV

n r i e r
U us tand t
69

I n d a n
S
280
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
281

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r
40
s
eV
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
282
de
 19/06/2022

Ionisation Efficiency IP

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Electron beam energy, eV

s
E ma STI s
A typical ionisation C
efficiency curve 283

de INJU
283

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
284
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
285

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
286
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
287

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand
28 32
t r i e
I n d a n
S
288
de una fuga…
 19/06/2022

Aire & Agua

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
289

k o
M e n
s h
S t a
d
Acoplamiento con técnicas

a id a
de separación GC, LC, SFC, CE
n
l e
Sistemas tándem:
E ive al r s
MS/MS, MS
r
(n)

n
U us tand t r i
Sistemas de datos, software, e
I n d a n
automatización, miniaturización

S
BIOMOLÉCULAS y nuevas

de
técnicas de ionización

290
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
291

k o
M e n
s h
a
Un solo analizador a menudotNO
S
a id a d
es suficiente

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
292
de
 19/06/2022

MS/MS

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
293

k o
M e n
s h
a
a menudo, un solo analizadortNO
S
a id a d
es suficiente

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
294
de
 19/06/2022

¿No es suficiente un solo analizador?

¿Por qué se requiere una
configuración tándem ?

tr í a
o e
m ?
u r s t r o
C pec as MS/MS
I A
s s C MS (n)

E ma ST I
de INJU
295

k o
M e n
B a s h
I%
S t dM
+

D
C a
n
+

i d a +.

e
+

l r?s A +

E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a Cn
¿Cuál es el origen del ion-fragmento +? m/z

S
¿De qué ion o iones se genera, i.e. cuáles son sus

de
precursores ?

296
 19/06/2022

Iones moleculares Iones moleculares

Abundancia P(N)
que se fragmentan que se fragmentan
fuera de la fuente de
en la fuente de iones
iones
y generan f+

f+

tr í a
e
Iones moleculares M+  f+

o
estables M+.

m
m*

r s o
E, eV

r
M+.

u t
AP

C pe as c
I,%

I A
M+.  f+ f+
M+.
IP IP - Energía (potencial)
de ionización

s s I C
m* AP - Energía (potencial)

E ma ST
de aparición del f+
m/z m* = (f+)2/M+.

de INJU
297

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i I e II III

n d
Cámara de ionización

I a n
Analizador
electrostático
Analizador
magnético
Sistema de
detección

S
298
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c Registro de iones metaestables

I A
s
E ma ST s I C
de INJU
299

k o
M e n
s h
S t a
a idDADI a d
Métodos
l e n r s
E ive aMIKES l r
n
U us tand t r i e
I n d a n
La respuesta a estas preguntas históricamente provenía

S
del estudio de iones metaestables m*, usando equipos

de
de sector magnético y de doble enfoque (E,B o B,E)

300
 19/06/2022

I,% M+.  f+ f+ M+.

m*
tr í a
o m e m/z

u r s t r o
C pec asm* = (f+)2/M+.

C I A
s
E ma ST s I
de INJU
301

k o
M e n
s h
S t a
d
Intensidad, %

n a id a
l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
m/z

Ionización “suave”
Intensidad, %

I n d a n
S
302
de m/z
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c A
La ionización «suave» genera pocas señales

I
en el espectro de masas, a menudo, se registran
s
E ma ST s I C
únicamente los iones cuasi-moleculares MH+, (M-H)-

de INJU
303

k o
M e n
s h
Fragmentar S ad t a
n alas partes:id
l e
Estudiar
E para e r s
conocer ell todo
n i v r i a e r
U us tand t
I n d a n
S
304
de
 19/06/2022

Como producto
de la ionización «suave»,
en el espectro de masas solo

a
aparece la señal del ion

tr í
molecular o cuasi-molecular

o m e(con masa, nominal o exacta),

s o
pero:

u r t r ¿Cuál es su estructura?
¿Cuál c
C es supeestructura?
es? ¿Cuál
s A
grupos funcionales? la unión

I
s s a C
de átomos en la molécula,

I
E ma ST
su disposición espacial?

de INJU
305

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
306
de
 19/06/2022

Iones muy estables o “fríos”

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
307

k o
M e n
s h
a
Colisión tactivada
S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
308
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C SISTEMAS
e c s I A
s p s a TÁNDEM
I C
E ma ST
de INJU
309

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
tándem l e n
E ive al
en
r
en s
el
el
espacio
tiempo
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
310
de
 19/06/2022

Para realizar un análisis por MS/MS,

En el modo tándem en ESPACIO, hay que
poner varios analizadores

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
311

k o
M e n
s h
t a
tándem e n
S
a id a d
l
E ive al
en el espacio:
r s
EBEB, QqQ, Q-TOF, TOF-TOF
en el tiempo:

n i e r
IT, Orbitrap, FT-ICR-MS

r
U us tand t
I n d a n
S
312
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s Q
t r o q
C pec as I A
s
E ma ST s I C
de INJU
313

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
314
de
 19/06/2022

Analizadores de masas

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
315

k o
M e n
s h
S t a
a id a
QqQqQ d
l e n r s
E ive al r
Pentacuadrupolo

n r i e
ThoMSon Lab,

U us tand t
Universidade Estadual
de Campinas,

d
UNICAMP, Brasil

I n a n
S
316
de
 19/06/2022

Quadrupole (Q)-TOF/MS Fuente de iones

Cuadrupolo
Celda de colisiones

a
Activadas (CC)
Detector MCP-TDC

tr í Pusher

o m e
u r s t r o Tubo de vuelo

C pe as c I A
s C
Reflectrón

s
E ma ST I
MCP - Micro-channel-plate detector. TDC - Time-to-digital converter. CC – Collision Cell.

de INJU
317

k o
M e n
s h
t a
Tándem
S en tiempo
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
318
de
 19/06/2022

Analizadores de masas

TRAMPA de iones tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
319

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
320
de
 19/06/2022

Rango de
Analizador Precio Tamaño Resolución masas
MS/MS
Sectorial + + ++ ++ +
Q +++ +++ + + ---
QqQ ++ +++ +

tr í a ++ +++

e
IT ++ +++ + ++ +++

r s o TOF

o
++ ++
m
++ +++ +

u t r
Q-TOF + ++ +++ +++ +++

C pe as c
FT-ICR ---

I A
+ +++ ++ +++

s s C
MS - Espectrómetro de masas; Q - Cuadrupolo; QqQ - Triple cuadrupolo; IT - Trampa de iones;

E ma ST I
TOF - Tiempo de vuelo; FT-ICR-MS de resonancia ion-ciclo trónica con transformada de Fourier.

Precio bajo, pequeño tamaño, resolución alta, rango de masas amplio, buena habilidad para MS-MS – “+++”

de INJU
321

k o
M e n
s h
MS/MS: tres pasos
S t a básicos
a id a d
Activaciónle
n
Selección de iones
r s
AnálisisEde iones-fragmento
e
de iones (fragmentación)
i v i a l e r
n
U us tand t r
I n d a n
S
322
de
 19/06/2022

Collision-induced dissociation (CID)

Collision-activated decomposition (CAD)

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
323

k o
M e n
s h
S t a
Métodos de activación
a id d
de iones
a
l e n s
Collision-activated/induced dissociation

r
E ive al
(CAD/CID)
r
n
U us tand t r i e
Infrared multiphoton dissociation (IRMPD)
Electron capture/electron transfer

I n d a n
dissociation (ECD, ETD)

S
Surface-induced dissociation (SID)

324
de
 19/06/2022

í a
tr iones
DISOCIACIÓN
e
de

r s o
activada o por m
u t r
ec as CIA
C pCOLISIONES
s
E ma STI s
de INJU
325

k o
M e n
s h
t a
Los iones se energetizan o se activan en un volumen

S
a id a d
llamado Collision Cell (una celda de colisiones),

n
donde se disocian y generan nuevos iones-fragmento

l e r s
y partículas neutras (moléculas o radicales)

E ive al
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
326
de
 19/06/2022

B+
A+ A+*
tr í a
o m e R.

u r s t r o
C pe as c
El ion se somete a los Como resultado de estos

I A
«golpes» o colisiones «choques», el ion aumenta

s C
con átomos o moléculas

s
su energía interna, v.gr.

E ma ST I
pequeñas (He, N2, Ar, Xe) energía en exceso, se fragmenta

de INJU
327

k o
M e n
s h
S t a
d
Activación de iones

+na i d a Disociación +

l e s
+ +
+ + +
E ive al
+
r + + +

n r i e r
U us tand t
Absorción de fotones

d n
Fragmentación

n
Iones estables
I
Irradiación
S a
de
Fuente de fotones
(Láser CO2)
328
 19/06/2022

Collision-induced dissociation (CID)

tr í a
Disociación inducida por colisiones:

o m e
1. de baja energía (0 - 200 eV)

u r s o
2. de alta energía (miles de eV)
t r
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
329

k o
M e n
s h
S t
Espectros de masas CID de a baja energía
a a d
l e n
dependen sensiblemente
s i d de:
r
E ivePequeños cambios l
n r i a en
e r
U uPresiónla
t
s en la cámara
energía de
n
colisiones
d
d n t a
n
I MasaSdelaanalito-target
de colisiones activadas

330
de
 19/06/2022

Ion precursor + energía (moléculas del gas de colisión)

mp+ + N  mp+* mp+*  mf+ + mN

Eintena = [N/(mp+ + N)] x Ecinética

tr í a
o m e
El ion-precursor, mp+ , con la energía cinética, Ecinéica, al chocar con

r s o
una molécula del gas de colisión N, adquiere energía en exceso, Einterna

u t r
(ion excitado mp+*) que se fragmenta generando un ion-producto,

C pe as c
mf+, y una partícula neutra mN.

I A
Con el aumento de la masa del ion-precursor, mp+ ,

C
s s I
se disminuye su energía interna (Einterna ~ 1/ mp+ ).

E ma ST
El aumento de la Ecinética (mv2 = eVa) y de la masa de la
molécula N conduce al incremento de la Einterna del ion mp+

de INJU
331

k o
M e n
s h
S t a
Gas a
residual
a id Helio d
l e n r s
E ive aArgón l r
n
U us Nitrógenot r i Xenón
d e
t a n
I n d a n
He
S < Ar < Xe

332
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
333

k o
M e n
s h
Analyzersta
S
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
Independently heated hyperbolic quadrupole mass filters

I n
Front analyzer
d a n = Primer analizador Q1 = MS1

S
Rear analyzer = Segundo analizador Q2 = MS2

de
Post-filter, pre-filter - Guía de iones.
T° recomendadas: 150 °C

334
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
335

k o
M e n
s h
S t a
a a dB +

A l e n A rsi d
E ive al R
+ +*

n r i e r .

U us tand t
I n d
El ion se somete a los

a n
«golpes» o colisiones con
Como resultado de estos
«ataques», el ion se activa,

S
átomos o moléculas verbigracia, adquiere un exceso

de
pequeñas (He, N2, Ar) de energía y se fragmenta

336
 19/06/2022

Hexapolo: celda de colisiones activadas

Primer cuadrupolo Segundo cuadrupolo

í a
Varillas hexapolares (hexapolo)

e tr
r s o o m
u
C pe as c t r Lentes de entrada Lentes de salida

C I A
s
E ma ST s I
Colimadores del haz iónico

de INJU
337

k o
M e n
s h
S t a
COLLISION CELL HELIUM QUENCH

a id a d
Helium has a fairly low ionization energy, 24.6 eV.

n
When He is the carrier gas, He is ionized and then produces He

l e r s
metastables.

E ive al
He+. → He +. * + hν

r
When He metastables interact with the nitrogen collision cell gas, they

n
U us tand
ionize the N2.

t r i
He * + N2 → N2+. + He + e-
e
The nitrogen ion, in turn, ionizes other molecules, causing baseline

d n
noise.

I n a
N2+. + A → A+. + N2

S
Introducing He quench gas in the collision cell neutralizes the He
metastables and decreasing the noise.

de
He* + He → 2He + heat

338
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
339

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
340
de
 19/06/2022

Monitoreo de iones-producto
Permite establecer vínculo
I “genético” entre los iones,
SIM CC SCAN
Q1 Q2 Q3
el precursor y sus productos
Monitoreo de iones precursores

a
Se logra también establecer
II
SCAN CC SIM
tr í
y confirmar el parentesco

e
Q1 Q2 Q3 entre los iones

o m
Pérdida de fragmento neutro

s
Barrido enlazado: se observan

u rIII
t r o mi CC mi-∆m
los iones con la misma dife-

c
rencia de masas, e.g. 15, 28, 60

C pe as A
Q1 Q2 Q3

I
Monitoreo de reacción seleccionada Aumento de la especificidad, confiabilidad y

s s I C
sensibilidad para detectar analito en una

E ma ST
IV SIM CC SIM mezcla compleja, monitoreando dos iones,
Q1 Q2 Q3 precursor y producto

de INJU
341

k o
M e n
s h
S t a
Espectro de masas de iones-producto de un

a id a d
fragmento seleccionado

l e n r s
Cámara (celda)

E ive al
Cámara de de colisiones

r
Analizador 1 activadas Analizador 2 Detector
ionización

n
U us tand t r i e
I n d a n
SIM Scan

S MS1 (Q1) Q2 (q) MS2 (Q3)

342
de
 19/06/2022

Espectro de masas completo

tr í a
o m e
u r s t r o Espectro de masas

C pe as c I A
de fragmentos, productos
del ion

s
E ma ST s I C
de INJU
343

k o
M e n
s h
t a
Espectro de masas de iones-producto de un fragmento seleccionado

S
a id
Espectro de masas completo

a d Espectro de masas de productos del ion

l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
d
Cámara de Cámara (celda) de

n
Analizador 1 Analizador 2

n
ionización colisiones activadas Detector

I a
SIM Scan

S
de
MS1 (Q1) Q2 (q) MS2 (Q3)

344
 19/06/2022

Monitoreo de iones-producto
Permite establecer vínculo
I “genético” entre los iones,
SIM CC SCAN
Q1 Q2 Q3
el precursor y sus productos
Monitoreo de iones precursores

a
Se logra también establecer
II
SCAN CC SIM
tr í
y confirmar el parentesco

e
Q1 Q2 Q3 entre los iones

o m
Pérdida de fragmento neutro

s
Barrido enlazado: se observan

u rIII
t r o mi CC mi-∆m
los iones con la misma dife-

c
rencia de masas, e.g. 15, 28, 60

C pe as A
Q1 Q2 Q3

I
Monitoreo de reacción seleccionada Aumento de la especificidad, confiabilidad y

s s I C
sensibilidad para detectar analito en una

E ma ST
IV SIM CC SIM mezcla compleja, monitoreando dos iones,
Q1 Q2 Q3 precursor y producto

de INJU
345

k o
M e n
s h
t a
Espectro de masas de ion(es) precursor(es) de un fragmento seleccionado

S
a a d
Espectro de masas completo Espectro de masas de productos del ion

? le n s i d
E ive al r
n r i e r
U us tand t
d
Cámara de

n
Cámara (celda) de
Analizador 1 Analizador 2

n
ionización colisiones activadas Detector

I a
Scan SIM

S
de
MS1 (Q1) Q2 (q) MS2 (Q3)

346
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I
Analizadores de masas
C 347

de INJU
347

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
348
de
 19/06/2022

Monitoreo de iones-producto
Permite establecer vínculo
I “genético” entre los iones,
SIM CC SCAN
Q1 Q2 Q3
el precursor y sus productos
Monitoreo de iones precursores

a
Se logra también establecer
II
SCAN CC SIM
tr í
y confirmar el parentesco

e
Q1 Q2 Q3 entre los iones

o m
Pérdida de fragmento neutro

s
Barrido enlazado: se observan

u rIII
t r o mi CC mi-∆m
los iones con la misma dife-

C pe as c
rencia de masas, e.g. 15, 28, 60

A
Q1 Q2 Q3

I
Monitoreo de reacción seleccionada Aumento de la especificidad, confiabilidad y

s s I C
sensibilidad para detectar analito en una

E ma ST
IV SIM CC SIM mezcla compleja, monitoreando dos iones,
Q1 Q2 Q3 precursor y producto

de INJU
349

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
Analizadores de masas
CROM-MASS-UIS

I n d a n
S
350
de 350
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
351

k o
M e n
s h
t a
Monitoreo de iones-producto

S
Permite establecer vínculo

d
I “genético” entre los iones,

a id a
SIM CC SCAN el precursor y sus productos

n
Q1 Q2 Q3

l e r s
Monitoreo de iones precursores Se logra también establecer

E ive al
II y confirmar el parentesco

r
SCAN CC SIM

i e
entre los iones

n
U us tand t r
Q1 Q2 Q3
Pérdida de fragmento neutro Barrido enlazado: se observan
los iones con la misma dife-

d
III rencia de masas, e.g. 15, 28, 60

n
mi CC mi-∆m

I n a
Q1 Q2 Q3
Monitoreo de reacción seleccionada

S
Aumento de la especificidad, confiabilidad

de
y sensibilidad para detectar analito en una
IV SIM CC SIM mezcla compleja, monitoreando dos iones,
Q1 Q2 Q3 precursor y producto

352
 19/06/2022

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I
Analizadores de masas
C 353

de INJU
353

k o
M e n
s h
t a
MRM – Monitoreo de múltiples reacciones

S
a id a
Espectro de masas completo
d Espectro de masas de la reacción de transición

l e n r s
F2 F1

E ive al r
n
U us tand t r i e
d
Cámara de Cámara (celda) de

n
Analizador 1 Analizador 2

n
ionización colisiones activadas Detector

I a
SIM SIM

S
de
MS1 (Q1) F1 Q2 (q) MS2 (Q3) F2

354
 19/06/2022

MRM: Mayor selectividad que SIM para muestras complejas

tr í a
o m e
r s o
1. Selectividad proporcional 1. La selectividad para los iones precursores es la

u t r
a la resolución espectral. misma que en SIM.

c
2. No hay selectividad para 2. Alta probabilidad de que al menos 1 ion-

C pe as A
iones con la misma m/z. producto sea un producto único de la disociación

I
del precursor, PERO no de la interferencia.

s s C
3. El ion-precursor NO se debe usar en relaciones

E ma ST I
iónicas o en cuantificación, puesto que las
interferencias serán las mismas que para el ion
SIM.

de INJU
355

k o
M e n
s h
Sensibilidad en S
a
MSt dependedde:
n a i d a
l e
E iver al s
Límite de detección
Concentración de la muestra,

n r i e r
U us tand t
interferencias, naturaleza del analito
Modo de inyección, resolución-columna

d
MS: Contaminación, presión, fugas

I n a n
S
MS- Espectrometría de masas, Detector de masas, Analizador másico

356
de
 19/06/2022

Señal

r í a
S/N
o m et
u r s t r o
Ruido

C pec as Etapas analíticas I A

s
E ma ST s 1
I
2
C 3 4 5 6

de INJU
357

k o
M e n
s h
S t a
Sensibilidad. Relación
a id a d
S/N

l e n r s
E ive al
10000 1000

n r i e r
U us tand t
1000

I n d a n 10

S
de
S/N = 10 S/N = 100
358
 19/06/2022

Relación señal/ruido (S/N) en diferentes etapas

del análisis instrumental

Relación S/R

tr í a
o e
Señal

m
u r s t r o
Ruido

C pe as c I A
s
E ma ST
1
(UV)
s 2
(MS)
I C 3 4 5
(LC-MS) (LC-MS/MS) (LC/LC-MS/MS)

de INJU
359

k o
M e n
s h
S t a
Sensibilidad. Relación S/N
a id Muy a d
l e n r s
E ive abaja l r
n
U us Media t r i d e
t a n
I n d a n
S
Alta

360
de
 19/06/2022

Modo de adquisición en GC/MS y GC/MS/MS

Modo de ¿Energía ¿Gas en la
Cuadrupolo 1 Cuadrupolo 3
de celda de
adquisición (MS1) (MS2)
colisión? colisiones?
Espectrómetro de masas con un solo analizador (MS1, Q)

í a
MS1 Scan (Barrido) Scan TTI No No

tr
MS1 SIM (Filtro) SIM TTI No No

e
MS/MS (QqQ)

r s o
MRM

o
SIM

m
SIM Sí Sí

u t r
Product Ion Scan SIM Scan Sí Sí

C pe as c
Precursor Ion Scan Scan SIM Sí Sí

I A
Neutral Loss/Gain Scan Scan Scan (enlazado con Q1) Sí Sí

s s C
Tuning

E ma ST
MS1 Profile
MS2 Profile I
Scan/Profile
TTI
TTI
Scan/Profile
No Opcional
Opcional Sí

de INJU
361

k o
M e n
s h
S adt a
QQQ:aÁreas de aplicación
l e n s i d
E Drogasidevabuso r
e al
Pesticidas

n
en alimentos

r i e r
t
UProductos farmacéuticos
s n d
u a
en fluidos fisiológicos

n d n t
I enSpetróleo a en diferentes matrices

de
Biomarcadores

362
 19/06/2022

t r í a
o m e
Infusión
u r s t r o
C pec as I A
s
E ma ST s I C
de INJU
363

k o
M e n
s h
S t a Extracto de una bebida (infusión)

d
Full scan de varias plantas, que contiene

a id a
trazas de cocaína.

n
A. Corriente iónica total obtenida

l e r s
en modo full scan.

E ive al
B. Fragmentograma de masas

r
(modo SIM), obtenido con base

i e
SIM: m/z 82, 182, 303 en los iones-diagnóstico de la

n
U us tand t r
cocaína, i.e., m/z 82, 182, 303
C. Registro de la transición iónica
303182, usando la

d
configuración tándem QqQ-MS.

n n
La máxima especificidad en la

I a
detección de la cocaína se logra

S
SRM: 303 182
usando el registro de esta
transición de iones, precursor y

de
producto, característica de la
cocaína, 303182.

364
 19/06/2022

Biomarcadores en petróleo:
FÓSILES QUÍMICOS

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
C
Petróleo: Matriz analítica muy compleja.

s
E ma ST s I
>10000-15000 componentes

de INJU
365

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n
Biomarcadores: fósiles
r s
químicos

E ive al
Origen de materia orgánica

n i e
Diagénesis y maduración

r r
U us tand t
Fingerprint molecular
Estructura molecular precisa

I n d n
Composición isotópica

a
S
Abundancias absolutas

de
Relación de estructuras

366
 19/06/2022

Biomarcadores: fósiles químicos

a
Alca(e)nos

tr í
Hidrocarburos isoprénicos

e
Hidrocarburos ramificados

r s o o m
Ciclohexanos sustituidos

r
Bicicloalcanos

u
C pe as c t Hidrocarburos aromáticos

C I A Terpanos (C20, C25, C30, C40)

s s I
Compuestos heterocíclicos

E ma ST
de INJU
367

k o
M e n
s h
S t a
a id
Análisis de biomarcadores
a d
n
en muestras petroquímicas

l e
E ive al r s
Mezcla extremadamente compleja

r
La composición depende del origen de la muestra

i e
La relación y el tipo de componentes

n
U us tand t r
(biomarcadores)
dependen del método de extracción, del grado de
concentración del extracto obtenido y de la

d n
eliminación de interferencias

I n a
La precisión y exactitud de la identificación de

S
biomarcadores dependen de las técnicas de
separación y detección (baja Vs alta resolución)

de
Concentración muy baja (ppb, ppm), co-elución

368
 19/06/2022

Extracto de crudo.
Fracción de saturados
Dominio de n-alcanos
Co-elución de componentes
Biomarcadores

tr í a
o m e
u r s t r o
C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
369

k o
M e n
s h
S t a
d
Fracción de saturados aislada de shale

n a id a
e s
Full scan
l
E ive al r
r
Por aquí, entre

n i e
centenares de picos,

U us tand t r
están los de “fósiles
moleculares”,
biomarcadores

I n d a n
S
370
de
 19/06/2022

m/z 372  217

217
100
m/z217

tr í a
e
50

o m
149
357 372

r s o
109

r
43 55 81 95 203 232
67 135

u t
163 262
29 189 247 288 315

c
0

C pe as
20 50 80 110 140 170 200 230 260 290 320 350 380

C I A
s s I
Monitoreo de ion seleccionado (SIM): m/z 217

E ma ST
Monitoreo de reacciones múltiples (MRM): m/z 372  217

de INJU
371

k o
M e n
s h
Esteranos
S t a
Diasteranos
a id a d
l e n 217

r s
E ive al
218

n r i e r
U us tand t 259
Hopanos
I n d a n 191

S
372
de
 19/06/2022

Fracción de saturados
SIM (EIC) aislada de shale
CROM-MASS-UIS m/z 191

tr í a
o m e
u r s t r o
Por aquí, entre decenas
m/z 217

c
de picos, están, e.g. los

C pe as A
de esteranos

s s I C I
E ma ST
de INJU
373

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive al r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
374
de
 19/06/2022

tr í a
o m e
s
Analizadores de masas

u r t r oEsteranos
c
217

C pe as I A218

s
E ma ST s I C
de INJU
375

k o
M e n
s h
S t a
MRM: Detección selectiva, sensible, inequívoca

a id a d
n Terpanos tricíclicos
M+.  m/z 191

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d
M+.  m/z 217

a n
Esteranos

S
376
de
 19/06/2022

Esteranos
MRM: M+316  217

tr í a
o m e
u r s t r o MRM: M+302  217

C pe as c I A
s
E ma ST s I C
de INJU
377

k o
M e n
s h
t a
Homohopanos
S
a id a d
n
MRM: M+370  191

l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
I n d a n
S
378
de
 19/06/2022

Hopanos

í a
MRM: M+412  191

e tr
r s o o m
u
C pe as c t r
C I A
s
E ma ST s I
de INJU
379

k o
M e n
s h
S t a
Diasteranos d
SIM (EIC, m/z 259)

n a id a
l e
E ive al r s
n r i e r
U us tand t
MRM: M+400  259 259

I n d a n
S
380
de
 19/06/2022

tr í a
e
Detección altamente selectiva (específica) de terpanos tricíclicos en una muestra de crudo

o
Complejo (fracción de saturados)

r s r o m Terpanos tricíclicos

u t
SIM

c
M+.  m/z 191

C pe as MRM

I A
s
E ma ST s I C
de INJU
381

k o
M e n
s h
S t a
d
Terpanos tricíclicos

n a id a
l e
E ive al r s MRM: M+472  191

n r i e r
U us tand t MRM: M+458  191

I n d a n
S
MRM: M+430  191

382
de
 19/06/2022

Configuración
í a
tr Selectividad
Aumentan:

o m e
u r s t r o Especificidad

C pec (patrones)
Sensibilidad

a s de fragmentación
I A
Se pueden estudiar las rutas
s
E ma ST s I C
de INJU
383

k o
M e n
s h
S t a
a id a d
l e n r s
E ive ¡Piensa! a l r
n
U us tand t r i e
I n d a n
S
384
de